代谢组学应用于糖肾方治疗糖尿病肾病的疗效评价

建立了基于超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC/TO F M S)分析技术的血浆代谢指纹谱,应用多元统计分析方法评价糖尿病肾病患者血浆代谢物变化差异及糖肾方的干预效果。通过研究糖肾方干预糖尿病肾病血浆内源性代谢物的变化,探索与该疾病密切相关的代谢途径,评价糖肾方的治疗效果。结果发现:经糖肾方治疗后,血浆内源性代谢物发生了明显变化,磷脂代谢、脂肪酸代谢、氨基酸代谢、嘌呤嘧啶代谢、固醇类代谢等多个代谢途径得到纠正。本研究基于UPLC/TO F M S的代谢组学方法,能够从整体水平反映疾病治疗过程中代谢网络的变化趋势,证实糖肾方具有治疗糖尿病肾病的临床疗效并有助于阐释药物作用机理。

复方灵芝健肾汤对早期糖尿病肾病氧化应激反应和内皮功能的影响

目的观察复方灵芝健肾汤联合雷公藤多苷片对早期糖尿病肾病(DN)患者氧化应激反应及内皮功能的影响。方法将126例早期DN患者随机分为观察组和对照组,各63例。两组均接受基础治疗;对照组给予雷公藤多苷片治疗,观察组在对照组基础上加用复方灵芝健肾汤。观察两组血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、尿白蛋白排泄率(UAER)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)以及一氧化氮(NO)、血管性血友病因子(v WF)和内皮素-1(ET-1)浓度变化,比较两组的临床疗效和中医症候积分。结果治疗后两组中医症候积分明显低于治疗前(P <0. 01),观察组明显低于对照组(P <0. 01);治疗后两组SCr、BUN、UAER明显低于治疗前(P <0. 01),观察组明显低于对照组(P <0. 01);观察组患者临床疗效高于对照组(P <0. 05);治疗后两组MDA、v WF、ET-1明显低于治疗前(P <0. 01),观察组明显低于对照组(P <0. 01);治疗后两组SOD、NO明显高于治疗前(P <0. 01),观察组明显高于对照组(P <0. 01)。结论复方灵芝健肾汤联合雷公藤多苷片能够缓解早期DN的氧化应激反应,减轻血管内皮细胞的损伤,改善肾功能,减轻临床症状。

左归降糖益肾方改善2型糖尿病肾病MKR小鼠肾损害机制研究

目的探究左归降糖益肾方能否通过激活PI3K/Akt信号通路和保护肠道菌群稳态改善2型糖尿病肾病MKR小鼠肾损害机制。方法将30只MKR小鼠随机分为DN+MKR组、ZGJTYSF组和ZGJTYSF+LY294002组,每组10只;将10只FBV小鼠作为对照组(Control组)。测定小鼠血糖和24 h尿蛋白总量;ELISA检测空腹胰岛素和血清中肾损伤指标;16S-rDNA肠道菌群测序检测小鼠粪便肠道菌群结构;蛋白质印迹法检测肾脏组织中p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt蛋白表达;HE染色检测肾组织病理学变化。结果和Control组相比,DN+MKR组小鼠FBG、UACR、血清中Scr、BUN、β2-MG水平、Simpson指数明显升高,OTU数、Shannon、Chao1、ACE指数及肾组织中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt比值明显降低(P<0.05);和DN+MKR组相比,ZGJTYSF组小鼠FBG、UACR、血清中Scr、BUN、β2-MG水平、Simpson指数明显降低,OTU数、Shannon、Chao1、ACE指数及肾组织中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt比值增加(P<0.05);和ZGJTYSF组相比,ZGJTYSF+LY294002组小鼠FBG、UACR、血清中Scr、BUN、β2-MG水平、Simpson指数明显升高,OTU数、Shannon、Chao1、ACE指数及肾组织中p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt比值降低(P>0.05)。和DN+MKR组相比,ZGJTYSF组厚壁菌门和变形菌门、普雷沃菌属和拟杆菌属菌落相对丰度明显降低,拟杆菌门和疣微菌门及乳酸菌属菌菌落明显升高(P<0.05);和ZGJTYSF组相比,ZGJTYSF+LY294002组厚壁菌门和变形菌门、普雷沃菌属和拟杆菌属菌落相对丰度明显升高,拟杆菌门和疣微菌门及乳酸菌属菌菌落相对丰度明显降低(P<0.05)。结论左归降糖益肾方可通过调节肠道菌群紊乱减轻2型糖尿病肾病MKR小鼠肾损害,保护肾组织,其作用机制可能和激活PI3K/Akt信号通路有关。

糖肾方对自发性2型糖尿病模型大鼠脂代谢及肝脏脂变的影响

目的:观察糖肾方对自发性2型糖尿病模型(OLETF)大鼠脂代谢及肝脏脂变的作用,探讨相关的作用机制。方法:45只雄性OLETF大鼠随机分成OLETF组、糖肾方组(1.60g/kg)和蒙诺组(0.833mg/kg)。18只LETO大鼠作为正常组。各实验组从动物12周龄起开始给药。分别在36周龄和56周龄取材,检测血脂水平,观察肝组织病理组织学变化并进行半定量分析,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分析SREBP-1及G6PDmRNA在肝组织中的表达。结果:糖肾方能显著降低OLETF组大鼠总胆固醇(TC)水平(P<0.01),减轻肝脂病变,显著改善肝脏组织大、小空泡的发生面积(P<0.05);抑制SREBP-1mRNA在肝脏中的表达(P<0.05);上调G6PDmRNA在肝脏中的表达(P<0.001)。结论:糖肾方可以改善OLETF大鼠的血脂水平异常及肝脂变,其可能的机制是通过降低SREBP-1和增加G6PDmRNA在肝脏的表达,减少脂肪在肝脏中的淤积及降低TG的合成。

降糖补肾方对糖尿病大鼠IKKβ mRNA表达的影响

目的观察降糖补肾方对小剂量链脲佐菌素(STZ)加高脂饲料诱导的糖尿病模型大鼠肌肉组织IKK激酶β(IKKβ)信使核糖核酸(mRNA)表达的影响。方法雄性SD大鼠高脂饲料喂养4周后注射小剂量STZ,1周后测大鼠空腹血糖,血糖值>11.1 mmol/L者为造模成功的大鼠,将造模成功的大鼠随机分为模型组和降糖补肾方干预组,另设阿司匹林对照组和空白对照组,药物干预4周,取大腿肌肉组织,采用聚合酶链反应逆转录RT-PCR技术检测IKKβmRNA表达水平。结果模型组IKKβmRNA表达明显高于空白对照组,是空白对照组的5.098倍(P<0.01);阿司匹林组、降糖补肾高、中剂量组能明显降低IKKβmRNA表达,分别是空白对照组的2.814、3.246、3.770倍,与模型组比P<0.01;降糖补肾低剂量组能降低IKKβmRNA表达,是空白对照组的4.974倍,与模型组比P>0.05。结论降糖补肾方在一定程度上能抑制糖尿病大鼠IKKβmRNA基因,这可能是降糖补肾方抑制炎症信号通路的传导而发挥其改善胰岛素抵抗治疗糖尿病的机制之一。