桃红四物汤对兔皮片移植模型血管新生及MMP-2的影响

目的:观察桃红四物汤对兔自体皮片移植术后移植皮片的血管密度、血清中MMP-2含量的影响,探讨桃红四物汤对皮片移植术后血管新生的影响机制。方法:将健康新西兰兔75只,按随机数字表法分为5组:桃红四物汤低、中、高剂量组、模型组、假手术组,每组15只。假手术组不进行皮片移植,切开后直接缝合,术后予蒸馏水灌胃,桃红四物汤低、中、高剂量组造模后予以相应剂量的桃红四物汤灌胃,模型组造模后以蒸馏水灌胃,各组灌胃时间最长均为8 d。分别于造模后2 d、5 d、8 d从每组随机抽取5只,检测移植皮片血管密度及血清中MMP-2含量。结果:造模后2 d、5 d、8 d,桃红四物汤低、中、高剂量组血管密度、血清MMP-2浓度均高于模型组(P<0.05);造模后2 d桃红四物汤低、中、高剂量组与模型组血管密度均低于假手术组(P<0.05);造模后2 d、5 d桃红四物汤中、高剂量组血管密度均高于桃红四物汤低剂量组(P<0.05)。造模后2 d、5 d、8 d桃红四物汤低、中、高剂量组血清MMP-2浓度均高于假手术组(P<0.05);造模后2 d、5 d、8 d桃红四物汤中、高剂量组血清中MMP-2浓度均高于桃红四物汤低剂量组(P<0.05);桃红四物汤高、中剂量组血管密度、血清MMP-2浓度比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:桃红四物汤能上调自体皮片移植模型兔血清中MMP-2含量,并能使血管密度值增加,具有促血管新生作用。

桃红四物汤影响ERK磷酸化表达延缓小鼠胚胎成纤维细胞生长的机理研究

目的探讨活血化瘀名方桃红四物汤(THSWD)减缓小鼠胚胎成纤维细胞(BALB/c 3T3,3T3)生长和增殖可能的分子靶点及信号通路。方法在3T3细胞内分别过表达碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、沉默bFGF以及用PD98059阻断细胞内ERK上游信号通路;然后观察桃红四物汤对细胞活性,细胞周期,bFGF、ERK1/2及p-ERK1/2基因或蛋白表达的影响。桃红四物汤含药血清培养基浓度为20%,作用时间48 h。结果与正常对照组比较,桃红四物汤组的3T3细胞活性降低(P<0.01);G0/G1期占比升高(P<0.05,P<0.01),S期占比降低(P<0.05,P<0.01);bFGF和ERK1/2基因表达降低(P<0.01);bFGF和p-ERK1/2蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),ERK1/2蛋白表达的差异无统计学意义(P>0.05)。与bFGF过表达组比较,bFGF过表达+桃红四物汤组的3T3细胞活性降低(P<0.05);G0/G1期占比升高(P<0.01),S期占比的差异无统计学意义(P>0.05);bFGF和ERK1/2基因表达降低(P<0.01);bFGF和p-ERK1/2蛋白表达降低(P<0.01),ERK1/2蛋白表达的差异无统计学意义(P>0.05)。与PD98059组比较,PD98059+桃红四物汤组的3T3细胞活性降低(P<0.05);G0/G1期占比升高(P<0.01),S期占比降低(P<0.01);ERK1/2基因表达的差异无统计学意义(P>0.05);ERK1/2和p-ERK1/2蛋白表达的差异无统计学意义(P>0.05)。由于bFGF基因的结构独特性及沉默引物设计的方法学缺陷,3T3细胞内未能沉默掉bFGF。结论桃红四物汤在3T3细胞中首先降低bFGF,进而降低ERK信号通路的标志性蛋白p-ERK的表达,减缓3T3细胞的增殖速度。