Effect of Rare Earths on Composition and Activities of Rare Earth Elements Binding Glycoprotein in Tea

The effects of spraying rare earths(RE) on composition and activities of tea polysaccharide were measured by inductively coupled plasma mass spectrometry (ICP-MS), gas chromatography(GC), amino acid analyzer and animal models. The results show that there are rare earth elements binding glycoprotein in tea (REE-TGP). The effects of RE on composition and content of saccharides in REE-TGP are not obvious. The contents of Hypro and Ser in REE-TGP are evidently enhanced in comparison with that in control (not treated with rare earth), but the content of Glu is smaller than that from control. The content of La in REE-TGP from the tea garden sprayed rare earth is 193% higher than that in control. REE-TGP declines content of blood sugar in mice and enhances immunization of rat, which are very evident when the animals are treated by REE-TGP from the tea garden sprayed RE.

高效液相色谱-电喷雾质谱法用于茶多糖蛋白的纯度和相对分子质量的测定

应用SephadexG100凝胶色谱方法从江西产粗老茶叶中提取纯化得到茶多糖蛋白(TGC)。通过高效液相色谱法对其纯度进行了分析,表明其为均一组分,进而应用凝胶法和高效液相色谱 电喷雾质谱法测得该茶多糖蛋白的相对分子质量为51500。

茶叶糖蛋白对树突状细胞表面分子表达的影响

为探讨茶叶糖蛋白对小鼠骨髓来源树突状细胞（BMDCs）表面分子表达的影响，采用细胞因子诱导法，以贴壁法获得贴壁单核细胞，添加重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（rmGM—CSF）和重组白细胞介素4（rmIL-4）进行体外诱导培养，倒置显微镜动态观察细胞形态的变化；采用MTT法，观察不同浓度的茶叶糖蛋白（TGP）对小鼠骨髓来源树突状细胞的细胞毒性；采用流式细胞术检测DCs的表面标志CD11c、CD86和MHCⅡ类分子表达的变化。结果表明，经TGP作用24h后，树突状细胞形态更加典型，更加成熟；茶叶糖蛋白在（0．8—200μg／mL）的浓度范围内，可认为TGP对树突状细胞无细胞毒性。与阴性对照相比，茶叶糖蛋白显著促进树突状细胞表面CD11c、CD86、MHCⅡ的表达，在浓度（0．1～25μg／mL）范围内呈现剂量依赖性，初步表明茶叶糖蛋白可以促进树突状细胞的成熟。

茶叶糖蛋白对RAW264.7细胞分泌作用的影响

本文研究利用小鼠巨噬细胞建立体外实验模型,对茶叶糖蛋白(TGP)的免疫活性进行研究。采用倒置显微镜观察细胞形态变化。Griess法和ELISA法检测不同剂量茶叶糖蛋白对RAW264.7细胞一氧化氮(NO)和细胞因子TNF-α、IL-1β分泌量的影响。结果表明:50μg/mL茶叶糖蛋白可显著促进细胞分泌一氧化氮和细胞因子TNF-α、IL-1β(p<0.01),说明茶叶糖蛋白可通过促进细胞分泌一氧化氮和细胞因子,起到活化RAW264.7细胞和调节机体免疫的功效。

茶多酚对肿瘤细胞多药耐药性逆转作用的研究

用免疫组化法和流式细胞仪对肿瘤细胞系MCF 7和MCF 7 Adr的P 糖蛋白表达水平进行定性定量研究。用噻唑蓝比色法 (MTT)研究茶多酚的细胞毒性及其对耐药性的逆转作用 ,并与Pgp抑制剂———奎尼定进行了比较。免疫组化法检测P 糖蛋白表达水平 ,MCF 7 Adr呈强阳性 ,而MCF 7呈阴性 ;流式细胞仪定量检测结果MCF 7 Adr细胞系细胞阳性率为 15 % ,MCF 7细胞系细胞阳性率为 1 8%。MCF 7 Adr细胞系存在Pgp的过度表达。噻唑蓝比色法 (MTT)检测结果茶多酚、奎尼定的加入对阿霉素对MCF 7的细胞毒性几乎没有影响。而茶多酚、奎尼定的加入明显增加了MCF 7 Adr对阿霉素的敏感性。免疫组化与流式细胞技术结合 ,可用于肿瘤细胞系P 糖蛋白表达水平的定性定量检测。茶多酚不仅具有一定的抗癌活性 ,还与奎尼定一样具有多药耐药性逆转作用。

茶树叶糖蛋白分离及鉴定的初步研究

茶叶是一种有益健康的保健食品,保健功能在于它有多种化学活性成分.近年来研究表明,茶叶糖蛋白可能是茶叶的保健因子之一.从茶树叶中提取了总蛋白、45%～70%硫酸铵分级总蛋白、分级蛋白Sephadex G-100凝胶层析分离出粗糖蛋白,根据糖蛋白糖链及蛋白的对照染色鉴定出多种茶树叶糖蛋白,并从SDS-胶上快速纯化了三种茶叶糖蛋白.ConA-Sepharose 4B亲和层析从茶树叶总蛋白中分离出16种天然活性糖蛋白.

茶叶糖蛋白对树突状细胞分泌与吞噬功能的影响

[目的]探讨茶叶糖蛋白对小鼠骨髓来源树突状细胞(DCs)功能调节的影响,为进一步阐明茶叶糖蛋白的免疫调节活性提供依据。方法:采用细胞因子诱导法,从Balb/cj小鼠骨髓细胞贴壁分离获得单核细胞,加入含10%胎牛血清、重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)及重组小鼠白细胞介素4(rmIL-4)的RPMI 1640完全培养基培养,在培养至第6d,实验组加入茶叶糖蛋白(1μg/mL^50μg/mL),对照组加入RPMI 1640或LPS(100 ng/mL),流式细胞仪检测各组DCs吞噬功能的变化,ELISA法检测各组DCs分泌细胞因子IL-12p70、IL-10、IL-1β功能的变化,Griess法检测各组DCs分泌NO功能的变化。[结果]茶叶糖蛋白组DCs吞噬功能较对照组显著下降,茶叶糖蛋白可以提高DCs分泌IL-12p70、IL-1β和NO,但显著降低IL-10的分泌量。[结论]茶叶糖蛋白能促进小鼠骨髓来源的DCs功能的成熟。

三种茶饮料对小鼠肠道首过效应及肝脏Cyp3a、Cyp2e1的影响

目的:研究市售罐装绿茶、冰红茶及茉莉清茶饮料对小鼠肠道首过效应和肝脏细胞色素氧化酶(cytochrome P450,CYP)Cyp3a、Cyp2e1的影响。方法:SPF级小鼠随机分为6组,其中绿茶组、冰红茶组、茉莉清茶组小鼠分别自由饮用绿茶、冰红茶、茉莉清茶7 d。用血中扑热息痛(ac-etaminophen,APAP)的浓度推断肠道首过效应。采用差速离心法分离肝/肠微粒体,以Bradford法定量蛋白,紫外分光光度法定量Cyp3a、Cyp2e1及血中APAP浓度。结果:绿茶组血中APAP浓度较空白组明显升高(P<0.01),而冰红茶组与空白组相比则显著降低(P<0.01);绿茶组和冰红茶组小肠Cyp3a酶活性较空白组显著升高(P<0.05或P<0.01)。各供试物组肝脏Cyp3a酶活性较空白组明显升高(P<0.01),各供试物组肝脏Cyp2e1酶活性较空白组显著降低(P<0.01)。结论:绿茶、冰红茶能显著改变肠道首过效应(绿茶抑制肠道P-gp,诱导肠道Cyp3a;冰红茶则诱导肠道P-gp及肠道Cyp3a;而茉莉清茶对肠道首过效应无影响)。各供试物均诱导肝脏Cyp3a的酶活性,抑制肝脏Cyp2e1的酶活性。故在服用经CYP3A、CYP2E1和P-gp代谢/转运的药物期间,大量或经常饮用上述茶可能影响这些药物的临床疗效和/或不良反应。

高效凝胶渗透色谱法测定茶叶糖蛋白含量研究

用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)鉴定了茶叶糖蛋白(TGC)的纯度，并以TGC纯品作为标准品，以UltrahydrogelTM500(7．8×300mm)为固定相，0．6mL／min蒸馏水为流动相，折光示差检测，对多种茶叶中TGC含量进行了测定，得回归方程为：Y=0．2503×10^-6X-0．0087，r=0．9997，其浓度在0．604～6．04mg·mL^-1范围内呈良好的线性关系。

茶叶细胞壁组分的分离及其稀土元素的分布与定位

本研究结果表明,细胞壁确实是稀土元素沉积的主要地方之一;茶叶细胞壁经无水乙二胺萃取处理后,得到了三种组分,组分A经SephadexG—100上柱分离后,表明它至少含有两种大分子化合物。分子量较小的大分子物质的分子量约为5.0×10~3。氧化稀土总量在三种组分中的含量,按组分A、B和C顺序依次降低,即132.6μg/g、87.8μg/g和12.3μg/g。组分A和B中的稀土元素含量比细胞壁中的要高,表现出富集。本研究基本实现了从细胞水平和分子水平上探索稀土元素在植物体中的分布与定位。

富硒(茶)糖蛋白对抗心肌线粒体氧化疲劳机制研究

目的:研究安康紫阳富硒绿茶中所含富硒(茶)糖蛋白(Se-rich tea glycoprotein,STG)对心肌细胞线粒体功能的影响。方法:选用大鼠作为测试对象,随机分成三组后分别进行为期8周的实验,实验测试心肌线粒体抗氧化酶活性、线粒体功能指标。结果:运动加STG组大鼠线粒体SOD、GSH-Px具有显著性差异,CAT具有非常显著性差异;能量代谢标志酶活性提高,细胞内的MDA、H_(2)O_(2)产生量显著降低。结论:STG具有增强心肌细胞线粒体抗疲劳、抗氧化能力和提高能量代谢标志酶活性的功能。

茶叶糖蛋白调控树突状细胞对T淋巴细胞增殖和CTL活性的影响

为探讨茶叶糖蛋白(TGP)对小鼠骨髓来源树突状细胞(DCs)表型及功能的影响,采用细胞因子诱导法,以贴壁法获得贴壁单核细胞,添加重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组白细胞介素-4(rmIL-4)进行体外诱导培养,倒置显微镜动态观察细胞形态的变化;采用流式细胞术检测DCs的表面标志CD11c和MHCII类分子表达;采用MTT法检测TGP对DCs刺激OVA未致敏或致敏淋巴细胞增殖的影响;初步探讨TGP对DCs抗小鼠SP2/0骨髓瘤功能的影响。结果表明,经TGP作用48h后,树突状细胞形态更加典型、成熟;与阴性对照相比,TGP显著促进树突状细胞表面CD11c和MHCⅡ的表达;TGP可增强DCs的刺激致敏淋巴细胞增殖的能力,说明DCs诱导免疫应答及抗原提呈功能均增强;与未经抗原负载相比,TGP抗肿瘤机制与促进DCs抗原呈递能力有密切的关系,可提高机体对肿瘤细胞的特异性主动免疫功能,而TGP的干预可促进这一功能的提高。茶叶糖蛋白可以促进树突状细胞表型及功能的成熟。