藤梨根提取物通过调控miR-451干预人食管鳞癌EC9706细胞的增殖

目的探讨藤梨根提取物(RAE)对食管鳞癌细胞EC9706增殖的影响及机制。方法采用MTT法检测不同剂量的RAE对人食管鳞癌细胞EC9706的增殖抑制作用,运用RT-PCR检测食管鳞癌细胞株中miR-451表达水平并制备不同浓度的RAE干预食管鳞癌细胞株的生长,并再次运用RT-PCR检测各组食管鳞癌细胞株中miR-451表达水平。结果 RAE对食管鳞癌细胞有毒性作用,当RAE浓度≤10μg/ml时,与空白对照组相比,对于EC9706细胞的抑制率无统计学差异(P>0.05),RAE 100μg/ml和1 000μg/ml的抑制率分别为18.9%、31.1%,与空白对照组比较有显著统计学意义(P<0.05)。RT-PCR法检测两组细胞miR-451的表达程度有显著性差异(P<0.05)。结论不同浓度RAE的细胞毒性不同,在一定范围内与其浓度相关,当其浓度≤10μg/ml时,抑制率较小,为非细胞毒性浓度。RAE在一定的浓度范围内可以上调miR-451的表达水平,是藤梨根治疗食管癌的机制之一。

藤梨根提取物对裸鼠移植人胃癌SGC-7901细胞瘤p53基因蛋白的影响

目的研究藤梨根提取物对人胃癌SGC-7901细胞凋亡的影响及其部分作用机理。方法采用免疫组织化学方法检测p53基因表达。结果藤梨根提取物大、中、小剂量组对人胃癌SGC-7901细胞p53蛋白表达阳性灰度值分别为185.48±1.05,124.05±1.53,95.51±0.19。结论藤梨根提取物抑制SGC-7901 p53蛋白水平的表达有可能是促进SGC-7901凋亡的作用机制。

藤梨根提取物对人胃癌SGC-7901细胞凋亡及Bcl-2的影响

目的研究藤梨根提取物对人胃癌SGC-7901细胞凋亡的影响及其部分作用机理。方法采用不同浓度的藤梨根提取物作用于人胃癌SGC-7901细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫组织化学方法检测Bcl-2基因表达。结果藤梨根作用于SGC-7901,在(8～32)mg/mL时促进该细胞呈不同程度的凋亡;藤梨根提取物大、中、小剂量组对人胃癌SGC-7901细胞Bcl-2蛋白表达阳性灰度值分别为103.41±1.01,104.05±1.239,0.52±1.09。结论藤梨根提取物对SGC-7901有明显促凋亡作用;藤梨根提取物抑制SGC-7901 Bcl-2蛋白水平的表达有可能是促进SGC-7901凋亡的作用机制。

藤梨根乙醇提取物通过AKT/PUMA通路诱导结直肠癌细胞凋亡

目的研究藤梨根乙醇提取物(TLG)对结直肠癌细胞的作用及其抗肿瘤机制。方法利用MTT检测TLG对人结直肠腺癌细胞HCT-15、LoVo的毒性,细胞平板克隆实验检测TLG对结直肠癌细胞HCT-15、LoVo增殖的影响,Hoechst-33258染色法和流式细胞术检测TLG对结直肠癌细胞凋亡的影响,Western blot实验检测TLG对HCT-15中相关蛋白Caspase-3、PARP、P65、PUMA、AKT、GSK-3β表达的影响,双荧光素酶报告基因实验检测TLG对HCT-15中相关启动子活性的影响。结果结直肠癌细胞HCT-15、LoVo经TLG处理后,与对照组相比,细胞活力以时间及剂量依赖性下降(P<0.01,P<0.001),转染AKT cDNA、PUMA siRNA或GSK-3β抑制剂处理后能够恢复增殖(P<0.001);不同浓度TLG处理后,细胞凋亡率提高(P<0.01,P<0.001),转染AKT cDNA或GSK-3β抑制剂处理后能够遏制TLG诱导的凋亡(P<0.01,P<0.001);Western blot显示HCT-15细胞中的p-AKT/AKT、p-GSK-3β/GSK-3β蛋白表达量随TLG浓度上升而减少(P<0.01),Cleaved-Caspase-3/Caspase-3、Cleaved-PARP/PARP、p65、PUMA蛋白表达量随TLG浓度上升而增加(P<0.05,P<0.01,P<0.001),同时转染AKT cDNA、PUMA siRNA或GSK-3β抑制剂处理后能够阻滞TLG对下游蛋白Cleaved-Caspase-3/Caspase-3、Cleaved-PARP/PARP、p65、PUMA的影响(P<0.05,P<0.01,P<0.001);报告基因结果显示NF-κB、PUMA启动子活性随TLG浓度上升而增强(P<0.05,P<0.01),同时转染AKT cDNA或GSK-3β抑制剂处理后恢复(P<0.01,P<0.001)。结论TLG可以显著诱导结直肠癌细胞凋亡,发挥较强的抑制肿瘤作用,其机制可能与AKT/PUMA信号通路有关。

藤梨根提取物通过IL-6/STAT3信号通路调控食管癌细胞生物学行为的研究

目的 探讨藤梨根提取物通过白细胞介素-6/信号传导因子及转录激活因子3(IL-6/STAT3)信号通路调控食管癌EC-9706细胞生物学行为的研究。方法 本实验研究自2018年10月到2019年6月,分别用1、5、10、100、500、1 000 mg/L的藤梨根提取物处理食管癌EC-9706细胞,选取100 mg/L作为最佳逆转实验浓度;用IL-6/STAT3信号通路激活剂处理食管癌EC-9706细胞。甲基噻唑基四唑(MTT)检测细胞的毒性;流式细胞术检测细胞的凋亡率;Transwell法检测细胞的迁移和侵袭;划痕实验检测细胞的运动能力;蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测细胞周期蛋白1(Cyclin D1)、周期蛋白依赖性激酶抑制因子(P21)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、信号传导及转录活化因子3(STAT3)、磷酸化的信号传导与转录激活因子-3(p-STAT3)蛋白的表达。结果 藤梨根提取物明显促进了食管癌EC-9706细胞凋亡(37.35±2.37),并抑制了细胞增殖(21.33±3.91)、迁移(106.31±3.20)和侵袭(67.29±2.99)(P<0.05);下调CyclinD1(0.25±0.01)、Bcl-2(0.26±0.03)、MMP-2(0.27±0.03)、MMP-9(0.25±0.01)、STAT3(0.34±0.03)、p-STAT3(0.20±0.01)蛋白表达,上调Bax(0.85±0.06)、P21(0.72±0.07)蛋白表达(P<0.05)。激活IL-6/STAT3信号通路明显逆转了藤梨根提取物对食管癌EC-9706细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用。结论 藤梨根提取物可促进食管癌EC-9706细胞凋亡,抑制细胞增殖、迁移和侵袭,其机制与抑制IL-6/STAT3信号通路有关。

藤梨根水提取物对人肺癌细胞增殖抑制的影响

目的:研究藤梨根水提取物对人肺癌细胞A549的抑制作用及其机制。方法:用MTT法检测不同剂量的藤梨根水提取物对人肺癌细胞A549的增殖抑制作用。运用免疫印迹法检测各浓度组48hPI3K/Akt信号通路重要蛋白Akt及其磷酸化形式p-Akt的蛋白水平。结果:不同浓度的藤梨根水提取物对人肺癌细胞A549均有抑制作用,且有一定的浓度依赖性。随着浓度升高,p-Akt/Akt值呈降低趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:藤梨根水提取物对人肺癌细胞A549增殖起抑制作用,同时与药物浓度有一定的依赖性,其可能通过抑制PI3K/Akt通路激活实现。

藤梨根乙醇提取物诱导小细胞肺癌凋亡的机制研究

目的:研究藤梨根乙醇提取物(TLG)对H1688、H446细胞凋亡的影响,并探究其相关的分子机制。方法:用不同浓度TLG处理H446、H1688细胞:使用MTT法检测细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡状况;Western blot检测Erk1/2、Foxo3a、PUMA、Cleaved PAr P蛋白表达量。结果:经TLG处理后,与不加药组相比,细胞的增殖抑制率以剂量依赖性形式增加;细胞凋亡率增加;Western Blot显示Erk1/2蛋白表达量随着TLG浓度的增加而降低;Foxo3a、PUMA、Cleaved PAr P蛋白表达量随着TLG浓度的增加而增加。结论:TLG可促进小细胞肺癌细胞H1688、H446的凋亡,其机制可能是通过Erk1/2-Foxo3a-PUMA轴发挥作用。