单一TTV DNA阳性急性肝炎临床特点及随访结果分析

目的通过分析单一TTVDNA阳性急性肝炎的临床特点 ,探讨TTV的致病性。方法临床表现为急性肝炎 ,排除甲 -庚型肝炎病毒感染。血清学检测单一TTVDNA阳性 ( 30例 )为TTV组 ,随机抽样急性乙肝 4 1例为HBV组。两组进行临床症状、体征和实验检测结果比较分析和统计学处理。结果TTV组与HBV组两组平均年龄分别为 4 2 .8岁及 30岁 ;男女比值分别为 1∶1和 4 .1∶1。两组起病及临床症状基本相同 ;黄疸型分别为83.3%及 90 .2 % ;TTV组与HBV组黄疸前期平均分别为 4 .7d及 4 .8d ;TBIL分别为 2 2 2 .1± 10 4 .1μmol/L及 191.0± 5 7.4 μmol/L ;ALT两组分别为 795 .5± 2 4 1.8u/L及 14 5 0 .1± 377.4u/L ;AST两组分别为 4 13.2±12 3.6u/L及 788.9± 183.8u/L。治疗 1月近期效果相同 ,两组均无重型肝炎及死亡病例。TTV组随访 11例 ,随访时间 1～ 5年肝功全部正常 ,10例TTVDNA持续阴性 ,恢复期慢性携带者 9.1% ( 1/ 11)。结论TTV和HBV感染一样可引起急性肝炎的临床表现 ,但年龄偏大 ,女性比例较多 (P <0 .0 5 ) ;TTV感染引起的急性肝炎的临床表现和实验检测异常与急性肝炎相似 ,但以ALT和AST为代表的肝脏炎症指标明显轻于HBV组 (P <0 .0 5 ) ;TTVDNA阳性及转归与转氨酶升降有较好的一致性 。

PCR-微孔板杂交法检测不同人群TTV DNA

根据报道的TTV全序列设计引物和探针 ,建立PCR 微孔板杂交法 ,检测 81例正常人群、92例职业献血员 12 3例甲～庚型肝炎、32例非甲～庚型肝炎、48例原发性肝癌患者的TTVDNA。结果表明TTV在以上五种人群中的阳性率分别为 3.7%、4.3 %、2 1.1%、2 8.1%、5 2 .0 % ,前者与后三者比较有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,TTV合并HBV二重感染占重叠感染的 5 4.0 %。这揭示不同人群均存在TTV感染 ,正常人群和职业献血员存在健康携带状态 ,甲～庚型肝炎和非甲～庚肝炎病人为高危人群 ,TTV可与各型肝炎存在重叠感染 ,TTV除经血传播外 ,存在其它传播途径 ,TTV感染与ALT及TBIL的升高密切相关。

原发性肝癌患者T淋巴细胞亚群变化及其与CTCs、TTV及HBV-DNA的关系

目的探讨原发性肝癌(HCC)患者T细胞免疫功能变化及其与外周血循环肿瘤细胞(CTCs)、肿瘤总体积(TTV)及乙肝病毒(HBV-DNA)定量的关系。方法收集45例HCC患者外周血,45例正常成年人外周血作为对照组。用流式细胞学技术测定CD3^+T细胞、CD4^+T细胞及CD4^+/CD8^+比值;采用益善生物技术公司的"免疫去除结合纳米过滤法"Can Patrol TM行CTCs检测。收集患者肿瘤最大直径及乙肝病毒定量(HBV-DNA)等临床病理参数。将HCC组患者依据CD4^+/CD8^+平均值分成高、低两组,比较两组之间CTCs、TTV、HBV-DNA定量的差别。结果 HCC组CD3^+T细胞、CD4^+T细胞及CD4^+/CD8^+明显低于对照组(P<0.05),CD8^+T细胞值明显高于正常组(P<0.05)。高CD4^+/CD8^+组CTCs总数及间质型CTCs明显低于低CD4^+/CD8^+组(P<0.05),而两组上皮型CTCs及混合型CTCs无明显差异(P>0.05)。CD4^+/CD8^+比值与TTV呈正相关(P<0.05),与CD8^+T细胞百分比呈负相关(P<0.05)。不同HBV-DNA组之间,CD4^+/CD8^+没有统计学差异(P>0.05)。结论 HCC患者T细胞免疫功能明显降低。T细胞免疫功能与CTCs、TTV与有着密切关系:T细胞免疫功能越差,外周血中CTCs越多、TTV越大。

兰州地区无偿献血人群血清TTV-DNA的检测

为了解兰州地区人群TTV的感染状况 ,作者采用套式PCR法 ,以TTV DNA的ORF1中的一段 30 9nt的序列为扩增序列 ,对 36份兰州地区无偿献血人群血清DNA进行扩增 ,将扩增阳性片段测序并进行序列同源性比较 ,结果发现兰州地区无偿献血人群TTV感染率为 5 2 .7%。 10份兰州序列之间的同源性为 88.6 %～ 95 .4 % ,兰州序列与日本TA2 87株的同源性为 88.1%～ 93.3% ,表明兰州地区无偿献血人群TTV感染非常普遍 ,兰州地区TTV流行株存在变异 ,至少有基因亚型存在。

献血人群感染TTV的检测及部分DNA序列分析

目的调查志愿无偿献血人群中输血传播病毒(TTV)的感染情况和分析TTVDNA部分基因序列。方法以TTVORF1保守区设计两对引物,用巢式多聚酶链式反应(PCR)检测TTVDNA,并克隆和测序。结果在血液筛查合格的无偿献血人群中检出TTVDNA的阳性率为5.0%(5/100)。在单一转氨酶异常,HBV、HCV和HIV血清标记物正常的献血人群检出TTVDNA的阳性率为5.6%(4/71)。两者有非常显著性差异(P<0.01)。与日本首例TTV-N22株相比,SZT1和SZT2株基因序列同源性为98.9%(3/272)和96.7%(9/272),SZT3和SZT4株为67.3%(89/272)和86.0%(38/272)。结论在符合献血条件的人群中存在无症状TTV携带者。与之相比较,在ALT异常献血人群中TTV流行率相对较高,对其部分基因序列的比较显示了较大的变异性。

引起肝炎新型DNA病毒(TTV)的研究

通过聚合酶链式反应的方法，在非甲──庚型肝炎病人的血清中检测到ＴＴＶ病毒。实验结果表明：ＴＴＶ病毒可能是引起非甲──庚型肝炎的新型ＤＮＡ病毒。

中国部分地区人群血清TTV部分序列变异的研究

目的 了解我国不同地区人群血清中所存在新型肝炎病毒 TTV的序列变异情况 .方法 从山东、北京、深圳、南京等地的 TTV PCR阳性血清中随机挑选 6例患者血清 ,用单管一步法从血清中提取其 TTV DNA,然后用所设计的引物进行 PCR扩增 ,并对其中的部分 ORF- 1序列 (30 9bp)进行克隆测序 ,利用网上软件 BL AST和 GOL DKEY将所测序列结果与日本所报道的序列进行比较 .结果 在 30 9个所测碱基中有少数碱基存在有变异序列 .中国株之间的同源性为91.0 %以上 ,与日本的序列相比同源性为 98.0 %以上 .结论 我们所测的几个中国株序列与日本株的基因型相同 .我们所测的多个序列结果可以积累较多 TTV序列资料 ,以利于TTV引物的设计 ,提高检测结果的可靠性 ,并为进一步研究其致病性奠定基础 .

武汉地区献血员血清TTV等几种肝炎相关病毒的基因检测

目的 :了解武汉地区不同献血员血清TTV感染特点及其与其它几种肝炎相关病毒感染之间的关系。方法 :采用PCR及巢式PCR对 54例武汉市城区义务献血员及 74例既往乡村献血者分别进行血清TTVDNA、HCVRNA及HGVRNA等检测。结果 :TTVDNA、HCVRNA及HGVRNA指标阳性率在既往乡村个体献血员为 4 3 .2 %、2 3 .0 %与 2 .7% ,城区义务献血员为 5.6%、1 .9%与 1 .9% ,前者TTVDNA与HCVRNA检出率较后者显著升高 (P <0 .0 1 ) ,两组TTVDNA的检出率显著高于其他肝炎相关病毒。结论 :武汉地区献血员人群存在TTV感染 ,长期的既往献血过程可使职业献血员TTV与HCV感染率升高 ;由此造成的TTV在部分乡村特殊人群中的流行已经成为武汉地区一个值得关注的流行病学问题。

HBV感染者重叠感染TTV的研究

目的 研究乙型肝炎病毒 (HBV)感染者重叠感染输血传播病毒 (TTV)的状况。方法 采用斑点杂交法检测乙型肝炎病毒感染者血清TTVDNA。结果 在 16 9例乙型肝炎病毒感染者中检出血清TTVDNA阳性者 2 3例 ,阳性率 13 6 1%。其中 ,急性乙型肝炎患者组阳性率 13 46 % ,慢性乙型肝炎患者组阳性率 15 0 7% ,HBsAg携带者组阳性率 11 36 % ,三者之间的差异无统计学意义P >0 0 5。结论 在我国存在TTV感染 。

TTV基因酶切分型研究

目的了解中国ＴＴＶ基因分型状况。方法采用套式ＰＣＲ检测Ｄ８、 Ｄ１０、 Ｄ２２、 Ｄ２５、 Ｄ２９血清中ＴＴＶ ＤＮＡ，限制性内切酶和ＰＣＲ产物直接测序技术进行酶切和序列分析。结果 Ｎ２２～ Ｄ８存在 ＢｓｔＵＩ特异性切点， Ｇ１ｂ～Ｄ１０无 ＢｓｔＵＩ切点，有ＥｃｏＲＩ切点，Ｇ２ａ、Ｄ２５、Ｄ２９序列均存在Ｈａｅ和Ｔｓｐ５０９切点，Ｇ２ｂ－Ｄ２２除存在ＨａｅⅢ切点之外还具有ＭｂｏⅠ切点。Ｐａｔ３～ＴＴｈ６仅有Ｈａｅ Ⅲ切点。结论ＡＢ００８３９４～Ｄ８具有相同的切点可能均属ｌａ型，Ｇ１ｂ－Ｊｃａｓｅ５切点相同可能为１ｂ型，ＴＴｈ１～１和ＴＴｈ１～２可能属１型中的其它亚型。Ｄ２５～Ｄ２９酶切点相同为２ａ型，Ｇ２ｂ～Ｄ２２切点相同为２ｂ型，Ｐａｔ３～ＴＴｈ６切点相同可能为２型中的其它亚型。

武汉地区职业献血员血清TTV等病毒核酸的检测

目的 调查武汉地区既往职业献血员血清TTVV DNA及其他几种肝炎病毒基因的状况与特点。方法采用PCR或巢式PCR对74例既往乡村献血员进行血清TTV DNA及HCV RNA、HGV RNA的检测。结果 TTVDNA、HCV RNA及HGV RNA阳性检出率分别为43.2％、23.0％与2.7％,TTV DNA检出显著高于其他肝炎相关病毒,HCV RNA阳性率显著高于HGV RNA阳性率。结论 既往长期的献血已造成地区乡村职业献血员TTV与HCV感染率的显著升高。

TTV与HBV重叠感染的研究

目的 研究乙型肝炎病毒 (HBV)感染者重叠感染输血传播病毒 (TTV)的状况。方法 采用斑点杂交法检测乙型肝炎病毒感染者血清TTVDNA。结果 在 364例乙型肝炎病毒感染者中检出血清TTVDNA阳性者 82例 ,阳性率 2 2 .53 %。其中 ,急性乙型肝炎患者组阳性率 2 3 .2 1 % ,慢性乙型肝炎患者组阳性率 2 6 .2 5 % ,HBsAg携带者组阳性率 1 5 .2 2 % ,三者之间的差异无统计学意义P >0 .0 5。结论 在我国存在TTV感染 。

乙型肝炎患者中TTV的混合感染

目的 研究乙型肝炎患者合并TTV感染状况及其对乙型肝炎病情的影响。方法 采用斑点杂交法检测乙型肝炎患者血清TTV DNA阳性率。结果 在128例乙型肝炎患者中检出血清TTV DNA阳性者16例(12.5％),在38例急性乙型肝炎患者的阳性率(13.1％)与90例慢性乙型肝炎的阳性率(12.2％)无统计学差异,混合感染TTV对乙型肝炎患者肝功能无明显影响。结论 在北京地区存在TTV感染,但其致病性值得进一步研究。

盐城地区孕产妇血清及乳汁中TTV感染状况

目的 了解盐城地区孕产妇血清及乳汁中 TT病毒 ( TTV)感染状况 ,探讨 TTV的传播途径。方法 采用PCR-微孔板杂交法对 1 0 5例孕产妇血清及乳汁标本进行 TTV DNA检测。结果 1 0 5例孕产妇血清及乳汁 TTV DNA阳性率分别为 1 2 .4%和 1 0 .5 % ,1 3例孕产妇血清 TTV DNA阳性患者中乳汁同时阳性 1 0例 ,血清与乳汁感染率的差异无显著性 ( P>0 .0 5 )。结论 孕产妇存在 TTV感染 。

山东人群TTV感染状况及TTV山东株部分基因序列分析

1997-10 Nishizawa et al发表了第一篇关于人类肝炎相关DNA病毒基因,暂命名为输血传播病毒(transfusion transmitted virus,TTV)的论文,周育森et al在国内首先测定了中国人TTV部分基因克隆序列,迄今国内少数实验室也相继开展了TTV感染的分子流行病学、临床和实验研究。初步研究结果表明,TTV感染同输血或血液制品密切相关,可能是导致肝功长期损害ALT异常又一重要致病因子,为探讨山东地区TTV感染存在和基因变异的情况及TTV在人类肝炎中作用和地位。我们以套式聚合酶链反应(nested-PCR)法,对输血后丙型肝炎和非甲～庚型肝炎患者进行TTV检测,并对部分病例进行序列分析,现将结果报告如下。

滤纸片干血斑检测TT病毒DNA

目的 建立一种快速、方便、准确的方法检测TT病毒的基因片段。方法 采集被检者全血滴在经EDTA--蛋白酶预处理的滤纸片上,室温干燥后,密封并保存于-20℃,然后进行PCR检测;同时取血清用传统方法作对照。结果 在相同时间内,本法测得的结果,与传统方法所得结果无异。结论 该方法具有特异、敏感、方便等特点,用此法检测TTV DNA是切实可行的。

病毒性肝炎合并输血传播肝炎病毒感染的初步研究

目的 了解病毒性肝炎合并输血传播肝炎病毒 (TTV)感染对肝功能及其预后的影响。方法 采用微板核酸杂交技术检测了 92例各型病毒性肝炎患者血清中的TTVDNA ,并对检测结果和临床资料进行统计学分析。结果 92例各型慢性病毒性肝炎患者中TTVDNA阳性 15例 ,阳性率 16 .3%。其中乙型肝炎 10例 ( 6 6 .6 7% ) ,丙型肝炎 2例 ( 13.33% ) ,戊型肝炎 1例 ( 6 .6 % ) ,原因不明的肝炎 2例 ( 1.33% )。 92例患者临床分型中慢性肝炎中度 2 3例 ,阳性 3例 ( 13.0 4 % ) ;慢性肝炎重度 2 7例 ,阳性 4例 ( 14 .81% ) ;肝炎肝硬化 4 2例 ,阳性 8例( 19.0 5 % )。各型间无统计学差异。在慢性肝炎、肝炎肝硬化中TTVDNA阳性与TTVDNA阴性患者的肝功能无统计学差异。结论 病毒性肝炎合并TTV感染不影响肝功能及病情预后。

原位杂交法检测非病毒性肝炎人群肝组织输血传播病毒

检测非病毒性肝炎人群肝组织中经输血传播病毒 (TTV)感染情况 ,探讨其致病性。采用原位杂交方法检测非病毒性肝炎人群肝组织中TT病毒核酸 (TTVDNA)的表达与分布 ,观察肝组织学变化。 32例非病毒性肝炎人群肝组织中检出TTVDNA阳性 9例 (2 8 1% )。原位杂交阳性信号为蓝紫色 ,细颗粒状 ,主要定位于肝细胞核内 ,肝细胞胞浆内多呈弱表达。阳性细胞在肝小叶内散在分布。阳性病例的切片经HE染色后 ,6例 (6 6 7% )有轻微的肝组织病理改变 ,包括肝细胞胞浆疏松化、嗜酸性变以及汇管区的扩大和淋巴细胞浸润等。而 2 3例TTVDNA阴性者中 ,仅 6例 (2 6 1% )有轻微的病理变化 (x2 =4 4 8,P =0 0 4 8)。非病毒性肝炎人群肝组织TTV感染均较为常见 ,在非病毒性肝炎人群尽管没有血清生化指标的改变 。