糖肾煎对早期2型糖尿病肾病大鼠足细胞α-actinin-4、ZO-1表达的影响

目的:探讨α-辅肌动蛋白-4(α-actinin-4)、紧密连接蛋白(ZO-1)在早期糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏表达与DN的关系,中药糖肾煎对保护肾脏的作用机制。方法:采用单肾切除+高脂饲料+小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射,结合行为干预建立早期(气阴两虚型)2型糖尿病肾病病证结合大鼠模型,按随机数字表法分为假手术组(N组)、模型组(M组)、糖肾煎组(T组)、贝那普利组(B组)。干预16周,观察各组大鼠一般状况、空腹血糖(FBG)、负荷后血糖(P2h BG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、24 h尿白蛋白(24 h-UAlb)、尿β2微球蛋白(U-β2MG)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr))、足细胞密度及病理改变,应用免疫组化及荧光定量PCR方法观察α-actinin-4、ZO-1及mRNA表达。结果:与N组比较,M组一般状况较差,FBG、P2h BG、FINS、HOMA-IR、24 h-UAlb、U-β2MG水平指标均有明显上升,α-actinin-4、ZO-1的累积光密度值(IOD)下降,PCR表达下降,足细胞密度较少,足突增宽、融合;与M组比较,T、Z组各指标均有改善;与B组比较,T组HOMA-IR、α-actinin-4、ZO-1的IOD有所改善,余指标比较差异无统计学意义。结论:中药糖肾煎能上调足细胞α-actinin-4、ZO-1的表达从而保护足细胞、延缓DN的进展。

糖肾煎治疗2型糖尿肾病的临床研究

目的:观察中药复方糖肾煎治疗2型糖尿病肾病的临床疗效。方法:100例2型糖尿病肾病(Ⅲ、Ⅳ期)患者,按随机数字表法分为治疗组和对照组各50例,对照组在控制代谢基础上给予盐酸贝那普利片(10mg/片、1次/d、口服),治疗组在对照组基础上加用中药汤剂糖肾煎,于治疗前、治疗1疗程(3个月)、2疗程(6个月)后比较中医症状评分,检测并比较2组患者24h尿白蛋白(24h-UAlb)、血β_2微球蛋白(血β_2-MG)、尿β_2微球蛋白(尿β_2-MG)、血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、血清胱抑素C(Cys C)、空腹血糖(FPG)、餐后2h血糖(2h PG)、糖化血红蛋白(HbA1C)、甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)等指标。结果:治疗组总有效率91.3%,明显优于对照组;与治疗前比较,2组中医症状总积分均下降,24h-UAlb、Cys C、血β_2-MG、尿β_2-MG、Hb A1C、FPG、2hPG、TC、TG、LDL-C等指标均有改善;治疗组在24h-UAlb、CysC、血β_2-MG、尿β_2-MG、HbA1C、FPG、2hPG等指标改善方面优于对照组。结论:糖肾煎能有效缓解2型糖尿病肾病患者症状,调节糖脂代谢,减少尿蛋白,延缓其病程。

糖肾煎对糖尿病肾病大鼠足细胞自噬及mTOR/P70S6K通路的影响研究

目的:研究糖肾煎对糖尿病肾病大鼠足细胞自噬及mTOR/P70S6K通路的影响。方法:大鼠按照随机数字表法分为空白对照组(6只)及造模组(35只),采用高糖高脂饲料喂养联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)法建立糖尿病肾病大鼠模型,将造模成功大鼠随机分为模型组,糖肾煎低、中、高剂量组及二甲双胍组。糖肾煎低、中、高剂量组分别按照5 g/kg、10 g/kg、20 g/kg的剂量灌胃给予大鼠糖肾煎,二甲双胍组按照100 mg/kg灌胃给予大鼠二甲双胍,空白对照组及模型组灌胃给予等剂量生理盐水,所有组别给药1次/d,连续给药16周。使用尿蛋白检测试剂盒测定各组大鼠24 h尿蛋白量;使用全自动生化分析仪测定大鼠空腹血糖及糖化血红蛋白水平;使用酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒测定血清肌酐、血清尿素氮水平及肾组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)水平;苏木精—伊红(HE)染色法检查肾组织病理学变化;免疫荧光法测定足细胞Synaptopodin及LC3水平;免疫印记法(western blotting)检测肾组织p-mTOR、mTOR、p-P70S6K、P70S6K蛋白水平。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠空腹血糖、糖化血红蛋白、24 h尿蛋白量、血清肌酐、血清尿素氮、肾组织MDA水平、肾组织pmTOR/mTOR及p-P70S6K/P70S6K水平显著升高(P<0.05),肾组织SOD及T-AOC水平、足细胞Synaptopodin及LC3荧光强度显著降低(P<0.05);与模型组比较,糖肾煎各剂量组大鼠空腹血糖、糖化血红蛋白、24 h尿蛋白量、血清肌酐、血清尿素氮、肾组织MDA水平、肾组织p-mTOR/mTOR及p-P70S6K/P70S6K水平显著降低(P<0.05),肾组织SOD及T-AOC水平、足细胞Synaptopodin及LC3荧光强度显著升高,并呈剂量依赖性(P<0.05)。结论:糖肾煎能够显著改善糖尿病肾病大鼠肾功能,修复足细胞损伤,调节足细胞自噬水平,其机制可能与调节mTOR/P70S6K通路有关。

糖肾煎通过促进SIRT1介导的自噬对糖尿病肾病大鼠的治疗作用

目的探究糖肾煎通过促进沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)介导的细胞自噬对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠的治疗作用。方法60只大鼠随机均分为对照组、糖尿病肾病(DN)模型组、糖肾煎组及二甲双胍组。对照组用普通饲料喂养,其他三组大鼠使用高糖高脂饲料及腹腔注射1%链脲佐菌素溶液(STZ)建立DN模型。建模成功后,糖肾煎组和二甲双胍组大鼠分别以10 g/(kg·d)糖肾煎和100 mg/(kg·d)二甲双胍灌胃,对照组与模型组大鼠给予同体积生理盐水灌胃,连续8周。末次给药前禁食不禁水12 h,经腹主动脉抽取各组大鼠外周血检测血清空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、尿素氮(BUN)、血尿肌酐(Scr),收集24 h尿液测定24 h尿白蛋白(24 h-UAlb)及胱抑素-c(Cys-c)的含量;给药结束后处死大鼠,取肾脏组织,采用苏木精-伊红(HE)染色观察各组大鼠肾脏组织病理改变,分别采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠肾脏组织中沉默信息调节因子1(SIRT1)、肾病蛋白(Nephrin)、肌间线蛋白(Desmin)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、锌指蛋白36(TTP)mRNA表达和SIRT1、微管相关蛋白1的轻链3(LC3)、核孔蛋白p62、Desmin、Nephrin蛋白表达。结果模型组大鼠血清FBG、BUG、SCr和24 h-UAlb、Cys-c含量较对照组升高(P<0.05);糖肾煎组和二甲双胍组大鼠血清上述指标含量分别较模型组降低(P<0.05)。与对照组相比,模型组大鼠局部肾小管间质纤维化、部分肾小管上皮细胞肿胀和脱落、肾小球萎缩及部分肾小球系膜细胞增生;糖肾煎组和二甲双胍组大鼠部分肾小管颗粒变性、少量肾小球萎缩及肾小球系膜细胞轻度增生。与对照组比较,模型组大鼠肾脏组织Nephrin、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ及SIRT1表达量降低(P<0.05),Desmin、p62、TNF-α及TTP表达量增加(P<0.05);与模型组比较,糖肾煎组和二甲双胍组大鼠肾脏组织Nephrin、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ及SIRT表达量升高(P<0.05),Desmin、TNF-α、TTP和p62表达降低(P<0.05)。结论糖肾煎可通过降低血糖水平保护DN大鼠肾脏,其机制可能与上调SIRT1介导的肾小管自噬有关。

糖肾煎对早期2型糖尿病肾病大鼠8-异前列腺素2α的影响

目的:探讨8-异前列腺素2α(8-iso-PGF2α)与早期2型糖尿病肾病(DN)相关性及中药糖肾煎对其影响。方法:采用单肾切除+高脂饲料+小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射,结合行为干预建立早期(气阴两虚型)2型糖尿病肾病病证结合大鼠模型,按随机数字表法分为假手术组(A组)、模型组(B组)、糖肾煎组(C组)、贝那普利组(D组)。干预16周,观察各组大鼠一般状况和空腹血糖(FBG)、负荷后血糖(P2h BG)、空腹胰岛素(FINS)、负荷后胰岛素(P2h INS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、24 h尿白蛋白(24h-UAlb)、尿β2微球蛋白(U-β2MG)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)、血浆及尿液8-iso-PGF2α、肾小球体积(GV)及基底膜厚度(GBM)。结果:与A组比较,B组大鼠一般状况差,FBG、P2h BG、FINS、P2h INS、HOMA-IR、24h-UAlb、U-β2MG、血、尿8-isoPGF2α水平指标均有明显上升、GV增大及GBM增厚;与B组比较,C组一般状况明显改善,各指标均有改善且GV增大减轻、GBM增厚减轻;与D组比较,C组一般状况改善较明显,HOMA-IR改善更明显,余指标无明显差异。结论:8-iso-PGF2α与早期(气阴两虚型)2型糖尿病肾病有相关性,糖肾煎对其有改善、保护肾脏的作用。

糖肾煎联合羟苯磺酸钙治疗糖尿病肾病的临床研究

目的观察糖肾煎联合羟苯磺酸钙治疗糖尿病肾病的临床疗效。方法将糖尿病肾病患者64例随机分为治疗组和对照组,每组各32例。两组在基础糖尿病的治疗上,对照组再给予羟苯磺酸钙治疗,治疗组给予羟苯磺酸钙加糖肾煎治疗。连续治疗12周后,比较两组治疗前后24h尿蛋白含量、肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)和空腹血糖(FBG)的变化。结果与治疗前比较,两组治疗后24h尿蛋白、Cr、BUN及FBG水平明显下降(P<0.05);与对照组比较,治疗组24h尿蛋白、BUN、Cr及FBG水平明显下降(P<0.05)。结论糖肾煎联合羟苯磺酸钙治疗糖尿病肾病有效,优于单用羟苯磺酸钙治疗。

糖肾煎对2型糖尿病肾病大鼠氧化应激的影响

目的从氧化应激途径探讨中药复方糖肾煎治疗2型糖尿病肾病的作用机制。方法采用单肾切除+高脂饲料+小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射,并结合行为干预方式制备2型糖尿病肾病气阴两虚病证结合大鼠模型,随机分为模型组、糖肾煎组和贝那普利组,另设假手术组。观察各组大鼠一般状态及体质量、空腹血糖(FBG)、负荷后血糖(P2h BG)、空腹血清胰岛素(FINS)、负荷后血清胰岛素(P2h INS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)、24h尿白蛋白定量、尿β_2微球蛋白、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)、血清及肾皮质谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)等指标,光镜下观察肾组织病理。结果 (1)与假手术组比较,模型组大鼠一般状态较差,且体质量、FBG、P2h BG、FINS、P2h INS、HOMA-IR、TC、TG、HDL-c、LDL-c、24h尿白蛋白定量、尿β_2微球蛋白、血清及肾皮质GSH-Px、SOD及MDA均有显著变化(P<0.01);(2)糖肾煎组一般状态较好,BUN、Cr无明显变化(P>0.05),余指标均有所改善(P<0.01或P<0.05);贝那普利组24h尿白蛋白定量、尿β_2微球蛋白、血清及肾皮质GSH-Px、SOD及MDA等指标有所改善(P<0.01或P<0.05),而余指标无明显变化(P>0.05);(3)糖肾煎组与贝那普利组比较,HOMA-IR明显降低(P<0.01),TC明显降低(P<0.05),24h尿白蛋白定量及尿β_2微球蛋白有减少但无统计学意义(P>0.05);(4)光镜结果:模型组肾组织出现了较明显的病理变化,而糖肾煎组及贝那普利组病变程度有所减轻。结论中药复方糖肾煎对2型糖尿病肾病气阴两虚型大鼠能调节糖脂代谢、减轻胰岛素抵抗、降低尿白蛋白及尿β_2微球蛋白、改善肾组织病理,其机制可能是通过改善氧化应激途径来实现的。

复方糖肾煎对2型糖尿病肾病大鼠足细胞的保护作用

目的观察中药复方糖肾煎对2型糖尿病肾病气阴两虚证大鼠足细胞的保护作用。方法采用随机数字表法将大鼠分为假手术组、模型组、糖肾煎小剂量组、糖肾煎大剂量组、贝那普利组、中西医结合组,采用单肾切除+高脂饲料+小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射+行为干预的方式,建立病证结合的2型糖尿病肾病气阴两虚证大鼠模型。各组分别干预16周后,观察各组大鼠空腹血糖(FBG)、负荷后2h血糖(P2hBG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-c)、低密度脂蛋白(LDL-c),血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)、肾重/体重指数、24h尿微量白蛋白(UAlb),尿β2微球蛋白(β2MG),免疫组化计算足细胞密度、电镜下足细胞病理改变。结果(1)与假手术组比较,模型组大鼠糖脂代谢异常(P<0.01),尿蛋白排泄率增加(P<0.01),肾功能无明显改变(P>0.05),足细胞密度减小(P<0.01),足突增宽、融合;(2)与模型组比较,糖肾煎小剂量组上述指标均有改善趋势,但无统计学意义(P>0.05),糖肾煎大剂量组、贝那普利组及中西医结合组上述指标均有改善(P<0.05或P<0.01);(3)与贝那普利组比较,糖肾煎大剂量组及中西医结合组HOMA-IR有所改善(P<0.01),余指标无明显变化。结论中药复方糖肾煎对2型糖尿病肾病气阴两虚证大鼠足细胞有保护作用。