海藻糖新衍生物的设计、合成及对HIV-1Tat-TAR结合的抑制活性

目的:设计合成海藻糖新衍生物,研究其对HIV-1Tat蛋白-TAR RNA结合的抑制活性。方法:以α,α-海藻糖(α,α-trehalose)为原料,经过澳化、乙酰化、叠氮化、催化氢化、缩合及胍基化等6步反应合成目标化合物。在基因水平上探讨其抑制HIV-1 Tat蛋白-TAR RNA结合的活性。结果:合成了一系列海藻糖新衍生物,其抗HIV-1 Tat蛋白-TAR RNA结合活性表明在海藻糖连接精氨酸或连有胍基的侧链后可以增强活性。结论:所设计、合成的带胍基的海藻糖新衍生物具有抑制HIV-1 Tat蛋白-TAR RNA结合的活性。

HIV-1 Tat-TAR结合抑制剂筛选模型的构建

将HIV-1 Tat(1-86aa)编码序列插入原核表达质粒pET28a中,转化E.coliBL21(DE3),IPTG诱导Tat蛋白表达,并用Ni+金属螯合层析介质纯化;把TAR DNA序列插入到含有T7启动子的载体pBluescript Ⅱ SK(+)中,用T7 RNA多聚酶体外转录合成TAR RNA。用毛细管电泳观察Tat与TAR的结合活性,并用转录抑制活性化合物AP064检验对Tat-TAR结合的阻断作用。结果显示,制备的Tat和TAR能相互结合,并被AP064有效阻断,表明此模型可用于筛选抑制Tat-TAR结合的化合物。

HIV－1反式激活因子（Tat）作用机理的研究进展

ＨＩＶ－１反式激活因子（Ｔａｔ）作用机理的研究进展梁臣，耿运琪（南开大学生命科学学院，天津３０００７１）关键词ＨＩＶ－１，Ｔａｔ，ＴＡＲ人免疫缺陷病毒－１（ＨＩＶ－１）属反转录病毒科，慢病毒亚科，为艾滋病的重要病原体。该病毒可长期潜伏于人体内，但在某...

Tat和TAR对人免疫缺陷病毒HIV-1基因表达的调控研究

目的为了寻找能够阻断HIV-1复制的方法,探索控制HIV-1蔓延的第二代基因治疗的新途径。方法采用自身引物一模板PCR得到了含有TAR核心序列(+11到+47)的多聚TAR-Core DNA同向串联体。结果所有这些抗性基因策略均能对病毒的复制产生较好的抑制作用。结论 TAT蛋白序列中氨基酸的替换使活性改变,与其三维结构的变化间有一定的相关性。

INTRACELLULAR EXPRESSION OF MULTIMERIZED ANTISENSE TAR-CORE RNAS INHIBIT THE REPLICATION OF HUMAN IMMUNODEFICIENCY VIRUS TYPE 1 IN HUMAN CD_4+T LYMPHOCYTES

ＩＮＴＲＯＤＵＣＴＩＯＮＩｔｉｓｒｅｐｏｒｔｅｄｔｈａｔｔｈｅｒｅａｒｅｍｏｒｅｔｈａｎ２８ｍｉｌｉｏｎＨＩＶ－ｉｎｆｅｃｔｅｄｐｅｏｐｌｅｎｏｗｉｎｔｈｅｗｏｒｌｄ．Ｂｕｔｕｎｆｏｒｔｕ－ｎａｔｅｌｙ，ａｎｔｉ－ＨＩＶｔｈｅｒａｐｙｉｓｓｔｉｌｆａ...