补肾强骨方对原发性骨质疏松症患者血清TRACP5b表达的影响

目的探讨补肾强骨方对原发性骨质疏松症患者血清TRACP5b表达的影响。方法选取2017年1月～2017年7月丽水市中医院收治的60例原发骨质疏松患者，按照采用随机数字表法分为治疗组与对照组，治疗组口服钙尔奇D片+补肾强骨方治疗，对照组口服钙尔奇D片+福善美片，疗程3个月。观察比较2组患者的中医症状评分，骨密度，疼痛评分，骨折风险量表评估和实验室检查指标。结果①治疗3个月，治疗组较对照组症状明显改善（P＜0.05）；②随访3个月，治疗组骨密度测定较对照组显著改善（P＜0.05）；③治疗2个月、3个月后，治疗组疼痛评分、骨折风险评估、血清TRACP5b较对照组均显著改善（P＜0.05）。结论补肾强骨方能有效缓解原发性骨质疏松症患者的临床症状，降低骨质疏松性骨折的风险。

血清Tracp5b、CEA、CA15—3检测对乳腺癌骨转移的临床意义

目的 探讨血清Tracp5b、CEA和CA15-3水平和乳腺癌骨转移的关系.方法 应用采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和化学发光免疫分析（CLIA）检测78例乳腺癌术后患者血清Tracp5b、CEA、CA15-3水平,其中骨转移39例,无骨转移39例（含骨外转移9例）以及健康女性对照组30例.结果 骨转移组血清TRACP5b水平为（6.25±2.37）,显著高于健康对照组（3.29±1.15）、无骨转移组（3.99±1.02）以及骨外转移组（4.08±1.10）（P〈0.05）,无骨转移组和骨外转移组（P〉0.05）;骨转移组血清CA15-3水平为（148.3±173.5）,显著高于健康对照组（13.88±7.12）和无骨转移组（15.21±7.62）（P〈0.05）,但和骨外转移组（90.7±79.3）（P〉0.05）;骨转移组CEA水平为（19.8±10.20）,显著高于健康对照组（2.69±1.10）和无骨转移组（3.19±1.32）（P〈0.05）,但和骨外转移组（13.56±8.13）（P〉0.05）.结论 血清TRACP5b的检测对乳腺癌骨转移具有较高的特异性和敏感性,而CA15-3、CEA在乳腺癌骨转移时具有较高的相关性,但不具备特异性.

抗MCV抗体与RANKL、OPG、TRACP-5b及RA疾病活动度的相关性研究

目的探索类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者抗突变型瓜氨酸波形蛋白(mutant citrulline vimentin,MCV)抗体与骨代谢标志物及疾病活动度之间的关系。方法收集119例RA患者临床资料和血清,检测抗MCV抗体及RANKL、OPG和TRACP-5b等骨代谢标志物,分析抗MCV抗体与骨代谢标志物之间的相关性,并探索抗MCV抗体与疾病活动是否有关联。结果RA患者抗MCV抗体滴度与RANKL、TRACP-5b水平及RANKL/OPG均无显著相关性(P>0.05),与OPG呈正相关但相关系数低(r=0.183,P<0.05)。②抗MCV抗体与DAS28(r=0.376,P<0.01)、ESR(r=0.440,P<0.01)、RF-IgM(r=0.376,P<0.01)呈正相关。结论抗MCV抗体与血清中骨代谢相关标志物TRACP-5b、RANKL、OPG、RANKL/OPG均无显著相关性,提示抗MCV抗体可能不直接通过影响骨代谢参与RA骨侵蚀进展。抗MCV抗体与疾病活动度呈正相关,提示它对RA病情评估可能有一定的价值。

血清25-OH-D、BAP、TRACP-5b与2型糖尿病患者胰岛功能及视网膜病变的相关性探讨

目的:研究血清25羟维生素D(25-OH-D)、骨特异性碱性磷酸酶(BAP)、抗酒石酸酸性磷酸酶B(TRACP-5b)与2型糖尿病患者胰岛功能及视网膜病变的相关性。方法:收集2018年1月-2019年10月在笔者所在医院住院的116例2型糖尿病患者资料,根据是否合并视网膜病变及病变分期分为无视网膜病变(NDR组)51例,背景期视网膜病变(NPDR组)32例,增殖期视网膜病变(PDR组)33例,选取同期非糖尿病患者30例为对照组,检测25-OH-D、BAP、TRACP-5b及血糖、血脂相关指标,计算体质量(BMI)、C肽的β细胞功能指数(HOMA-β)、C肽抵抗指数(HOMA-CR)。采用Pearson多重线性回归分析相关性。结果:NDR组、NPDR组、PDR组25-OH-D、BAP水平均低于对照组,TRACP-5b水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。NDR组、NPDR组、PDR组HOMA-β均低于对照组,HOMA-CR均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。PDR组25-OH-D、BAP水平低于NDR组、NPDR组,TRACP-5b水平高于NDR组、NPDR组,NPDR组25-OH-D、BAP水平低于NDR组,TRACP-5b水平高于NDR组,差异均有统计学意义(P<0.05);PDR组HOMA-β低于NDR组、NPDR组,HOMA-CR高于NDR组、NPDR组,NPDR组HOMA-β低于NDR组,HOMA-CR高于NDR组,差异均有统计学意义(P<0.05)。HOMA-β与25-OH-D呈正性相关(r=0.781,P=0.000),与TRACP-5b呈负性相关(r=-0.482,P=0.017),HOMA-CR与BAP呈负性相关(r=-0.619,P=0.007)。结论:骨代谢指标与胰岛功能具有相关性,25-OH-D水平与视网膜病变严重程度相关。

姜黄素对类风湿关节炎破骨细胞分化中核因子κB受体活化因子基因及蛋白表达的影响

目的研究姜黄素对类风湿关节炎(RA)破骨细胞(OC)分化中核因子κB受体活化因子(RANK)基因及蛋白表达的影响。方法采用核因子κB受体活化因子配体(RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(M?CSF)诱导RA病人外周血单个核细胞(PBMC)向OC分化,给予不同浓度的姜黄素(2.5、5及10μmol/L)进行干预,并设空白对照组。抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色标记成熟OC并计数;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real?time PCR)和蛋白质印迹法(Western Blot)检测各组细胞RANK基因表达和蛋白水平。结果RA病人PBMC经RANKL诱导后能获得大量TRAP阳性的OC,经姜黄素(2.5、5及10μmol/L)干预后,TRAP阳性细胞数明显减少(P<0.05);与空白对照组相比,姜黄素各浓度组细胞RANK基因表达显著降低(P<0.05);姜黄素(2.5、5及10μmol/L)各浓度组细胞RANK蛋白的表达分别为(0.46±0.09)、(0.36±0.08)和(0.25±0.07),与空白对照组(0.68±0.11)相比均显著降低(F=21.278,P=0.000)。结论姜黄素可能通过下调RANK基因和相关蛋白的表达,抑制RA病人OC分化。

椎体软骨发育不良伴免疫调节异常1例基因诊断及文献复习

目的探讨1例罕见的矮小症伴多系统异常病例的临床和实验室诊断。方法采用全外显子组测序技术,结合高通量数据分析流程进行基因检测,并采用Sanger测序进行验证。结果患儿,男,14岁,发现身材矮小5年余。身高132cm,有面部色素沉着斑点和甲癣。外翻足已手术矫正,因自身免疫性溶血性贫血长期口服泼尼松治疗。头颅CT示两侧基底节、两侧额叶及左侧顶叶多发性钙化。脊柱平片示胸腰椎椎体变扁。全外显子组测序结合Sanger测序验证,发现ACP5基因纯合致病突变(c.643G>A,p.G215R),确诊为罕见的椎体软骨发育不良伴免疫调节异常(SPENCDI)。结论全外显子组测序是确诊疑难罕见病的有效方法之一。

氨基多糖对RANKL诱导的RAW264.7向破骨细胞样细胞分化的抑制作用观察

目的探讨氨基多糖(GAGs)对核因子κB受体活化因子配体(RANKL)诱导的RAW264.7向破骨细胞分化的影响。方法采用RANKL单独诱导RAW264.7细胞(对照组),分别采用不同浓度肝素、高分子量透明质酸(HA)、硫酸软骨素(CS)C联合RANKL诱导RAW264.7分化(分别为肝素组、HA组、CSC组)。细胞培养第3、5、7、8天采用抗酒石酸酸性磷酸酶染色法(TRAP)检测破骨细胞样细胞并计数;ELISA法检测第8天各组培养液上清中抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRAP5b)含量。结果与对照组比较,诱导第3、5、7、8天,破骨样细胞数均明显减少(P<0.05);其中肝素组随浓度的增大而减少(P<0.05)。第8天培养液中TRAP5b含量与细胞计数结果相符。结论氨基多糖对RANKL诱导下RAW264.7向破骨细胞样细胞的分化具有抑制作用;肝素的作用具有剂量依赖性。

补肾接骨汤联合碳酸钙D3片口服治疗老年骨质疏松性股骨转子间骨折肾虚血瘀证

目的:观察补肾接骨汤联合碳酸钙D3片口服治疗老年骨质疏松性股骨转子间骨折肾虚血瘀证的临床疗效,并探讨其作用机制。方法:将107例老年骨质疏松性股骨转子间骨折股骨近端防旋髓内钉(proximal femoral nail antirotation,PFNA)内固定术后肾虚血瘀证患者随机分为2组。55例采用补肾接骨汤联合碳酸钙D3片口服治疗(联合组),52例采用碳酸钙D3片口服治疗(碳酸钙D3片组)。补肾接骨汤水煎服,每日1剂,连续服用12周;碳酸钙D3片口服,每日1片,连续服用12周。记录并比较2组患者的骨折愈合时间、髋部疼痛视觉模拟量表(visual analogue scale,VAS)评分,并分别于治疗前、治疗结束后比较2组患者骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)、转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1、骨碱性磷酸酶(bone alkaline phosphatase,BALP)及抗酒石酸酸性磷酸酶5b(tartrate resistant acid phosphatase 5b,TRACP5b)血清含量。结果:①骨折愈合时间。联合组患者骨折愈合时间短于碳酸钙D3片组[(7. 85±1. 28)周,(8. 73±1. 18)周,t=3. 692,P=0. 000)]。②髋部疼痛VAS评分。时间因素和分组因素存在交互效应(F=37. 953,P=0. 000); 2组患者髋部疼痛VAS评分总体比较,组间差异有统计学意义,即存在分组效应(F=4. 269,P=0. 000);治疗前后不同时间点髋部疼痛VAS评分的差异有统计学意义,即存在时间效应(F=13. 274,P=0. 000); 2组患者髋部疼痛VAS评分随时间均呈下降趋势,且2组的下降趋势不完全一致[联合组:(7. 31±1. 25)分,(4. 13±0. 83)分,(2. 15±0. 58)分,F=5. 271,P=0. 000;碳酸钙D3片组:(7. 46±1. 02)分,(5. 08±0. 96)分,(2. 76±0. 42)分,F=3. 985,P=0. 000];治疗开始后1周2组患者髋部疼痛VAS评分比较,差异无统计学意义(t=0. 678,P=0. 499);治疗开始后3周、5周联合组髋部疼痛VAS评分均低于碳酸钙D3片组(t=5. 485,P=0. 000; t=6. 201,P=0. 000)。③骨愈合相关指标。治疗前2组患者OPG、RANKL、TGF-β1血清含量比较,组间差异均无统计学意义(t=0. 253,P=0. 800; t=0. 352,P=0. 726; t=1. 345,P=0. 181);治疗结束后2组患者OPG、RANKL、TGF-β1血清含量均高于治疗前[OPG:(4. 12±0. 84) pmol·L^(-1),(8. 57±1. 33) pmol·L^(-1),t=20. 980,P=0. 000;(4. 08±0. 79) pmol·L^(-1),(7. 16±1. 25) pmol·L^(-1),t=15. 020,P=0. 000。RANKL:(14. 63±3. 37) nmol·L^(-1),(32. 59±10. 95) nmol·L^(-1),t=11. 626,P=0. 000;(14. 85±3. 10) nmol·L^(-1),(41. 93±12. 15) nmol·L^(-1),t=16. 016,P=0. 000。TGF-β1:(227. 53±41. 28)μg·L^(-1),(380. 58±35. 66)μg·L^(-1),t=20. 807,P=0. 000;(237. 93±38. 52)μg·L^(-1),(312. 74±37. 51)μg·L^(-1),t=10. 034,P=0. 000],联合组患者OPG、TGF-β1血清含量均高于碳酸钙D3片组(t=5. 643,P=0. 000; t=9. 591,P=0. 000),RANKL血清含量低于碳酸钙D3片组(t=4. 169,P=0. 000)。④骨代谢相关指标。治疗前2组患者BALP、TRACP5b血清含量比较,组间差异无统计学意义(t=1. 170,P=0. 245; t=1. 750,P=0. 083);治疗结束后2组患者BALP血清含量均高于治疗前[联合组:(57. 48±4. 19)单位·L^(-1),(78. 43±3. 52)单位·L^(-1),t=28. 392,P=0. 000;碳酸钙D3片组:(56. 43±5. 07)单位·L^(-1),(65. 39±4. 85)单位·L^(-1),t=9. 289,P=0. 000],TRACP5b血清含量均低于治疗前[联合组:(7. 02±0. 47)单位·L^(-1),(4. 28±0. 30)单位·L^(-1),t=35. 715,P=0. 000;碳酸钙D3片组:(6. 84±0. 59)单位·L^(-1),(5. 11±0. 43)单位·L^(-1),t=17. 088,P=0. 000],联合组患者BALP血清含量高于碳酸钙D3片组(t=15. 980,P=0. 000),TRACP5b血清含量低于碳酸钙D3片组(t=11. 632,P=0. 000)。结论:补肾接骨汤联合碳酸钙D3片口服可有效缩短老年骨质疏松性股骨转子间骨折肾虚血瘀证患者的骨折愈合时间,减轻患者术后疼痛,其作用机制可能与其改善骨代谢、促进成骨细胞活化以及抑制破骨细胞过度活化有关。

蓝刺头多糖B对胰岛素抵抗L6骨骼肌细胞耗糖量及AMPK表达的影响

为了探究蓝刺头多糖B(ETPB)对棕榈酸(PA)诱导的胰岛素抵抗L6骨骼肌细胞耗糖量及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)表达的影响,体外培养大鼠L6成肌细胞,诱导分化为骨骼肌细胞并进行分化鉴定;采用CCK8法检测细胞存活率,筛选PA和ETPB的安全浓度;葡萄糖氧化酶法检测各组细胞耗糖量;实时荧光定量PCR法检测AMPK mRNA基因表达水平,Western blot法检测AMPK蛋白表达量。结果显示:PA诱导L6骨骼肌细胞发生胰岛素抵抗的最适造模浓度为0.4 mmol/L,ETPB的最大安全浓度为200 mg/mL;ETPB可显著提高胰岛素抵抗L6骨骼肌细胞耗糖量(P<0.05),上调AMPK mRNA表达水平,增加AMPK蛋白表达量。提示:ETPB可以通过提高AMPK基因及蛋白表达而促进胰岛素抵抗L6骨骼肌细胞耗糖,这可能是ETPB改善骨骼肌胰岛素抵抗的作用机制之一。

阿仑膦酸钠联合胰岛素治疗糖尿病骨质疏松疗效研究

目的探讨阿仑膦酸钠联合胰岛素治疗2型糖尿病(diabetic mellitus,DM)骨质疏松(osteoporosis,OP)疗效及其作用机制。方法选择2015年3月—2016年3月间温州市人民医院收治的DM合并OP患者94例,经随机数表法将94例患者分为观察组及对照组各47例,所有患者在入院后均常规治疗,给予对照组患者二甲双胍联合胰岛素治疗,给予观察组患者阿仑膦酸钠联合胰岛素治疗,评价2组患者临床疗效,检测血清中糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血糖(FPG)、血钙(Ca)、抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRAP-5b)、骨钙素(BGP)、骨特异性碱性磷酸酶(BAP)水平。经DPX-LBMD双能x线测量仪测定股骨颈、Wards三角、大转子的骨密度(BMD)。结果观察组总有效率为89.36%,高于对照组的72.34%,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后观察组BAP、TRAP-5b、BGP水平优于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05);治疗后观察组股骨颈、Wards三角、大转子的BMD高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论采用阿仑膦酸钠联合胰岛素对DM合并OP治疗可有效提高骨密度水平,疗效显著,安全性高,值得推广。

组织蛋白酶C促进根尖周炎的作用研究

组织蛋白酶C(Cathepsin C, Cat C)是溶酶体半胱氨酸蛋白酶中的番木瓜蛋白酶超家族成员,可影响炎性因子和趋化因子的表达,在多种炎性疾病中发挥重要作用,但其在根尖周病中的作用尚不清楚.本研究主要探讨Cat C在根尖周病炎症进展及骨破坏中的作用.首先建立了野生型(wild type, WT)小鼠和Cat C基因敲减(Cat C knock down,Cat C KD)小鼠根尖周炎模型,通过HE染色和Micro-CT三维重建的方法验证模型建立成功.研究结果显示WT小鼠根尖周组织炎性浸润和骨破坏程度明显高于Cat C KD小鼠. Cat C在WT小鼠根尖周炎中的表达明显高于正常对照组. WT小鼠根尖周组织中核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand, RANKL)的表达量多于CatC KD小鼠根尖周组织,且CatC与RANKL存在着显著正相关性,另外WT小鼠根尖周炎破骨细胞数量亦明显高于CatC KD小鼠.本研究表明CatC对小鼠根尖周炎症进展及骨破坏起促进作用.