新疆农牧区老年肌少症患者外周血PBMC中TWEAK、Fn14及NF-κB通路基因表达分析

目的观察新疆农牧区老年肌肉减少症(后简称肌少症)患者外周血单个核细胞(PBMC)中肿瘤坏死因子样细胞凋亡弱诱导物(TWEAK)、成纤维细胞生长因子诱导早期反应蛋白14(Fn14)及核因子κB(NF-κB)通路基因的表达变化,并探讨其意义。方法在新疆农牧区常住居民中选择80例研究对象,肌少症患者40例纳入肌少症组、健康人群40例纳入对照组。提取两组空腹外周血中的PBMC,采用qRT-PCR法检测TWEAK、Fn14、IκB激酶α(IKKα)、IκB激酶β(IKKβ)、NF-κB p65 mRNA。结果肌少症组外周血PBMC中TWEAK、Fn14、IKKα、IKKβmRNA表达高于对照组(P均<0.05)。校正性别、年龄后,协方差分析结果仍显示,肌少症组外周血PBMC中TWEAK、Fn14、IKKα、IKKβmRNA表达高于对照组(P均<0.05)。校正年龄、性别后,偏相关性分析显示,TWEAK mRNA与Fn14 mRNA表达呈正相关(r=0.424,P<0.01),Fn14 mRNA与IKKα、IKKβmRNA表达呈正相关(r分别为0.264、0.284,P均<0.05),IKKα、IKKβmRNA与NF-κB p65 mRNA表达呈正相关(r分别为0.724、0.660,P均<0.01)。结论新疆农牧区老年肌少症患者外周血PBMC中TWEAK、Fn14、IKKα、IKKβmRNA高表达,TWEAK、Fn14 mRNA表达与IKKα、IKKβmRNA表达有相关性;TWEAK、Fn14可能通过调节IKK激活NF-κB炎症通路从而参与老年人肌少症的发生发展。

肿瘤坏死因子样细胞凋亡弱诱导物/成纤维细胞生长因子诱导早期反应蛋白14轴及下游核因子κB通路的关键因子mRNA及蛋白表达差异与老年肥胖的相关性

目的研究老年人外周血单个核细胞(PBMC)中肿瘤坏死因子样细胞凋亡弱诱导物(TWEAK)/成纤维细胞生长因子诱导早期反应蛋白14(Fn14)轴及下游核因子κB(NF-κB)通路的关键因子mRNA及蛋白表达差异与老年人中心性肥胖的相关性。方法2017年9月至2018年5月在新疆农牧区常住居民横断面流行病学调查数据库中随机抽取80例研究对象,根据是否为中心性肥胖分为对照组(n=40)和中心性肥胖组(n=40),提取空腹外周血中PBMC,采用待实时荧光定量聚合酶链反应、Western blotting方法检测TWEAK、Fn14、IκB激酶α(IKKα)、IκB激酶β(IKKβ)、NF-κBp65的mRNA、蛋白表达。采用SPSS 26.0软件进行数据分析。根据数据类型,组间比较分别采用t检验及χ2检验。相关性分析采用双变量Pearson相关分析法。结果中心性肥胖组外周血PBMC中的Fn14、IKKα、IKKβ的mRNA表达高于对照组(P<0.05);TWEAK、NF-κBp65的mRNA表达也高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。中心性肥胖组的Fn14、IKKα、IKKβ蛋白表达水平高于对照组(P<0.05),两组间TWEAK、NF-κBp65蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。双变量Pearson相关性分析显示,上述因子的mRNA表达水平,TWEAK与Fn14呈正相关(r=0.472;P<0.01),Fn14与IKKα、IKKβ均呈正相关(r=0.262,0.275;P<0.05);IKKα、IKKβ与NF-κBp65均呈正相关(r=0.747,0.692;P<0.01)。结论新疆农牧区常驻老年人中心性肥胖与外周血PBMC中Fn14、IKKα、IKKβ的蛋白、mRNA的高表达相关,TWEAK/Fn14可能通过调节IKK激活NF-κB炎症通路,参与人类肥胖的发生、发展。

TWEAK/Fn14信号通路在肿瘤发生发展及治疗中的作用研究进展

肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子(tumor necrosis factor-like weak inducer of apoptosis,TWEAK)是肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)超家族的成员,能与成纤维细胞生长因子诱导早期反应蛋白14(fibroblast growth factor-inducible 14,Fn14)结合而发挥作用。研究表明,TWEAK/Fn14在多种肿瘤中表达上调,参与调节肿瘤细胞增殖、凋亡、侵袭及转移,与肿瘤的发生发展及预后不良密切相关,揭示TWEAK/Fn14可能成为肿瘤治疗中有效的生物标志物及靶点。本文就TWEAK/Fn14的结构、相关信号通路及其在肿瘤发生发展和治疗中的作用进行综述。

胰岛素样生长因子Ⅰ转染对脂肪干细胞TWEAK/Fn14信号通路的影响

背景:胰岛素样生长因子Ⅰ具有诱导间充质干细胞向软骨细胞分化的能力,通过基因转染的方式将胰岛素生长因子Ⅰ转染入脂肪干细胞或许能够更好的促进脂肪干细胞向软骨细胞分化。目的:探讨胰岛素样生长因子Ⅰ基因对脂肪间充质干细胞体外定向成软骨分化能力以及对TWEAK/Fn14信号通路的影响。方法:构建慢病毒载体p LVX-IGF-I-IRES-Zs Greenl基因并转染第3代人脂肪间充质干细胞,诱导细胞向软骨分化。同时将pL VX-IRES-Zs Greenl转染的脂肪间充质干细胞设为绿色荧光蛋白/脂肪间充质干细胞组,单纯脂肪间充质干细胞设为对照组。结果与结论:与绿色荧光蛋白/脂肪间充质干细胞组和对照组相比,胰岛素样生长因子Ⅰ/脂肪间充质干细胞组细胞中TWEAK mR NA表达水平降低,而胰岛素样生长因子Ⅰ,Col2al和Sox9 mR NA的表达水平增加,Col2a1表达水平增加,基质金属蛋白酶3以及TWEAK的表达降低。提示pL VX-IGF-I-IRES-ZsG reenl慢病毒转染脂肪间充质干细胞后可获得胰岛素样生长因子Ⅰ的高效表达,且能下调细胞TWEAK基因及蛋白表达,可促进体外培养的脂肪间充质干细胞转化为软骨细胞。

TWEAK及其受体Fn14在大鼠骨关节炎(OA)关节软骨和滑膜中的表达

目的检测肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子(tumor necrosis factor-like weak inducer of apoptosis,TWEAK)及其受体成纤维细胞生长因子诱导因子14(fibroblast growth factor inducible 14,Fn14)mRNA及蛋白在大鼠骨关节炎(osteoarthritis,OA)关节软骨和滑膜中的表达情况,初步了解TWEAK及其受体Fn14在OA发病中的作用。方法 42只大鼠中随机选取18只行膝关节前交叉韧带切断(anterior cruciate ligamenttransection,ACLT)制作OA模型作为实验组,另外18只接受手术但不切断前交叉韧带作为假手术组,剩余6只作为正常对照组。饲养至1、2、4周时,实验组及假手术组随机各取6只处死,6只正常对照组在第4周处死,采集所有动物关节软骨及滑膜组织,用实时定量PCR及Western blot分别检测TWEAK和Fn14在mRNA及蛋白水平的表达情况。结果术后第2和第4周实验组动物关节滑膜中TWEAK及Fn14的mRNA及蛋白表达水平显著上调,与假手术组及正常对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);术后第2周实验组动物关节软骨中TWEAK及Fn14的mRNA及蛋白表水平与假手术组及正常对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 TWEAK及其受体Fn14的mRNA及蛋白表达水平在大鼠OA关节软骨及滑膜组织中的表达显著增高,它们可能是参与OA的重要细胞诱导因子。

TWEAK/Fn14信号通路在骨骼肌代谢相关基因表达及能量代谢中作用研究进展

随着饮食结构和生活方式的改变,肥胖和2型糖尿病（T2DM）等代谢性疾病的发生率逐年上升,其机制主要涉及机体外周组织、尤其是骨骼肌组织葡萄糖摄取功能受损所引起的胰岛素抵抗（IR）。最新研究显示,肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂（TWEAK）与其受体成纤维细胞生长因子诱导早期反应蛋白14（Fn14）形成的二联体在调控骨骼肌细胞代谢相关基因转录和能量代谢方面发挥重要作用。

基于TWEAK/Fn14信号通路探讨大黄酚对OVA诱导哮喘小鼠的保护作用

[目的]观察大黄酚对卵清蛋白(OVA)诱导哮喘小鼠模型的保护作用,并探讨肿瘤坏死因子样凋亡弱诱导因子(TWEAK)/成纤维细胞生长诱导因子14(Fn14)信号通路与其保护作用的关系。[方法]60只C57BL/6小鼠按体质量随机分为正常对照组(CON组)、模型组(OVA组)、地塞米松阳性对照组(DEX组)、大黄酚低剂量组(RHU-L组)、大黄酚中剂量组(RHU-M组)和大黄酚高剂量组(RHU-H组),每组10只。实验结束后,对各组小鼠的哮喘症状进行评分;Diff-Quick染色法计量各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞数。苏木精-伊红(HE)染色法观察肺组织病理学变化;酶联免疫吸附法检测各组小鼠BALF中白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-5(IL-5)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的含量;免疫组化法检测各组小鼠肺组织中TWEAK蛋白的表达水平。蛋白免疫印迹法检测各组小鼠肺组织TWEAK/Fn14信号通路蛋白TWEAK和Fn14的表达水平。[结果]大黄酚可明显降低哮喘症状评分(P<0.05),减少哮喘小鼠BALF中总细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞的数量(P<0.05),改善肺组织的病理学变化,降低BALF中IL-4、IL-5、TNF-α和IL-1β炎症因子的水平(P<0.05),减少肺组织中TWEAK和Fn14蛋白表达(P<0.05)。[结论]大黄酚对OVA致哮喘小鼠模型具有较好的保护作用,其可能与调节TWEAK/Fn14信号通路有关。

一种潜在的骨肉瘤治疗靶向——TWEAK/Fn14信号通路

骨肉瘤是一种骨科常见恶性肿瘤,预后较差。近年来医疗技术迅猛发展,骨肉瘤的疗效也不断提高。但是本病仍然尚无有效、彻底的治疗方法。随着分子生物学研究的开展和深入,各种信号通路在骨肉瘤中的作用也越来越受到关注。其中TWEAK/Fn14通路有可能在骨肉瘤的发生发展中起到重要作用,本文将对TWEAK/Fn14通路与骨肉瘤潜在关系的研究进展做一综述。

TWEAK和Fn14在子宫内膜异位症发病中的作用

目的探讨肿瘤坏死因子样凋亡弱诱导剂(TWEAK)和成纤维细胞生长因子诱导型14(Fn14)在子宫内膜异位症(EMs)中的表达与功能。方法选取2014年6月~2015年6月我院妇产科收治的50例EMs患者作为研究对象,其中30例为异位囊壁组,20例为在位内膜组,同时收集与研究组匹配的因子宫肌瘤、宫颈病变等疾病接受全子宫切除术的20例患者作为对照组。利用免疫组织化学、Western-Blot及RT-PCR检测TWEAK、Fn14在不同组的基因和蛋白表达,根据所得数据分析TWEAK、Fn14表达水平与CA-125水平、抗子宫内膜抗体(EMAb)、修正子宫内膜异位症分期(r-AFS)的相关性。结果三组患者的TWEAK、Fn14阳性表达率比较,差异有统计学意义(P<0.05);异位囊壁组、在位内膜组患者的TWEAK、Fn14阳性表达率均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);EMs患者TWEAK、Fn14阳性表达率在r-AFS、CA-125、EMAb中差异有统计学意义(P<0.05);TWEAK、Fn14表达水平与r-AFS、CA-125、EMAb均成正相关(P<0.05)。结论 TWEAK/Fn14参与子宫内膜异位症的发生和发展,TWEAK/Fn14水平异常可导致子宫内膜细胞的凋亡水平下降。

TWEAK及其受体Fn14与风湿性疾病

TWEAK是肿瘤坏死因子超家族新发现的成员,广泛表达于人体各种组织细胞中,通过与其受体Fn14特异性结合发挥生物学效应。TWEAK不仅能够诱导细胞凋亡,而且具有调节血管生成、促进炎性反应、调节机体免疫等功能。最新研究认为,TWEAK及其受体Fn14与风湿性疾病发病密切相关,可能成为风湿性疾病治疗的新靶点。

TWEAK及受体Fn14与急性肾损伤的研究进展

肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子(tumor necrosis factor-like weak inducer of apoptosis,TWEAK)是肿瘤坏死因子超家族细胞因子的成员之一,能激活成纤维细胞生长因子诱导-14(fibroblast growth factor inducible 14,Fn14)。TWEAK/Fn14表达广泛,在不同的急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)动物实验模型中可观察到其根据细胞表类型-细胞状态-微环境的不同,具有促细胞炎症、凋亡、纤维化以及细胞增殖等作用,并对AKI及其预后产生影响。本文对近些年来TWEAK/Fn14与急性肾损伤的相关文献进行总结,为今后的AKI研究和治疗提供新的思路。

TWEAK/Fn14信号通路与心力衰竭能量代谢异常的关系

TWEAK是一种多功能细胞因子,参与调控多种细胞增殖、迁移、分化、凋亡以及血管生成等。TWEAK通过与受体Fn14结合形式与多种细胞内信号通路联系密切,并参与调节各种生理过程。TWEAK主要通过Fn14-TRAF2-NF-κB依赖性信号传导下调PGC-1α表达水平诱导心功能不全。或维持PGC-1α表达水平预防心脏功能障碍。所以选择性靶向干预Fn14-TRAF2-NF-κB依赖性信号传导途径或调节PGC-1α水平可以作为心肌病和心力衰竭的新型治疗策略研究方向。本文将近年来关于TWEAK/Fn14信号通路的相关研究进行总结整理,探讨TWEAK/Fn14信号通路与心肌能量代谢异常的关系,以期对完善临床慢性心力衰竭的诊断、治疗和预后策略有所帮助。

TWEAK介导Fn14信号通路在抑郁样动物模型中的研究进展

肿瘤坏死因子样凋亡弱诱导因子(tumor necrosis factorlike weak inducer of apoptosis,TWEAK)是肿瘤坏死因子超家族(tumor necrosis factor super family,TNFSF)中的一员。TNFSF在人体中表达广泛,在免疫应答,炎症反应,细胞稳态和组织修复中发挥重要作用。TWEAK通过与成纤维细胞生长因子诱导的14(Fn14)结合而发挥作用,Fn14是一种I型跨膜蛋白,是目前报道的其唯一的受体,TWEAK也是唯一与Fn14结合的配体。TWEAK主要表达为II型跨膜蛋白,但可通过弗林蛋白酶将膜固定TWEAK(mTWEAK)进行蛋白水解加工产生可溶性TWEAK(sTWEAK),mTWEAK和sTWEAK均可与Fn14结合[1-2]。

TWEAK/Fn14信号在皮肤病诊断与治疗中的作用

肿瘤坏死因子样细胞弱凋亡因子(TWEAK)属于肿瘤坏死因子配体超家族成员,通过激活其受体成纤维细胞生长诱导因子14(Fn14)而发挥多种生物学功能。TWEAK/Fn14信号的激活可以调控细胞增殖、分化过程,促进纤维增生反应、血管形成和炎症反应,参与红斑狼疮、银屑病、皮肤肿瘤等疾病的发病过程。TWEAK在某些皮肤病患者的血清及尿液中表达上调,有潜力成为早期诊断及活动度评估的生物学标志物。适度激活TWEAK/Fn14信号可促进皮肤创伤愈合,但过强或延长激活该信号则会导致各种病理性组织损害,故激活或阻断该信号的特定环节有望成为治疗皮肤病的新策略。本文综述了TWEAK/Fn14信号在皮肤病发病机制中的作用,探讨该信号在相关诊断与治疗中的潜在价值。

TWEAK/Fn14mRNA在大鼠骨性关节炎滑膜中表达的实验研究

目的:研究TWEAK/Fn14是否参与了骨性关节炎(osteoarthritis,OA)发生发展,进一步探讨骨性关节炎发生机制。方法:将24只成年SD大鼠随机分为3组,即正常组、模型组、TWEAK抗体组,每组8只。模型组、TWEAK抗体组均采用木瓜蛋白酶关节腔注射建立骨性关节炎模型。TWEAK抗体组在造模前1 h经鼠尾静脉注射TWEAK抗体进行干预。检测指标:(1)关节滑膜HE染色;(2)关节滑膜TWEAK和Fnl4 mRNA的表达;(3)IL-1β、TNF-α在滑膜中的表达。结果:(1)HE染色:TWEAK抗体组较模型组改变轻,存在部分增生;(2)与模型组比较,TWEAK抗体组TWEAK/Fn-14mRNA表达均降低,差异有统计学意义(P<0.05);(3)与模型组比较,TWEAK抗体组滑膜中IL-1β、TNF-α表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TWEAK/Fn14参与了OA的发生,可能是OA形成的机制之一。

TWEAK/Fn14在子宫内膜异位症中的表达及功能分析

目的探讨TWEAK/Fn14在子宫内膜异位症中的表达情况,并分析其功能。方法选取2016年10月~2019年4月本院收治的子宫内膜异位症患者40例为观察组,另外选取同期确诊子宫内膜癌者40例为对照组,均实施手术治疗,比较手术前后,TWEAK及Fn14表达水平,并评价阳性染色细胞范围(E)与阳性染色强度(Ⅰ)评分。结果术前,两组的TWEAK mRNA水平比较,差异无统计学意义(P> 0.05);术后,观察组的TWEAK mRNA水平高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。术前,两组低倍镜下E评分和高倍镜下Ⅰ评分比较,差异无统计学意义(P> 0.05);术后,观察组低倍镜下的E评分低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05);术后,观察组高倍镜下Ⅰ评分均低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。结论TWEAK/Fn14在抑制子宫内膜异位症发展,缓解子宫内膜异位症患者病情,减少其浸润性方面有重要意义。

TWEAK及其受体Fnl4的基础研究进展

肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导荆（TNF—like weak inducer of apoptosis，TWEAK）作为肿瘤坏死因子配体超家族的新成员，具有广泛的生物学活性，在诱导细胞凋亡，促进细胞增殖和血管形成，提高细胞侵袭力，刺激黏附分子及金属基质蛋白酶表达，诱导炎症因子表达等方面发挥重要作用。本文就TWEAK及其受体成纤维细胞生长因子诱导的早期反应蛋白14（Fibmblast growth factor—inducible immediate—eady response protein14）的结构特征、组织及细胞分布、作用机制、生物学效应，研究方法等的目前研究进展作一综述。

TWEAK在动脉粥样硬化中的研究进展

动脉粥样硬化被描述为一种慢性炎症性疾病,在这一过程中包括细胞聚集、增殖、新生血管形成和管壁硬化。TWEAK是肿瘤坏死因子超家族的新成员之一,有许多生物学功能,能诱导炎症反应、激活细胞生长、刺激黏附分子及金属蛋白酶表达、诱导细胞凋亡等。在体外培养的细胞中有潜在的致动脉粥样硬化效应,是参与动脉粥样硬化的重要因素之一。

TWEAK/Fn14在结节性红斑患者皮损组织中的表达

目的探讨TWEAK/Fn14信号通路在结节性红斑中的表达情况及意义。方法收集西安交通大学第二附属医院皮肤科2021年6月-2021年10月结节性红斑患者15例,取同期正常组织为对照,行石蜡组织包埋术及病理切片,提取组织蛋白和RNA,免疫组织化学染色、实时荧光定量PCR及蛋白印迹检测TWEAK和Fn14分子在结节性红斑皮损组织和正常组织中的表达,并进行差异比较和统计学分析。结果免疫组织化学检测结果显示,TWEAK/Fn14蛋白在正常组织中低表达,在患者皮损处显著高表达,尤其在脂肪小叶及血管周围,并伴有多种炎症细胞浸润、脂肪肉芽肿和纤维化;实时荧光定量PCR及蛋白印迹检测显示患者皮损组织中的TWEAK/Fn14信号表达显著高于正常组织对照组(P<0.05)。结论TWEAK/Fn14信号通路可能在结节性红斑发病机制中发挥重要作用,有望成为治疗结节性红斑的潜在靶点。

TWEAK激活自噬增强上皮性卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/DDP顺铂敏感性的研究

目的:观察TWEAK对上皮性卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/DDP的顺铂(DDP)耐药性的影响,并初步探讨其机制。方法:CCK8法测定不同浓度TWEAK刺激后A2780/DDP的顺铂半数细胞致死量(IC50)。Western blot法检测TWEAK刺激A2780/DDP后Beclin-1、微管结合蛋白轻链3(LC3)及成纤维细胞生长因子诱导早期反应蛋白14(Fn14)的表达水平。激光共聚焦显微镜检测绿色荧光-LC3蛋白(GFP-LC3)在A2780/DDP细胞内的分布情况。用TWEAK刺激敲除Fn14表达的A2780/DDP细胞,Western blot法检测Beclin-1、LC3的表达。结果:CCK8检测结果显示,10、100ng/mlTWEAK组的顺铂IC50分别为(31.940±0.118)μg/ml、(28.769±0.090)μg/ml,均显著低于0ng/ml组(36.358±0.106)μg/ml(P均<0.05)。Western blot法结果显示,TWEAK可呈剂量和时间依赖性诱导Beclin-1、LC3及Fn14表达上调,而特异性敲除Fn14表达后,Beclin-1、LC3表达明显下调。激光共聚焦显微镜检测结果显示,TWEAK可诱导GFP-LC3致密斑形成。结论:TWEAK可增强人卵巢癌细胞耐药株A2780/DDP的顺铂敏感性;呈剂量和时间依赖性激活A2780/DDP的自噬活性,且主要通过与其受体Fn14结合介导。