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白僵蚕粗提物对黑素瘤细胞与角质形成细胞共培养模型TYR及其相关蛋白TRP-1、TRP-2mRNA表达的影响 被引量:3
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作者 陈凤江 郭云辉 王兴岩 《中国中医药科技》 CAS 2013年第6期579-579,共1页
1材料 1.1药物白僵蚕:购自北京同仁堂制药集团哈尔滨药店,水煎醇沉,用MEM增养基配制成0.5、1.0g/L。
关键词 角质形成细胞 MRNA表达 白僵蚕 trp-1 黑素瘤细胞 相关蛋白 培养模型 粗提物
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Down-regulation of tyrosinase,TRP-1,TRP-2 and MITF expressions by citrus press-cakes in murine B16 F10 melanoma 被引量:8
2
作者 Sang Suk Kim Min-Jin Kim +6 位作者 Young Hun Choi Byung Kuk Kim Kwang Sik Kim Kyung Jin Park Suk Man Park Nam Ho Lee Chang-Gu Hyun 《Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine》 SCIE CAS 2013年第8期617-622,共6页
Objective:To investigate the suitability of citrus-press cakes,by-products of the juice industry as a source for the whitening agents for cosmetic industry.Methods:Ethylacetate extracts of citrus-press cakes(CCE)were ... Objective:To investigate the suitability of citrus-press cakes,by-products of the juice industry as a source for the whitening agents for cosmetic industry.Methods:Ethylacetate extracts of citrus-press cakes(CCE)were examined for their anti-melanogenic potentials in terms of the inhibition of melanin production and mechanisim of melanogenesis by using Western Blot analysis with tyrosinese,tyrosinase-related protein-1(TRP-1),TRP2,and microphthalmia-associated transcription factor(MITF)proteins.To apply the topical agents,citrus-press cakes was investigated the safety in human skin cell line.Finally flavonoid analysis of CCE was also determined by HPLC analysis.Results:Results indicated that CCE were shown to down-regulate melanin content in a dose-dependent pattern.The CCE inhibited tyrosinase,TRP-2,and MITF expressions in a dose-dependent manner.To test the applicability of CCE to human skin,we used MTT assay to assess the cytotoxic effects of CCE on human keratinocyte HaCaT cells.The CCE exhibited low cytotoxicity at 50μg/mL.Characterization of the citrus-press cakes for flavonoid contents using HPLC showed varied quantity of rutin,narirutin,and hesperidin.Conclusions:Considering the anti-melanogenic activity and human safety,CCE is considered as a potential anti-melanogenic agent and may be effective for topical application for treating hyperpigmentation disorders. 展开更多
关键词 Citrus-press CAKES MELANIN MELANOGENESIS TYROSINASE MITF trp-1 trp-2
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TRP-1 B细胞表位区在酵母中的表达纯化及生物学活性研究 被引量:3
3
作者 李廷慧 高天文 +6 位作者 李春英 李毅 张文红 王立峰 李立文 孙东杰 刘玉峰 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2004年第5期263-266,共4页
目的 为进一步探索酪氨酸酶相关蛋白 -1(TRP 1)人源B细胞表位 ,利用甲醇营养型酵母Pichiapas toris表达系统表达TRP 1的B细胞表位区。方法 将本实验室已构建好的质粒 pUC19/TRP 1进行双酶切 ,将目的片段亚克隆至带有 6His标签的 pRSET... 目的 为进一步探索酪氨酸酶相关蛋白 -1(TRP 1)人源B细胞表位 ,利用甲醇营养型酵母Pichiapas toris表达系统表达TRP 1的B细胞表位区。方法 将本实验室已构建好的质粒 pUC19/TRP 1进行双酶切 ,将目的片段亚克隆至带有 6His标签的 pRSETA载体 ,将 6His融合的TRP 1整体PCR扩增出来 ,克隆到酵母表达载体pPIC3 .5K上 ,构建成重组质粒 pPIC3 .5K/6His TRP1。该质粒转化酵母菌GS115 ,经G418筛选得到高拷贝转化子。转化菌体经Mut表型鉴定后 ,用含 0 .5 %甲醇的培养基诱导表达 ,表达产物利用Ni NTAagarose柱通过金属螯合亲和层析进行纯化后 ,测定其生物学活性。结果 通过 4天的诱导 ,该系统成功表达了 6His TRP1蛋白 ,经亲和层析纯化后扫描分析重组蛋白分子量约为 18kD ,纯度可达 96%。Westernblotting及ELISA实验证实 ,表达产物具有良好的抗原性和特异性。生物学活性检测证实其具有结合白癜风病人IgG的能力。 结论 在Pichiapastoris表达系统中 ,获得了具有生物学活性的可溶性重组TRP 1的B细胞表位肽段 ,为深入研究TRP -1人源表位及白癜风的发病机制、免疫治疗及恶性黑素瘤的免疫治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 trp-1 B细胞表位 酵母 纯化 生物学活性 酪氨酸酶相关蛋白-1 白癜风
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TRP-1在黑素细胞中作用的初步研究 被引量:1
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作者 李春英 高天文 +3 位作者 孙林潮 齐显龙 李强 刘玉峰 《中国美容医学》 CAS 2004年第3期275-276,共2页
目的构建TRP-1反义核酸、转染黑素细胞并观察细胞生长和黑素代谢功能的改变,探讨TRP-1在黑素细胞中的作用。方法将TRP-1反义核酸真核表达载体转染黑素细胞,以测定的MTT结果绘制细胞生长曲线;测定TRP-1反义核酸转染黑素细胞后细胞内黑素... 目的构建TRP-1反义核酸、转染黑素细胞并观察细胞生长和黑素代谢功能的改变,探讨TRP-1在黑素细胞中的作用。方法将TRP-1反义核酸真核表达载体转染黑素细胞,以测定的MTT结果绘制细胞生长曲线;测定TRP-1反义核酸转染黑素细胞后细胞内黑素含量的变化。结果从生长曲线可以看出,TRP-1反义核酸转染的黑素细胞增殖速度明显低于对照细胞;黑素含量明显降低。结论TRP-1反义核酸能显著抑制黑素细胞生长并降低黑素含量,表明TRP-1在维持黑素细胞正常的生长和黑素代谢中发挥重要作用。 展开更多
关键词 trp-1 黑素细胞 反义核酸 细胞生长曲线
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内皮素-1(ET-1)对羊驼皮肤黑素细胞增殖和黑素生成的影响 被引量:7
5
作者 耿建军 张杰 +4 位作者 穆晓丽 白瑞 董彦君 白俊明 董常生 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期932-938,共7页
旨在研究内皮素-1(Endothelin-1,ET-1)对羊驼皮肤黑素细胞(Melanocyte,MC)增殖和黑素合成的影响。本研究中,体外培养正常羊驼皮肤黑素细胞,观察不同浓度ET-1(0、0.1、1、10、100nmol.L-1)对羊驼皮肤黑素细胞增殖、黑素含量、内皮素受体B... 旨在研究内皮素-1(Endothelin-1,ET-1)对羊驼皮肤黑素细胞(Melanocyte,MC)增殖和黑素合成的影响。本研究中,体外培养正常羊驼皮肤黑素细胞,观察不同浓度ET-1(0、0.1、1、10、100nmol.L-1)对羊驼皮肤黑素细胞增殖、黑素含量、内皮素受体B(Endothelin recepter B,EDNRB)基因、酪氨酸酶(Tyrosinase,TYR)基因、酪氨酸相关蛋白-1(Tyrosinase related protein 1,TRP-1)基因和表皮黑皮素-1受体(Melanocortin 1receptor,MC1R)基因表达量的影响。结果表明,ET-1处理羊驼皮肤黑素细胞3d后,羊驼皮肤黑素细胞增多,黑素含量、EDNRB、TRP-1和TYR基因表达量都明显增加(P<0.05),以10nmol.L-1组最为显著。ET-1能诱导羊驼皮肤黑素细胞增殖、树突增长,诱导EDNRB、TYR和TRP-1基因表达量增高,使黑素合成增加;同时诱导MC1R基因表达量增高,从而通过α-MSH信号通路对羊驼黑色素的生成产生影响。 展开更多
关键词 ET-1 羊驼 皮肤 黑素细胞 EDNRB TYR MC1R trp-1
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酪氨酸酶相关蛋白-1的基因克隆表达及纯化 被引量:6
6
作者 李春英 高天文 刘玉峰 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2001年第6期368-370,共3页
目的 克隆TRP 1编码基因 ,表达并纯化TRP 1蛋白。方法 通过RT PCR方法扩增TRP 1编码基因 ,克隆至 pUC19载体并测序 ,再亚克隆至GST融合表达载体 pGEX 4T 1,转化大肠杆菌 ,IPTG诱导表达TRP 1/GST融合蛋白 ,分析鉴定表达蛋白的可溶性 ,... 目的 克隆TRP 1编码基因 ,表达并纯化TRP 1蛋白。方法 通过RT PCR方法扩增TRP 1编码基因 ,克隆至 pUC19载体并测序 ,再亚克隆至GST融合表达载体 pGEX 4T 1,转化大肠杆菌 ,IPTG诱导表达TRP 1/GST融合蛋白 ,分析鉴定表达蛋白的可溶性 ,并用谷氨酰胺树脂柱纯化表达的蛋白。结果 ①从培养的人黑素细胞中扩增出编码TRP 1的cDNA序列 ,序列测定证实与文献报道的序列一致 ;②成功构建了GST融合表达载体 pGEX 4T 1/TRP 1;③表达了TRP 1/GST融合蛋白 ;④得到纯化的TRP 1/GST融合蛋白。结论 人TRP 1基因的克隆成功及TRP 1/GST融合蛋白的表达与纯化 ,为进一步探索TRP 展开更多
关键词 trp-1 克隆 融合表达 恶性黑素瘤 白癜风
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TRP-1编码基因反义核酸对黑素细胞增殖及功能的影响 被引量:7
7
作者 李春英 高天文 +4 位作者 李廷慧 孙东杰 李强 高鸽 刘玉峰 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期68-70,共3页
目的构建酪氨酸相关蛋白-1(TRP-1)反义真核表达载体并转染TRP-1高表达的黑素细胞及恶性黑素瘤细胞,进一步研究其对黑素细胞及恶性黑素瘤细胞增殖及功能的影响。方法将TRP-1基因反向亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1,转染黑素细胞及恶性黑... 目的构建酪氨酸相关蛋白-1(TRP-1)反义真核表达载体并转染TRP-1高表达的黑素细胞及恶性黑素瘤细胞,进一步研究其对黑素细胞及恶性黑素瘤细胞增殖及功能的影响。方法将TRP-1基因反向亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1,转染黑素细胞及恶性黑素瘤细胞。以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TRP-1mRNA水平的变化,免疫印迹法检测TRP-1蛋白水平的改变。通过流式细胞仪检测细胞周期的变化,并用L-多巴测定酪氨酸酶活性的改变。结果成功构建重组反义表达载体pcDNA3.1/TRP-1(-),转染细胞稳定表达TRP-1反义核酸。RT-PCR提示TRP-1mRNA水平显著下降,免疫印迹提示其TRP-1蛋白表达水平降低。流式细胞检测表明反义TRP-1转染细胞发生细胞周期G1期阻滞。转染组黑素细胞及黑素瘤细胞酪氨酸酶活性抑制率分别达46%和54%。结论TRP-1在黑素细胞及黑素瘤细胞的增殖及功能方面发挥重要作用,TRP-1反义核酸转染细胞细胞周期受到阻滞,酪氨酸酶活性明显降低。 展开更多
关键词 trp-1编码基因 反义核酸 细胞增殖 细胞功能 黑色素瘤 黑素细胞
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逍遥散有效部位对A375与HacaT细胞共培养模型TYR及其相关蛋白mRNA表达的影响 被引量:7
8
作者 张宁 刘慧 +4 位作者 张明磊 刘斌 任燕冬 王雪 李建民 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1025-1029,共5页
目的:探讨逍遥散有效部位对A375与HacaT细胞共培养模型黑素合成的影响及机理。方法:制备逍遥散AB-8大孔树脂柱层析富集物,将其作用于以1∶2的比例构建的A375细胞与HacaT细胞共培养模型,采用Hunt法检测黑素含量,RT-PCR法测定TYR、TRP-1、... 目的:探讨逍遥散有效部位对A375与HacaT细胞共培养模型黑素合成的影响及机理。方法:制备逍遥散AB-8大孔树脂柱层析富集物,将其作用于以1∶2的比例构建的A375细胞与HacaT细胞共培养模型,采用Hunt法检测黑素含量,RT-PCR法测定TYR、TRP-1、TRP-2 mRNA的表达。结果:逍遥散大孔树脂柱层析40%乙醇洗脱部位对细胞共培养模型作用显著,与阴性对照组比较,逍遥散4、2 g/L组黑素量分别下调82.23%、93.01%;TYR、TRP-1、TRP-2 mRNA表达量分别下调29.11%、23.78%、20.05%和25.13%、15.02%、11.64%(P<0.01)。结论:逍遥散有效部位提取物可能通过下调TYR、TRP-1和TRP-2 mRNA的表达而降低人黑素瘤细胞的酪氨酸酶活性和黑素合成量。 展开更多
关键词 逍遥散 黄褐斑 TYR trp-1 trp-2
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Inhibition of two stages of melanin synthesis by sesamol,sesamin and sesamolin 被引量:1
9
作者 Montra Srisayam Natthida Weerapreeyakul Kwanjai Kanokmedhakul 《Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine》 SCIE CAS 2017年第10期886-895,共10页
Objective: To investigate the antimelanogenesis properties of three sesame compoundssesamol, sesamin and sesamolin via two stages of melanin synthesis vis-à-vis sunscreen function and enzyme inhibition in melanom... Objective: To investigate the antimelanogenesis properties of three sesame compoundssesamol, sesamin and sesamolin via two stages of melanin synthesis vis-à-vis sunscreen function and enzyme inhibition in melanoma cell line in order to search for alternative depigmenting agents.Methods: Antimelanogenic effects of sesame lignans were assessed in SK-MEL2 compared with the reference depigmenting agents, kojic acid and b-arbutin, in order to evaluate:(a) the sunscreen function of sesamol, sesamin and sesamolin by measurement of UV absorbtion property;(b) the inhibition of tyrosinase activity through mushroom and cellular tyrosinase; and(c) the effect on melanin content and melanogenic protein expression(tyrosinase, TRP-1 and TRP-2) by Western blot analysis; and(d) the toxicity of sesamol, sesamin and sesamolin to cells using cell cytotoxicity assay.Results: The results showed that sesamin, sesamolin and sesamol exerted satisfiable sunscreen function by absorbed UVB at 290 nm. Sesamol exhibited the highest inhibition of mushroom tyrosinase activity, but lipophilic sesamolin exhibited the highest cellular tyrosinase inhibition(IC_(50) of 1.6 μM) followed by sesamin, sesamol, and kojic acid,respectively. The order from high to low inhibition of melanin pigment was detected in the SK-MEL2 treated with sesamolin, sesamin, sesamol, kojic acid, and b-arbutin,respectively. Sesamolin and sesamin successfully inhibited cellular tyrosinase activity and respectively decreased TRP-1/TRP-2(36%/15%) and TRP-1 levels(16%), thereby inhibiting melanogenesis via antityrosinase activity. No cytotoxicity to SK-MEL2 or Vero(normal) cell lines was observed at the lignan concentrations that exerted an antimelanogenic effect.Conclusions: Three sesame lignans prevent melanin synthesis through 2 stages:(a) by blocking melanin-induction and(b) by interrupting melanogenic enzyme production. This study provides evidence that sesamol, sesamin and sesamolin are potential for antimelanogenesis agents. 展开更多
关键词 SESAMOL SESAMIN SESAMOLIN TYROSINASE trp-1/trp-2 Antimelanogenesis
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异源黑色素瘤DNA疫苗结合IL-12和Ii-PADRE抗鼠黑色素瘤的研究 被引量:1
10
作者 刘祥磊 张利红 +2 位作者 孙蕴淳 Steve Kay 吴炯 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1262-1268,共7页
研究酪氨酸激酶相关蛋白2(tyrosinase related protein 2,TRP-2)和gp100质粒DNA在B16黑色素瘤小鼠模型中的抗肿瘤作用。TRP-2及gp100在人类和鼠类黑色素瘤中均高度表达。鼠源gp100(mgp100)和鼠源TRP-2(mTRP-2)在小鼠中的免疫原性较差,... 研究酪氨酸激酶相关蛋白2(tyrosinase related protein 2,TRP-2)和gp100质粒DNA在B16黑色素瘤小鼠模型中的抗肿瘤作用。TRP-2及gp100在人类和鼠类黑色素瘤中均高度表达。鼠源gp100(mgp100)和鼠源TRP-2(mTRP-2)在小鼠中的免疫原性较差,而异源黑色素瘤相关抗原可打破这些免疫耐受。使用电脉冲法免疫人源gp100(hgp100)和人源TRP-2(hTRP-2)质粒在B16F10肿瘤模型中表现出显著的保护作用。TRP-2和gp100质粒免疫结合Ii-PADRE(invariant Pan DR reactive epitope)和鼠源白介素-12(murine interleukin-12,mIL-12)质粒有效消退了建立的皮下B16F10肿瘤。上述结果表明,肌肉内注射异源DNA疫苗结合Ii-PADRE与IL-12质粒使用可能是一种有效治疗黑色素瘤的策略。 展开更多
关键词 gp100 trp-2 B16F10黑色素瘤 肿瘤消退
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Testa of Rhynchosia nulubilis down-regulates melanin synthesis in UVB-induced guinea pigs epidermal skin tissue
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作者 HyunJeongLEE DonghunLEE +6 位作者 Jung-binSONG YoungSikKIM Hai-lingGUO SeunggyeongLEE JuyeonPARK SunYoeuKIM HocheolKIM 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第S1期101-102,共2页
OBJECTIVE Synthetic compounds that are used in the clinic to regulate skin hyperpigmentation,such as arbutin,and kojic acid,are only moderately effective.But their use is limited by side effects.As part of an effort t... OBJECTIVE Synthetic compounds that are used in the clinic to regulate skin hyperpigmentation,such as arbutin,and kojic acid,are only moderately effective.But their use is limited by side effects.As part of an effort to overcome the limitations,there is a pressing need for developing effective natural product for whitening.Each of black soybean has been reported to produce anti-melanogenic effects.Especially,antioxidant and anti-aging compounds are richer in testa than the rest part of black soybean.Therefore,we hypothesized that testa of Rhynchosia nulubilis(TR)would show more anti-melanogenic effects than whole black soybean.METHODS Anti-melanogenic effect of TR was done by using mouse B16F10 melanoma.The depigmenting efficacy was then observed following topical application of the TR to UVB-stimulated hyperpigmented dorsal skin of guinea pigs.RESULTS Treatment with TR extract resulted a 27.67% decrease in melanogenesis while whole black soybean showed 5.3% decrease at mouse melanoma cell line.Colorimetric analysis showed a significantly lower depigmenting value by day 14 following treatment with TR in UVB-irradiated guinea pigs the dorsal skin,indicating that TR produced a depigmentation effect.By staining with Hematoxylin-Eosin staing and Fontana-Masson stain,we found that the TR-treated group had more effect histopathologically in epidermal melanin production than resveratrol or rice alone-treated group.TR was associated with reduction in the levels of microphthalmia-associated transcription factor(MITF),and downregulation of tyrosinase and tyrosinase-related protein(TRP-1)expression,leading to inhibit epidermal melanin production by Western blotting analysis.CONCLUSION This study suggests that the testa of R.nulubilis may be a promising candidate in regulating skin pigmentation with UVB exposure. 展开更多
关键词 Rhynchosia nulubilis WHITENING trp-1 UVB MELANOMA
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小柴胡汤对B16黑素瘤细胞黑素合成相关蛋白表达的影响 被引量:2
12
作者 周密思 彭圆 +4 位作者 陈军 林连美 刘晶 刘颖 梁倩婷 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期1769-1771,共3页
目的:研究不同浓度小柴胡汤对B16黑素瘤细胞黑素合成相关酶酪氨酸酶(TYR),酪氨酸酶相关蛋白-1(TRP-1),酪氨酸酶相关蛋白-2(TRP-2)蛋白表达的影响。方法:采用CCK8检测细胞活力,选取小柴胡汤低、中、高浓度分别为0.1、1.0、2.5mg/mL用于实... 目的:研究不同浓度小柴胡汤对B16黑素瘤细胞黑素合成相关酶酪氨酸酶(TYR),酪氨酸酶相关蛋白-1(TRP-1),酪氨酸酶相关蛋白-2(TRP-2)蛋白表达的影响。方法:采用CCK8检测细胞活力,选取小柴胡汤低、中、高浓度分别为0.1、1.0、2.5mg/mL用于实验,Western Blot法检测B16细胞中TYR、TRP-1、TRP-2蛋白的表达。结果:与对照组比较,随着浓度的增加,小柴胡汤水煎液能够显著下调细胞TYR、TRP-2蛋白的表达(P<0.05,P<0.01);小柴胡汤中、高浓度组较对照组降低TRP-1活性(P<0.01)。结论:小柴胡汤对黑素合成的抑制作用除了通过直接抑制TYR活性外,还可通过下调酪氨酸酶家族其他成员TRP-1、TRP-2的基因表达、蛋白合成三方面实现其抑制黑素生成的作用,提示小柴胡汤对黑素生成的抑制可通过对酶蛋白转录后调节途径来实现。 展开更多
关键词 小柴胡汤 黑素合成 酪氨酸酶 酪氨酸酶相关蛋白-1 酪氨酸酶相关蛋白-2
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嵌合NY-ESO-1 DNA疫苗诱导黑色素瘤小鼠模型抗肿瘤免疫的研究
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作者 谷银芳 顾汉民 +2 位作者 周曙明 吴炯 蒋泽华 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2015年第11期1503-1511,共9页
NY-ESO-1作为一种肿瘤抗原,具有较强的免疫抗原性,并且已成为肿瘤候选疫苗之一。但由于目前大多应用NY-ESO-1多肽以及蛋白质疫苗,其临床试验效果欠佳,亟需更为有效的NY-ESO-1抗原设计的肿瘤免疫治疗出现。该研究的目的是探索将NY-ESO-1... NY-ESO-1作为一种肿瘤抗原,具有较强的免疫抗原性,并且已成为肿瘤候选疫苗之一。但由于目前大多应用NY-ESO-1多肽以及蛋白质疫苗,其临床试验效果欠佳,亟需更为有效的NY-ESO-1抗原设计的肿瘤免疫治疗出现。该研究的目的是探索将NY-ESO-1与具有增强免疫效应的五种因子分别重组成嵌合蛋白抗原,使其更有效地被加工、转运和呈递,以期找到最佳的基因佐剂,增强NY-ESO-1作为肿瘤治疗性DNA疫苗的免疫效果。采用电脉冲体内细胞高效转入的方法对C57BL/6小鼠进行DNA免疫,发现用编码NY-ESO-1或连接有HSP70的嵌合体质粒免疫可诱导强烈的NY-ESO-1特异性Ig G1反应。NY-ESO-1连接泛素的质粒免疫小鼠主要诱导NY-ESO-1特异性Ig G2a反应,表明此基因佐剂诱导强的Th1免疫反应。与其他嵌合NY-ESO-1质粒免疫相比,NYESO-1连接泛素的质粒免疫小鼠,有效地保护小鼠对有NY-ESO-1表达的B16F10黑色素瘤细胞系的挑战作用,证明强的Th1免疫反应对预防和治疗肿瘤具有重要作用。去除调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)可进一步增强泛素-NY-ESO-1嵌合DNA疫苗治疗黑色素瘤的作用。此外,Ub-NY-ESO-1质粒结合编码异源黑素瘤抗原GP100和TRP-2的质粒免疫可诱导对抗含有NY-ESO-1表达的B16F10黑色素瘤的协同抗肿瘤免疫疗效。该研究结果表明,编码泛素-NY-ESO-1嵌合抗原的质粒DNA疫苗或与编码其他相关黑色素瘤抗原的质粒的联合可能是有效的治疗黑色素瘤的疫苗。 展开更多
关键词 NY-ESO-1 B16F10黑色素瘤 基因佐剂 治疗性基因疫苗 gp100 trp-2
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不同质量分数高良姜素对人黑色素瘤A375细胞黑素合成及相关基因表达的影响 被引量:13
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作者 霍仕霞 彭晓明 +2 位作者 高莉 赵萍萍 闫明 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期244-249,共6页
目的研究不同质量分数高良姜素对人黑色素瘤A375细胞黑素合成及酪氨酸酶基因(TYR)、酪氨酸酶相关蛋白-1(TRP-1)、酪氨酸酶相关蛋白-2(TRP-2)mRNA和蛋白表达的影响。方法采用MTT法测定细胞增殖,左旋多巴氧化法测定酪氨酸酶活性,NaOH裂解... 目的研究不同质量分数高良姜素对人黑色素瘤A375细胞黑素合成及酪氨酸酶基因(TYR)、酪氨酸酶相关蛋白-1(TRP-1)、酪氨酸酶相关蛋白-2(TRP-2)mRNA和蛋白表达的影响。方法采用MTT法测定细胞增殖,左旋多巴氧化法测定酪氨酸酶活性,NaOH裂解法测定黑素合成,采用RT-PCR法、Western-blotting法检测A375细胞中TYR、TRP-1、TRP-2mRNA和蛋白表达。结果 90%高良姜素浓度为1.0~10.0μmol/L对A375细胞具有显著的促增殖作用(P<0.01),而在浓度为20.0μmol/L时,无促A375细胞增殖作用(P>0.05),浓度为0.5~20.0μmol/L均能促进酪氨酸酶活性的升高(P<0.05、0.01),浓度为1.0~20μmol/L具有显著促进黑素升高的作用(P<0.05、0.01),且随着浓度的增加呈增强趋势;99%高良姜素浓度在0.5~20.0μmol/L具有显著促进A375细胞增殖和酪氨酸酶活性升高作用(P<0.01),而对黑素合成无促进作用(P>0.05)。90%高良姜素对TYR、TRP-1 mRNA表达基本无影响,1.0μmol/L时上调TRP-2 mRNA表达(P<0.05);99%高良姜素能上调TYR、TRP-1及TRP-2 mRNA表达;二者均促进TYR蛋白表达,但对TRP-1及TRP-2蛋白表达基本无影响。结论 99%高良姜素能够促进A375细胞增殖及酪氨酸酶活性升高,可能是通过上调TYR、TRP-1、TRP-2的mRNA表达和TYR蛋白表达实现的;而90%高良姜素能够显著促进细胞增殖、酪氨酸酶活性升高及黑素增加,表明90%高良姜素能够促进黑素的合成,但不是通过调节TYR、TRP-1、TRP-2的mRNA表达,可能是通过促进TYR蛋白表达实现的。 展开更多
关键词 高良姜素 黑素合成 酪氨酸酶 酪氨酸酶相关蛋白-1 酪氨酸酶相关蛋白-2
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高原玫瑰纯露与平原玫瑰纯露体外功效对比初步研究 被引量:6
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作者 方婷欢 马萍 +2 位作者 霍刚 周莹 沈黎玥 《药物生物技术》 CAS 2018年第3期222-225,共4页
玫瑰纯露在护肤领域应用广,一般常用作溶剂,使用量大、浓度高。为进行高原地区玫瑰纯露与平原地区玫瑰纯露在相应体外功效上的对比,使用分别产自西藏墨脱与安徽黄山的玫瑰纯露在较高质量浓度下进行功效对比研究。研究采用人永生化表皮... 玫瑰纯露在护肤领域应用广,一般常用作溶剂,使用量大、浓度高。为进行高原地区玫瑰纯露与平原地区玫瑰纯露在相应体外功效上的对比,使用分别产自西藏墨脱与安徽黄山的玫瑰纯露在较高质量浓度下进行功效对比研究。研究采用人永生化表皮角化细胞(Ha Ca T细胞),人成纤维细胞(HSF细胞),人黑色素瘤细胞(A375细胞)作为体外模型,通过MTT法、L-DOPA氧化法、ELISA、DPPH自由基清除实验进行相应对比检测。实验发现在较高质量浓度范围内(20,40,60,80,100 g/L)高原玫瑰纯露不影响角质细胞与成纤维细胞的生长,并且高原玫瑰纯露比平原玫瑰纯露更显著的抑制黑色素细胞内酪氨酸酶活性及酪氨酸酶相关蛋白2(TRP-2)表达,并可以显著促进角质细胞丝聚蛋白(FLG)表达,而平原玫瑰纯露在高质量浓度条件下抑制了FLG蛋白的表达,两组纯露清除自由基能力均较弱。高原玫瑰纯露相较于平原玫瑰纯露高质量浓度下在相应体外功效上具有更好的安全性和抑制黑色素生物合成和促进FLG蛋白表达的作用,两组玫瑰纯露均不具备较好的抗衰老及清除自由基的能力。 展开更多
关键词 高原玫瑰纯露 平原玫瑰纯露 酪氨酸酶 酪氨酸酶相关蛋白2(trp-2) 丝聚蛋白(FLG) 抗氧化
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