Research Progress on the Efficacy and Chemical Components of Medicinal Taxillus chinensis(DC.)Danser

Taxillus chinensis(DC.)Danser is a traditional Chinese medicine,which has the effects of nourishing the liver and kidney and strengthening the bones and muscles.Its properties and efficacy were recorded in many ancient Chinese herbal medicine books and modern books.In addition,other parasitic plants of the Loranthaceae family also have the effects of promoting blood circulation,checking diarrhea,and resisting tumor to treat various diseases.This paper reviewed recent scholars’research on the efficacy and chemical composition of medicinal Loranthaceae plants,and expounded the similarities and differences between T.chinensis and other medicinal Loranthaceae plants.

基于简单重复序列间标记分析寄主影响的广寄生遗传多样性

以寄生于不同寄主的广寄生[Taxillus chinensis(DC.)Danser]作为研究对象,运用简单重复序列间(Inter-simple sequence repeat,ISSR)分子标记技术对其进行遗传多样性分析。采用植物基因组DNA提取试剂盒对15个寄主的广寄生进行DNA提取,随后使用5个ISSR引物进行PCR扩增。对扩增出来的条带进行人工计数,借助POPGENE 3.2软件和NTSYS 2.10软件对15个寄主广寄生的遗传多样性进行分析。结果表明,共扩增出65条条带,均为多态性条带,多态性占比为100%。遗传相似系数在0.353 8~0.784 6,聚类图将15个样品分为6个类群,研究表明,15个寄主广寄生样品的遗传多样性存在差异,群体间具有遗传差异性。

桑寄生中总黄酮的含量测定及抗氧化活性研究

建立桂花树桑寄生中总黄酮的紫外分光光度测定方法;用清除DPPH自由基的能力来评价桑寄生中总黄酮的抗氧化活性。总黄酮浓度在0.004 mg/mL^0.02 mg/mL范围内,吸光度与浓度呈具有良好的线性关系(r=0.999 5)。桂花树桑寄生中总黄酮含量为14.18 mg/g,平均加标回收率为101.2%,同一批样品5次测定值的RSD为2.07%~2.25%之间;抑制DPPH自由基的能力IC50是32.31μg/mL。该方法简便、快捷、准确、重现性好,可作为检测桂花树桑寄生中总黄酮含量的一种好方法;结果表明,桂花树桑寄生总黄酮具有一定的抗氧化活性。

桑寄生中槲皮素、槲皮苷的鉴定与含量测定

目的分离并鉴定桑寄生Taxilluschinensis(DC.)Danser中黄酮类化合物,建立槲皮素和槲皮苷的含量测定方法。方法利用硅胶柱色谱分离黄酮类成分,用红外、紫外、质谱等谱学方法确定化合物的结构,采用HPLC法测定槲皮素与槲皮苷的含量。结果槲皮素在0.1～4.0μg范围内,槲皮苷在0.3～2.4μg范围内,浓度与峰面积呈良好线性关系。结论含量测定方法精密度高,分离度良好,具有实用性。

补肾活血方对免疫性卵巢早衰小鼠卵泡凋亡相关蛋白的影响

目的研究补肾活血方对卵巢早衰(POF)小鼠卵泡凋亡调控相关基因的表达,为临床中医药预防和治疗卵巢早衰提供思路。方法采用透明带3作抗原,对BALB/c雌性小鼠皮下多点注射,建立免疫性POF模型。用补肾活血方低、中、高剂量进行治疗,设倍美力为阳性对照药,采用ELISA法测定外周血清抗透明带抗体(AzpAb)的含量,进行脏器指数及卵巢病理学观察,免疫组织化学SABC法检测卵泡凋亡调控基因(bcl-2/Bax)表达变化。结果与空白组比较,模型组AzpAb表达明显增高,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,各剂量组、倍美力组表达均明显下降,差异有统计学意义(P<0.01);与空白组比较,模型组卵巢指数、胸腺指数均明显下降,脾脏指数明显增加,差异有统计学意义(P<0.01),与模型组比较,高剂组和倍美力组卵巢指数(P<0.01)、胸腺指数(P<0.05)增加,脾脏指数降低(P<0.05);与空白组比较,模型组bcl-2蛋白表达明显下降、Bax蛋白表达显著增加,差异有统计学意义(P<0.01),与模型组比较,各剂量组、倍美力组bcl-2蛋白表达明显增高(P<0.01),Bax蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论补肾活血方可能通过调节凋亡调控基因(bcl-2/Bax)的表达,使AzpAb表达明显下降,从而调节免疫反应,抑制抗体集聚,阻止卵泡的过度凋亡,改善卵巢的免疫功能,使有生机卵泡增加,淋巴细胞、浆细胞浸润减少,达到抑制自身免疫损伤、保护卵巢、改善卵巢功能的目的。

威灵仙、秦艽、桑寄生醇提物体外对淋巴细胞和环氧酶的影响

目的 :探讨威灵仙、秦艽和桑寄生提取物对淋巴细胞和环氧酶的影响。方法 :测定小鼠胸腺淋巴细胞和脾脏淋巴细胞增殖的变化 ,新生小公牛颈动脉内皮细胞的 6 keto PGF1α和小鼠腹腔巨噬细胞的PGE2 含量。结果 :威灵仙、秦艽和桑寄生对小鼠胸腺淋巴细胞和脾脏淋巴细胞的增殖有抑制作用 ,三种药物对环氧酶 1(COX 1)和氧化酶 2 (COX 2 )有不同程度的抑制。结论 :三种药物的祛风湿的部分机理可能是由于抑制淋巴细胞增殖和环氧酶而介导的。

桑寄生与红花寄生强心作用的比较研究

目的比较桑寄生与红花寄生的强心作用。方法采用离体蛙心灌流(斯氏法)方法,观察桑寄生及红花寄生对心肌收缩力及心率的影响。结果红花寄生对离体衰竭蛙心有明显的强心作用,而桑寄生则无明显影响。结论红花寄生对离体衰竭蛙心有明显的强心作用。

二氧化碳超临界萃取法萃取两种不同寄主桑寄生挥发油成分研究

目的分析寄主分别为桂花树和相思树的桑寄生挥发油的化学成分。方法采用二氧化碳超临界萃取法(SFE-CO2)提取桑寄生挥发油,用气相色谱-质谱联用法分析鉴定其化学成分,用面积归一化法确定其相对含量。结果桂花树寄生挥发油分离鉴定25个化合物,占总量的51.23%,主要成分是甲氧基肉桂酸乙酯、香豆素、十五烷等;相思树寄生挥发油分离鉴定11个化合物,占总量的53.94%,主要化学成分是2,4-二叔丁基苯酚、反式薄荷酮等。结论两种不同寄主桑寄生挥发性成分及其相对含量有较大的差异。

寄主来源为柚子的桑寄生挥发性成分的水蒸气蒸馏法和二氧化碳超临界流体萃取法提取

目的分析寄主来源为柚子的桑寄生的挥发性成分。方法采用水蒸气蒸馏法和二氧化碳超临界流体萃取法提取寄主来源为柚子的桑寄生的挥发性成分,用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术对其进行分析,采用面积归一化法测定了各成分的相对含量。结果从水蒸气蒸馏法的提取物中获得101个色谱峰,鉴定了其中65个成分,已鉴定出的成分的相对含量占流出峰总面积的65.71%,从二氧化碳超临界流体萃取法的提取物中共获得69个色谱峰,鉴定了其中29个成分,已鉴定出的成分的相对含量占流出峰总面积的52.75%。结论用水蒸气蒸馏法和二氧化碳超临界流体萃取法提取得到的挥发性成分有明显差异,该研究可为揭示桑寄生的药效物质基础提供更多的依据。

广寄生种子结构及其萌发实验研究

目的:了解广寄生种子结构与种子萌发过程及其影响萌发的因素。方法:采用体视显微镜观察广寄生种子萌发过程和智能人工气候箱培养观察广寄生种子萌发的影响因素。结果:①广寄生种子由种皮、胚与胚乳构成,胚由胚芽与"类胚根"构成,其中"类胚根"为分化形成种子初生吸器的器官;②种子不具休眠期,可以独立萌发。萌发时首先见"类胚根"从种孔"露头"膨大并逐渐分化形成初生吸器,同时芽也从种孔长出;③广寄生种子含水量为50%,种子对干燥脱水敏感,当含水量下降到25%时种子的萌发率为0;④广寄生种子适宜萌发温度为20～30℃,低于10℃和高于40℃萌发率为0;⑤种子无论有无光照均能独立萌发,在有光照条件下分化形成的初生吸器通常为一个,并呈现避光性分化;在无光照条件下种子则能分化形成多个吸器;⑥在有寄主情况下,种子的初生吸器分化形成朝向寄主;⑦种子不耐储藏,寿命短暂。结论:广寄生种子不具休眠期,种子一经成熟即可萌发生长,属于顽拗型种子类型,种子由种皮、胚与胚乳构成,成熟的胚由胚芽与"类胚根"器官构成,初生吸器在种子萌发时在"类胚根"基础上逐渐分化形成。

红花夹竹桃、红花寄生及桑寄生对小鼠的半数致死量测定

目的研究红花夹竹桃、红花寄生及桑寄生对小鼠的半数致死量(LD50)。方法给小鼠一次性灌胃,观察7 d内小鼠的毒性反应和死亡情况,以小鼠急性死亡率为指标,求红花夹竹桃、红花寄生及桑寄生3种药物对小鼠LD50和LD50的95%的可信限。结果红花夹竹桃、红花寄生及桑寄生的小鼠LD50分别为16.78,91.75,129.41 g.kg-1。结论红花夹竹桃毒性最大,其次为红花寄生,桑寄生毒性最小。

桑寄生醋制工艺研究

目的优选桑寄生的最佳醋制工艺。方法以槲皮素含量为指标,对影响醋制品质量的3个主要因素(加醋量、烘烤温度、烘烤时间)进行正交试验。结果最佳炮制工艺为加醋量50%、烘烤温度80～85℃、烘烤时间20min。结论该条件可作为桑寄生的最佳醋制工艺。

两种不同寄主桑寄生总黄酮的含量测定

目的:建立紫外分光光度法测定桑寄生总黄酮的方法。方法:采用紫外分光光度法,以芦丁为对照品,以亚硝酸钠—硝酸铝—氢氧化钠为显色剂,在最大吸收波长495nm处对总黄酮进行含量测定。结果:黄酮类化合物在0.0092～0.0552mg/mL范围内线性关系良好(r=0.9987);测得相思树桑寄生和夹竹桃桑寄生总黄酮的含量分别为13.56mg/g和9.79mg/g。结论:两种桑寄生的总黄酮含量存在明显差异,所建立的紫外分光光度法简便快速,稳定可靠,可用于桑寄生中总黄酮的含量测定。

广寄生和瘤果槲寄生及其寄主植物中齐墩果酸、熊果酸含量的相关性研究

目的:考察寄主及其寄生植物齐墩果酸和熊果酸含量的关系。方法:采用HPLC法对寄主及其寄生齐墩果酸、熊果酸含量进行测定,样品采用乙醇超声提取30 min,用Agilent Eclipse XDB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-乙腈-0.05%醋酸铵溶液(12∶67∶21)为流动相,流速为1.0 ml.min-1,检测波长为210 nm。结果:齐墩果酸和熊果酸的线性范围分别为2.61～209.00 mg.L-1(r=0.999 8)和7.85～628.00 mg.L-1(r=0.999 9),浓度与峰面积呈良好线性关系,平均加样回收率分别为99.27%和99.75%。结论:广寄生不含齐墩果酸和熊果酸,瘤果槲寄生中含有齐墩果酸,不含熊果酸。

桑寄生不同部位总RNA提取方法比较研究

目的:从桑寄生中提取高质量的RNA。方法:以桑寄生叶片、茎、花和种子为材料,采用TRIzol试剂盒法、改良TRIzol法、CTAB-Li Cl法、CTAB-异丙醇法4种方法,比较不同材料及不同方法分离RNA的效果。结果:TRIzol试剂盒法和改良TRIzol法均不能有效的去除桑寄生中的多糖和蛋白质等杂质,不适合用于桑寄生RNA的提取;CTAB-Li Cl法提取的RNA质量较高、完整性较好,可满足各种后续分子生物学实验的要求;CTAB-异丙醇法提取桑寄生RNA的效果虽然较好,但还达不到小RNA分析实验要求。结论:为桑寄生后续分子生物学研究提供基础,也为次生代谢物较丰富的药用植物RNA的提取提供参考。

桑寄生繁殖技术研究

本文从接种方法、时间、部位及接种后的栽培管理等方面对桑寄生Taxillus chinensis(DC.)Danser的繁殖技术进行比较系统的研究,旨在为将来的桑寄生栽培提供理论依据和技术指导。试验结果表明,不同接种部位、接种时间、接种方法及管理措施对桑寄生的萌芽率、寄生率有重要的影响;模拟桑寄生野生繁殖状态,3月份将种子与鸟粪以1∶5的比例拌匀后接种到桑树上部枝条并进行人工管理的萌发率和寄生率最高。本文建立了一种高效的桑寄生繁殖方法。

两种不同寄主桑寄生的化学成分预试验

目的:初步比较两种不同寄主(白蜡树和柚子树)来源的桑寄生所含化学成分的类型。方法:通过试管反应法和滤纸反应法,分别对两种不同寄主(白蜡树和柚子树)来源的桑寄生提取液进行化学成分预试。结果:两者均含有糖苷类、鞣质、有机酸、黄酮及酚类成分,均不含有香豆素、生物碱、强心苷类成分。结论:不同寄主上的桑寄生所含化学成分的类型有所区别。

高效液相色谱法测定桑寄生中槲皮素的含量

目的建立测定桑寄生中有效成分槲皮素含量的方法。方法采用高效液相色谱法测定。以甲醇-0.4%磷酸溶液(45∶55)为流动相,检测波长为360nm,柱温为室温。结果槲皮素在0.003208-0.03208μg范围内呈良好线性关系,回归方程为Y=1764.1846X-11.322(r=0.9994),槲皮素的平均回收率为97.24%(RSD=1.12%,n=6)。结论方法简便,分离效果好,结果准确可靠,可以用于桑寄生的质量控制。

广寄生、瘤果槲寄生总黄酮含量的测定及比较

采集一株柚树上的广寄生和瘤果槲寄生的枝叶,分出整枝、嫩枝和老枝三种实验材料,对其处理后,用70%乙醇浸提24小时,再用超声波法(功率60w,温度60℃,时间45分钟)提取,以芦丁为标准样,用紫外分光度计于510nm处测定总黄酮,结果表明:广寄生、瘤果槲寄生的整枝总黄酮得率分别是8.47%和2.98%,嫩枝总黄酮得率分别是9.32%和3.83%,老枝总黄酮得率分别是6.82%和2.43%;广寄生总黄酮含量>瘤果槲寄生总黄酮含量.

补肾化瘀方对多囊卵巢大鼠血脂水平的影响

目的观察补肾化瘀方对多囊卵巢(PCO)大鼠血脂代谢的影响。方法采用来曲唑灌胃制作PCO大鼠模型,造模成功后,分别给予不同剂量补肾化瘀方和炔雌醇环丙孕酮片灌胃,观察大鼠胆固醇(TC)、甘油三酯(TG),低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)的变化。结果 PCO大鼠TC、HDL、LDL含量明显高于正常组,与正常组相比,差异有统计学意义(P<0.05);补肾化瘀方中、低剂量组和炔雌醇环丙孕酮片能不同程度地改善PCO大鼠血脂成分的病理改变。结论补肾化瘀方能改善PCO大鼠血脂代谢异常。