丹参酮ⅡA对UVA诱导的HaCaT细胞凋亡的影响

以人自发性永生化角质形成细胞系(Ha Ca T)细胞为材料,通过CCK8和蛋白印迹法分别测定不同剂量长波紫外线(ultraviolet A,UVA)、不同浓度丹参酮ⅡA(tanshinoneⅡA,TSⅡA),以及UVA和TSⅡA共同作用下的细胞活力和促分裂素原活化蛋白激酶(mitogenactivated protein kinase,MAPK)信号通路蛋白(p38,JNK和Erk)磷酸化水平.结果表明:在10 J/cm2的UVA照射下,细胞活力为对照组的70%左右,在20 J/cm2的UVA照射下,细胞活力仅为对照组的55%左右;低浓度的TSⅡA在正常情况下对细胞活力无影响,高浓度(85μmol/L)TSⅡA处理组的细胞活力约为对照组的70%左右.与TSⅡA或UVA单独处理相比,二者共同作用下细胞活力大大降低且差异极其显著.UVA照射提高了MAPK信号通路中的p38和JNK磷酸化水平,但是对Erk磷酸化水平没有影响;而TSⅡA可以显著提高低辐射剂量(2 J/cm2)UVA诱导下的p38和JNK的磷酸化水平.这说明UVA促进Ha Ca T细胞凋亡是通过提高p38和JNK磷酸化水平来实现的;而TSⅡA可以提高p38和JNK磷酸化水平,进一步加速UVA诱导的Ha Ca T细胞凋亡.

丹参酮Ⅱ_A对裸鼠人肠癌血管新生的抑制作用

目的:研究丹参酮ⅡA(TSⅡA)对裸鼠人肠癌血管新生的抑制作用。方法:建立人肠癌HCT-116细胞裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为5组:模型组(DMSO组)、TSⅡA低、中、高剂量组(0.5,1,2 mg.kg-1.d-1)和5氟脲嘧啶组(50 mg.kg-1.2 d),连续给药21 d后处死裸鼠,取出瘤体,测量瘤体大小及质量,计算肿瘤抑制率;免疫组化法检测瘤体的微血管密度(MVD);ELISA测定血清中血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达情况;Western blot检测瘤体中β-catenin蛋白表达。结果:TSⅡA低、中、高剂量组的瘤重抑制率分别为25.6%,46.7%,59.6%。免疫组化结果显示,DMSO组、TSⅡA低、中、高裸鼠瘤体MVD计数分别为(60.8±7.0),(47.5±6.7),(31.3±4.2),(20.5±4.1)个,各组与DMSO组比较差异显著(P<0.01)。ELISA结果显示,TSⅡA低、中、高剂量组裸鼠血清VEGF表达量分别是DMSO组的0.94,0.84,0.73倍,差异显著(P<0.01)。TSⅡA各组瘤体中β-catenin蛋白表达量在细胞总蛋白和核蛋白中均显著降低,并且呈一定剂量依赖效应。结论:TSⅡA能够抑制裸鼠人肠癌皮下移植瘤的生长和微血管生成,其机制可能与下调VEGF和β-catenin蛋白表达有关。

丹参酮ⅡA对缺氧缺血脑损伤新生大鼠脑组织中MicroRNA-181b表达的影响

目的:探讨丹参酮ⅡA(TSⅡA)对缺氧缺血脑损伤新生大鼠脑组织中MicroRNA-181b(miR-181b)表达的影响。方法:挑选出生时间在7日的SD新生大鼠作为本次研究的实际对象,选择的数量为40只,最后使用随机数字法分为以的四组:正常对照组、模型对照组、TSⅡA低剂量组、TSⅡA高剂量组,各组均为10只,缺氧缺血手术完成以及分组之后,将其与原有小组中的母鼠放在一起。对照组中的小鼠只将其颈部皮肤划开,分离其颈总动脉,但不对其进行结扎手术。建立经典的HIBD动物模型,并且在造模过程中要注意观察建立动物模型前后实验动物的行为学改变。模型对照组在进行缺氧缺血术后使用等量生理盐水腹腔注射,每日注射1次,直至取用标本。TSⅡA低剂量组在缺氧缺血术后使用TSⅡA磺酸钠注射液以35mg/kg的剂量进行腹腔注射,每日注射1次。TSⅡA高剂量组,行缺氧缺血术后使用TSⅡA磺酸钠注射液以70mg/kg的剂量进行腹腔注射,每日注射1次。将四组新生鼠处死,并完整的取出大脑,采用PCR的方法进行检测各组新生鼠脑组织中miR-181b水平。结果:各组新生鼠脑组织miR-181b表达量的变化:正常对照组miR-181b较模型对照组明显表达(P<0.05),TSⅡA各组miR-181b均较模型对照组明显表达(P<0.05),TSⅡA高剂量组miR-181b表达强于TSⅡA低剂量组(P<0.05)。结论:丹参酮ⅡA可促进新生鼠缺氧缺血脑损伤后脑组织中miR-181b的表达。