基于HRM技术的小麦光周期基因功能标记的开发和应用

根据前期研究小麦光周期基因TaCO9-1A在春性品种和冬性品种间存在的差异,开发特异的分子标记TWS[T代表小麦(Triticum aestivumL.),W代表冬性(winter),S代表春性(spring)],利用该标记通过高分辨率熔解曲线(high resolution melting curve,简称HRM)技术对典型的强冬性品种中麦895、春性品种宁春4号、223份小麦自然群体及冬春杂交的2个F_2代群体进行基因分型,并利用传统的聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,简称PAGE)检测方法进行分型验证。结果表明,HRM技术能准确、快速地检测出样本基因型,结果与聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果完全一致,223份材料中99份材料为春性小麦(TS)型,124份材料为冬性小麦(TW)型,F_2代分离群体中可明确分离TW、TS/W(杂合)、TS基因型,且分离比为1∶2∶1,说明该标记可应用于自然群体及F_2代分离群体的基因分型。田间调查及关联分析表明,TWS标记与小麦春冬性及早熟性显著关联(P <0. 01)。该标记的开发及其高通量分子检测方法的应用对小麦分子标记辅助选择育种、小麦品种冬春性检测及品种区划布局等具有重要的指导作用。