响应面分析南方红豆杉黄酮微波提取工艺研究

目的:优化南方红豆杉[Taxus mairei(Lemee et Levl.)S.Y.Hu ex Liu]枝叶中总黄酮的微波提取工艺。方法:在单因素实验基础上,采用响应面分析法对影响南方红豆杉枝叶中总黄酮提取率的主要因素(提取时间、料液比和乙醇体积分数)进行优化,建立影响因素与响应值之间的数学模型,确定最佳微波提取工艺条件。结果:南方红豆杉枝叶中总黄酮最佳微波提取工艺为:料液比27.39(V/W),乙醇体积分数61.44%,提取时间15.27min,微波频率1 887MHz。结论:采用响应面法对南方红豆杉中总黄酮的提取条件进行优化,该方法合理可靠,为生产工艺提供理论依据。

响应面分析法优化南方红豆杉总黄酮超声提取工艺研究

目的优化南方红豆杉Taxus mairei(Lemee et Levl.)S.Y.Hu ex Liu枝叶中总黄酮的超声提取工艺。方法在单因素实验基础上,采用响应面分析法对影响南方红豆杉枝叶中总黄酮提取率的主要因素(提取时间、料液比和乙醇体积分数)进行优化,建立影响因素与响应值之间的数学模型,确定最佳超声提取工艺。结果南方红豆杉枝叶中总黄酮最佳超声提取工艺为:液料比26.38(V/m),乙醇体积分数63.56%,提取时间55.61 min,提取2次,提取频率为59 kHz。结论采用响应面分析法对南方红豆杉中总黄酮的超声提取条件进行优化,该方法合理可靠,为生产工艺提供了理论依据。

南方红豆杉总生物碱的含量测定

目的考察南方红豆杉总生物碱的含量测定方法。方法采用分光光度法测定南方红豆杉中总生物碱的含量。以乌头碱为对照品,溴甲酚绿为酸性染料,在pH为3.0±0.1的缓冲液条件下,三氯甲烷萃取,于415 nm波长处测定其吸光度。结果乌头碱在0.009 6～0.022 4 mg/mL质量浓度范围内线性关系良好,回归方程Y=48.813X-0.025 2,r=0.999 6,平均加样回收率为100.26%(RSD为2.04%),其总生物碱含量平均值为0.382%。结论分光光度法简便、准确,可用于南方红豆杉总生物碱的含量测定。

基于Box-Behnken设计优选南方红豆杉多糖微波提取工艺研究

目的:采用中心组合(Box-Behnken)设计优选南方红豆杉[Taxus mairei(Lemee et Levl.)S.Y.Hu ex Liu]枝条中多糖的微波提取工艺。方法:在单因素实验基础上,采用Box-Behnken设计对影响南方红豆杉枝条中多糖提取率的主要因素(料液比、提取时间、提取次数)进行优化,建立影响因素与响应值之间的数学模型,确定最佳超声提取工艺条件。结果:南方红豆杉枝条中多糖最佳超声提取工艺为:料液比21.48(V/W),提取时间13.78 min,提取次数3次,微波频率为1887MHz。结论:采用响应面法对南方红豆杉中多糖的提取条件进行优化,该方法合理可靠,能为生产工艺提供理论依据。

温度、日照时数及降水量与南方红豆杉初生代谢产物的相关性研究

目的:探讨环境因子与南方红豆杉初生代谢产物的相关性,为进一步研究南方红豆杉生物学特性及开发利用提供实验依据。方法:运用SPSS 19.0统计软件进行相关性分析和通径分析,探究温度、日照时数、降水量与初生代谢产物含量的相关性。结果:各环境因子直接贡献绝对值最大的为月均温度,且月均温度通过月累积光照时数对南方红豆与南方红豆杉相对生物量和总多糖含量的相关程度和杉相对生物量和总多糖含量的影响最大,说明月均温度通过月累积光照时数对南方红豆杉初生代谢产物含量的影响最大。结论:温度与光照时数两者之间关系较为密切,且温度变化对南方红豆杉初生代谢产物含量的累积影响最为明显。该研究对南方红豆杉采收、加工、利用及揭示南方红豆杉生物学特性具有一定指导意义。

响应面分析南方红豆杉枝条多糖超声提取工艺及其抗氧化作用研究

目的:研究南方红豆杉枝条中多糖的超声提取工艺及抗氧化作用。方法:在单因素实验基础上,采用响应面分析法对影响南方红豆杉枝条中多糖提取率的主要因素进行优化,建立影响因素与响应值之间的数学模型,确定最佳超声提取工艺条件;通过DPPH自由基清除率、还原力和总的抗氧化活性的测定,分析其抗氧化作用。结果:最佳超声提取工艺为:料液比26.78(V/W),提取时间42.81min,超声频率为33.88kHz,提取2次;南方红豆杉多糖对DPPH自由基具有一定的清除作用,总的抗氧化活性和还原能力均随多糖浓度的增加而上升。结论:采用该方法对提取条件进行优化,合理可靠,能为生产工艺提供理论依据;其多糖具有较强的抗氧化作用。

激素加变温层积法处理南方红豆杉种子生理生化变化研究

目的:研究南方红豆杉种子萌发的机制,即南方红豆杉种子形态后熟过程中的生物大分子的变化过程。方法:采用0.05%赤霉素(GA3)加低(4℃)-暖(23℃)-低(4℃)变温层积处理南方红豆杉种子,研究其生理生化变化。结果:采用激素加变温层积法处理种子后,蛋白质、氨基酸、可溶性糖都具有在低温层积时期累积较快,暖层积时期消耗较快的特点,三者的含量总体都呈上升趋势,分别比处理前增加115.56%、123.70%、50.71%,但脂肪含量下降40.00%。脱氢酶、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、蛋白酶活性分别比处理前增加111.05%、178.73%、141.84%、169.97%。结论:激素加变温层积法影响南方红豆杉种子生理生化变化,使种子内贮藏物质不断分解代谢、转化和利用,这也是破除其休眠的关键。

南方红豆杉不同组织总RNA提取方法研究

目的:从南方红豆杉不同组织中提取高质量的总RNA。方法:以南方红豆杉幼叶、嫩茎和种子为材料,采用Trizol法、CTAB法、热酚法、改良热酚法和天根RNAprep Pure多糖多酚植物总RNA提取试剂盒法5种方法进行比较分析。结果:Trizol法基本未提取到南方红豆杉不同组织的RNA;CTAB法提取的RNA浓度较高,但OD_(260)/OD_(280)大于2.1,RNA降解严重;热酚法提取的RNA浓度较高,OD_(260)/OD_(280)均小于1.8,蛋白质和酚类物质等残留严重,质量较低;改良热酚法和试剂盒法28S rRNA、18S rRNA和5S rRNA条带清晰,完整性好,OD_(260)/OD_(280)均在1.8~2.1范围内,纯度高。结论:Trizol法、CTAB法和热酚法均不适用于南方红豆杉总RNA提取,而改良热酚法和试剂盒法可提取到质量较好的南方红豆杉总RNA。