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亚洲牛带绦虫泛素缀合酶E2的克隆表达及免疫鉴定
被引量:
1
1
作者
廖兴江
戴佳琳
+5 位作者
黄江
胡旭初
余新炳
申萍香
周灵贵
郎书源
《西安交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第4期395-398,共4页
目的克隆表达亚洲牛带绦虫泛素缀合酶E2(UBCE2)全长编码序列,获得纯化的重组蛋白,为进一步功能研究做充分准备。方法以亚洲牛带绦虫成虫cDNA文库中含有UBCE2基因的质粒作为模板,扩增该基因,将其克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,测序鉴...
目的克隆表达亚洲牛带绦虫泛素缀合酶E2(UBCE2)全长编码序列,获得纯化的重组蛋白,为进一步功能研究做充分准备。方法以亚洲牛带绦虫成虫cDNA文库中含有UBCE2基因的质粒作为模板,扩增该基因,将其克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,测序鉴定重组质粒,在大肠杆菌BL-21/DE3中用IPTG诱导,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,重组后的蛋白用His-镍蛋白纯化柱纯化,并使用Western blotting分析其免疫反应性。结果PCR、双酶切及DNA测序结果均表明重组质粒pET-28a(+)-UBCE2构建成功,该基因在大肠杆菌中以包涵体形式得到表达,十二烷基肌氨酸钠纯化后蛋白通过SDS-PAGE鉴定结果表明该基因在大肠杆菌BL-21/DE3得到高效表达,亲和层析得到高纯度的蛋白且该重组蛋白可被亚洲带绦虫及牛带绦虫患者血清识别,表明其有免疫反应性。结论亚洲牛带绦虫UBCE2可在原核表达系统中表达,并具有免疫反应性,为进一步研究该基因的功能奠定基础。
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关键词
亚洲牛带绦虫
泛素缀合酶E2
基因克隆
原核表达
免疫反应性
下载PDF
职称材料
题名
亚洲牛带绦虫泛素缀合酶E2的克隆表达及免疫鉴定
被引量:
1
1
作者
廖兴江
戴佳琳
黄江
胡旭初
余新炳
申萍香
周灵贵
郎书源
机构
贵阳医学院多媒体形态学实验室
中山大学中山医学院寄生虫学教研室
出处
《西安交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第4期395-398,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30760227)
贵州省科技攻关项目[No.黔科合NY字(2008)3060]~~
文摘
目的克隆表达亚洲牛带绦虫泛素缀合酶E2(UBCE2)全长编码序列,获得纯化的重组蛋白,为进一步功能研究做充分准备。方法以亚洲牛带绦虫成虫cDNA文库中含有UBCE2基因的质粒作为模板,扩增该基因,将其克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,测序鉴定重组质粒,在大肠杆菌BL-21/DE3中用IPTG诱导,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,重组后的蛋白用His-镍蛋白纯化柱纯化,并使用Western blotting分析其免疫反应性。结果PCR、双酶切及DNA测序结果均表明重组质粒pET-28a(+)-UBCE2构建成功,该基因在大肠杆菌中以包涵体形式得到表达,十二烷基肌氨酸钠纯化后蛋白通过SDS-PAGE鉴定结果表明该基因在大肠杆菌BL-21/DE3得到高效表达,亲和层析得到高纯度的蛋白且该重组蛋白可被亚洲带绦虫及牛带绦虫患者血清识别,表明其有免疫反应性。结论亚洲牛带绦虫UBCE2可在原核表达系统中表达,并具有免疫反应性,为进一步研究该基因的功能奠定基础。
关键词
亚洲牛带绦虫
泛素缀合酶E2
基因克隆
原核表达
免疫反应性
Keywords
taenia asginata asiatica
ubiquitin-conjugating enzyme E2 prokaryotic expression immunoreactivity
分类号
R383.3 [医药卫生—医学寄生虫学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
亚洲牛带绦虫泛素缀合酶E2的克隆表达及免疫鉴定
廖兴江
戴佳琳
黄江
胡旭初
余新炳
申萍香
周灵贵
郎书源
《西安交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2009
1
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