糖痹康治疗糖尿病周围神经病变的临床疗效观察

目的:观察糖痹康治疗糖尿病周围神经病变的临床疗效及安全性。方法:纳入60例中医辨证为气阴两虚,血瘀脉络证的糖尿病周围神经病变患者为研究对象,按照性别相同、年龄相近、体质量指数相近、就诊时间相近、糖尿病病程相似、中医证候积分相似、密歇根糖尿病神经病变积分(MDNS)相似7个条件进行1∶1配对,共配对30对,每对患者随机分入试验组(糖痹康组)和对照组(甲钴胺组),共治疗12周。以MDNS为主要疗效指标,中医证候积分、电生理、血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平、空腹血糖水平、餐后2 h血糖水平、糖化血红蛋白水平为次要疗效指标,评价糖痹康治疗糖尿病周围神经病变的临床疗效及安全性。结果:试验组患者的总有效率为83.33%(25/30),对照组患者的总有效率为53.33%(16/30);经治疗,试验组患者在改善MDNS积分、改善中医证候积分、提高双侧胫神经运动神经传导速度和感觉神经传导速度、降低血清NSE水平方面均优于对照组(P<0.05);在改善空腹血糖、餐后2 h血糖、糖化血红蛋白水平方面均无显著差异(P>0.05);两组患者在试验过程中均未发现明显不良反应。结论:糖痹康与甲钴胺相比,在改善糖尿病周围神经病变患者症状及体征、提高胫神经传导速度、降低血清NSE水平方面更有优势,且糖痹康治疗糖尿病周围神经病变无明显不良反应。

糖痹康治疗糖尿病周围神经病变的临床研究

[目的]采用自身前后对照方法,评价中药复方糖痹康治疗糖尿病周围神经病变(DPN)的临床有效性及安全性。[方法]在基础治疗(如血糖、血压、血脂等)的基础上,给予35例DPN患者口服糖痹康配方颗粒,治疗8周后,对患者的各项指标(如:中医证候、实验室检查及肌电图)进行客观评价。[结果]糖痹康治疗前后受试对象的双侧胫运动神经(MCV)、感觉神经(SCV)传导速度明显改善(P<0.05),且治疗前后安全性指标(血糖、糖化血红蛋白、血脂及血压)均在正常范围内,无显著性差异(P>0.05)同时未出现药物不良反应。[结论]中药复方糖痹康可显著改善DPN患者的临床症状、提高神经传导速度、显著降低国际公认糖尿病周围神经病变积分并且总有效率达到91.14%。

中药复方糖痹康改善氧化应激的分子机制探讨

目的:观察中药复方糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经锰超氧化物歧化酶(Mn SOD)、铜锌超氧化物歧化酶(Cuzn SOD)mRNA表达的影响。方法:SD雄性大鼠60只,随机选取10只为正常组,其余大鼠采用高脂饲料和小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱发2型糖尿病大鼠动物模型。造模成功后随机分为模型组,弥可保组,糖痹康低、中、高剂量组,每组10只。各组采取相应干预。16周后取大鼠一侧坐骨神经,用铜试纸显色法检测大鼠血清的SOD含量及采用RT-PCR方法检测坐骨神经组织中Mn SOD及Cuzn SODmRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清SOD的含量显著降低;与模型组相比,糖痹康剂量组大鼠血清中SOD的含量显著升高;与正常组比较,模型组大鼠坐骨神经Cuzn-SODmRNA及Mn-SODmRNA表达显著降低;与模型组比较,弥可保,糖痹康低、中和高剂量组Mn-SODmRNA的表达显著升高,同时与模型组比较,糖痹康低、中和高剂量组CuznSODmRNA的表达显著升高,糖痹康低,中和高剂量组Mn-SODmRNA的表达显著升高,弥可保组Mn-SODmRNA的表达显著升高虽也升高,但无统计学意义。结论:临床有效中药糖痹康对糖尿病周围神经病变的神经保护作用有可能与通过提高血清SOD含量及Mn-SOD及Cuzn-SOD基因表达而起到抗氧化应激作用有关。

中药复方糖痹康对糖尿病大鼠神经保护机制的研究

目的:观察中药复方糖痹康对糖尿病周围神经病变大鼠血浆内皮素(ET)和血清一氧化氮(NO)含量的影响,探讨其神经保护机制。方法:采用高脂饲料和小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱发2型糖尿病大鼠动物模型,造模成功后随机分为模型组、甲钴胺组、糖痹康高、中、低剂量组,另设10只雄性SD大鼠为正常组,模型组和正常组给予蒸馏水,用不同剂量的糖痹康灌胃,并与甲钴胺对照,每4周检测体质量、空腹血糖,16周后取大鼠一侧坐骨神经,光镜观察各组大鼠坐骨神经病理变化及用放射免疫法检测糖痹康对糖尿病周围神经大鼠血浆ET及铜试纸显色法检测大鼠血浆大鼠血清NO的含量。结果:治疗16周后,糖尿病大鼠体质量、血糖明显改善。与模型组比较,甲钴胺组及中药各剂量组能明显改善糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经病理组织学损伤程度,与正常组比较,模型组大鼠血浆中ET的含量显著提高(P<0.01),模型组大鼠血清中NO的含量显著降低(P<0.01);与模型组比较,经药物干预后,各组大鼠血浆中ET的含量均降低(P<0.01),糖痹康低剂量组大鼠血清中NO的含量升高(P<0.05),甲钴胺组及糖痹康中、高剂量组大鼠血清中NO的含量均显著升高(P<0.01),结论:糖痹康能降低糖尿病大鼠血糖对坐骨神经的形态具有保护作用及可上调糖尿病周围神经病变大鼠血浆ET的水平和下调糖尿病周围神经病变大鼠血清NO的水平。

糖痹康对糖尿病周围神经病变大鼠氧化应激及细胞凋亡的影响

目的观察糖痹康对糖尿病性周围神经病变大鼠相关的活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、半胱天冬酶-3(caspas-3)、坐骨神经细胞凋亡的影响,探讨其对氧化应激及细胞凋亡作用的神经保护机制。方法使用60只高脂饲料喂养后小剂量链脲佐菌素(streptozotoin,STZ)腹腔注射而诱发的2型糖尿病大鼠动物模型,8周造模成功后按体重随机分为模型组,α-硫辛酸——糖痹康低、中、高剂量组,另外单独设10只大鼠为正常组,模型组和正常组予蒸馏水灌胃,糖痹康组和α-硫辛酸组分别予不同剂量糖痹康和α-硫辛酸灌胃,每4周测1次体重、空腹血糖,16周后取大鼠一侧坐骨神经,检测其ROS(比色法)、MDA(硫代巴比妥酸法)、SOD(黄嘌呤氧化酶法)含量,酶联免疫吸附法检测caspas-3蛋白表达,末端脱氧核苷酸转移酶介导的d UTP缺口末端标记测定法[terminal dexynucleotidyl transferase(Td T)-mediated d UTP nick end labeling,TUNEL]检测细胞凋亡。结果与正常组比较,各组大鼠SOD显著下降,MDA、ROS显著升高,Caspase-3蛋白表达水平显著升高,TUNEL检测阳性细胞显著增多;与模型组比较,α-硫辛酸组和糖痹康中、高剂量组ROS、MDA含量明显减少,SOD含量明显升高(P<0.05);TUNEL检测α-硫辛酸组和糖痹康高剂量组与模型组相比阳性细胞数减少(P<0.05),糖痹康高剂量组与α-硫辛酸组比较,阳性细胞数稍多于α-硫辛酸组(P<0.05);α-硫辛酸组、糖痹康高剂量组大鼠坐骨神经组织Caspase-3蛋白表达显著少于模型组(P<0.05),两组间Caspase-3蛋白表达无明显差异(P>0.05)。结论糖痹康可能通过提高SOD,清除过多MDA、ROS,缓解糖尿病性周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy,DPN)的氧化应激损伤,减少神经细胞凋亡,延缓DPN的进展。

糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经VEGF和HIF-1α调控机制研究

目的:观察中药复方糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经VEGF及HIF-1α表达的影响。方法:SD雄性大鼠60只,随机选取10只为正常组,其余大鼠采用高脂饲料和小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱发2型糖尿病大鼠动物模型。造模成功后随机分为模型组,甲钴胺组,糖痹康低、中、高剂量组,每组10只。各组采取相应干预。16周后取大鼠一侧坐骨神经,采用Western blot法检测大鼠大鼠坐骨神经VEGF和HIF-1α的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠坐骨神经组织HIF-1α及VEGF蛋白表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,糖痹康中剂量组HIF-1α蛋白表达显著降低(P<0.01),而与模型组比较,糖痹康低和高剂量组以及弥可保组虽有减低但无统计学意义;与模型组比较,弥可保组与糖痹康低、中、高剂量组均可显著降低大鼠坐骨神经中VEGF的蛋白表达。(P<0.01)。结论:糖痹康上调糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神VEGF及HIF-1α蛋白表达,可能是其DPN神经保护作用靶点之一。

糖痹康对糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经NF-κB-IκB信号通路的影响

目的:观察中药复方糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经NF-κB及IκB表达的影响。方法:SD雄性大鼠60只,随机选取10只为正常组,其余大鼠采用高脂饲料和小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱发2型糖尿病大鼠动物模型。造模成功后随机分为模型组,甲钴胺组,糖痹康低、中、高剂量组,每组10只。各组采取相应干预。16周后取大鼠一侧坐骨神经,采用Western blot法检测大鼠大鼠坐骨神经NF-κB及IκB的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠坐骨神经组织IKB-a及NF-KB蛋白表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,糖痹康中剂量组IKB-a蛋白表达降低,但无统计学意义;弥可保、糖痹康低和高剂量组IKB-a及NF-KB蛋白表达显著降低(P<0.01或P<0.05),糖痹康中剂量组NF-KB蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论:抑制NF-κBIκB信号通路,可能是中药复方糖痹康防治DPN的作用机制之一。

HPLC同时测定糖痹康颗粒中黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的含量

目的建立同时测定糖痹康颗粒中黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素含量的方法。方法采用高效液相色谱法。色谱柱:Thermo syncronis C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:0.1%甲酸乙腈(A)-0.1%甲酸水(B);梯度洗脱:0~3 5 m i n,2 0%(B)~5 5%(B);3 5~4 0 m i n,1 0 0%(B);流速:1 m L/min;柱温为40℃;检测波长为275 nm;进样量为20μL。结果黄芩苷检测浓度在5~500μg/m L范围内与峰面积积分值呈良好线性关系Y=6×107X+62726(r=0.9996,n=7);平均回收率为100.06%,RSD=1.08%(n=9);汉黄芩苷检测浓度在1~85μg/m L范围内与峰面积积分值呈良好线性关系Y=90214X-51875(r=0.9997,n=7);平均回收率为100.11%,RSD=0.41%(n=9);黄芩素检测浓度在0.4~25μg/m L范围内与峰面积积分值呈良好线性关系Y=158201X-10020(r=0.9997,n=7);平均回收率100.00%,RSD=0.73%(n=9);汉黄芩素检测浓度在0.1~10μg/m L范围内与峰面积积分值呈良好线性关系Y=69606X-29918(r=0.9991,n=7);平均回收率为100.07%,RSD=1.17%(n=9);结论该方法操作简单,结果可靠,可为糖痹康颗粒的质量控制提供参考。

中药复方糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经BDNF蛋白及BDNFmRNA表达的影响

目的:观察中药复方糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经脑源性神经生长因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)蛋白及BDNFmRNA表达的影响。方法:采用高脂饲料和小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱发2型糖尿病大鼠动物模型,用不同剂量的糖痹康灌胃并与甲钴胺对照,16周后取大鼠一侧坐骨神经,用免疫组化法检测坐骨神经中BDNF蛋白的表达及采用RTPCR方法检测坐骨神经组织中BDNF mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组BDNF蛋白表达显著降低及BDNF mRNA表达显著降低;糖痹康组与模型组比较,能升高BDNF蛋白及BDNF mRNA表达。结论:中药复方糖痹康能够促进糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经BDNF mRNA的转录和蛋白的表达。

糖痹康对糖尿病周围神经病变大鼠血浆β-内啡肽的影响

目的观察中药复方糖痹康对糖尿病周围神经病变大鼠血浆β-内啡肽(β-EP)含量的影响,探讨其镇痛及神经保护机制。方法采用高脂饲料和小剂量链脲佐菌素(STZ)诱发2型糖尿病大鼠动物模型,造模后随机分为模型组、甲钴胺组及糖痹康高、中、低剂量组,另设10只大鼠为正常组。模型组和正常组给予等量蒸馏水,各治疗组给予相应药物灌胃,每4周检测体质量、空腹血糖,16周后取大鼠一侧坐骨神经,光镜观察各组大鼠坐骨神经病理变化,并用放射免疫法检测大鼠血浆β-EP变化。结果治疗16周后,糖尿病大鼠体质量、血糖明显改善。与模型组比较,甲钴胺组及糖痹康各剂量组能明显改善糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经病理组织学损伤程度。与正常组比较,模型组β-EP表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,糖痹康中、高剂量组显著增加β-EP表达(P<0.01)。结论糖痹康能降低糖尿病大鼠血糖,上调糖尿病周围神经病变大鼠血浆β-EP水平,对坐骨神经的形态具有保护作用。

糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经p38丝裂素活化蛋白激酶及血浆肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的观察中药复方糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经p38丝裂素活化蛋白激酶(p38 MAPK)及血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响,探讨其神经保护及镇痛机制。方法 SD雄性大鼠60只,随机选取10只为正常组,其余大鼠采用高脂饲料和小剂量链脲佐菌素诱发2型糖尿病大鼠模型。成模后随机分为模型组、甲钴胺组和糖痹康低、中、高剂量组,每组10只。各给药组给予相应药物干预。16周后取大鼠一侧坐骨神经,放免法检测大鼠血浆TNF-α含量;Western blot检测大鼠坐骨神经p38、p-p38 MAPK蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠坐骨神经p38、p-p38蛋白表达及血浆TNF-α含量升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠血浆TNF-α含量和坐骨神经p-p38蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01),各给药组p38蛋白表达降低,但只有糖痹康高剂量组差异有统计学意义(P<0.05)。结论糖痹康下调大鼠坐骨神经p38、p-p38 MAPK蛋白表达和血浆TNF-α含量,可能是其糖尿病周围神经病变神经保护及镇痛作用靶点之一。

HPLC-DAD法同时测定糖痹康中6种主要活性成分

目的研究糖痹康颗粒6种活性成分的含量同时测定的方法。方法采用HPLC-DAD法测定糖痹康颗粒中6种活性成分的含量,C18色谱柱（150 mm,4.6 mm,5μm）,0.1%甲酸与水-0.1%甲酸与乙腈（18%-60%）梯度洗脱;检测λ为多波长检测分别是：196、201、202、204、276、228 nm;用标准曲线法测定。结果 6种活性成分在5-600μg/m L范围内线性关系良好,回归方程分别为：芍药苷：Y=227 988X＋182,R2=0.999 1;毛蕊异黄酮葡萄糖苷：Y=417 929 X-213,R2=0.999 7;特女贞苷：Y=199 569X-312,R2=0.998 3;迷迭香酸：Y=364 936X＋152,R2=0.998 1;黄芩苷：Y=64 131 X＋362,R2=0.999 4;小檗碱：Y=87 882 X＋111,R2=0.999 5。6种活性成分的加样回收率分别为：芍药苷：101.44%（RSD=0.48%）;毛蕊异黄酮葡萄糖苷：99.99%（RSD=0.43%）;特女贞苷102.07%（RSD=0.57%）;迷迭香酸：98.38%（RSD=0.46%）;黄芩苷：102.71%（RSD=0.485%）;小檗碱：99.54%（RSD=0.77%）。结论所建立含量测定方法简便、快捷、可靠,可用于糖痹康颗粒的质量控制。

糖痹康对糖尿病大鼠背根神经节组织氧化应激、细胞凋亡的影响及机制

目的观察糖痹康对糖尿病大鼠背根节神经组织氧化应激、细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法选取SD雄性大鼠60只,随机分为正常对照组、模型组、糖痹康低剂量组、糖痹康中剂量组、糖痹康高剂量组及弥可保组各10只。模型组、糖痹康低剂量组、糖痹康中剂量组、糖痹康高剂量组及弥可保组采用腹腔注射链脲佐菌素法制备糖尿病模型,正常对照组腹腔注射等量注射枸橼酸盐缓冲液。8周后,将各组大鼠麻醉,取出背根神经节,检测背根神经节组织活性氧簇(ROS)水平,采用TUNEL法测算神经节组织细胞凋亡率,采用Western blotting法检测凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase3)以及p38丝裂原活性蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路相关蛋白p38、p-p38的表达。结果 (1)模型组ROS水平高于正常对照组,糖痹康低、中、高剂量组及弥可保组ROS水平均低于模型组(P均<0. 05)。(2)模型组细胞凋亡率高于正常对照组,糖痹康低、中、高剂量组及弥可保组细胞凋亡率均低于模型组(P均<0. 05)。(3)模型组Bcl-2蛋白表达低于正常对照组,Cleaved Caspase3蛋白表达高于正常对照组(P均<0. 05);与模型组比较,糖痹康低、中、高剂量组及弥可保组Bcl-2蛋白表达均升高,Cleaved Caspase3蛋白表达均降低(P均<0. 05)。(4)模型组p38、p-p38蛋白表达均高于正常对照组,糖痹康低、中、高剂量组及弥可保组p38、p-p38蛋白表达均低于模型组(P均<0. 05)。结论糖痹康可降低糖尿病大鼠背根神经节组织ROS水平、抑制细胞凋亡,其机制可能与抑制p38 MAPK信号通路有关。

糖痹康对糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经传导速度的影响

目的:探讨糖痹康对链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病周围神经病变(Diabetic penipheral neuropathy,DPN)大鼠坐骨神经传导速度的影响。方法:腹腔注射STZ55mg/kg建立糖尿病大鼠模型,分为正常组、模型组、弥可保组、糖痹康小剂量组、糖痹康中剂量组、糖痹康大剂量组。12周后处死大鼠,常规坐骨神经HE染色,测定右侧体表和体内坐骨神经运动神经传导速度(MNCV)、感觉神经传导速度(SNCV)。实验数据用SPSS16.0进行统计学处理。结果:坐骨神经组织病理学检查显示,糖痹康组坐骨神经病理学改变较模型组轻。与模型组比较,糖痹康组中、高剂量组坐骨神经MNCV、SNCV显著加快(P<0.01),糖痹康组中、高剂量组运动和感觉坐骨神经1.5倍阈刺激诱发的动作电位幅度明显加大(P<0.01)。结论:糖痹康能改善STZ诱导的DPN坐骨神经传导速度减慢及其动作电位的减小,且其对神经传导速度的改善程度存在剂量依赖关系,对DPN有一定的保护作用。

糖痹康颗粒HPLC指纹图谱研究

目的建立糖痹康颗粒HPLC指纹图谱,科学评价并有效控制其质量,确保其生产的稳定性。方法采用德国默克RP-18 endcapped色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸水为流动相梯度洗脱,柱温40℃,流速1 m L/min,检测波长240 nm,进样量20μL。采用国家药典委员会《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版》对10批糖痹康颗粒制剂进行相似度评价,并对处方中的9味药进行相关性分析。结果以汉黄芩苷为参照峰,初步建立糖痹康颗粒HPLC指纹图谱,10批糖痹康颗粒制剂的HPLC指纹图谱相似度在0.90以上,标示出25个共有色谱峰,其中18个归属到方中各药材。结论该方法分离效果好、准确、简单,可为糖痹康颗粒质量评价提供参考。

糖痹康对糖尿病大鼠细胞因子表达的影响

目的观察糖痹康对糖尿病大鼠肿瘤坏死因子(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白(MCP-1)、血管细胞粘附分子1(VCAM-1)、血氧化低密度脂蛋白(oxLDL)及细胞间粘附分子1(ICAM-1)表达影响。方法采用高脂饲料喂养SD大鼠,注射STZ诱发2型糖尿病模型,给予糖痹康干预16周后,采集腹主动脉血和大鼠一侧坐骨神经样本,采用ELISA法检测血清细胞因子含量,Western blot法检测坐骨神经组织中MCP-1、VCAM-1及TNF-α表达。结果与正常组相比,模型组大鼠坐骨神经组织TNF-α、VCAM-1和MCP-1蛋白表达以及血清中oxLDL、ICAM-1、VCAM-1、TNF-α和MCP-1含量均显著升高(P<0.01);与模型组相比,糖痹康可显著降低组织和血清中细胞因子表达(P<0.05~0.01),且呈现剂量依赖性。结论糖痹康可下调STZ诱导的糖尿病大鼠血清TNF-α、oxLDL、ICAM-1、VCAM-1及MCP-1的含量和坐骨神经中VCAM-1、TNF-α、MCP-1蛋白表达,这可能是糖痹康对糖尿病周围神经病变神经保护的机制之一。

从血液相关因素评价糖痹康对糖尿病周围神经病变的干预作用

目的观察中药复方糖痹康对糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠血液相关因素的影响。方法采用链脲佐菌素制作DPN大鼠模型,将成模大鼠随机分为模型组、甲钴胺组,以及糖痹康低、中、高剂量组。观察各组干预治疗12周后,大鼠血糖、血脂、全血黏度、血栓素B(2TXB2)和6-酮-前列素F1α(6-keto-PGF1α)、一氧化氮(NO)和内皮素(ET)的变化。结果给药12周后,糖痹康中剂量组低切全血黏度显著降低,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),其他各给药组全血黏度有明显降低趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。糖痹康低、中剂量组高密度脂蛋白含量较模型组明显升高(P<0.01),总胆固醇含量明显降低(P<0.05);糖痹康中、高剂量组低密度脂蛋白含量明显降低(P<0.01)。与模型组比较,糖痹康中、高剂量组NO含量明显升高,内皮素、TXB2含量均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05);中剂量组TXB2/6-keto-PGF1α比值明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论糖痹康可能通过降低DPN大鼠的血液黏度、血脂、ET含量、TXB2和TXB2/6-keto-PGF1α比值,升高NO含量来发挥保护周围神经的作用。

糖痹康对STZ诱导的DPN大鼠坐骨神经细胞凋亡Drp1信号通路的影响

目的:探讨糖痹康对糖尿病周围神经病变大鼠细胞凋亡Drp1信号通路的作用机制。方法:使用60只高脂饲料喂养后小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射而诱发的2型糖尿病大鼠动物模型,8周造模成功后按体重随机分为模型组、α-硫辛酸组、糖痹康低、中、高剂量组,另外单独设10只大鼠为正常组,模型组和正常组予蒸馏水灌胃,糖痹康组和α-硫辛酸组分别予不同剂量糖痹康和α-硫辛酸灌胃,每4周测一次体重、空腹血糖,16周后取大鼠一侧坐骨神经,采用实时荧光定量PCR法检测大鼠坐骨神经Drp-1、Bax和Bcl-2 mRNA表达水平。结果:与正常组比较,模型组和各治疗组Drp-1的表达水平明显升高,Bax表达显著增加,Bcl-2表达显著减少;糖痹康高剂量组Drp-1的表达水平比α-硫辛酸组更低,Bax表达也更减少,而Bcl-2表达则明显增加。结论:糖痹康可以抑制Drp1的表达水平,促进抗凋亡基因Bcl-2的表达而抑制促凋亡基因Bax表达,从而具有抗Drp-1信号通路的细胞凋亡作用,缓解DPN的进展。

糖痹康对高糖损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用

目的:观察糖痹康大鼠含药血清对高糖造成人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的保护作用。方法:以CCK-8法观察不同浓度葡萄糖对人脐静脉内皮细胞活力的影响;根据实验结果选择葡萄糖浓度为5.55mmol/L组为正常组,葡萄糖浓度为25mmol/L组做为模型组。然后制备正常组,弥可保组,糖痹康组的大鼠含药血清,将含药血清作用于高糖损伤的人脐静脉内皮细胞,分为正常组、高糖模型组、高糖弥可保组、高糖糖痹康低、中、高剂量组,并通过测定培养液中丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮(NO)含量与超氧化物歧化酶(SOD)活力,探讨糖痹康对血管内皮细胞损伤的保护作用。结果:与高糖模型组比较,糖痹康含药血清能减少细胞MDA、LDH释放量,提高SOD活力及NO含量。结论:糖痹康对高糖损伤的血管内皮细胞有一定的保护作用,间接的起到对周围神经的保护作用。

糖痹康对糖尿病周围神经病变大鼠氧化应激的影响

目的:观察中药糖痹康对DPN大鼠血清SOD、NO和NGF的影响,从而探讨其对DPN大鼠的抗氧化效果。方法:健康SD大鼠80只随机选取10只为正常对照组,普通饲料喂养,其余高脂饲料喂养,8周后STZ造模:用0.1 mmol·L^(-1)无菌枸橼酸钠缓冲液(PH 4.5,4℃),将STZ配成0.45%的溶液,按45 mg·kg^(-1)的剂量标准一次性给大鼠左下腹腔内注射。72 h后用血糖仪测尾尖血血糖,选持续血糖水平≥16.7 mmol·L^(-1)以上且血糖稳定3 d者为造模成功,按体质量随机进入各治疗组,模型复制成功后,按体质量随机分为以下5组,每组10只:模型组、弥可保组(西药组)、糖痹康低剂量组、糖痹康中剂量组、糖痹康高剂量组,加上正常组,共6组。糖痹康低剂量组:按成人剂量5倍给药,即生药4.175 mg·(kg·d)^(-1);糖痹康中剂量组:按成人剂量10倍给药,即生药8.35 mg·(kg·d)^(-1);糖痹康高剂量组:按成人剂量20倍给药,即生药16.7 mg·(kg·d)^(-1),均换算成糖痹康为3 m L灌胃;弥可保组:按成人剂量10倍给药,即1.97 mg·(kg·d)^(-1),用蒸馏水配成混悬液3 m L灌胃;模型组及正常组给予等量蒸馏水灌胃。采用ELISA法测定实验大鼠血清SOD、NO、NGF酶活性,按SOD、NO、NGF ELISA试剂盒说明操作。结果:与模型组相比较,糖痹康各剂量组有显著升高,高剂量组效果优于对照组;糖痹康各剂量组可以明显提高血清NGF水平。结论:中药糖痹康可以升高血清SOD、NO和NGF水平,抑制体内过高的氧化应激水平,阻止和/或延缓了DPN的发生和发展。