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小麦mRNA剪接因子TaSR与TaHis的互作鉴定及其基因表达分析
1
作者
宋普文
邓佳乐
+5 位作者
杜玉新
陈家美
敬月婷
刘俊彤
李澳
胡海燕
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2024年第3期166-172,共7页
为研究TaHis基因对小麦赤霉病的抗性机制,首先克隆了TaHis基因全长编码序列,构建了pGBKT7-TaHis诱饵载体,通过酵母双杂交技术对赤霉病诱导的小麦穗部酵母双杂交文库进行筛选,获得互作蛋白后利用酵母双杂交技术和双分子荧光互补技术验证...
为研究TaHis基因对小麦赤霉病的抗性机制,首先克隆了TaHis基因全长编码序列,构建了pGBKT7-TaHis诱饵载体,通过酵母双杂交技术对赤霉病诱导的小麦穗部酵母双杂交文库进行筛选,获得互作蛋白后利用酵母双杂交技术和双分子荧光互补技术验证蛋白质之间的互作,并利用RT-qPCR技术对抗感小麦材料中TaHis互作蛋白的赤霉病诱导表达模式进行分析。结果表明,成功构建了pGBKT7-TaHis诱饵载体,经过酵母双杂交文库筛选后,在四缺选择培养基(SD/-Leu/-Trp/-His/-Ade)上获得了18个酵母单克隆。测序后Blast分析发现,共获得5个可能与TaHis互作的蛋白质,其中在6个酵母单克隆中均鉴定到富含丝氨酸/精氨酸的mRNA剪接因子SR45a类蛋白(TaSR)编码序列。以百农4299为材料,克隆了TaSR基因全长编码区,并构建了pGADT7-TaSR载体,酵母双杂交试验表明,pGADT7-TaSR和pGBKT7-TaHis共转化的酵母细胞在四缺培养基(SD/-Leu/-Trp/-His/-Ade/X-α-Gal/AbA)上可以生长且显蓝色,表明TaSR和TaHis在酵母细胞中直接互作;构建了YC-TaHis、YN-TaSR载体,双分子荧光互补试验表明,共转化YC-TaHis和YN-TaSR的烟草细胞中产生强烈荧光信号,进一步验证了TaSR与TaHis的互作。RT-qPCR分析显示,TaSR在抗性材料百农4299中受赤霉病诱导后上调表达,在感病材料百农607中受赤霉病诱导后下调表达,表明TaSR基因表达量与小麦赤霉病抗性呈正相关。综上,小麦TaSR与TaHis存在相互作用,且TaSR基因表达量与小麦赤霉病抗性呈正相关。
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关键词
小麦赤霉病
tahis
TaSR
酵母双杂交
双分子荧光互补
RT-QPCR
下载PDF
职称材料
面向IPv6的协议测试技术
2
作者
吴鹏辉
王能
蒋雪垠
《微机发展》
2005年第12期38-41,共4页
网络协议测试是检验网络协议实现的一个关键性方式,它是在软件测试的基础上发展起来的。面向IPv6的协议测试技术作为它的一个分支,则是为了验证IPv6协议栈是否满足协议标准而提出的。文章详细介绍了针对小设备上的IPv6协议栈开发过程中...
网络协议测试是检验网络协议实现的一个关键性方式,它是在软件测试的基础上发展起来的。面向IPv6的协议测试技术作为它的一个分支,则是为了验证IPv6协议栈是否满足协议标准而提出的。文章详细介绍了针对小设备上的IPv6协议栈开发过程中所用到的一致性测试工具和方法,包括:PacketGenator,TAHI Project,and TTCN-3,并结合Ethereal抓包软件,对项目组自行开发的协议栈进行测试,实测效果良好。
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关键词
IPV6
一致性测试
WINPCAP
TAHI
PROJECT
TTCN-3
下载PDF
职称材料
题名
小麦mRNA剪接因子TaSR与TaHis的互作鉴定及其基因表达分析
1
作者
宋普文
邓佳乐
杜玉新
陈家美
敬月婷
刘俊彤
李澳
胡海燕
机构
河南科技学院农学院
出处
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2024年第3期166-172,共7页
基金
河南省自然科学基金项目(212300410143)
河南省科技攻关计划项目(222102110030,212102110270)。
文摘
为研究TaHis基因对小麦赤霉病的抗性机制,首先克隆了TaHis基因全长编码序列,构建了pGBKT7-TaHis诱饵载体,通过酵母双杂交技术对赤霉病诱导的小麦穗部酵母双杂交文库进行筛选,获得互作蛋白后利用酵母双杂交技术和双分子荧光互补技术验证蛋白质之间的互作,并利用RT-qPCR技术对抗感小麦材料中TaHis互作蛋白的赤霉病诱导表达模式进行分析。结果表明,成功构建了pGBKT7-TaHis诱饵载体,经过酵母双杂交文库筛选后,在四缺选择培养基(SD/-Leu/-Trp/-His/-Ade)上获得了18个酵母单克隆。测序后Blast分析发现,共获得5个可能与TaHis互作的蛋白质,其中在6个酵母单克隆中均鉴定到富含丝氨酸/精氨酸的mRNA剪接因子SR45a类蛋白(TaSR)编码序列。以百农4299为材料,克隆了TaSR基因全长编码区,并构建了pGADT7-TaSR载体,酵母双杂交试验表明,pGADT7-TaSR和pGBKT7-TaHis共转化的酵母细胞在四缺培养基(SD/-Leu/-Trp/-His/-Ade/X-α-Gal/AbA)上可以生长且显蓝色,表明TaSR和TaHis在酵母细胞中直接互作;构建了YC-TaHis、YN-TaSR载体,双分子荧光互补试验表明,共转化YC-TaHis和YN-TaSR的烟草细胞中产生强烈荧光信号,进一步验证了TaSR与TaHis的互作。RT-qPCR分析显示,TaSR在抗性材料百农4299中受赤霉病诱导后上调表达,在感病材料百农607中受赤霉病诱导后下调表达,表明TaSR基因表达量与小麦赤霉病抗性呈正相关。综上,小麦TaSR与TaHis存在相互作用,且TaSR基因表达量与小麦赤霉病抗性呈正相关。
关键词
小麦赤霉病
tahis
TaSR
酵母双杂交
双分子荧光互补
RT-QPCR
Keywords
Fusarium head blight
tahis
TaSR
Yeast two-hybrid
Bimolecular fluorescence complementation
RT-qPCR
分类号
S512.1 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
面向IPv6的协议测试技术
2
作者
吴鹏辉
王能
蒋雪垠
机构
华东师范大学计算机科学技术系
出处
《微机发展》
2005年第12期38-41,共4页
基金
上海市科委科技攻关计划项目(035115040)
文摘
网络协议测试是检验网络协议实现的一个关键性方式,它是在软件测试的基础上发展起来的。面向IPv6的协议测试技术作为它的一个分支,则是为了验证IPv6协议栈是否满足协议标准而提出的。文章详细介绍了针对小设备上的IPv6协议栈开发过程中所用到的一致性测试工具和方法,包括:PacketGenator,TAHI Project,and TTCN-3,并结合Ethereal抓包软件,对项目组自行开发的协议栈进行测试,实测效果良好。
关键词
IPV6
一致性测试
WINPCAP
TAHI
PROJECT
TTCN-3
Keywords
IPv6
conformance testing
WinPcap
TAHI project
TTCN - 3
分类号
TP393.06 [自动化与计算机技术—计算机应用技术]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
小麦mRNA剪接因子TaSR与TaHis的互作鉴定及其基因表达分析
宋普文
邓佳乐
杜玉新
陈家美
敬月婷
刘俊彤
李澳
胡海燕
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2024
0
下载PDF
职称材料
2
面向IPv6的协议测试技术
吴鹏辉
王能
蒋雪垠
《微机发展》
2005
0
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
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引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
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