端粒酶逆转录酶与核因子κB/p65在喉鳞状细胞癌中的表达

目的探讨端粒酶逆转录酶(telomerasere-verse transcriptase,TERT)和核因子κB/p65(NF–κB/p65)在喉鳞状细胞癌中的表达及两者间可能存在的相互关系。方法采用免疫组化SP法检测41例喉鳞状细胞癌和10例声带息肉组织中TERT和NF-κB/p65的表达水平。结果TERT和NF-κB/p65在喉鳞状细胞癌中的阳性表达率分别为78.05%和68.29%,声带息肉中几乎未见TERT和NF-κB/p65的表达。定性分析发现TERT与喉鳞状细胞癌的T分级﹑淋巴结转移和肿瘤临床分期有关。相关分析显示NF-κB/p65与TERT呈正相关。结论①TERT和NF-κB/p65参与了喉癌的发展过程;②TERT有望作为防止喉鳞状细胞癌进一步恶化的治疗靶点;③喉鳞状细胞癌中NF-κB/p65促进了TERT的表达。

人端粒酶反转录酶催化酶亚单位基因对肝母细胞瘤细胞株体外生物学特性的影响

目的 研究人端粒酶反转录酶催化酶亚单位 (hTERT)基因对肝母细胞瘤细胞株体外生物学特性的影响。方法 体外将已构建好的正、反义hTERT真核表达载体转染HepG2 肝母细胞瘤细胞株 ,经G4 18及聚合酶链反应 (PCR)筛选鉴定获得分别转入了正、反义hTERT载体的抗性克隆细胞HepG2 s和HepG2 as。运用逆转录 PCR(RT PCR)技术及TRAP 银染法对各组细胞内源性hTERTmRNA的表达及端粒酶的活性进行了检测 ;同时还采用MTT法、双层软琼脂克隆形成试验、流式细胞术观察和分析了反义hTERT对肝母细胞瘤细胞体外生长增殖活力的影响及是否能诱导瘤细胞的凋亡。结果 与空白对照组、正义hTERT组相比 ,反义hTERT能显著降低HepG2 细胞内源性hTERTmRNA的表达 (n =10 ,t =7 6 1,P <0 0 1)和下调端粒酶活性。当各组细胞传至第 2 0代后 ,与HepG2 、HepG2 s比较 ,HepG2 as细胞的生长速度和集落形成能力明显地减慢和降低 (n =10 ,t=4 5 4 ,P <0 0 1和n =10 ,t=3 96 ,P <0 0 1) ,同时伴有凋亡率的显著增加 (n =10 ,t=9 2 4 ,P <0 0 1和n =10 ,t=8 37,P <0 0 1)。结论 反义hTERT体外可抑制肝母细胞瘤细胞的生长增殖能力 。