LncRNA TUSC7对人骨肉瘤细胞增殖和迁移的影响

目的探讨LncRNA TUSC7对人骨肉瘤细胞增殖和侵袭的影响。方法构建LncRNA TUSC7过表达质粒,选择正常成骨细胞hFOB 1.19和MG-63、U-2OS骨肉瘤3种细胞株为素材,将重组质粒TUSC7和空质粒pcDNA 3.1分别对MG-63和U-2OS细胞进行转染,正常成骨细胞hFOB 1.19不转染,并采用CCK-8实验、Transwell迁移实验观察TUSC7对细胞增殖和迁移能力的影响。结果成功构建LncRNA TUSC7过表达质粒,MG-63、U-2OS骨肉瘤未转染组、空质粒组的细胞增殖能力和迁移能力均大于正常细胞组,差异有统计学意义(P<0.05),U-2OS转染组、MG-63转染组的增殖能力与正常细胞组相比,差异无统计学意义(P>0.05);MG-63转染组与正常细胞组相比,差异有统计学意义(P<0.05);MG-63与U-2OS骨肉瘤空质粒组与未转染组比较,差异无统计学意义(P>0.05),MG-63与U-2OS骨肉瘤转染组的细胞增殖能力和迁移能力均大于未转染组,差异有统计学意义(P<0.05);MG-63与U-2OS骨肉瘤转染组与空质粒组相比,差异无统计学意义(P>0.05);U-2OS转染组与MG-63转染组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 LncRNA TUSC7具有抑制骨肉瘤细胞增殖和侵袭的能力,对U-2OS骨肉瘤的穿膜的抑制效果更好。

长链非编码RNA TUSC7对人恶性黑色素瘤A375细胞增殖的影响

目的探讨长链非编码RNA TUSC7在人皮肤恶性黑色素瘤(malignant melanoma,CMM)细胞株中的表达及其对人黑色素瘤细胞增殖的影响。方法采用qRT-PCR技术检测人皮肤CMM组织和良性痣组织,CMM细胞株G-361、SK-MEL-1、A375、A875和正常人表皮黑色素细胞系HEMn-LP中TUSC7的表达。将CMM A375细胞分别转染TUSC7过表达质粒(pcDNATUSC7组)和阴性对照序列(pcDNA3.1组),分别采用CCK-8法和克隆形成实验检测两组细胞的增殖情况,采用流式细胞术检测细胞凋亡。结果 60例CMM组织和CMM细胞株中TUSC7的表达水平显著低于20例良性痣组织和正常人表皮黑色素细胞(P<0.05)。A375细胞过表达质粒pcDNA-TUSC7转染组中TUSC7表达水平显著高于pcDNA3.1组,差异有统计学意义(P<0.05)。CCK-8和克隆集落形成实验结果表明pcDNA-TUSC7组A375细胞增殖指数和细胞克隆数均显著低于pcDNA3.1组,流式细胞术检测凋亡率结果表明pcDNA-TUSC7组A375细胞凋亡率均显著高于pcDNA3.1组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CMM细胞株中TUSC7呈低表达,上调TUSC7表达能显著抑制CMM细胞的增殖和克隆形成能力,促进细胞凋亡,TUSC7可能参与CMM的恶性进展。

食管鳞癌患者血清中lncRNA-TUSC7的表达及与细胞侵袭转移的关系

目的探究长链非编码lncRNA-TUSC7在食管鳞癌患者血清中表达的临床意义并进一步评估其对食管癌细胞侵袭和转移能力的影响。方法选取2017年1月~2019年5月南阳市第二人民医院和南阳市中心医院收治的60例食管鳞癌患者的血清,同时选取60例年龄、性别匹配的健康体检者血清作为对照组。采用RT-qPCR方法检测血清中TUSC7的表达,分析其与临床病理特征的关系。同时以正常食管上皮细胞为对照,检测4种食管鳞癌细胞系中TUSC7的表达,进一步通过体外过表达或抑制TUSC7,进行MTT,划痕实验和细胞侵袭实验分析TUSC7对细胞迁移及侵袭的影响。Western blot检测过表达或抑制TUSC7对食管鳞癌细胞上皮间质转化(EMT)的标志物(MMP-9、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin)蛋白表达的影响。结果食管鳞癌患者血清中LncRNATUSC7的表达低于正常健康对照组(P<0.05);TUSC低表达与肿瘤分期、淋巴结转移及组织浸润程度相关(P<0.05)。细胞水平上实验组TUSC7表达水平低于对照组(P<0.05);过表达TUSC7可显著抑制食管癌细胞的迁移和侵袭能力(P<0.05);并提高KYSE-30细胞EMT相关蛋白E-cadherin,而降低MMP-9、N-cadherin和Vimentin蛋白表达量(P<0.05);而抑制TUSC7后结果相反。结论TUSC7在ESCC血清和细胞系中表达下调,与食管鳞癌淋巴结转移相关,且具有通过EMT促进肿瘤细胞迁移和侵袭的功能。因此血清中TUSC7具有成为食管鳞癌诊疗和转移监测的分子标记物的可能。