TSP50在肺腺癌中的表达及意义

目的探讨睾丸特异性蛋白酶50(testes-specific protease 50,TSP50)在肺腺癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测TSP50蛋白在72例肺腺癌及癌旁组织标本中的表达情况,分析其与各临床病理特征的关系。结果 TSP50在肺腺癌组织中阳性表达率为73.6%,显著高于癌旁组织(P<0.01);TSP50蛋白表达与肿瘤的淋巴结转移状态、临床分期存在明显相关性(P=0.009,P=0.022),而与肺腺癌患者的性别、年龄、肿瘤大小、吸烟史、组织学类型无明显相关性(P>0.05)。结论 TSP50在肺腺癌中高表达,与肺腺淋巴结转移及临床分期显著正相关,有望成为新的肺腺癌的治疗靶点。

睾丸组织中的TSP50启动子甲基化差异的研究

目的:检测不同组织中TSP50启动子区域的甲基化状态,研究其表达的机制。方法:分离、纯化鼠睾丸中的精原细胞、精母细胞和精子,分别提取人的睾丸组织、Ntera-2细胞、鼠精原细胞、精母细胞和精子的基因组DNA,用重亚硫酸盐处理基因组DNA,PCR扩增人和鼠的TSP50的启动子CpG岛区域,电泳,提纯,连接于质粒中,转导入细胞中,扩增,提取,纯化质粒,测序。结果:人睾丸组织甲基化水平较低,Ntera-2细胞处于较高水平。鼠的精原细胞和精子细胞甲基化水平较高,精母细胞甲基化水平较低。结论:TSP50启动子区域甲基化位点的甲基化水平调控TSP50蛋白的表达。

癌/睾丸抗原TSP50在脂多糖刺激下引起宫颈上皮内瘤变的机制研究

目的探讨癌/睾丸抗原TSP50在宫颈上皮内瘤变发展过程中可能介导的作用,为完善其病理机制提供数据支撑。方法体外培养End1/E6E7细胞,设立对照组(不接受刺激的End/E6E7)、空质粒组(转染空质粒)、TSP50shRNA干扰组(转染包涵TSP50的慢病毒)。脂多糖(LPS)干预8 h后,使用免疫蛋白印记(WB)实验检测TSP50的表达情况以及由其引起的变相关蛋白IKB-α、TLR4、P65、MMP-2的表达水平;免疫荧光实验检测增殖相关标记物Ki67及上皮细胞间质化标记物N-cadherin的变化;使用real-time PCR检测雌激素代谢相关酶COMT、CYP17的表达变化。连续培养14 d,采用克隆集落形成实验检测细胞增殖活性的变化。结果LPS干预8 h后,相比于对照组,TSP50shRNA干扰组TSP50、TLR4、P65、MMP-2蛋白表达降低,IKB-α蛋白表达升高;COMT、CYP17A的m RNA表达升高;Ki67表达降低,N-cadherine表达升高;各指标组间差异有统计学意义(P<0.05)。连续培养14 d后,TSP50shRNA干扰组集落克隆数目明显减少(P<0.05)。结论TSP50在宫颈上皮内瘤变的发生过程中可能起到促进作用,其机制可能与促进细胞增殖和调节雌激素代谢有关。

染料木素对乳腺癌细胞睾丸特异性蛋白酶50表达的影响

目的:阐明低浓度染料木素(Gen)促进乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231癌睾丸抗原特异性蛋白酶50(TSP50)表达的机制。方法:取对数生长期乳腺癌细胞,免疫组化、Western blot法观察乳腺癌细胞中TSP50表达情况,MTT还原法、流式细胞术和双染法检测Gen对乳腺癌细胞周期、凋亡情况及TSP50表达的影响。结果:对照组、5μmol/L Gen和25μmol/L Gen组干细胞亚群阳性率分别为(7.37±0.43)%、(11.57±1.13)%和(12.05±0.96)%;高浓度Gen作用后,干细胞亚群百分率下降(6.04±0.22)%;与对照组相比,5μmol/L Gen和25μmol/L Gen处理后,P70S6K1磷酸化水平略有增加,Erk1/2的磷酸化水平显著增加,MCF-7细胞中MMP-2与TSP50蛋白在5μmol/L浓度下表达增加。结论:低浓度Gen刺激乳腺癌细胞生长,TSP50可因非基因组效应相关的信号而表达增加,使ER+乳腺癌干细胞表型特异性分子增加,促进ER+乳腺癌细胞增殖。