Tec家族蛋白酪氨酸激酶Itk PH结构域与OS-9蛋白的相互作用

用酵母双杂交技术筛选与ItkPH结构域相互作用的蛋白分子 ,以了解Itk的功能及其在T细胞信号转导中的位置与作用 .Itk的PH结构域扩增后克隆入酵母双杂交系统的pLexA载体 ,转化酵母细胞EGY4 8(p8op lacZ) ,经检测PH结构域无自激活作用 ,且对酵母细胞无毒性作用 .用PH结构域作为“钓饵”蛋白 ,在酵母双杂交系统中筛选构建于AD载体的T细胞cDNA文库 .将PH结构域及筛库所得基因片段分别进行融合表达 ,用于体外结合实验 ,进一步证实二者的相互作用 .经营养缺陷选择、诱导筛选和鉴定确证 ,筛库所得的插段约 15 0 0bp的文库质粒为一真阳性克隆 .经blast比较分析为骨肉瘤、横纹肌肉瘤等肿瘤组织中高表达的os 9基因 .体外结合实验也表明 ,ItkPH结构域可与该基因表达产物结合 .Itk的PH结构域可与OS 9蛋白相互作用 .

非受体蛋白酪氨酸激酶Tec家族的研究进展

Ｔｅｃ家族是近几年国外研究较活跃的胞浆内酪氨酸蛋白激酶分子，它们主要在淋巴细胞和髓样细胞中表达。该家族成员有Ｂｔｋ、Ｉｔｋ／Ｔｓｋ／Ｅｍｔ、Ｔｅｃ、Ｔｘｋ和Ｂｍｘ，其结构具有高度同源性，均由ＰＨ结构域、ＳＨ３、ＳＨ２及激酶结构域组成，其Ｎ端缺乏疏水性...