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广东猪输血传播病毒流行病学调查及其主要抗原编码区进化分析 被引量:2
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作者 陈轶雯 李中圣 +4 位作者 白挨泉 陈善真 李其昌 姚火春 王贵平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1767-1772,共6页
为了解广东省猪群中猪输血传播病毒(TTSuVs)的感染情况,采用Nest-PCR方法对广东省7个不同地区规模化猪场抽检采集的159份育肥猪血清进行检测。结果表明,TTSuVs的2个种——TTSuV1和TTSuV2的阳性检出率分别为54.72%和35.22%,二者的共感染... 为了解广东省猪群中猪输血传播病毒(TTSuVs)的感染情况,采用Nest-PCR方法对广东省7个不同地区规模化猪场抽检采集的159份育肥猪血清进行检测。结果表明,TTSuVs的2个种——TTSuV1和TTSuV2的阳性检出率分别为54.72%和35.22%,二者的共感染率为29.56%,说明TTSuVs在广东猪群中有较为广泛的传播。挑选Nest-PCR检测TTSuV1和TTSuV2为阳性的样品,分别在病毒保守区设计引物,扩增病毒基因,测序验证后,与其它已发表的不同属种TTVs ORF1序列进行进化树分析。结果表明猪TTVs与人、犬、猫、猴的TTVs分别处在进化树的不同分枝,具有很大差异;本次研究获得的TTSuV1ORF1序列与国内多株已发表的TTSuV1ORF1序列相似性为72%~75%;获得的TTSuV2ORF1序列与现有测序的多株TTSuV2的ORF1序列相似性为88%~97%。此研究为进一步研究TTSuVs流行状况、血清学诊断方法和临床防治技术奠定基础。 展开更多
关键词 ttsuv1 ttsuv2 流行病学 抗原进化分析
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猪细环病毒2型环介导等温扩增检测方法的建立 被引量:2
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作者 张黎 李凯 +3 位作者 田光玲 李德峰 王伟松 何后军 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第5期1098-1103,共6页
为了能快速、特异的检测猪细环病毒2型(TTSuV2),本研究针对TTSuV2全基因序列的非编码区域和第1个开放性阅读框前端设计了2对引物,建立了TTSuV2的环介导等温扩增(LAMP)检测方法并对反应成分和条件进行了梯度摸索。试验结果显示,该LAMP检... 为了能快速、特异的检测猪细环病毒2型(TTSuV2),本研究针对TTSuV2全基因序列的非编码区域和第1个开放性阅读框前端设计了2对引物,建立了TTSuV2的环介导等温扩增(LAMP)检测方法并对反应成分和条件进行了梯度摸索。试验结果显示,该LAMP检测方法最佳反应条件为64℃恒温90 min,可特异性检测TTSuV2,与猪细环病毒1型、猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪博卡病毒无交叉反应,病毒最低检出限为100拷贝/μL。结果表明,建立的LAMP方法具有快速、特异且灵敏的特点,可在TTSuV2快速检测方面提供一定的技术支持。 展开更多
关键词 猪细环病毒2型(ttsuv2) 环介导等温扩增 检测
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川渝地区猪TTV血清流行病学调查及危险性因素分析
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作者 聂奎 周作勇 +1 位作者 曾政 黄奕兰 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期14-18,共5页
该试验用ELISA和"病例-对照研究"方法,对四川、重庆共23个区县的养殖场和散养农户进行猪TTSuV感染的血清流行病学调查及危险性因素分析.试验共检测1 918头份猪血清,检出阳性血清341份,平均抗体阳性率为17.78%,其中种公猪的阳... 该试验用ELISA和"病例-对照研究"方法,对四川、重庆共23个区县的养殖场和散养农户进行猪TTSuV感染的血清流行病学调查及危险性因素分析.试验共检测1 918头份猪血清,检出阳性血清341份,平均抗体阳性率为17.78%,其中种公猪的阳性率为32.5%,种母猪31.4%,育肥猪19.6%和仔猪11.2%.四川地区猪的阳性率为15.98%(17.37%~23.26%);重庆地区为20.05%(12.22%~30.00%).试验结果表明,在四川、重庆地区存在TTSuV感染.调查发现,川渝两地的地理条件和养殖规模因素与猪发生TTSuV感染的关联程度很小(地理条件:OR=1.08,95%CI=0.49-1.58;养殖规模:OR=1.04,95%CI=1.01-1.47).生产期长或年龄大的种公猪、种母猪和育肥猪发生TTSuV感染的危险性则分别是仔猪的3.8,3.6和1.9倍(种公猪:OR=3.8,95%CI=1.878-7.752;种母猪:OR=3.6,95%CI=2.153-6.110;育肥猪:OR=1.9,95%CI=1.443-2.586),种公猪、种母猪发生TTSuV感染的危险性分别是育肥猪的2.0和1.9倍(种公猪:OR=2.0,95%CI=1.004-3.887;种母猪:OR=1.9,95%CI=1.165-3.026),表明饲养期或年龄这一暴露因素与猪发生TTSuV感染的危险性有较强或中等程度的关联. 展开更多
关键词 TORQUE Teno SUS virus(ttsuv) 血清流行病学 危险性因素 病例-对照研究 四川 重庆
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2017-2018年吉林部分地区规模化猪场猪细环病毒的遗传变异分析
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作者 刘东旭 李国江 +2 位作者 苗丽娟 沙万里 尹柏双 《中国兽药杂志》 2019年第7期8-17,共10页
为了解猪细环病毒(TTSuVs)在吉林部分规模化猪场的遗传变异情况,对2017-2018年来自吉林部分地区的10家规模化猪场的574份血清样品进行TTSuVs流行情况调查,并根据收集地点对20株TTSuVs进行ORF1全基因序列扩增及遗传变异性分析。结果显示... 为了解猪细环病毒(TTSuVs)在吉林部分规模化猪场的遗传变异情况,对2017-2018年来自吉林部分地区的10家规模化猪场的574份血清样品进行TTSuVs流行情况调查,并根据收集地点对20株TTSuVs进行ORF1全基因序列扩增及遗传变异性分析。结果显示:10家规模化猪场中,TTSuV1感染率为36.75%,TTSuV2感染率为63.2%,TTSuV1与TTSuV2混合感染率为30.3%。10株TTSuV1测序株之间的核苷酸同源性为75.7%~94.7%,氨基酸同源性为48.1%~88.2%;10株TTSuV2测序株之间的核苷酸同源性为77.5%~94.0%,氨基酸同源性为70.6%~87.4%。研究表明:吉林地区部分规模化猪场流行的TTSuV1均属于TTSuV1-lb型,而TTSuV2流行情况较为复杂,各种亚型均有涉及且呈现遗传变异多样性。 展开更多
关键词 ttsuvs 流行情况 ORF1 遗传变异
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猪输血传播病毒检测方法研究进展 被引量:1
5
作者 闫沁男 井申荣 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1016-1020,共5页
猪输血传播病毒(Torque teno sus virus,TTSuV)是一种单链,无包膜的DNA病毒。在健康的或患有某些疾病的猪中,都能检测到它的存在,具有很高的流行率。目前,针对TTSuV的检测方法有多种,如PCR方法,血清免疫学方法等,但是各有优缺点,因此本... 猪输血传播病毒(Torque teno sus virus,TTSuV)是一种单链,无包膜的DNA病毒。在健康的或患有某些疾病的猪中,都能检测到它的存在,具有很高的流行率。目前,针对TTSuV的检测方法有多种,如PCR方法,血清免疫学方法等,但是各有优缺点,因此本文就现有的TTSuV检测方法做一个简单综述,使读者能够对TTSuV的检测方法有一个全面了解。 展开更多
关键词 猪输血传播病毒(ttsuv) PCR 滚环扩增(RCA) ELISA
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猪细环病毒数字PCR定量检测方法的建立 被引量:5
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作者 杨春华 孙洁 +5 位作者 罗秋红 祝建新 孙思扬 周延 钟毅 夏彪 《中国动物检疫》 CAS 2017年第4期80-85,共6页
[目的]实现猪细环病毒(TTSuV)的准确定量检测。[方法 ]根据TTSuV的序列特点,设计特异性引物、探针,建立数字PCR检测技术。对数字PCR反应体系中的引物和探针浓度进行优化,分析方法的灵敏度、特异性,并初步应用于进行临床检测。[结果 ]最... [目的]实现猪细环病毒(TTSuV)的准确定量检测。[方法 ]根据TTSuV的序列特点,设计特异性引物、探针,建立数字PCR检测技术。对数字PCR反应体系中的引物和探针浓度进行优化,分析方法的灵敏度、特异性,并初步应用于进行临床检测。[结果 ]最终确定TTSuV1a和TTSuV1b数字PCR反应体系中最佳引物浓度均为250 nmol/L,最佳探针浓度均为300 nmol/L,TTSuV1a型和TTSuV1b型灵敏度均可达到单个拷贝数;以猪圆环病毒Ⅱ型、猪细小病毒和猪伪狂犬病毒进行特异性试验,结果无交叉反应;批内和批间试验表明,该方法的重复性良好;本实验室留存的92份血清样本的检测结果与其背景信息一致。[结论 ]本研究建立的TTSuV数字PCR法具有特异性强、灵敏度高、检测限低等优点,可用于TTSuV的定量检测。 展开更多
关键词 猪细环病毒 实时荧光PCR 数字PCR
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猪细环病毒1型环介导等温扩增方法的建立 被引量:1
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作者 张黎 李凯 +2 位作者 田光玲 李德峰 何后军 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期517-521,共5页
猪细环病毒(Torque teno sus virus,TTSu V)是一种无囊膜,单链的DNA病毒,存在猪细环病毒1型和猪细环病毒2型2个亚型。为建立一种新型快速的TTSu V1检测方法。针对TTSu V1保守的非编码区域(untranslated regions,UTR)设计2对LAMP引物,并... 猪细环病毒(Torque teno sus virus,TTSu V)是一种无囊膜,单链的DNA病毒,存在猪细环病毒1型和猪细环病毒2型2个亚型。为建立一种新型快速的TTSu V1检测方法。针对TTSu V1保守的非编码区域(untranslated regions,UTR)设计2对LAMP引物,并对反应体系和反应条件进行了优化调整,建立了TTSu V1 LAMP检测方法。结果表明该方法最佳反应条件为62℃1 h,病毒最低检出限可达9.2 copies/μL,特异性良好。LAMP反应是一种集特异性强,灵敏度高,反应速度快于一体的的基因检测方法,有望成为快速检测TTSu V1的手段之一。 展开更多
关键词 细环病毒1型 环介导等温扩增方法(LAMP) 灵敏度 特异性
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江苏地区猪细环病毒分子流行病学调查 被引量:2
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作者 张志成 戴薇 +2 位作者 茅慧华 陈钟鸣 范红结 《中国动物检疫》 CAS 2013年第2期35-40,共6页
猪细环病毒(Torque tenosusvirus,TTSuVs)是近年来新发现的一种DNA病毒,广泛分布于家猪和野猪体内。为研究TTSuVs在江苏地区猪群中的分布情况,及其各分离株之间的进化关系,本实验采用PCR技术对来自江苏地区6个猪场的398份血清样品进行TT... 猪细环病毒(Torque tenosusvirus,TTSuVs)是近年来新发现的一种DNA病毒,广泛分布于家猪和野猪体内。为研究TTSuVs在江苏地区猪群中的分布情况,及其各分离株之间的进化关系,本实验采用PCR技术对来自江苏地区6个猪场的398份血清样品进行TTSuVs检测,挑选部分阳性样品扩增其5'-UTR基因片段,并将所获得的基因序列与国外已报道的5'-UTR基因序列进行进化树分析比较。结果显示,TTSuVs可分为TTSuV1和TTSuV2两大分支,其单一阳性检出率分别为58.4%(227/398)和48.0%(198/398),混合阳性检出率为15.4%(64/398)。TTSuV1和TTSuV2均可分为3个亚群,本实验所获得的TTSuVs分离株在各自亚群中均有分布,地域差异不明显。江苏地区TTSuVs分离株与国外某些国家的TTSuVs分离株之间有较高的亲缘关系。本实验表明,TTSuVs感染在江苏地区猪群中普遍存在,并对我国养猪产业构成潜在威胁。 展开更多
关键词 猪细环病毒 江苏地区 PCR检测 分子流行病学调查
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同时检测猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒和猪细环病病毒1型和2型的多重SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法的建立 被引量:1
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作者 Pérez L J 刘丹 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第6期175-175,共1页
在集约化养殖条件下,猪场常见多种病毒混合感染。本试验研究的5种病毒与多种猪病相关,在全球范围的猪场造成了严重的经济损失。本研究建立了能同时检测和鉴别猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)和猪细环病病毒... 在集约化养殖条件下,猪场常见多种病毒混合感染。本试验研究的5种病毒与多种猪病相关,在全球范围的猪场造成了严重的经济损失。本研究建立了能同时检测和鉴别猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)和猪细环病病毒1型和2型(TTSuV1和TTSuV2)的多重SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法。该方法能够区分这5种病毒,且对其他DNA病毒检测证明了该系统的特异性。该多重实时荧光定量PCR灵敏度高,检测限为3.65×103~5.04×103拷贝DNA模板/反应。批内和批间变异系数低。该方法对临床样本的检测结果与特异性PCR方法检测结果符合率为100%。这种方法可能成为流行病学研究和疾病控制的有效工具。 展开更多
关键词 多重real-time PCR SYBR GreenⅠ PCV2 PPV PRV ttsuv1和ttsuv2
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猪细环病毒研究进展 被引量:1
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作者 曲歌 苗丽娟 +3 位作者 王欣茹 谢晓薇 于丽敏 刘东旭 《吉林畜牧兽医》 2018年第8期9-11,共3页
新发现的指环病毒科包含了感染人类和其他动物的细环病毒。其中在家猪和野猪中感染的细环病毒被称之为猪细环病毒(Torque teno sus viruses,TTSu V),该病毒是一种在猪群中普遍存在的单股环状DNA病毒。到目前为止,猪主要感染的是两种不... 新发现的指环病毒科包含了感染人类和其他动物的细环病毒。其中在家猪和野猪中感染的细环病毒被称之为猪细环病毒(Torque teno sus viruses,TTSu V),该病毒是一种在猪群中普遍存在的单股环状DNA病毒。到目前为止,猪主要感染的是两种不同基因型的TTSu V。该病毒传播方式主要是垂直传播和水平传播,仔猪感染的病毒数可随着生长日龄的增加而增多。到目前为止,仍然缺乏对TTSu V的免疫学研究,但机体似乎不会产生有效的免疫反应限制病毒血症,这使得该病毒受到更多的关注。细环病毒长期以来一直被人们忽视,甚至被认为是非致病病毒。但是,现在越来越多的证据表明,细环病毒和猪圆环病毒之间存在的某种联系,该病毒不仅影响一些疾病的发展,甚至还影响他们的结果。 展开更多
关键词 细环病毒 圆环病毒 混合感染
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猪细环病毒实时荧光PCR检测技术的建立及应用 被引量:2
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作者 杨春华 孙思扬 +3 位作者 孙洁 李仕祥 祝建新 周延 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期999-1006,共8页
为了实现猪细环病毒(TTSuV)快速检测,给TTSuV的调查、监测和防控提供可行性、操作性强的技术支持。本试验根据TTSuV的序列特点设计特异性引物、探针,应用实时荧光PCR技术检测TTSuV1a型和TTSuV1a1b型。以猪细小病毒、猪圆环病毒Ⅱ型和猪... 为了实现猪细环病毒(TTSuV)快速检测,给TTSuV的调查、监测和防控提供可行性、操作性强的技术支持。本试验根据TTSuV的序列特点设计特异性引物、探针,应用实时荧光PCR技术检测TTSuV1a型和TTSuV1a1b型。以猪细小病毒、猪圆环病毒Ⅱ型和猪伪狂犬病毒进行特异性试验,无交叉反应。该检测方法具有较好的特异性和重复性,TTSuV1a灵敏度可达9.2拷贝/μL,TTSuV1b灵敏度可达5.6×101拷贝/μL;批内变异系数均小于1%,批间变异系数均小于3%。将该方法与PCR法、PCR-DHPLC进行比较,结果证实该方法具有较好的准确性。对92份血清样本进行检测,发现有58份TTSuV1a阳性、62份TTSuV1b阳性、51份TTSuV1a和TTSuV1b共感染阳性。本研究建立的TTSuV实时荧光PCR法具有特异、敏感、快速、重复性好等优点,可用于TTSuV感染的分子流行病学调查。 展开更多
关键词 ttsuv 实时荧光PCR 检测
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生物制品中猪细环病毒污染检测方法的建立和初步应用 被引量:3
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作者 吴雪伶 赵龙 +3 位作者 冯建平 樊金萍 赵翔 孟淑芳 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期299-304,共6页
目的:建立生物制品中猪细环病毒( Torque teno sus virus,TTSuV)污染的检测方法,并进行方法学分析及初步的应用。方法针对TTSuV保守序列设计引物和探针,建立荧光PCR方法,对方法的特异性、线性、精密度、最低检测限等参数进行验... 目的:建立生物制品中猪细环病毒( Torque teno sus virus,TTSuV)污染的检测方法,并进行方法学分析及初步的应用。方法针对TTSuV保守序列设计引物和探针,建立荧光PCR方法,对方法的特异性、线性、精密度、最低检测限等参数进行验证,并对试验样本对检测的干扰性进行分析。利用该方法对猪全血样品、生产用细胞及轮状病毒疫苗样品进行检测,通过建立TTSuV分型检测的PCR方法对阳性样品进行分型。结果荧光PCR法的特异性较好,与不同种属的细小病毒、猴SV40病毒及猪圆环病毒无明显的交叉反应,TTSuV1和TTSuV2荧光PCR分别在109~103拷贝/μl和109~102拷贝/μl范围内线性较好,R2值达到0.993以上,TTSuV1和TTSuV2的最低检测限分别为1×103拷贝/μl和1×102拷贝/μl,试验内和试验间的Ct的精密度CV值均小于7%,试验内病毒拷贝数的CV值小于25%,试验间CV值小于45%。细胞样品成分对病毒检测无明显的干扰性。对20份猪全血样品进行检测,8份为阳性,其中1份为TTSuV1阳性,4份为TTSuV2阳性,3份为TTSuV1/2混合感染。 TTSuV1和TTSuV2型与标准株序列同源性分别为98%~99%和98%。对细胞样品和轮状病毒疫苗进行检测,结果均为阴性。结论成功建立了TTSuV荧光PCR检测法,能够用于生物制品TTSuV污染的检测,进一步提高了生物制品的安全性。 展开更多
关键词 猪细环病毒 荧光PCR 细胞 分型
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广西部分地区猪细环病毒的分子流行病学调查 被引量:3
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作者 洪绍锋 刘磊 +7 位作者 刘欢 郭旋 黎木兰 卢冰霞 莫彦宁 龙凤 刘德清 黄伟坚 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期325-330,共6页
为了解近年来才被发现的一种新型人畜共患DNA病毒——细环病毒在广西猪群中的流行情况,采用巢式PCR方法检测95份采自广西不同猪场、屠宰场的血清和组织样品(淋巴结、脾、肺),并挑选部分阳性样品进行基因克隆。结果显示,被检猪群中普遍... 为了解近年来才被发现的一种新型人畜共患DNA病毒——细环病毒在广西猪群中的流行情况,采用巢式PCR方法检测95份采自广西不同猪场、屠宰场的血清和组织样品(淋巴结、脾、肺),并挑选部分阳性样品进行基因克隆。结果显示,被检猪群中普遍存在细环病毒感染,TTSuV1和TTSuV2的阳性率分别为37.9%和20.0%,两者的混合感染率为11.6%。获得的9条TTSuV1和10条TTSuV2基因序列与NCBI上发布的参考序列同源性分别为81.8%~99.7%和79.2%~99.2%;遗传进化分析表明,广西猪群中流行的TTSuVs主要为TTSuV 1a、TTSuV 1b和TTSuV 2a。 展开更多
关键词 猪细环病毒 广西 分子流行病学 核苷酸同源性
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人用疫苗生产用细胞、胰酶及疫苗成品中猪细环病毒PCR检测方法的建立及验证 被引量:3
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作者 任芳芳 钱兴丽 +5 位作者 宋彩花 陈巍 赵勇 刘信毅 洪超 杨晓蕾 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2018年第6期656-661,共6页
目的建立人用疫苗生产用细胞、胰酶及疫苗成品中猪细环病毒(Torque teno sus virus,TTSu V)的PCR检测方法,并进行验证。方法根据Gen Bank中登录的TTSu V1(JN688927)及TTSu V2(AY823991)的序列,合成TTSu V1及TTSu V2基因组部分DNA序列,... 目的建立人用疫苗生产用细胞、胰酶及疫苗成品中猪细环病毒(Torque teno sus virus,TTSu V)的PCR检测方法,并进行验证。方法根据Gen Bank中登录的TTSu V1(JN688927)及TTSu V2(AY823991)的序列,合成TTSu V1及TTSu V2基因组部分DNA序列,连接于PUC57质粒上,制备重组质粒,以重组阳性质粒DNA为模板,PCR扩增316 bp的TTSu V1片段及252 bp的TTSu V2片段,同时验证方法的灵敏度和特异性。并采用该方法对2批0.1%胰酶、Vero、KMB17、MRC5、Hep2、BT细胞及6批疫苗[3批Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(inactivated poliomyelitis vaccine made from Sabin strain,SIPV)收获液、1批SIPV成品、1批冻干甲型肝炎减毒活疫苗[hepatitis A(live)vaccine,freezedried,f HAV]成品、1批肠道病毒71型(enterovivus type 71,EV71)灭活疫苗成品]进行检测。结果建立的PCR法最低分别可检出10 fg/μL TTSu V1和0.01 fg/μL TTSu V2的目的基因;该方法可特异性扩增出TTSu V1和TTSu V2的目的基因条带。2批0.1%胰酶、Vero、KMB17、MRC5、Hep2、BT细胞及6批疫苗均未检出TTSu V1及TTSu V2。结论成功建立了疫苗生产用原材料、细胞、疫苗收获液及成品中TTSu V的PCR检测方法,且该方法具有较高的灵敏度和特异性,可用于本所疫苗生产中对TTSu V的检测。 展开更多
关键词 猪细环病毒 细胞 胰酶 减毒活疫苗 灭活疫苗 聚合酶链式反应
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