TRPC6介导的疾病及相关小分子调节剂的研究进展

瞬时受体电位阳离子通道6(TRPC6)是瞬时受体电位离子通道家族的成员之一,在人体的各器官组织内广泛表达,参与多种生理功能。研究表明,TRPC6通道受到多种因素的调节,直接或间接地参与肾脏、心血管等疾病的病理生理过程,而随着研究的深入,越来越多小分子调节剂被发现能够影响TRPC6的活性或表达,对相关疾病起到改善作用,这些发现为开发针对TRPC6相关疾病的新型治疗药物提供了理论基础和潜在的药物靶点,本文概述了TRPC6在肾脏疾病、心血管疾病等发生发展中的重要作用,并对TRPC6介导相关疾病的作用机制进行了综述,并介绍了TRPC6小分子调节剂治疗肾脏、心血管等疾病的研究进展。

基于Wnt/β-catenin/TRPC6/CaN通路探讨淫羊藿苷对激素抵抗性肾病综合征大鼠泼尼松抵抗的作用机制

目的观察淫羊藿苷对激素抵抗性肾病综合征(SRNS)大鼠泼尼松抵抗的改善作用,及对Wnt/β-catenin/TRPC6/CaN通路表达的影响。方法将50只SD大鼠分为空白组、模型组、泼尼松组(6.3 mg/kg)、淫羊藿苷组(50 mg/kg)和联合组,每组10只。采用2次尾静脉注射阿霉素建立SRNS大鼠模型,分别予相应方式干预6周。观察大鼠一般状态,检测24 h尿蛋白定量(24 h-UTP)、尿17-羟皮质类固醇(17-OHCS)及血清生化指标,Masson染色观察肾组织病理形态及超微结构,RT-PCR、Westernblot检测肾组织Wnt/β-catenin/TRPC6/CaN通路相关基因及蛋白表达。结果与空白组比较,模型组大鼠体质量、进食量、饮水量均明显减少,24 h-UTP增加、尿17-OHCS含量减少(P<0.01),血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)含量升高(P<0.01),血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)含量降低(P<0.05,P<0.01);肾小球增大,基底膜增厚,球囊壁增厚伴纤维化,足细胞空泡变性,有大量胶原纤维沉积,胶原容积分数(CVF)增加(P<0.01);Wnt、β-catenin、TRPC6、CaM、CaN、NFAT1 mRNA和蛋白表达均明显升高(P<0.01),F-actin、MYH9mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.01)。与模型组比较,联合组大鼠体质量、饮水量明显增加,24 h-UTP降低、尿17-OHCS含量增加(P<0.01),SCr、BUN、TG含量降低(P<0.01);肾组织纤维化程度减轻,CVF减少(P<0.01),足突融合现象明显好转,足细胞结构趋于正常;肾组织Wnt、β-catenin、TRPC6、CaM、CaN、NFAT1 mRNA和蛋白表达明显降低,F-actin、MYH9 mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.01,P<0.05)。结论淫羊藿苷可能通过抑制Wnt/β-catenin/TRPC6/CaN通路,上调骨架蛋白F-actin、MYH9基因和蛋白表达,进而保护足细胞结构、减缓足细胞损伤,改善SRNS大鼠泼尼松抵抗。

益气养阴活血方对糖尿病肾病大鼠肾组织TRPC6、RhoA表达的影响

目的:探讨益气养阴活血方对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织TRPC6、RhoA表达的影响。方法:大鼠喂养1周后分为3组:空白组、模型组、中药组。建立DN大鼠模型,造模成功后空白组和模型组灌服生理盐水,中药组灌服益气养阴活血方颗粒,8周后生化检测24 h尿蛋白、血肌酐(Scr)、谷丙转氨酶(ALT)、血脂(TC、TG)、空腹血糖(FBG)等;测量肾小球直径,称取左肾重量、计算肥大指数;PAS染色观察大鼠肾脏病理;免疫组化检测肾组织TRPC6、RhoA表达。结果:益气养阴活血方能够降低实验大鼠肾组织TRPC6、RhoA的表达,减少24 h尿蛋白,升高ALB,缩小肾小球直径,改善大鼠体质量及肾脏病理,保护足细胞,降低肥大指数及血脂、血糖。结论:益气养阴活血方可能通过影响DN大鼠肾组织TRPC6、RhoA的表达,而改善上述生化指标,减轻肾脏病理损害,并对肝、肾功能未见明显损害。

SGLT2抑制剂卡格列净通过调控AngⅡ/TRPC6通路保护肾病综合征大鼠肾功能

目的探究SGLT2i通过调控AngⅡ/TRPC6通路对肾病综合征大鼠肾功能的保护机制。方法将大鼠随机分为对照组(Control组)、肾病综合征大鼠模型组(NS组)、NS组+卡格列净片干预组(SGLT2i组)、SGLT2i组+AngⅡ干预组(SGLT2i+AngⅡ/TRPC6通路激活剂AngⅡ组)、SGLT2i+AngⅡ组+SAR7334干预组(SGLT2i+AngⅡ+AngⅡ/TRPC6通路抑制剂SAR7334组),每组10只。检测24 h尿蛋白定量;检测生化指标(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、总蛋白(TP)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平;HE染色检测肾组织病理学变化;透射电镜检测足细胞超微结构;ELISA检测血浆中AngⅡ和CaN含量;蛋白质印迹法检测肾组织中AngⅡ、TRPC6、cleaved-caspase 3蛋白表达。结果与Control组相比,NS组大鼠ALB、TP含量明显降低,24 h尿蛋白定量、BUN、SCr、TC、TG含量、足突融合率、AngⅡ和CaN含量及AngⅡ、TRPC6、cleaved-caspase 3蛋白表达明显升高(P<0.05);与NS组相比,SGLT2i组大鼠ALB、TP含量升高,24 h尿蛋白定量、BUN、SCr、TC、TG含量、足突融合率、AngⅡ和CaN含量及AngⅡ、TRPC6、cleaved-caspase 3蛋白表达明显降低(P<0.05);与SGLT2i组相比,SGLT2i+AngⅡ组大鼠ALB、TP含量明显降低,24 h尿蛋白定量、BUN、SCr、TC、TG含量、足突融合率、AngⅡ和CaN含量及AngⅡ、TRPC6、cleaved-caspase 3蛋白表达明显升高(P<0.05);与SGLT2i+AngⅡ组相比,SGLT2i+AngⅡ+SAR7334组大鼠ALB、TP含量升高,24 h尿蛋白定量、BUN、SCr、TC、TG含量、足突融合率、AngⅡ和CaN含量及AngⅡ、TRPC6、cleaved-caspase 3蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论SGLT2i对肾病综合征大鼠肾功能发挥保护作用,其机制和抑制AngⅡ/TRPC6通路有关。

三七总皂苷调控CTRP6/RhoA/Rock对骨质疏松大鼠的保护作用机制研究

目的:探究三七总皂苷对骨质疏松大鼠的保护作用及机制。方法:雌性SD大鼠50只,随机分为假手术组、模型组、三七总皂苷组(40 mg/kg)、三七总皂苷+si-NC组(40 mg/kg三七总皂苷组+4 nmol/kg si-NC)、三七总皂苷+si-CTRP6组(40 mg/kg三七总皂苷组+4 nmol/kg si-CTRP6),每组各10只。除假手术组外,其余各组均采用双侧卵巢切除法构建骨质疏松症大鼠模型。选模成功后,各组采用相应药物干预10周。检测血清雌二醇(E_(2))、骨代谢相关指标[Ca、P、1,25(OH)_(2)D_(3)]、炎症因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)水平以及氧化应激(SOD、GSH-Px、MDA)水平;苏木素-伊红染色观察股骨组织病理学变化;显微CT分析股骨骨微结构变化;Western blot检测大鼠股骨组织CTRP6/Rho A/Rock通路蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠股骨组织出明显病理损伤,血清E_(2)、Ca、P和1,25(OH)_(2)D_(3),SOD、GSH-Px水平均降低(P<0.01),TNF-α、IL-1β、IL-6及MDA水平均升高(P<0.01),股骨组织CTRP6表达降低(P<0.01),GTP-Rho A/Rho A、Rock1/Rock2比值均增加(P<0.01)。与模型组比较,三七总皂苷组大鼠股骨组织损伤减轻,血清E_(2)、Ca、P和1,25(OH)_(2)D_(3),SOD、GSH-Px水平均升高(P<0.01),TNF-α、IL-1β、IL-6及MDA水平均降低(P<0.01),股骨组织CTRP6表达增加(P<0.01),GTP-Rho A/Rho A、Rock1/Rock2比值均降低(P<0.01)。与三七总皂苷组比较,三七总皂苷+si-CTRP6组大鼠上述指标均被显著抑制(均P<0.01)。结论:三七总皂苷能够改善骨质疏松模型大鼠股骨组织的损伤情况,其机制与调控CTRP6/Rho A/Rock通路,抑制炎症与氧化应激相关。

抗TRPC6多肽单克隆抗体的制备与鉴定

目的制备抗TRPC6多肽单克降抗体,并对其免疫学和生物学特性进行鉴定。方法采用TRPC6多肽偶联血蓝蛋白(KLH)为抗原,免疫Balb/c小鼠,取血清效价高者脾细胞与Ag8.653骨髓瘤细胞进行融合。采用间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞,以及测定单克隆抗体的特性、效价及其相对亲和力;采用单克隆抗体亚类检测试剂盒鉴定Ig亚型;并经有限稀释法克隆化培养获得杂交瘤细胞株;采用秋水仙素阻断法鉴定杂交瘤细胞株染色体。结果获得3株能稳定分泌抗TRPC6多肽的单克隆抗体,分别命名为A2、F11和H8;抗体Ig亚类均为IgG1型,染色体均在89±7条的范围内;相对亲和力结果 F11为6μg/ml,A2、H8为12.5μg/ml。结论抗TRPC6多肽单克隆抗体的成功制备,为TRPC6的免疫学检测方法的建立奠定基础。

膜性肾病肾活检组织中TRPC6和podocalyxin表达改变及其意义

目的检测膜性肾病(membranous nephropathy,MN)患者肾活检组织中肾小球足细胞瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(transient receptor potential cation channel 6,TRPC6)和podocalyxin的表达和分布,探讨足细胞蛋白TRPC6和podocalyxin在MN蛋白尿发生中的作用。方法采用常规组织病理以及免疫组化检查,并行免疫荧光双套色染色于激光共聚焦显微镜下观察TRPC6、podocalyxin在各组肾组织中表达及分布的改变,以计算机图像分析系统进行半定量分析。结果对照组肾组织podocalyxin沿肾小球毛细血管壁连续均匀分布,阳性荧光信号表达强,MN组表达减弱,且分布不均或节段性缺失,部分呈点状、短线状不连续分布,肾病综合征组较非肾病综合征组减弱更明显;TRPC6在对照组肾小球有一定的表达,沿肾小球基膜呈均匀连续线型分布,MN组TRPC6荧光强度有不同程度增强,且呈点状、团块状不均匀分布,肾病综合征组较非肾病综合征组更明显。结论 TRPC6和podocalyxin在正常肾组织沿肾小球基膜呈连续线状均匀分布;MN患者肾小球内TRPC6表达增加,podocalyxin表达减少,且分布形式亦发生变化,提示TRPC6和podocalyxin等足细胞相关蛋白表达改变及分布异常可能是MN蛋白尿发生的重要病理机制。

慢性炎性痛诱致小鼠焦虑样行为和前扣带回TRPC3和TRPC6通道的表达上调

目的:探讨慢性炎性痛诱致小鼠焦虑样行为情况下前扣带回(anterior cingulate cortex,ACC)TRPC 3/6通道的表达改变。方法:采用小鼠痛行为检测方法、旷场行为检测方法和免疫印迹实验(Western Blot)。结果:小鼠后肢足底皮下注射完全弗氏佐剂(complete freund’s adjuvant,CFA)建立慢性炎性痛模型。痛行为检测结果显示足底皮下注射CFA可以诱致小鼠产生长时程的机械性和热痛觉过敏现象。旷场实验可见CFA致炎致痛后的小鼠较正常小鼠在旷场中央区活动距离明显降低,停留时间明显减少,提示慢性炎性痛小鼠表现为显著的焦虑样行为。进一步采用Western Blot实验发现炎性痛焦虑样小鼠前扣带回脑区的TRPC3和TRPC6通道蛋白表达水平较对照组动物显著上调。结论:CFA引发的慢性炎性痛模型中,小鼠产生焦虑样情绪,TRPC3和TRPC6通道蛋白在ACC部位的蛋白表达水平明显升高。提示这些焦虑样痛情绪的发生与疼痛痛觉通路中ACC脑区的TRPC3及TRPC6表达密切相关。

抗TRPC6多肽单克隆抗体的制备及其识别抗原表位分析

目的:制备抗TRPC6多肽单克降抗体,并对其生物学特性进行鉴定。方法:采用TRPC6多肽偶联血蓝蛋白(KLH)为抗原,免疫小鼠后经细胞融合,间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞;单克隆抗体亚类检测试剂盒鉴定Ig亚型;间接ELISA法鉴定该单克隆抗体的特性、效价及其相对亲和力;采用生物信息学进行抗原表位预测,并通过ELISA单抗相加试验分析单抗识别抗原位点的差异性。结果:获得3株能稳定分泌抗TRPC6多肽的单抗杂交瘤细胞株,分别命名为A2、F11和H8;抗体Ig亚类均为IgG1型;染色体鉴定符合杂交瘤细胞的特性;3株单抗相对亲和力比较F11较强,A2和H8接近;抗体识别位点分析结果表明A2与H8、A2与F11的相加指数分别大于50%,可能识别的是不同位点;而F11与H8的相加指数小于50%,可能识别的是同一位点。结论:抗TRPC6多肽单克隆抗体的成功制备及其识别抗原表位分析,为TRPC6蛋白的相关研究提供物质基础。

中枢神经系统内的TRPC6离子通道

TRPC6是TRP（transient receptor potential,TRP）基因超家族C亚家族（canonical）的成员之一,编码钙可通透的非选择性阳离子通道[1,2]。十余年来的研究证明TRPC6分子参与动物体内许多重要的生理和病理调节过程,如血管与气道平滑肌收缩、肾小球滤过膜滤过功能、免疫和血液细胞调节等[3];该分子功能异常会导致高血压和局灶性节段性肾小球硬化[4,5]。

全反式维甲酸对肾小球硬化大鼠肾小球TRPC6表达的影响

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对大鼠肾小球瞬时受体电位阳离子通道6(TRPC6)表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠60只,随机分成假手术组、GS组、ATRA组,每组20只,干预12周后处死大鼠。电镜下观察肾小球超微结构改变。免疫组织化学方法检测肾脏组织TRPC6、TGF-β1、Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)的蛋白分布及表达,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测肾脏组织TRPC6 mRNA的表达,免疫印迹法(WB)方法检测肾小球TRPC6的蛋白表达。结果 :与GS组相比,ATRA组大鼠GSI显著下降(P<0.01),肾小球TRPC6、TGF-β1、Col-Ⅳ的蛋白表达量显著下降,TRPC6的mRNA表达量显著下降(P<0.05)。结论:ATRA可能通过抑制肾小球TRPC6的表达而减轻GS进展。

附子、黄连寒热药性对体外足细胞增殖及TRPV4、TRPC6蛋白表达的影响

目的研究附子、黄连寒热药性对体外足细胞增殖及TRPV4、TRPC6蛋白表达的影响。方法 MTT法检测足细胞增殖,实验分为:空白对照组、附子组和黄连组。附子组和黄连组加入不同浓度药液进行干预,并测定吸光值(A),计算细胞抑制率。检测TRPV4、TRPC6蛋白试验中,实验分为:空白对照组、附子组和黄连组,其中附子组给予200μg/ml药液、黄连组给予800μg/ml药液,再加入含RPMI 1640培养基培养足细胞24 h。用Western blot法检测附子、黄连对TRPV4、TRPC6蛋白表达影响。结果 MTT的研究表明,黄连组中50,100,200,400,800μg/ml药液均可抑制足细胞生长增殖,且与浓度成正相关。附子在相对较低的质量浓度范围内(<200μg/ml),促进足细胞生长增殖,超过一定实验浓度时(>200μg/ml),抑制足细胞生长增殖。实验表明附子和黄连均可以上调TRPV4蛋白表达,与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。而在TRPC6蛋白表达中,附子和黄连具有明显的下调TRPC6蛋白表达的作用,与空白对照组对比差异有统计学意义(P<0.05)。结论附子、黄连这两种不同药性的中药均可以影响与肾脏病相关的蛋白TRPV4、TRPC6表达。

TRPC6在肺部的生理与病理生理功能

经典瞬时受体电位(transient receptor potential canonical,TRPC)通道是一类非选择性钙离子通道,TRPC6是TRPC家族的成员之一,其基因编码的蛋白在人体脑、肾、肝和肺等多个器官均有表达。TRPC6不仅是肺中表达最丰富的TRPC通道,也是目前肺部疾病中研究最多的TRPC通道。TRPC6参与动物体内许多重要的生理和病理调节过程,TRPC6的基因突变或过表达可引起胞内钙离子信号通路异常,从而导致多种病理生理改变。肺部疾病的病理生理过程有多种细胞共同参与。TRPC6在不同的细胞中表达不同,表现的生理与病理生理功能则有差异。

加味猪苓汤对阿霉素肾病综合征大鼠TRPC6、CaN表达的影响

目的:探讨加味猪苓汤对阿霉素肾病综合征大鼠肾组织中TRPC6、CaN表达的影响。方法:选取90只清洁级SD大鼠,适应性喂养1周后随机分为两组:健康组(30只)、模型组(60只)。采用阿霉素注射法建立肾病综合征大鼠模型,造模成功后,60只模型组大再次随机分为模型对照组(30只)和实验组(30只)。健康组和模型对照组给予生理盐水灌胃,实验组给予加味猪苓汤颗粒灌胃,3周后检测24 h尿蛋白、血清胆固醇、白蛋白、尿素氮及血肌酐,处死大鼠后称取左肾质量,计算肥大指数;PAS染色观察肾小球直径、大鼠肾脏病理变化以及肾组织中TRPC6、CaN的表达。结果:与健康组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白定量、肾脏病理损害程度以及TRPC6、CaN的表达显著增加(P<0.01),血清白蛋白水平、体质量显著降低(P<0.01);与对照组比较,实验组大鼠24 h尿蛋白定量、肾脏病理损害程度以及TRPC6、CaN的表达显著降低(P<0.01),血清白蛋白水平、体质量显著升高(P<0.01)。结论:加味猪苓汤可以改善肾功能、降低尿蛋白,减轻肾脏病理损害,具有一定的肾脏保护功能,其机制可能是通过降低肾组织中TRPC6、CaN的表达有关。

Wnt5a/TRPC6在姜黄素拮抗肥胖相关肾小球病足细胞损伤中的机制探讨

目的:探讨Wnt5a/TRPC6/Ca 2+在姜黄素拮抗肥胖相关肾小球病(ORG)足细胞损伤中的作用及机制。方法:小鼠足细胞分为4组:对照组、瘦素刺激组、Wnt5a刺激组和姜黄素干预组。mRNA检测采用实时定量PCR方法,蛋白检测采用免疫印迹法。应用Fura 2-AM检测细胞内钙离子浓度。结果:(1)与对照组相比,瘦素刺激12 h后,Wnt5a、TRPC6的mRNA和蛋白的表达均显著增高,podocin、nephrin的mRNA和蛋白的表达均显著降低;与瘦素刺激组相比,姜黄素干预组中Wnt5a、TRPC6的mRNA和蛋白的表达均显著降低,podocin、nephrin的mRNA和蛋白的表达显著增高。(2)与对照组相比,Wnt5a刺激12 h后,TRPC6的mRNA和蛋白的表达均显著增高,podocin、nephrin的mRNA和蛋白的表达均显著降低。(3)与对照组相比,加入瘦素刺激后,从7 min开始足细胞内钙离子水平明显增多,至15 min时逐渐趋于平稳;而姜黄素干预组中,加入瘦素刺激后监测20 min,足细胞内钙离子浓度始终趋于平稳。结论:Wnt5a/TRPC6/Ca 2+通路活化是ORG足细胞损伤的重要机制之一,肾脏足细胞Wnt5a活化可以刺激TRPC6表达上调,致足细胞损伤;姜黄素可能通过抑制Wnt5a/TRPC6/Ca 2+通路的活化来拮抗ORG足细胞损伤。

Calcineurin和TRPC6参与ET-1诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖

目的:探讨Calcineurin和瞬时感受器电位6(TRPC6)的相互作用以及对内皮素-1(ET-1)诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖的影响。方法:以ET-1刺激肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)检测Calcineurin活性以及TRPC6的表达;分别于ET-1刺激前给予Calcineurin特异性抑制剂环孢素A(CsA)和TRPC6 siRNA处理,测定Calcineurin活性、TRPC6的表达以及细胞的增殖情况;采用Calcineurin活性检测试剂盒检测其活性,Western blot和RT-PCR检测TRPC6的表达,MTT法检测PASMCs的增殖。结果:ET-1可激活原代培养的PASMCs中Calcineurin的活性,上调TRPC6的表达;CsA和TRPC6 siRNA可以分别降低TRPC6表达和Calcineurin活性;也可以抑制ET-1刺激的PASMCs增殖。结论:Calcineurin与TRPC6参与ET-1诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖并相互影响。

敲除TRPC6对MPTP诱导小鼠神经炎性损伤的影响

目的在小鼠MPTP(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine)诱导的神经炎症模型中检测小胶质细胞的TRPC6通道的表达,并探究TRPC6通道对于炎症表达和多巴胺能神经元损伤的影响。方法在MPTP注射的小鼠中,用标记CD11b的磁珠分选出黑质区域的小胶质细胞,并通过蛋白质免疫印迹的方法检测TRPC6的表达。在构建CD11b-TRPC6^(-/-)小鼠后,通过免疫荧光的方法检测MPTP诱导的小胶质细胞的增殖以及多巴胺能神经元的损伤。同时结合蛋白质免疫印迹和实时荧光定量PCR的方法,在MPTP模型中检测TRPC6敲除后cryαB蛋白水平和炎症因子表达。结果在MPTP注射的小鼠中,小胶质细胞中TRPC6通道的表达显著上调。另外,在注射MPTP的CD11b-TRPC6^(-/-)小鼠中,小胶质细胞中的cryαB蛋白水平被上调。同时,MPTP诱导的小胶质细胞的增殖以及炎症因子表达增强被抑制,而多巴胺能神经元的损伤得到缓解。结论小胶质细胞中TRPC6通道表达在MPTP模型中上调,而TRPC6的敲除可增加小胶质细胞中cryαB蛋白水平,并降低炎症因子的表达,从而减少多巴胺能神经元的损伤。

1,25(OH)_2D_3抑制嘌呤霉素氨基核苷诱导的肾病大鼠TRPC6的表达

目的观察1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]对嘌呤霉素氨基核苷(PAN)肾病大鼠肾脏TRPC6表达的影响。方法大鼠随机分为对照组(Con)、模型组(Mod)和1,25(OH)2D3治疗组(Vit D),每组n=10。Mod组和Vit D组每10天尾静脉注射PAN 100 mg/kg建立PAN肾病模型。Vit D组每天给予1,25(OH)2D30.2μg/kg灌胃。在1和3月时分两批处死动物,检测24 h尿蛋白、肾功能、血脂和血浆蛋白;PAS染色和透射电镜观察肾组织学改变;RT-PCR、激光共聚焦检测TRPC6、synaptopodin及nephrin的表达和分布。结果 PAN肾病大鼠逐渐出现大量蛋白尿、大量腹水、高脂血症和低蛋白血症肾病综合征的表现。病理呈现肾间质水肿、炎性细胞浸润、大量的蛋白管型及局灶节段性肾小球硬化、肾小管萎缩和纤维化。与Mod组大鼠比较Vit D组大鼠24 h尿蛋白显著减少[1月时,(338±120)mg vs(669±142)mg,3月时(432±83)mg vs(601±95)mg,P<0.01],肾小球硬化指数显著减轻[(2.3+0.6)vs(3.4+0.4),P<0.01],肾功能改善[Cr(40.2±3.4)μmol/L vs(53.4±6.3)μmol/L,BNU(9.4±3.0)mmol/L vs(17.3±2.9)mmol/L,P<0.01];激光共聚焦显示PAN大鼠TRPC6表达显著升高并与synaptopodin高度融合,Nephrin mRNA的表达显著降低;与Mod组大鼠比Vit D组大鼠TRPC6 mRNA显著降低,nephrin的表达显著升高[在1月时,(0.42±0.10)vs(0.75±0.14);在3月时(0.35±0.07)vs(0.68±0.10),P<0.01],Nephrin mRNA[在1月时(0.81±0.19)vs(0.33±0.09);在3月时(0.77±0.10)vs(0.44±0.10),P<0.01]。结论 1,25(OH)2D3通过抑制PAN肾病大鼠TRPC6的表达来发挥肾脏保护作用。

TRPC6与肾脏疾病

瞬时受体电位阳离子通道(transient receptor potential channel,TRPC)作为瞬时受体电位(transientreceptor potential,TRP)超家族中的一员,是一种非选择性的离子通道,在人体的各种组织、器官和细胞中均有表达。TRPC6基因突变致局灶节段性肾小球硬化(focal segmental glomerulosclerosis,FSGS),从而揭示了TRPC通道,尤其TRPC6与肾脏疾病的密切关系。TRPC6突变可引起细胞内钙离子浓度升高,也可直接影响肌动蛋白细胞支架组织,这些都是导致肾脏疾病的机制。