高糖环境下糖络宁对大鼠背根神经节神经元细胞凋亡水平及MAPKs信号通路的影响

目的研究糖络宁对高糖环境下大鼠背根神经节神经元(DRGn)细胞凋亡及丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响。方法6~8周体重(215±15)g清洁级雄性SD大鼠60只,按照随机数字表法分为高、中、低浓度糖络宁组和正常组,每组15只。各组分别以糖络宁组方生药5、2.5、1.25 g/(kg·d)和等量蒸馏水灌胃,制备含药血清和正常对照血清。新生SD胎鼠制备DRGn细胞,分为正常组(10%正常大鼠血清+Neurobasal培养基),高糖组(正常组基础上+50 mmol/L葡萄糖),糖络宁各浓度组(高糖组基础上+10%低、中、高浓度糖络宁含药血清),培养24 h后检测细胞凋亡及JNK1、p-JNK1、c-Jun、p-c-Jun、Map3k8、p-Map3k8蛋白表达。结果高糖组细胞凋亡率、p-JNK1、p-c-Jun、Map3k8、p-Map3k8表达及p-JNK1/JNK1、p-c-Jun/c-Jun、p-Map3k8/Map3k8比值高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);糖络宁各浓度组细胞凋亡率、p-JNK1、p-c-Jun、p-Map3k8表达及p-JNK1/JNK1、p-c-Jun/c-Jun、p-Map3k8/Map3k8比值明显低于高糖组,差异有高度统计学意义(P<0.01);中浓度糖络宁组细胞凋亡率、p-JNK1、p-c-Jun、p-Map3k8表达及p-JNK1/JNK1、p-c-Jun/c-Jun、p-Map3k8/Map3k8比值明显低于高、低浓度糖络宁组,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05);中、低浓度糖络宁组c-Jun表达低于高糖组,差异有统计学意义(P<0.05),糖络宁各浓度组JNK1、Map3k8及c-Jun表达比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论糖络宁可能通过抑制MAPKs信号通路降低细胞凋亡水平。

糖络宁调控miR-211对糖尿病周围神经病变大鼠背根神经元凋亡的影响

目的探讨中药糖络宁调控miR-211对糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠背根神经元(DRGn)凋亡的影响。方法以新生大鼠DRGn细胞作为研究对象,将其分为正常组、高糖组、糖络宁组、miR-211抑制剂阴性组和miR-211抑制剂组。正常组采用神经元专用培养基,高糖组、糖络宁组、miR-211抑制剂阴性组和miR-211抑制剂组采用高糖神经元专用培养基(含50 mmol/L葡萄糖),其中miR-211抑制剂阴性组和miR-211抑制剂组分别予空载体和miR-211抑制剂载体进行转染。正常组、高糖组、miR-211抑制剂阴性组和miR-211抑制剂组给予10%空白血清干预,糖络宁组予10%糖络宁含药血清干预。干预24 h后,收集各组细胞,检测细胞凋亡率、miR-211及凋亡通路相关指标蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、真核细胞起始因子2α(eIF2α)、转录激活因子4(ATF4)、C/EBP同源蛋白(CHOP)的表达水平。结果高糖组与miR-211抑制剂阴性组细胞凋亡率各指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。高糖组细胞凋亡率、miR-211基因表达及PERK、eIF2α、ATF4、CHOP蛋白表达水平均高于正常组,糖络宁组和miR-211抑制剂组细胞凋亡率、miR-211基因表达及PERK、eIF2α、ATF4、CHOP蛋白表达水平低于高糖组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论糖络宁可通过抑制miR-211调控凋亡通路来减轻高糖诱导下的大鼠DRGn凋亡。