红景天苷对脂多糖所致痴呆小鼠Tau蛋白过度磷酸化的作用

目的采用腹腔注射脂多糖(LPS)制备小鼠痴呆模型,观察红景天苷(Sal)对该模型小鼠脑组织Tau蛋白过度磷酸化的影响。方法49只雄性C57BL/6J小鼠随机分成7组:空白组、Sal高剂量对照组、LPS组、LPS+Sal低、中、高剂量组、LPS+多奈哌齐(DP)组。药物干预组小鼠灌胃给予Sal 25、50、100 mg/kg或DP 1 mg/kg,空白组和LPS组小鼠给予同体积双蒸水灌胃,1次/d,连续30 d。从灌胃第15天起,LPS小鼠腹腔注射LPS 250μg/kg,空白组与Sal高剂量对照组小鼠腹腔注射等体积生理盐水,1次/d,连续7d。给药结束前1周,采用Morris水迷宫检测各组小鼠行为学功能;之后处死小鼠取脑,Elisa检测脑组织上清液中炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平;Western blot法检测脑组织中IL-1β、IL-6、核因子-κB(NF-κB)的表达水平,以及Tau在S202、T231、S396、S404位点的磷酸化水平及总Tau蛋白的表达水平。结果Morris水迷宫结果显示,与空白组小鼠比较,LPS小鼠在第5、6天找到隐匿平台的时间(逃避潜伏期)明显延迟(P<0.01),而给予Sal和DP后明显缩短了逃避潜伏期(P<0.01);Elisa结果显示IL-1β(P<0.01),IL-6和TNF-α(P<0.05)在LPS组小鼠脑内的水平均较空白组显著增加,而给予Sal高剂量和DP后均不同程度的下降(P<0.05)。Western blot法检测LPS小鼠脑组织中IL-1β,IL-6和NF-κB的蛋白表达水平较空白组显著增加(P<0.01),而给予Sal高剂量和DP后均不同程度的下降(P<0.05;P<0.01)。Tau蛋白磷酸化的结果显示,LPS小鼠脑组织Tau蛋白在S202、T231、S396、S404位点的磷酸化水平均较空白组小鼠增加(P<0.01),给予Sal和DP后不同程度的降低了上述磷酸化位点的水平(P<0.01或P<0.05)。但总Tau蛋白的表达水平在各组没有明显变化。结论红景天苷明显改善腹腔注射LPS导致的痴呆小鼠的行为学功能,并降低脑内Tau蛋白过度磷酸化的水平。

人参皂苷Rb1抑制β淀粉样蛋白_(25-35)诱导的皮层神经元tau蛋白过度磷酸化

目的 探讨人参皂苷Rb1对凝聚态β AP25 35诱导的胎鼠皮层神经元tau蛋白过度磷酸化的影响及其可能的作用机制。方法 通过蛋白免疫印迹法和免疫细胞化学染色法检测神经元tau蛋白磷酸化水平、总tau蛋白水平和糖原合成酶3β(GSK 3β)的蛋白表达水平。结果 凝聚态β AP25 35(20μmol·L-1)作用于皮层神经元12h,tau蛋白磷酸化水平和总tau蛋白水平均增高,同时GSK 3β蛋白表达也增多。用人参皂苷Rb1或GSK 3β特异性抑制剂氯 化锂预处理后,凝聚态β AP25 35诱导的tau蛋白的过度磷酸化受到明显抑制,同时GSK 3β的表达也降低。结论 人 参皂苷Rb1可通过抑制GSK 3β的表达来抑制凝聚态β AP25 35诱导的皮层神经元tau蛋白的过度磷酸化。

肥胖及2型糖尿病大鼠Alzheimer病样Tau蛋白过度磷酸化修饰及机制探讨

Tau蛋白异常过度磷酸化修饰在阿尔茨海默病(Alzheimerdisease,AD)发病机理中起非常重要的作用,而2型糖尿病是AD的风险因素之一.采用蛋白质印迹研究2型糖尿病及单纯肥胖大鼠脑中海马回tau蛋白磷酸化程度,发现在这两种大鼠模型中海马tau蛋白在多个位点上都呈现过度磷酸化状态.同时,胰岛素信号传导系统中的关键酶糖原合成激酶-3β(glycogensynthasekinase-3β,GSK-3β)活性在这两种大鼠模型的海马回中明显增高,经脑立体定位法向大鼠海马回注射GSK-3β抑制剂氯化锂(LiCl),可阻止2型糖尿病及肥胖大鼠模型中的GSK-3β激活,但仅阻止单纯肥胖大鼠海马回tau蛋白过度磷酸化.另外,海马神经细胞膜上胰岛素受体β亚基水平在两种实验模型中显著下降.研究结果表明,2型糖尿病及肥胖可能通过增高胰岛素抵抗,从而导致GSK-3β激活和tau蛋白的过度磷酸化来提高AD的发病风险.2型糖尿病脑中低下的葡萄糖代谢也可能在tau蛋白的过度磷酸化起一定作用.

电休克干预对嗅球切除抑郁模型大鼠海马Glu浓度和Tau蛋白过度磷酸化的影响

目的观察不同电量和不同时程电休克干预对嗅球切除抑郁模型大鼠海马Glu浓度和Tau蛋白过度磷酸化的影响。方法建立大鼠嗅球切除抑郁模型,采用随机单位组3×3析因设计:将每只大鼠视为1个单位,对每个单位给予3个处理因素,即电量因子(3个水平:25、50、75 mA)和时程因子(3个水平:3、6、9次电休克)的所有组合(共9组,n=6)。全部电休克处置结束12 h内留取海马,高效液相色谱法检测Glu在海马中的含量,Western blot检测p-PHF-1Ser396/404、p-AT8Ser199/202、p-12E8Ser262在海马中的表达。结果电休克引发海马Glu浓度升高及Tau蛋白磷酸化加剧,且电休克的电流和时程均可影响这一过程,两者的作用是相加的。结论电休克导致海马Glu浓度升高,从而加剧海马Tau蛋白的磷酸化程度。

Tau蛋白过度磷酸化对脑淀粉样蛋白生成的影响

目的研究tau蛋白过度磷酸化对脑淀粉样蛋白生成的影响。方法用蛋白磷酸酯酶抑制剂冈田酸(OA)在大鼠侧脑室内注射,每天1次连续8周。用Morris水迷宫和免疫组化方法观察OA组大鼠行为学改变、神经原纤维缠结及淀粉样蛋白的表达;并与对照组比较。结果与对照组相比,OA组大鼠Morris水迷宫平均潜伏期显著延长,学习获取能力较差,空间记忆能力衰退。OA组大鼠的海马CA1区、CA3区、CA4区、齿状回、大脑皮质出现tau蛋白磷酸化,神经原纤维缠结;大脑皮质及海马CA1区、CA3区、齿状回等部位出现β淀粉样蛋白沉积。结论Tau蛋白过度磷酸化可以增加脑部淀粉样蛋白的沉积。

Tau蛋白过度磷酸化对突触后膜AMPA受体数量及功能的影响

目的 探讨大鼠Tau蛋白过度磷酸化对突触后膜AMPA受体数量及功能的影响.方法 原代培养新生SD大鼠海马神经元,将编码红色荧光蛋白DsRed的质粒（标记树突棘）和绿色荧光蛋白GFP标记的P301L突变的人类Tau蛋白基因共转染到5～7d的原代培养大鼠海马神经元内持续培养,编码DsRed的质粒和野生型GFP-Tau共转染为对照.以神经活细胞实时图像成像分析Tau蛋白易位过程.以免疫组化分别检测各组Tau蛋白的表达及AMPA受体数量改变.结果 野生型GFP-Tau蛋白组只出现在树突上,GFP-P301L突变组Tau蛋白广泛出现于树突棘上;与野生型组相比,GFP-P301L突变组Tau蛋白表达水平显著增加（P＜0.01）,AMPA受体数量显著减少（P＜0.01）.结论 Tau蛋白过度磷酸化可能通过显著减少AMPA受体数量,导致AMPA受体在突触后膜上的运输失常,造成认知功能的障碍.

tau蛋白过度磷酸化在阿尔茨海默病发病机制中的作用

阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)是最常见的老年痴呆病,神经纤维缠结(neurofibrillary tangles,NFT)是AD患者脑内主要的病理特征之一,而NFT的主要成分是过度磷酸化tau蛋白。tau蛋白过度磷酸化被认为是AD发病的重要因素,能产生细胞毒性并介导神经元凋亡,但其如何影响NFT形成并引起毒性的具体机制尚不清楚。文中综述了tau蛋白过度磷酸化的分子机制,及其在AD中的影响和针对tau蛋白进一步研究的突出问题。

阿尔茨海默病发病机制中β淀粉样蛋白和Tau蛋白过度磷酸化的相互关系

阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）是发生于老年期或老年前期的慢性进行性神经退行性疾病,表现为大脑普遍萎缩,神经突触和神经元缺失为最早出现的改变,其病理特征为以神经细胞内神经纤维缠结（neurofibrillary tangles,NFTs）、

丙泊酚和地卓西平马来酸盐逆转抑郁大鼠电休克后的Tau蛋白过度磷酸化

目的比较丙泊酚和地卓西平马来酸盐(MK-801)对抑郁大鼠电休克(ECT)后Tau蛋白过度磷酸化的影响及其机制。方法将嗅球切除抑郁模型大鼠分入6组,每组8只:对照组大鼠予5mL 0.9%氯化钠溶液腹腔内注射;MK-801组大鼠予5mL MK-801(10mg/kg)腹腔内注射;MK-801+ECT组大鼠予5mL MK-801(10mg/kg)腹腔内注射+施行1个疗程ECT;丙泊酚组大鼠予5mL丙泊酚(200mg/kg)腹腔内注射;丙泊酚+ECT组大鼠予5mL丙泊酚(200mg/kg)腹腔内注射+施行1个疗程ECT;ECT组大鼠予5mL0.9%氯化钠溶液腹腔内注射+施行1个疗程ECT。ECT后采用高效液相色谱法检测谷氨酸(Glu)在海马组织中的表达,免疫组织化学法和免疫印迹法检测p-AT8Ser202和糖原合成酶激酶(GSK)-3β1H8在海马组织中的表达。结果 ECT组、MK-801+ECT组和丙泊酚+ECT组的Glu含量分别显著高于对照组、MK-801组和丙泊酚组(P值均<0.01),丙泊酚组显著低于对照组(P<0.01),丙泊酚+ECT组显著低于ECT组(P<0.01),MK-801组与对照组间、MK-801+ECT组与ECT组间的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。ECT组、MK-801+ECT组和丙泊酚+ECT组的p-AT8Ser202和GSK-3β1H8蛋白表达分别显著高于对照组、MK-801组和丙泊酚组(P值均<0.01),MK-801组和丙泊酚组均显著低于对照组(P值均<0.01),MK-801+ECT组、丙泊酚+ECT组均显著低于ECT组(P值均<0.05)。结论丙泊酚和MK-801可减缓ECT后Tau蛋白的过度磷酸化程度。

褪黑素对花萼海绵诱癌素诱导大鼠前脑脑片tau蛋白过度磷酸化的保护

目的 用脑片研究花萼海绵诱癌素 (CA)诱导骨架蛋白tau过度磷酸化 ,以及褪黑素 (MT)的保护作用及可能机制。方法 培养大鼠前脑脑片 ,分为 5组 :A组 :正常对照组 ,B组 :0 1μmol/LCA组 ,C组 :10 μmol/LMT +0 1μmol/LCA组 ,D组 :4 0 μmol/LMT +0 1μmol/LCA组 ,E组 :80 μmol/LMT +0 1μmol/LCA组。用免疫印迹法检测tau的磷酸化程度 ,同时检测脑片组织丙二醛 (MDA)含量及超氧化物歧化酶 (SOD)活性。结果0 1μmol/LCA使tau蛋白在Ser396 / 4 0 4、Ser198/ 199/ 2 0 2位点的磷酸化程度显著升高 ,脑片的MDA含量及SOD活性显著升高 ;MT能使tau蛋白在Ser396 / 4 0 4、Ser198/ 199/ 2 0 2位点的磷酸化水平显著降低 ;显著降低CA处理增高的脑片MDA水平 ,提高SOD活性。结论 CA能够诱导前脑脑片tau蛋白发生过度磷酸化 ;MT对CA诱导的tau蛋白过度磷酸化具有保护作用。为深入探讨阿尔茨海默病发病机制和防治方法提供了实验依据。

马钱苷通过抑制蛋白磷酸酶2A催化亚基C磷酸化降低tau蛋白过度磷酸化

目的探讨马钱苷对tau蛋白过度磷酸化的影响及其作用机制。方法马钱苷(500、1 000μmol/L)与人神经母细胞瘤细胞株(SK-N-SH细胞)预孵育24 h,之后加入PI3K抑制剂Wortmannin(WT)及PKA抑制剂GF-109203X(GFX)与SK-N-SH细胞孵育3 h,采用Western blotting方法观察马钱苷对tau蛋白在Thr205、Thr217、PHF-1位点的磷酸化,GSK-3β-Ser9、GSK-3β、PP2A催化亚基C(protein phosphatase 2A catalytic subunit C,PP2Ac)磷酸化/甲基化及PP2Ac的表达。结果 WT/GFX明显抑制pGSK-3β-ser9的表达,引起GSK-3β活性增高,从而导致tau蛋白Thr205、Thr217、PHF-1位点高度磷酸化。马钱苷能够明显抑制模型细胞tau蛋白在Thr205、Thr217、PHF-1位点的过度磷酸化,但是不能增高p-GSK-3β-ser9的表达,提示马钱苷抑制tau蛋白磷酸化的作用不是通过影响GSK-3β通路实现的。但是实验显示马钱苷能够抑制PP2A催化亚基C Tyr307位点的磷酸化,但对Leu309位点甲基化无影响。结论马钱苷能够抑制tau蛋白过度磷酸化,机制可能与其抑制PP2A催化亚基C Tyr307位点的磷酸化,提高PP2A活性有关,与GSK-3β通路无关。

Tau蛋白过度磷酸化与阿尔茨海默病

阿尔茨海默病(AD)是最常见的痴呆类型,Tau蛋白异常过度磷酸化是其主要的发病机制之一。Tau蛋白是脑内一种微管相关蛋白,受蛋白激酶(磷酸化)和蛋白磷酸酯酶(脱磷酸化)的调节。Tau蛋白功能异常改变可能是神经元功能障碍和死亡的必要环节。该文对Tau蛋白的结构与功能,Tau蛋白过度磷酸化,Tau蛋白磷酸化调节及Tau蛋白、β淀粉样蛋白与AD的关系进行阐述。

间断性缺氧对小鼠海马tau蛋白异常过度磷酸化的影响

目的观察间断性缺氧(IH)对小鼠海马tau蛋白磷酸化的影响。方法选取雄性昆明小鼠30只,随机分为对照组5只和IH组25只。对照组置于IH箱内不行IH处理,8 h后取脑组织待测;IH组置于IH箱内给予IH处理8 h,分别于IH后1、6、12、24、48 h取脑组织待测。HE染色观察海马神经细胞形态变化,免疫组化法检测海马区磷酸化tau蛋白(P-tau)及总tau蛋白(T-tau)的表达。结果 HE染色结果显示,IH后细胞间隙增宽,细胞数目减少,部分细胞出现形态学改变。免疫组化结果显示,IH后1、6、12、24、48 h P-tau的平均光密度值除IH后1 h组外,其余各组均高于对照组(P均<0.05);24 h组高于其他各组(P均<0.05)。不同时间点的T-tau表达差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 IH可导致小鼠海马tau蛋白过度磷酸化。

NAC对Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞Tau蛋白过度磷酸化影响的研究

目的探讨N-乙酰基半胱氨酸(NAC)对β淀粉样蛋白片段25-35(Aβ25-35)诱导SH-SY5Y细胞Tau蛋白过度磷酸化的影响。方法用凝聚态Aβ25-35刺激SH-SY5Y细胞,建立Tau蛋白过度磷酸化的细胞模型。分为空白组、对照组和试验组。空白组为未刺激的细胞,对照组给予20μmol·L^(-1)的Aβ25-35作用6 h,试验组先给予10 mmol·L^(-1)的NAC作用24 h,然后给予20μmol·L^(-1)的Aβ25-35共同作用6 h。通过蛋白免疫印迹法检测CDK 5的两个亚基CDK5和P35/P25的蛋白水平,以及Tau蛋白在Thr 212和Ser396位点的磷酸化水平;采用荧光酶标法检测氧自由基(ROS)。对三组细胞的CDK5和P35/P25的蛋白水平、Thr 212和Ser396位点的磷酸化水平和ROS进行比较。结果三组细胞ROS荧光值比较结果显示,空白组ROS荧光值为231±19,对照组为359±23,试验组为264±32。空白组最低,对照组最高,试验组ROS荧光值明显高于空白组(P<0.05),但低于对照组(P<0.05)。空白组Tau蛋白在T212和S396磷酸化水平分别为1.03±0.09、1.04±0.05,对照组分别为1.63±0.54、1.72±0.34,试验组分别为1.31±0.09、1.21±0.05,空白组最低,对照组最高,试验组细胞明显高于空白组(P<0.05),但低于对照组(P<0.05)。空白组CDK5、P35分别为1.00±0.06、1.00±0.18,对照组分别为0.75±0.14、1.12±0.13,试验组分别为0.19±0.21、0.99±0.09。空白组、对照组与试验组CDK5、P35相比较无显著差异(P>0.05)。空白组P25水平为1.10±0.16、对照组为1.69±0.20,试验组为1.19±0.03,空白组最低,对照组最高,试验组P25值低于对照组,P25值高于空白组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 NAC可以降低Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞Tau蛋白磷酸化水平。

2,6-二异丙基苯酚逆转嗅球切除抑郁模型大鼠电休克后的Tau蛋白过度磷酸化和认知障碍

通过观察2,6-二异丙基苯酚对电休克后嗅球切除抑郁模型大鼠学习记忆和Tau蛋白过度磷酸化的影响,探讨兴奋性氨基酸受体拮抗剂对Tau蛋白过度磷酸化的调节及两者对抑郁大鼠学习记忆的影响,为改善学习记忆障碍的神经心理学机制研究和临床干预性治疗提供实验依据.按随机单位组2×2析因设计设置2个干预因素,即电休克干预(两水平:无处置、施行一个疗程电休克)和2,6-二异丙基苯酚干预(两水平:腹腔注射5 ml生理盐水或5 ml 2,6-二异丙基苯酚100 mg/kg)的所有组合.选24周龄健康雄性Sprague-Dawley大鼠建立嗅球切除抑郁模型,将32只24周龄模型大鼠随机分为4个实验组(n=8):Ⅰ组(腹腔注射5 ml 2,6-二异丙基苯酚100 mg/kg)、Ⅱ组(腹腔注射5 ml 2,6-二异丙基苯酚100 mg/kg+施行电休克1个疗程)、Ⅲ组(腹腔注射5 ml生理盐水)、Ⅳ组(腹腔注射5 ml生理盐水+施行电休克1个疗程).全部电休克处置结束24 h内开始Morris水迷宫检测,之后留取海马组织.高效液相色谱法检测神经递质谷氨酸(Glu)在海马组织中的含量;免疫组化SP法和蛋白质印迹法检测Tau-5(总Tau蛋白)、p-PHF1Ser396/404、p-AT8Ser199/202、p-12E8Ser262、GSK-3β1H8和PP-2A在海马组织神经元中的表达.电休克和2,6-二异丙基苯酚均可造成大鼠学习记忆障碍,即延长逃避潜伏期并缩短空间探索时间,两者的影响呈相减效果.电休克可明显增加海马中神经递质谷氨酸(Glu)的浓度,2,6-二异丙基苯酚可降低海马中神经递质Glu的浓度,且两者有相减效果.电休克和2,6-二异丙基苯酚对海马总Tau蛋白和PP-2A蛋白的表达无明显影响.电休克可增加海马中磷酸化Tau蛋白和GSK-3β1H8蛋白的表达;2,6-二异丙基苯酚可减少海马中磷酸化Tau蛋白和GSK-3β1H8蛋白的表达;两者的影响均呈相减效果.实验结果表明,电休克导致海马Glu浓度升高,通过上调GSK-3β1H8增加海马Tau蛋白的磷酸化程度导致学习记忆功能障碍,而2,6-二异丙基苯酚则可通过降低海马Glu浓度下调GSK-3β1H8的表达,从而减缓Tau蛋白的磷酸化程度以改善ECT后的学习记忆.

自主运动抑制tau蛋白过度磷酸化改善学习记忆的分子机制

目的探讨自主运动调节tau蛋白激酶和tau蛋白磷酸酶的基因表达,抑制APP/PS1转基因小鼠海马tau蛋白过度磷酸化,进而改善学习记忆能力的分子机制。方法C57系APP/PS1转基因小鼠随机分为运动组(TE)与对照组(TC);C57系野生小鼠亦随机分为运动组(E)与对照组(C)。其中,TE组和E组小鼠从3月龄开始,给予16周的跑轮运动装置,TC组和C组小鼠不施加运动干预,作为相应对照组。Morris水迷宫实验检测APP/PS1转基因小鼠的空间学习记忆能力,Western Blot实验检测海马磷酸化tau蛋白(P-tau)水平,RT-PCR实验检测海马tau蛋白及tau蛋白激酶GSK-3β和CDK-5,tau蛋白磷酸酶PP2A和PP1 mRNA表达。结果(1)与TC组相比,TE组小鼠Morris水迷宫游泳潜伏期显著性降低(P<0.05),平台象限的游泳时间百分比显著性增加(P<0.05),穿越原平台位置的次数极显著性增加(P<0.01);(2)与TC组相比,TE组小鼠海马总tau蛋白mRNA表达显著下调(P<0.05),Ser202位点和Thr181位点P-tau蛋白表达均显著性下调(P<0.05);(3)与TC组相比,TE组小鼠海马tau蛋白磷酸化激酶GSK-3β(P<0.01)和CDK-5(P<0.05)mRNA表达显著性下调,tau蛋白磷酸酶PP2A(P<0.01)和PP1(P<0.01)mRNA表达极显著性下调。结论16周自主运动通过下调tau蛋白激酶表达、上调tau蛋白磷酸酶表达,抑制APP/PS1转基因小鼠海马tau蛋白的过度磷酸化,进而促进海马神经细胞功能,改善转基因小鼠学习记忆。说明自主运动可通过调节脑的分子生物学机制,促进认知功能的改善和提升,预防和缓解阿尔茨海默病。

从Tau蛋白过度磷酸化探讨2型糖尿病所致神经纤维化的机制

目的观察高血糖对大鼠认知能力和Tau蛋白磷酸化程度的影响,从Tau蛋白过度磷酸化探讨2型糖尿病神经纤维化的机制。方法设定两个干预因素,即2型糖尿病造模手段3水平:普食喂养、高脂高糖高蛋白饮食、高脂高糖高蛋白饮食并腹腔注射小剂量链脲佐菌素)和药物干预(2水平:无处置、罗格列酮片按照3.0mg/(kg·d)灌胃4周)。48只SD大鼠分为6组。Morris水迷宫检测大鼠认识能力;葡萄糖氧化酶法检测血浆血糖;放射免疫法检测血浆胰岛素;胰岛素抵抗指数HOMA-IR评估胰岛素抵抗程度;高效液相色谱法检测海马谷氨酸浓度;ELISA检测海马p-PHF1^(Ser396/404)、p-AT8^(Ser199/202)、p-12E8^(Ser262)的表达。结果胰岛素抵抗和2型糖尿病造成认知障碍,罗格列酮可缓解认知障碍;胰岛素抵抗和2型糖尿病可明显增加海马中血糖(Glu)浓度,罗格列酮可减少Glu浓度;胰岛素抵抗和2型糖尿病可增加海马中磷酸化Tau蛋白的表达;罗格列酮可减少海马中磷酸化Tau蛋白的表达。结论胰岛素抵抗及血糖升高可能是2型糖尿病时海马Tau蛋白过度磷酸化的原因;罗格列酮可以缓解这一过程。

Tau蛋白过度磷酸化对2型糖尿病所致神经纤维化的影响

目的观察胰岛素抵抗、高血糖和罗格列酮对大鼠认知功能、海马β样淀粉蛋白(Aβ)、Tau蛋白总量及其磷酸化的影响,探讨2型糖尿病患者神经纤维化的机制。方法将48只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为6组(每组8只):普食+马来酸罗格列酮组、普食+无治疗组、高脂高糖高蛋白(HFD)+马来酸罗格列酮组、HFD+无治疗组、HFD+链脲佐菌素(STZ)+马来酸罗格列酮组、HFD+STZ+无治疗组。通过Morris水迷宫测试大鼠的认知功能。采用高效液相色谱法测定大鼠海马组织中谷氨酸(Glu)水平,ELISA法测定总Tau蛋白(Tau5)和p-PHF1^(Ser396/404)、p-AT8^(Ser199/202)、p-12E8^(Ser262)水平。结果普食+马来酸罗格列酮组和普食+无治疗组的Morris水迷宫逃避潜伏期(EL)均显著短于HFD+STZ+马来酸罗格列酮组(P值均<0.05),空间探索时间(SET)均显著长于HFD+STZ+马来酸罗格列酮组(P值均<0.05);普食+马来酸罗格列酮组的EL显著短于HFD+马来酸罗格列酮组(P<0.05),SET显著长于HFD+马来酸罗格列酮组(P<0.05);HFD+无治疗组的EL显著长于HFD+马来酸罗格列酮组(P<0.05),SET显著短于HFD+马来酸罗格列酮组(P<0.05);HFD+STZ+无治疗组和HFD+无治疗组的EL均显著长于普食+无治疗组(P值均<0.05),SET均显著短于普食+无治疗组(P值均<0.05)。HFD+STZ+马来酸罗格列酮组的Glu水平显著高于普食+无治疗组和普食+马来酸罗格列酮组(P值均<0.05);HFD+马来酸罗格列酮组的Glu水平显著低于HFD+无治疗组(P<0.05),显著高于普食+马来酸罗格列酮组(P<0.05);普食+无治疗组的Glu水平显著低于HFD+STZ+无治疗组和HFD+无治疗组(P值均<0.05)。HFD+STZ+马来酸罗格列酮组的总Tau蛋白、p-PHF1^(Ser396/404)、p-AT8^(Ser199/202)和p-12E8^(Ser262)水平均显著高于普食+无治疗组和普食+马来酸罗格列酮组(P值均/<0.05);HFD+马来酸罗格列酮组的总Tau蛋白、p-PHF1^(Ser396/404)、p-AT8^(Ser199/202)和p-12E8^(Ser262)水平均显著低于HFD+无治疗组(P值均<0.05),均显著高于普食+马来酸罗格列酮组(P值均<0.05);普食+无治疗组的总Tau蛋白、p-PHF1^(Ser396/404)、p-AT8^(Ser199/202)和p-12E8^(Ser262)水平均显著低于HFD+STZ+无治疗组和HFD+无治疗组(P值均<0.05)。结论胰岛素抵抗和血糖水平升高可能是2型糖尿病时海马Tau蛋白过度磷酸化的原因,罗格列酮可缓解这一过程。

A2AR活化在脑创伤后tau蛋白过度磷酸化中的作用和机制分析

目的研究A2AR活化在脑创伤后tau蛋白过度磷酸化中的作用和机制。方法选择无特定病原体级的SD大鼠、SHSY5Y进行培养,大鼠原代海马神经元分别加CGS21680溶液和DMSO,SH-SY5Y的观察组分别加CGS21680溶液,及sb216763、H-89,或只加ZM241385,对照组加DMSO,对比各组tau蛋白过度磷酸化情况。结果大鼠原代海马神经元tau蛋白磷酸化水平明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;SH-SY5Y细胞中,观察1组tau蛋白磷酸化水平明显升高,与其他组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）;观察2组和3组tau蛋白磷酸化水平明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;观察4组和5组tau蛋白磷酸化水平与对照组比较,差异无统计学意义。结论脑创伤后A2AR活化能够激活激酶A和GSK-3β,从而导致tau蛋白过度磷酸化。