刺五加新品种‘紫加1号’多糖分离纯化及抗氧化活性分析

‘紫加1号’为该课题组选育的刺五加(Acanthopanax senticosus)新品种,嫩茎叶灰紫色且味甘。为分离纯化‘紫加1号’嫩茎叶多糖,并测定各组分的单糖组成和分子量大小、评价各组分的抗氧化活性。该研究以‘紫加1号’嫩茎叶为材料,采用水提醇沉工艺,经大孔树脂吸附法除杂脱色得到粗多糖(A.polysaccharides,ASPS);通过DEAE-Cellulose 52离子柱和Sephadex G-100凝胶柱分离纯化得多糖组分;采用离子色谱和凝胶色谱-示差-多角度激光光散射色谱,测定各均一组分的单糖组成和分子量;通过测定均一组分清除羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O_(2)^(-·))、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH)的能力,分析其体外抗氧化活性强弱。结果表明:ASPS经分离纯化得到4种多糖组分,即酸性多糖ASPA-1-1、ASPA-2-1、ASPA-3-1和中性多糖ASPN-1,其分子量依次为8.10、26.15、0.91、0.89 kDa,主要是由阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、核糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸等按不同比例组成的杂多糖。ASPA-1-1、ASPA-2-1、ASPA-3-1、ASPN-1均具有明显的抗氧化活性,其中ASPA-2-1清除·OH、DPPH的能力高于ASPA-1-1、ASPA-3-1、ASPN-1,而ASPA-3-1清除O_(2)^(-·)的能力最强。综上认为,从‘紫加1号’中分离纯化得到的多糖具有较好的抗氧化活性。该研究结果为‘紫加1号’作为天然抗氧化剂的深度研究和进一步开发与利用提供了一定的科学理论依据。

不同枸杞品种嫩茎游离氨基酸的区域化差异

枸杞嫩茎作为我国传统的食材与中药材,因其较高的营养价值深受广大消费者欢迎,游离氨基酸是嫩茎中重要的营养成分。测定分析了4个枸杞品种在3个种植地嫩茎中氨基酸含量及组成差异,并采用主成分分析法进行了综合评价。结果表明,枸杞嫩茎中含有17种氨基酸,总含量在567.1~1818.4 mg/100 g,其中脯氨酸、丝氨酸含量较高。不同地点不同品种之间的游离氨基酸总量、必需氨基酸和药用氨基酸均存在显著差异。整体上,青海种植的枸杞嫩茎中总氨基酸含量最高,均值为1645.87 mg/100 g,占枸杞干重的1.65%,而江苏盐城种植的枸杞嫩茎必需氨基酸含量和药用氨基酸含量最高,均值分别占氨基酸总量的41.62%和38.60%。枸杞嫩茎呈味氨基酸中,以甜味和鲜味氨基酸占优势。主成分结果表明,种植于江苏盐城的柴杞3号、柴杞1号和柴杞2号综合营养价值最好。

‘紫加1号’花色苷提取工艺及抗氧化活性分析

旨在优化‘紫加1号’嫩茎叶花色苷提取工艺,并探讨其体外抗氧化活性。采用溶剂浸提法提取‘紫加1号’嫩茎叶花色苷,通过单因素试验和正交试验,分析浸提时间、浸提温度、料液比、乙醇浓度和提取次数对花色苷提取率的影响,确定提取‘紫加1号’花色苷的最佳工艺。通过水杨酸法、邻苯三酚自氧化法和DPPH法对‘紫加1号’花色苷的体外抗氧化活性进行测定。结果表明,花色苷最佳提取工艺为浸提温度50℃、浸提时间2.5 h、料液比为1:100 g/mL、乙醇浓度为55%、提取2次,此条件下得率为62.34 mg/100g,接近实际值56.23 mg/100g,说明结果准确可靠。同时,‘紫加1号’花色苷对羟基自由基(·OH)、超氧基自由基(O_(2)-·)和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH)有明显的清除作用,半数抑制浓度(IC50)依次为0.488 mg/mL、0.764 mg/mL和0.032 mg/mL。该法能够有效提取‘紫加1号’嫩茎叶花色苷,且获得的花色苷具有明显的体外抗氧化活性。

丹霞梧桐组织培养技术研究

采用丹霞梧桐种子和苗木嫩茎为外植体,研究不同外植体类型、不同灭菌方式、不同培养基对丹霞梧桐组织培养的影响,结果表明,种子用0.1%的升汞处理8 min或15%的次氯酸钠处理8 min,两种消毒方式升汞消毒效果最佳。顶芽、嫩茎用0.1%的升汞分三次(4 min+3 min+1 min),每次间隔用无菌水冲洗1次消毒效果最佳。初代培养基配方:MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂5 g/L.MS+6-BA0.5 mg/L+NAA0.5 mg/L+糖30 g/L+活性炭0.5 g/L+琼脂5 g/L诱导发芽率达90~95%、继代培养基:MS+6-BA1.0 mg/L+GA30.5 g/L+蔗糖30 g/L+琼脂5 g/L,增值倍数为3~6。

大理长叶兰离体培养技术研究

以大理长叶兰幼嫩茎段为外植体,通过筛选灭菌方法,原球茎增殖和生根诱导等适宜培养基,建立离体快繁技术体系。结果显示:最适合外植体消毒的方法为:75%酒精10s+2%洁尔灭3 min+01%升汞1 min,污染率为11.1%,存活率为86.6%;最适增殖培养基为:MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+100 ml/L CM+0.1 g/L AC,平均增殖系数达4.73;最适生根培养基为:1/2 MS+0.5 mg/L IBA+200 ml/L CM+0.1g/L AC,平均生根系数达2.95,且不定芽与根系长势良好。

银杏幼嫩茎段培养诱导愈伤组织及其细胞学研究

将银杏幼嫩茎段培养于含NAA和BA的MS和改良MS培养基中获得球型胚.培养基类型对愈伤组织的诱导和分化有明显影响,MS培养基优于DCR培养基.所有的MS和改良MS培养基上有胚性细胞的分化.在含有4mg/L的NAA的MS和改良MS培养基中,有三细胞和四细胞的原胚出现,并在MS+2mg/LNAA+0.1mg/LBA的培养基中观察到球形胚的分化.

金露梅扦插繁殖技术研究

The techniques of cutting propagation of Potentilla fruticosa was studied.The tender stem cuttings and the woody stem cuttings were treated by different concentrations of BBA(0 mg·kg-1,10 mg·kg-1,50 mg·kg-1,100 mg·kg-1,200 mg·kg-1,500 mg·kg-1).The results indicated that the rooting percentage of tender stem cuttings at the concentration of 10 mg ·kg-1BBA was the highest(88.3%),and that of woody stem cuttings treated by the concentration of 50 mg·kg-1BBA was the highest(66.67%).It also indicated that the rooting percentages of the tender stem cuttings were better than those of the woody stem cuttings with same treatment.

桂枝的化学成分研究

目的 对桂枝的化学成分进行系统研究。方法 利用各种色谱技术进行分离纯化 ,并根据理化常数和光谱解析 (U V,IR,MS,NMR)鉴定各化合物结构。从桂枝 95 %乙醇浸膏的氯仿和乙酸乙酯部分中 ,共分离得到 11个化合物。结果 分别鉴定为 :肉桂酸 ( )、2 -甲氧基肉桂酸 ( )、1,4 -二苯基 -丁二酮 ( )、香豆素 ( )、β-谷甾醇 ( )、丁香醛 ( )、5α,8α-过氧化麦角甾醇 ( )、2 -甲氧基苯甲酸 ( )、6β-羟基 - 4 -烯 - 3-豆甾酮 ( )、原儿茶酸 ( )、胡萝卜苷 ( )。结论 化合物 、 、 为首次从天然界分离得到 ,化合物 为首次从高等植物中分离得到 ,化合物 、 为首次从本属植物中分离得到。

花楸嫩叶和茎段的愈伤组织诱导

以花楸嫩叶和茎段为外植体,在添加BA、TDZ、IBA、NAA、2,4-D组成的不同激素组合的MS培养基上培养,以诱导愈伤组织.以幼嫩的茎段为外植体时,从愈伤组织的诱导率、体积和生长状态综合考虑,得出生长素的效应为NAA＞2,4-D＞IBA;最佳激素种类组合为NAA1.0mg/L+BA0.5～3.0mg/L、2,4-D1.0mg/L+BA0.5～3.0mg/L或TDZ0.01～0.5mg/L.以幼嫩的叶片为外植体时,虽然诱导率可达100%,但只是在切口处长小米粒大小的愈伤组织,生长素的诱导效应大小为2,4-D＞NAA＞IBA,最佳激素组合为2,4-D1.0mg/L+BA0.5～3.0mg/L.将初代培养的愈伤组织转入增殖培养基,增殖效果都非常好,4周后愈伤组织长满培养瓶.

单叶铁线莲Clematis henryi愈伤组织诱导与植株再生

以单叶铁线莲老枝、嫩茎、叶片和叶柄为外植体,在附加各种激素的MS培养基上进行诱导培养,以探讨愈伤组织诱导和植株再生的条件。结果表明,嫩茎为最佳外植体,适用于愈伤组织的诱导,在MS+1.2 mg.L-16-BA+0.35 mg.L-1NAA培养基中,嫩茎的出愈率为88.6%;MS+4.0 mg.L-1KT+0.4 mg.L-1NAA为最佳不定芽诱导培养基,不定芽发生率为90.0%;MS+0.04 mg.L-1NAA为最佳生根培养基,生根率达95.0%。

中国珍稀植物明党参嫩茎叶挥发油化学成分研究

采用毛细管气相色谱 -质谱 -计算机联用技术对明党参嫩茎叶挥发油的化学成分进行研究。从挥发油中鉴定出 2 7种成分 ,占总油量的 97.50 2 % ,其主要成分是牛儿醇乙酸酯 ( 4 6.636% )、明党参炔 ( 11.4 83% )、β-金合欢烯 ( 10 .986% )。

巴戟天组织培养和快速繁殖研究

以巴戟天顶芽及嫩茎节段为外植体，以MS为基本培养基，通过不同的激素种类和浓度配比，建立巴戟天组培快繁体系。结果表明，外植体表面消毒以70％酒精预处理60s，再用0．1％HgCl2浸泡10min，效果较好，茎节为外植体优于顶芽。培养基MS＋BA1．0mg／L＋IBA0．05mg／L利于诱导出芽，可用于初代培养；MS＋BA1．0mg／L＋IBA0．2mg／L利于形成丛生芽，用于继代增殖，繁殖系数6．0／50d；1／2MS＋IBA0.4～0.8mg／L适宜诱导生根获得再生植株，生根率100％；生根苗移栽于排水良好的火土或砂土中，成活率90％。

西伯利亚白刺的微繁技术

以西伯利亚白刺(Nitraria sibirica)的幼嫩茎段为外植体,采用正交设计及方差分析对影响西伯利亚白刺植株离体培养的因素进行了优化研究,培育出了西伯利亚白刺的组培苗。结果表明,适合初代培养的培养基是N6+IBA1.0mg/L+6-BA1.0mg/L,适合继代增殖的培养基为N6+IBA0.1mg/L+6-BA2.0mg/L,适合壮苗的培养基是不加激素的N6培养基,适合生根的培养基为MS+IBA0.5mg/L。

4种仙人掌科植物的组织培养研究

以仙人掌科4种植物的嫩茎或子球为外植体,研究了不同培养基对其诱导和增殖的影响,同时还进行了生根和移栽试验。结果表明:珊瑚树、黄毛掌和山影掌嫩茎的最佳诱导培养基为MS+BA2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L、最适增殖培养基为MS+BA0.5 mg/L+NAA0.2 mg/L,豪氏沙布疣球子球的最佳诱导培养基为MS+BA3.0 mg/L+NAA0.2 mg/L、最适增殖培养基为MS+BA1.0 mg/L+NAA0.2 mg/L;4种仙人掌科植物在1/2 MS+IBA0.5 mg/L培养基上均能良好生根,将生根苗移栽到蛭石∶河沙为1∶1的混合基质中成活率达80%以上。

金露梅嫩茎离体培养再生植株的研究

以金露梅嫩茎为外植体进行簇生芽诱导,结果表明:诱导簇生芽时,以MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L效果较好,分化率达100%;继代培养时以MS+6-BA1.0mg/L+KT0.5mg/L+NAA0.1mg/L增殖率较高,达11.7倍;再生苗在1/2MS+NAA0.1mg/L的培养基上生根效果较好。

刺榆嫩茎叶的生药学研究

对刺榆嫩茎叶进行了显微鉴定,并采用HPLC法测定了刺榆嫩茎叶中主要成分芦丁的含量。结果表明:刺榆嫩茎叶组织中有大型的分泌细胞,有众多的草酸钙簇晶和非腺毛,其中叶片主脉维管束为外韧型。主要成分为黄酮类物质,其中含芦丁0.09%,在0.05~0.45μg范围内,与峰面积呈良好线性关系(r=0.9998),平均回收率为99.34%(RSD=0.6%,n=5)。

3个木薯品种嫩茎叶中氢氰酸、总黄酮及主要营养成分含量的变化

以木薯(Manihot esculenta Crantz)品种‘华南7号’(‘South China 7’)、‘华南9号’(‘South China 9’)和‘华南205号’(‘South China 205’)为研究对象,分别对种植后90、120、150、180和210 d的3个木薯品种嫩茎叶中氢氰酸、总黄酮及主要营养成分含量的变化进行了分析;在此基础上,明确供试3个品种嫩茎叶作为饲料的最佳采收期。结果表明:随种植后时间延长,3个品种嫩茎叶中的氢氰酸和总黄酮含量变化均呈波动趋势,其中,‘华南7号’嫩茎叶的氢氰酸含量在种植后150和210 d显著降低(分别为347.843和320.507 mg·kg^(-1)),‘华南9号’嫩茎叶的氢氰酸含量在种植后150 d最低(313.643 mg·kg^(-1)),‘华南205号’嫩茎叶的氢氰酸含量在种植后210 d最低(75.103 mg·kg^(-1));‘华南7号’和‘华南205号’嫩茎叶的总黄酮含量在种植后120 d最高(分别为1.963%和1.917%),而‘华南9号’嫩茎叶的总黄酮含量则在种植后210 d最高(1.801%)。不同生长期3个木薯品种嫩茎叶的粗蛋白质和粗灰分含量均符合相关动物饲料的标准,而总磷含量均较低。其中,‘华南7号’嫩茎叶的粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维、粗灰分和总钙含量在种植后150 d相对较高,分别为25.273%、7.687%、23.077%、7.157%和1.660%,其无氮浸出物含量(26.823%)相对较低;‘华南9号’嫩茎叶的上述5种营养成分含量在种植后120 d相对较高,分别为28.050%、6.990%、21.557%、8.467%和1.493%,其无氮浸出物含量(24.723%)相对较低;‘华南205号’嫩茎叶的粗蛋白质、粗脂肪和粗灰分含量在种植后120 d相对较高,分别为24.273%、7.080%和7.633%,其粗纤维(18.470%)、无氮浸出物(32.037%)和总钙(1.323%)含量相对较低。综合分析结果显示:‘华南7号’、‘华南9号’和‘华南205号’嫩茎叶作为饲料的最佳采收时间分别为种植后150、120和120 d。

海蓬子不同部位氨基酸含量分析及营养评价

采用氨基酸自动分析仪对海蓬子不同部位氨基酸组成进行分析和比较,并对其营养价值进行评价。结果表明:海蓬子嫩茎、茎秆、根部位中均含有16种氨基酸,其中必需氨基酸8种,比例比较均衡。海蓬子嫩茎部位蛋白质含量最高,达到16.53%,必需氨基酸含量58.04mg/g、必需氨基酸与非必需氨基酸比值0.59、氨基酸比值系数分65.72,符合WHO/FAO的推荐标准。研究表明,海蓬子嫩茎有较高的营养价值和良好的开发利用前景。

香叶天竺葵的离体培养研究

以香叶天竺葵的嫩茎为外植体进行组织培养研究,结果表明:培养基MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L既适合于愈伤组织的诱导,也适合于不定芽的分化增殖;培养基1/2MS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.7 mg/L为生根诱导的最佳配方。组培苗的过渡成活率可达到90%以上。

核桃试管不定根的组织学研究

以核桃品种‘新早丰’试管嫩茎为试材,采用二步生根法诱导生根,对其试管苗不定根发生发育过程进行了解剖学研究。结果表明:核桃试管嫩茎内未发现潜伏根原基;诱导生根后,不定根原基起源于形成层,特别是髓射线正对的形成层部分,属于诱生根原基型;不定根上的侧根起源于中柱鞘细胞。核桃试管嫩茎不定根的发育过程可分为4个阶段:(1)形成层细胞分裂;(2)转变为分生组织细胞群(即根原始细胞);(3)细胞群发育成可见的根原基; (4)根原基内细胞继续分裂分化形成根尖的外形,其内发育出维管束,并向外生长,穿过皮层,突破茎表皮。在组织培养条件下长出的不定根内部解剖构造为典型的初生构造,移栽后68 d出现次生构造。另外,试管苗根毛出现与否及其发育状况受基质理化性质的影响,即生态条件可以改变组织发生及其形状。