LncRNA TUG1在血管内皮细胞功能紊乱中的作用研究

目的探讨lncRNA TUG1(taurine up-regulated 1)与冠心病的关系,研究TUG1对脐静脉内皮细胞(HUVECs)功能的影响。方法采用real-time PCR检测冠心病病例对照外周血单个核细胞(PBMCs)中TUG1的表达。利用siRNA敲低HUVECs内TUG1表达水平,并检测对细胞凋亡及IL-8表达水平的影响。建立并应用低氧和TNF-α刺激的内皮细胞损伤模型,探讨TUG1在内皮细胞功能紊乱中的作用。结果冠心病患者PBMCs样本中TUG1表达显著高于对照组(P<0.001)。敲低TUG1显著抑制正常培养及低氧或TNF-α刺激诱导的内皮细胞凋亡(P<0.05)。敲低TUG1并予以低氧或TNF-α刺激,IL-8的表达明显下降(P<0.001)。结论 LncRNA TUG1在冠心病患者中出现异常高表达。体外实验结果显示,敲低TUG1能抑制内皮细胞凋亡,降低IL-8的表达水平。提示TUG1可能影响血管内皮细胞功能,参与冠心病的发生发展过程。

支气管肺发育不良新生大鼠长链非编码RNA Tug1的表达及其作用

目的研究长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(taurine upregulation gene 1,Tug1)在新生大鼠支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)模型中的表达,并从肺组织形态学及肺泡发育成熟度两方面探究长链非编码RNA Tug1与肺发育的相关性,为阐明BPD中肺发育障碍的病理机制奠定基础。方法采用高氧诱导新生SD大鼠制备BPD模型(氧浓度为85%,n=40),对照组为空气环境正常生长的新生SD大鼠(氧浓度21%,n=40)。每组分别于生后1、3、7、14 d随机取10只采集肺组织样本。通过苏木精-伊红染色观察肺组织形态学改变,应用辐射状肺泡计数法(RAC)评估肺泡发育成熟度,利用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测肺组织中长链非编码RNA Tug1及血小板源性生长因子受体α(platelet derived growth factor receptor alpha,Pdgfra)的基因水平,用蛋白免疫印迹技术检测Pdgfra的蛋白表达情况。结果在对照组,Tug1及Pdgfra的mRNA表达随日龄增加呈递增趋势,且Tug1的表达与RAC值呈显著正相关(r=0.648,P=0.007),与Pdgfra的mRNA表达呈正相关(r=0.572,P=0.021),与Pdgfra蛋白表达也呈正相关(r=0.755,P=0.001)。模型组中,Tug1表达从7 d开始显著低于对照组(0.78±0.20比1.68±0.20,P=0.04),趋势持续至14 d;Pdgfra的mRNA表达从7 d开始显著低于对照组(1.04±0.25比1.62±0.37,P=0.002),趋势持续至14 d。Pdgfra蛋白表达在对照组随日龄增加呈递增趋势,模型组7 d开始显著低于对照组(1.04±0.13比1.62±0.09,P=0.04),趋势持续至14 d。结论长链非编码RNA Tug1与肺发育成熟度密切相关,其表达在正常发育肺组织中呈递增趋势,新生大鼠BPD模型肺组织中Tug1表达下调可能是BPD肺泡发育障碍的发生机制之一。