氨茶碱和糖皮质激素治疗对哮喘患者嗜酸性粒细胞凋亡的作用

目的:测定诱导痰及血中嗜酸性粒细胞(Eos)数目及凋亡率,比较氨茶碱、糖皮质激素及联合用药对支气管哮喘患者Eos凋亡的作用。方法:对2000年8月至2007年12月期间我院门诊及住院的90例支气管哮喘患者,随机分成三组,30例健康者为对照组。用3%高渗盐水超声雾化吸入进行痰液诱导,采集血样,经分离纯化Eos后,计数,并以台盼蓝染色检测细胞存活率,分别以TUNEL法和流式细胞术测定患者用药前、后诱导痰及血中Eos凋亡状况。结果以统计学分析。结果:(1)血清及诱导痰Eos数目二者具有正相关。(2)三组患者治疗前、后肺功能(FEV1.0)及气道反应性(PD20FEV1.0)测定值比较,差异有显著性(P<0.05)。茶碱、激素两组间比较,差异无显著性,而联合用药组与茶碱、激素组间两两比较,差异有显著性(P<0.05)。(3)各组血清与诱导痰Eos数目及百分率均与FEV1.0呈负相关,与PD20FEV1.0呈负相关。(4)诱导痰及外周血中,三组给药前后,凋亡率均有显著性差异(P<0.01);凋亡率茶碱、激素组间两两比较,无显著性差异,茶碱、联合用药及激素、联合用药组间比较,差异有显著性(P<0.05);茶碱、激素、联合用药三组分别同对照组比较,差异有显著性(P<0.01),并且各组诱导痰及外周血中Eos凋亡率呈正相关。(5)Eos用药前坏死率为(4±1)%,用药后各组与用药前比较,细胞坏死率(18±4)%、(19±3)%和(21±3)%显著增加(P<0.01)。结论:(1)联合用药后,诱导痰和血中Eos凋亡数量较单独应用氨茶碱或激素的为多,说明二者联合用药治疗哮喘有协同作用。(2)诱导痰技术在哮喘患者气道炎症研究方面,无创安全、简便易行,本实验中血清、诱导痰Eos数目及凋亡率具有正相关,为临床Eos凋亡测定开辟了新的更有效的途径。

海藻玉壶汤加减海藻甘草反药组合对甲状腺肿大大鼠PI3K/Akt通路相关基因表达的影响

目的:探讨海藻、生甘草剂量为2015年版《中华人民共和国药典》规定高限剂量的2倍条件下,海藻玉壶汤加减海藻甘草反药组合对甲状腺肿大大鼠PI3K/Akt通路相关基因表达的影响。方法:84只大鼠按体质量分为空白组、模型组、阳性药组、全方组、去海藻组、去甘草组、去藻草组,每组12只。用丙硫氧嘧啶复制甲状腺肿大动物模型,然后给予相应药液灌胃治疗。采用TUNEL检测细胞凋亡,计算凋亡指数,采用实时定量PCR和Western Blot检测PI3K、Akt、Cyclin D1、Bcl-2 mRNA和Akt、p-Akt蛋白表达水平。结果:与模型组比较,全方组凋亡指数显著升高(P<0.05),各中药给药组PI3K、Cyclin D1和Bcl-2 mRNA表达水平显著降低(P<0.01,P<0.05),全方组和去藻草组Akt mRNA表达显著降低(P<0.05),各中药给药组p-Akt、p-Akt/Akt蛋白表达显著降低(P<0.01,P<0.05)。结论:海藻玉壶汤加减海藻甘草对丙硫氧嘧啶所致甲状腺肿大大鼠有显著治疗作用,通过作用于PI3K/Akt信号通路,下调Cyclin D1和Bcl-2等mRNA的表达,对细胞增殖和细胞凋亡两方面进行调控,起到治疗甲状腺肿大的作用。