糖肾宝复方对高糖培养的小鼠肾小球系膜细胞Ets-1/MCP-1信号通路的影响

目的观察高糖环境下糖肾宝复方含药血清对小鼠肾小球系膜细胞(MCs)增殖及E26转录因子1(Ets-1)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)、纤黏蛋白(FN)表达的影响。方法分别将糖肾宝复方及蒸馏水对SPF小鼠进行灌胃,制备含药血清与正常血清。然后体外培养小鼠MCs,设计合成Ets-1-siRNA并转染小鼠MCs。实验分为6组:正常对照组、高糖组、高糖+糖肾宝血清组、Ets-1-siRNA组、Ets-1-siRNA+糖肾宝组、空转组。药物干预72 h后,采用实时荧光定量PCR和Western Blot法检测各组MCs中Ets-1、MCP-1、FN及ColⅣmRNA水平和蛋白表达;CCK-8法检测24、48、72、96、120 h各时间点MCs增殖情况。结果与正常对照组比较,高糖组及高糖+糖肾宝血清组MCs增殖显著升高(P<0.01),且72 h达到峰值,96 h增殖速率趋于稳定(P<0.01),同时高糖组及空转组Ets-1、MCP-1、FN及ColⅣmRNA水平和蛋白表达均显著升高(P<0.01);与高糖组比较,高糖+糖肾宝血清组、Ets-1-siRNA组和Ets-1-siRNA+糖肾宝组MCs增殖,Ets-1、MCP-1、FN及ColⅣmRNA水平和蛋白表达均显著下降(P<0.01);Ets-1-siRNA组和Ets-1-siRNA+糖肾宝组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论糖肾宝复方能抑制高糖培养的MCs增殖及细胞基质(ColⅣ、FN)分泌,其机制可能与抑制Ets-1/MCP-1炎症信号通路的活化。