TRFIA、FQ-PCR方法联合检测乙肝标志物的应用探讨

目的探讨检测乙肝标志物联合使用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)和荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法的应用价值.方法 2008年1月至2014年5月云南省第二人民医院检验科对门诊疑似乙肝患者2 476例,分别行TRFIA检测其血清学标志物HBV(HBV-M)和行FQ-PcR方法检测其HBv.DNA含量,并对2种方法的阳性检出率进行比较.结果 2 476例受检者中,FQ-PcR检测其HBv-DNA阳性1 656份,总阳性率为66.9%,其中TRFIA法HBsAg、HBeAg、HBcAb均阳性861份,使用FQ-PCR法检测HBV-DNA的含量阳性816份,占94.8%;TRFIA法HBsAg、HBeAb、HBcAb均阳性1 023例,使用FQ-PCR法检测HBV-DNA的含量阳性674份,占65.9%;HBsAg、HBeAg均阳性27份,其中使用FQ-PCR法检测HBV-DNA的含量阳性26份,占96.3%;HBsAg、HBcAb均阳性148份,其中使用FQ-PCR法检测HBV-DNA的含量阳性117份,占79.1%;HBsAb、HBeAb均阳性55份,其中使用FQ-PCR法检测HBV-DNA的含量阳性2份,占3.64%;HBsAb、HBeAb、HBcAb均阳性123份,其中使用FQ-PCR法检测HBV-DNA的含量阳性11份,占8.94%;HBeAb阳性22份,其中使用FQ-PCR法检测HBV-DNA的含量阳性2份,占9.09%;HBeAb、HBcAb均阳性43份,其中使用FQ-PCR法检测HBV-DNA的含量阳性3份,占6.98%;HBcAb阳性37份,其中使用FQ-PCR法检测HBV-DNA的含量阳性2份,占5.41%;HBsAb阳性89份,其中使用FQ-PCR法检测HBV-DNA的含量阳性2份,占2.22%;均阴性48份,其中使用FQ-PCR法检测HBV-DNA的含量阳性1份,占2.08%.结论 TRFIA法用来排查机体有无感染乙肝病毒,对于乙肝传染性强弱仅能做一个初步的估计指标,不能准确检测出血清HBV-DNA低滴度者,故靠TRFIA法诊断和判断病情是不够的;FQ-PCR法检查乙肝患者体内的乙肝病毒数量、复制指标,能够能为精确的判断出乙肝病毒在体内的复制、传染强弱情况,是对TRFIA法不足的补充.而FQ-PCR法在检测时也容易受到一些人为或非人为因素的影响.二者联合检测可提高其准确性,有利于病情的判断和诊治.

HBV-DNA与HBV-TRFIA检测结果比较分析

目的 探讨乙肝患者血清 HBV DNA的表达水平及其与乙肝标志物的相互关系 ,了解用 TRFIA法检测 HBV- M,其对应的 HBV- DNA拷贝数。方法 用荧光聚合酶链反应 ( FQ- PCR)对患者进行 HBV-DNA检测 ,同时用 TRFIA法定量测定乙肝表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体和核心抗体指标。结果 在 39例患者血清中检测出 HBV- DNA病毒基因拷贝值范围为 2 .1× 1 0 3～ 3.8× 1 0 8copies/ ml,平均含量为 2 .95× 1 0 6copies/ ml,总阳性检出率为 43.3% ;2 0例 HBs Ag( + )、HBe Ag( + )、抗 - HBc( + ) ,其 HBV-DNA阳性为 1 6例 ,阳性检出率为 80 % ;42例 HBs Ag( + )、抗 - HBe( + )、抗 HBc( + ) ,其 HBV- DNA阳性为 1 7例 ,阳性检出率为 40 .5 % ;9例 HBs Ag( + )、抗 - HBc( + ) ,其 HBV- DNA阳性为 3例 ,阳性检出率为33.3% ;1 0例抗 - HBs( + )、抗 - HBe( + )、抗 - HBc( + ) ,其 HBV- DNA阳性为 1例 ,阳性检出率为 1 0 % ;3例 HBs Ag( + )、HBe Ag( + )、抗 - HBe( + )、抗 - HBc( + ) ,其 HBV- DNA阳性为 2例 ,阳性检出率为66.7% ;而 2例 HBV- M全 ( - )的 HBV- DNA也全 ( - )。结论 FQ- PCR是测定乙肝病人血清中 HBVDNA含量较特异、灵敏的方法 ,能反映乙肝病毒的复制水平和活跃程度 ;乙肝血清学标志物定量?

TRFIA检测新生儿TSH作为非缺碘地区标志应用的研究

目的:探讨TRFIA检测新生儿TSH水平作为非缺碘地区标志应用的价值。方法:依据碘缺乏病监测资料,应用TRFIA技术检测新生儿72h足跟血(全血滤纸片)。结果:在人群环境碘营养状况基本符合IDD消除标准,TRFIA检测新生儿全血TSH>5mU/L的比率为2.57%(426/16548),而ELISA法为17.35%(1500/8644,2003年)。结论:TRFIA检测新生儿出生72h足跟血(滤纸片)TSH<5mU/L比率≥97%可作为碘营养状况正常的判定标准(非缺碘地区的标志)。

TRFIA、RIA及ELISA法测定AFP的比较

目的对TRFIA、RIA与ELISA法测定AFP进行比较。方法分别进行精密度、线性、对比试验的比较。结果精密度试验中,TRFIA批内为2.3%,批间为5.3%;RIA批内为5.7%,批间为10.5%;ELISA法批内为8.6%,批间为16.1%。三种方法线性不同,TRFIA法最宽,ELISA法最窄。测定结果比较TRFIA(Y)与RIA(X1)Y=1.13X1+8.2,r=0.995;TRFIA(Y)与ELISA(X2)Y=1.30X2+16.1,r=0.980。RIA与TRFIA的结果相关性比ELISA与TRFIA的相关性好。结论TRFIA测定AFP的灵敏度、特异性比RIA及ELISA法好,且无放射性污染,结果准确可靠。

TRFIA法和ELISA法在HBsAg检测中的方法学评价

目的：对时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）和ELISA两种方法捡测HBsAg进行方法学评价。方法：先用TRFIA筛选出HBsAg阳性标本，再用ELISA试剂检测，并分组进行比较。结果：TRFIA法HBsAgr0．21—2．0ng／m1）标本40份中，ELISA法检测阳性24例，PEl性符合率60％，差异有统计学意义（P〈0．05）：而TRFIA法HBsAg（2．1—10．0ng／ml、10．1—50．0ng／ml、50．1—100．0ng／ml、〉100．1ng／m1）标本分别为33、47、29、47份中．ELISA法检测阳性也分别为33、47、29、47例，阳性符合率100％；TRFIA法HBsAg分为0．21—2．0ng／ml、2．1-10．0ng／ml、10．1—50．0ng／ml、50．1—100．0ng／ml、〉100．1ng／m组，ELISA法检测S／CO值±s分别为2．9571±3．1833、12．5415±6．1660、22．1553±4．6074、24．8674±4．2402、25．2192±2．9074，前两组比较有统计学意义，而后三组比较无统寸学意义。结论：采用TRFIA法定量检测HBsAg灵敏度更高，线性范围更宽，在低浓度标本检测中更具优势，

用TRFIA法与PCR法检测HBV的效果分析

目的:对比分析用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)法与荧光定量PCR(FQ-PCR)法检测乙肝病毒的效果。方法:对我院收治的202例疑似乙肝患者进行FQ-PCR与TRFIA检测的结果进行分析,对比分析其检测结果的阳性率和HBs Ag、HBe Ag浓度与DNA水平的相关性。结果:在本组患者中,进行HBs Ag/HBe Ag/HBc Ab检测结果呈阳性的患者有65例,其进行HBV-DNA检测的阳性率为96.9%(63/65,P>0.05);进行HBs Ag/HBe Ab/HBc Ab检测结果呈阳性的患者有101例,其进行HBV-DNA检测的阳性率为73.3%(74/101,P<0.05);进行HBs Ag/HBe Ag检测结果呈阳性的患者有4例,其进行HBV-DNA检测的的阳性率为100%(4/4);进行HBs Ag检测结果呈阳性的患者有5例,其进行HBV-DNA检测的阳性率为20%(1/5,P<0.05);进行HBs Ag/HBc Ab检测结果呈阳性的患者有8例,其进行HBV-DNA检测的阳性率为37.5%(3/8,P>0.05)。本组中166例"大三阳"、"小三阳"患者的HBV-DNA拷贝数与HBs Ag、HBe Ag的含量具有一致性,存在一定的正相关性,差异显著(r=0.508,P<0.05;r=0.531,P<0.05),有统计学意义。结论为患者进行TRFIA检测能准确地诊断其是否发生HBV感染,间接地分析出其体内HBV的复制水平,此法在诊断乙型病毒性肝炎、分析此病患者的病情及临床疗效方面具有重要的临床价值。

TRFIA检测干血纸片TSH室内质控结果分析

目的:探讨TRFIA法检测干血纸片TSH的质量控制.方法:对1年的质控干血纸片的TSH值进行统计学x、P50、s、CV、最大值、最小值等指标分析;同时对血斑不同部位的TSH值测定.结果:质控干血纸片TSH测定值的x、P50均在标准值(真值)的±20范围以内,C1、C2的CV值分别在6.6%～11.7%、3.6%～15.5%;血斑取血部位以中心到边缘的1/2处所测TSH值接近真值.结论:TRFIA法筛查新生儿先天性甲状腺功能低下症(CH)干血纸片TSH值精密度高,能有效进行质量监控.

TRFIA定量检测乙型肝炎病毒标志物的应用评价

目的:评价时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术在乙型肝炎病毒感染血清标志物(HBVM)定量测定中的应用。方法:同一质控品用ELISA法和TRFIA同时测定,对比分析两者的相关性、精密度、灵敏度及回收率。结果:两种方法的HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb定性符合率分别为100%、98%、100%、98%、100%,与ELISA法比,TRFIA精密度、灵敏度均较高,HBsAg最低检出浓度达0.13ng/ml,回收率为97.8%。结论:TRFIA定量检测HBVM优于ELISA法,在临床上具有广泛的应用前景,值得推广。

TRFIA与ELISA法检测乙肝病毒血清学标志物注意事项

为了保证时间分辨免疫荧光法( TRFIA)和酶联免疫吸附试验( ELISA)对乙型肝炎病毒标志物检测的质量控制,本文分别分析了两种检测方法的各自特点和注意事项,有助于检测人员对分析检测结果是否受到干扰提高判断和处理干扰因素的能力,保证检验结果的准确性。

TRFIA螯合剂中间体2,6-二(3′-溴甲基-1′-吡唑基)-4-溴吡啶的合成、分离与表征

以2,6-二(3-甲基-1-H-吡唑基)-4-溴吡啶为原料,经重氮化、溴化合成了新型时间分辨荧光免疫分析(TR-FIA)双功能螯合剂中间体2,6-二(3′-溴甲基-1′-吡唑基)-4-溴吡啶,通过IR、GC-MS1、HNMR和元素分析等对其结构进行了确认,探讨了合成条件及反应机理。同时,通过GC-MS1、HNMR和元素分析等对第一副产物4-溴-2-(3′-溴甲基-1′-吡唑基)-6-(3′-甲基-1′-吡唑基)吡啶的结构也进行了确认,以其为原料可继续合成目标化合物,大幅提高总产率。

BAS－TRFIA技术有关问题的实验研究

ＢＡＳ－ＴＲＦＩＡ技术有关问题的实验研究李振甲（解放军总医院临床医学研究所，北京，１００８３５）我们于１９８９年首先将ＢＡＳ应用于ＴｎｙＩＡ技术，先后成功地建立了肿瘤标记物，蛋白类激素，奋体类化合物和ＨＢＶ标记物的检测。进一步提高了方法的灵敏度，更重...

TrFIA乙肝病毒PreS1抗原的应用研究

目的:乙型肝炎病毒PreS1抗原时间分辨荧光免疫分析(TrFIA)的应用。方法:收集120例HBVDNA拷贝数>103的乙型肝炎患者血清标本,同时应用TrFIA和酶联免疫吸附法(ELISA)对样本中PreS1抗原进行检测。选择荧光值较高的一例PreS1抗原阳性血清标本,倍比稀释至1:16384倍,用TrFIA试剂与ELISA定性试剂盒同时进行PreS1抗原的检测。结果:有9例标本ELISA结果为阴性,而用TrFIA可检测到PreS1抗原,χ2=7.1,P<0.05,TrFIA方法灵敏度高于ELISA方法。一例PreS1抗原阳性血清标本ELISA在1:2048倍时结果为阴性,而TrFIA在1:8192倍时仍可检出PreS1抗原。TrFIA方法高、中、低三个浓度批内CV分别为3.57%、3.71%、6.74%;批间CV分别为3.54%、4.16%、8.52%均优于ELISA方法。50份正常体检者血清标本(乙肝标志物均阴性)用TrFIA试剂进行PreS1抗原的检测,结果均阴性,特异性100%。结论:TrFIA与ELISA相比,精密度和灵敏度有较大提高。