同步辐射软X射线引起小麦根尖细胞凋亡的研究

采用不同剂量的软X射线辐照小麦种子,利用DAPI荧光染色和TUNEL原位标记对种子萌发后的根尖细胞进行细胞凋亡的检测。结果表明,在剂量为0—288J/cm2范围内的软X射线辐照能引起小麦根尖细胞的凋亡现象(如细胞形态学变化及细胞核内DNA的断裂等)发生,细胞凋亡率与同步辐射软X射线辐照剂量呈正相关性。

血流切应力对动脉内皮细胞凋亡影响的在体研究

探讨动脉血流受阻后壁切应力 (WSS)变化对动脉内皮细胞 (AEC)凋亡的影响。用 6 0只实验兔建立动脉血流减少模型 ,在术后 0～ 30 d 8个不同时点 ,AEC铺片 Tunel原位末端标记法 ,计量 AEC的凋亡率。结果发现 :在 WSS降低后 1～ 7d,AEC凋亡率显著增高 ,3d达到峰值。随着 WSS的递增 ,术后 14、30 d AEC的凋亡率又恢复至正常对照水平。提示 WSS的变化可显著影响 AEC的凋亡状况 ,其中

低温保存对绵羊精子DNA链完整性的影响

为了探讨低温保存对绵羊精子DNA链完整性的影响,采用原位缺口末端标记(TUNEL)法对小尾寒羊新鲜和低温保存精子的DNA链完整性进行检测。结果表明:经24 h、48 h、72 h、96 h处理的低温保存绵羊精液的DNA链断裂精子百分率分别为(0.017 2±0.006 2),(0.028 0±0.0142),(0.037 3±0.017 0),(0.037 1±0.008 8)。与新鲜精液相比,低温保存的精液中DNA链断裂精子百分率虽然略有增加但无统计学差异,表明低温保存对绵羊精子DNA链的完整性没有显著性损伤。

乌司他丁对脓毒症大鼠肺损伤抑炎及抗凋亡信号机制的研究

目的 探讨乌司他丁（UTI）对脓毒症（sepsis）大鼠肺脏保护作用及其抗凋亡机制的研究。方法 SD雄性大鼠随机分三组：Sham组（n=10）仅行开关腹手术，Sepsis组（n=10）和UTI组（n=10）行盲肠结扎穿孔术（CLP），UTI组建模前1 h大鼠尾静脉注射乌司他丁20万U/kg，24 h后重复给药，Sepsis组注射等量生理盐水。于6、12、24、36、48 h尾静脉采血测定TNF-α、IL-6、IL-10浓度，48 h留取肺脏标本行苏木素-伊红（HE）染色和免疫组化检测Bax/Bcl-2、TUNEL表达及Western-blot检测，caspase-3蛋白表达，透射电镜下观察肺组织超微结构变化。结果 UTI组炎症因子TNF-α、IL-6表达高于Sham组而低于Sepsis组（P〈0.05），UTI组抑炎因子IL-10高于Sepsis组而低于Sham组（P〈0.05）。HE染色Sepsis组肺泡水肿、充血，炎细胞侵润，而UTI组较Sepsis组明显减轻；在Sepsis组凋亡蛋白Bax表达高于UTI组，而抗凋亡蛋白Bcl-2表达低于UTI组；TUNEL检测肺泡上皮细胞凋亡率UTI组明显低于Sepsis组（P〈0.05）；透射电镜观察，Sepsis组肺泡壁及毛细血管基底膜肿胀、肺泡腔变小，腔内大量炎性渗出、肺泡Ⅱ型上皮细胞内线粒体空化等，而UTI组明显减轻；通过Western-blot检测，caspase-3蛋白在UTI组表达高于Sham组而低于Sepsis组（P〈0.05）。结论 乌司他丁抑制脓毒症大鼠血清中促炎介质的释放，抗血管内皮细胞及肺泡上皮细胞凋亡，降低caspase-3蛋白表达，对脓毒症大鼠急性肺损伤（ALI）起到保护作用。

大鼠脑损伤后氨基胍的神经保护作用

目的探讨大鼠脑损伤后诱导性一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂———氨基胍(AG)的神经保护作用。方法采用大鼠额叶锐器损伤模型,将SD大鼠随机分成氨基胍(AG)治疗组和生理盐水(NS)对照组。用生物化学方法检测NO含量;RT-PCR法及免疫组织化学染色方法观察iNOSmRNA和iNOS阳性细胞表达变化;末端脱氧核苷酸转移酶介导的原位缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡。将两组结果进行比较。结果AG治疗组创伤区及周边NO含量、iNOSmRNA和iNOS阳性细胞表达量较NS组明显降低,凋亡细胞数量也相应明显减少。结论AG能选择性地抑制iNOS表达,减少NO过量产生,从而减少细胞凋亡,发挥神经保护作用。

基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨左归丸对^(60)Co-γ射线损伤大鼠卵泡凋亡调控作用

目的以磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路为靶点,探讨左归丸对^(60)Co-γ射线早衰大鼠的保护作用。方法采用^(60)Co-γ射线一次性照射(6.0 Gy,LD_(40))性成熟雌性SD大鼠60只,随机分成模型组、补佳乐组(0.18 g·kg^(-1)·d^(-1))、补佳乐(0.09 g·kg^(-1)·d^(-1))+左归丸高剂量(23.625 g·kg^(-1)·d^(-1))组、左归丸高剂量(23.625 g·kg^(-1)·d^(-1))组、左归丸中剂量(9.45 g·kg^(-1)·d^(-1))组和左归丸低剂量(4.725 g·kg^(-1)·d^(-1))组,每日1次,治疗21 d,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清[卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和雌二醇(E_(2))],苏木素-伊红(HE)染色观察卵巢的组织形态变化,原位末端标记法(TUNEL)检测颗粒细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测卵巢组织磷酸化(p)-PI3K、p-Akt、p-mTOR和B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的蛋白表达结果。结果与正常组比较,模型组大鼠血清FSH显著上升(P<0.01),E2明显下降(P<0.05),卵巢早期卵泡和黄体数量减少(P<0.01);颗粒细胞凋亡率显著增加(P<0.01);卵巢组织p-PI3K、p-Akt、p-mTOR和Bcl-2蛋白表达明显下降,Bax蛋白表达显著增加(P<0.01);与模型组比较,各给药组干预后卵巢内早期卵泡数量增加,颗粒细胞凋亡率降低,p-PI3K、p-Akt、p-mTOR和Bcl-2蛋白表达有增加趋势,Bax蛋白表达有下降趋势,尤以补佳乐+左归丸高剂量组差异均具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论左归丸对辐射损伤卵巢的保护作用机制可能是通过活化卵巢组织PI3K/Akt/mTOR蛋白表达,增加Bcl-2蛋白量和抑制Bax蛋白表达。