PTEN基因编码产物与子宫内膜癌发生发展的相关性研究

背景与目的:第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因(phosphataseandtensionhomologydeletedonchromosometen,PTEN)是迄今发现的第一个具有磷脂酶活性的抑癌基因,该基因突变或缺失及蛋白表达异常与多种肿瘤的发生、发展密切相关。本研究旨在探讨抑癌基因PTEN与子宫内膜癌发生、发展的关系。方法:应用半定量逆转录聚合酶链反应(reversetranscriptionpolymerasechainreaction,RT-PCR)方法测定24例子宫内膜癌组织、10例子宫内膜非典型增生组织、10例子宫内膜增生组织和10例正常子宫内膜组织的PTENmRNA表达水平;SP免疫组化法测定73例子宫内膜癌组织(其中腺癌57例)、25例子宫内膜非典型增生组织、71例子宫内膜增生组织和31例正常子宫内膜组织的PTEN蛋白表达水平,并将结果与各病例的组织学类型、组织学分级、肌层浸润深度和临床分期等生物学行为进行相关性分析。结果:在转录水平和蛋白水平,子宫内膜腺癌组和癌前病变组中PTEN的表达均明显低于内膜增生症组和正常子宫内膜组,各组组织中PTENmRNA相对含量分别为0.35±0.13、0.46±0.11、2.32±0.32、2.45±0.51;PTEN蛋白表达缺失率分别为66.67%(38/57)、76.00%(19/25)、5.63%(4/71)和0%(0/31)。PTEN蛋白表达缺失率与其组织学类型和组织学分级有关(P均<0.01),?

PTEN与P-AKT在胃癌中的表达及意义

目的:检测人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)与磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B(P-AKT)在胃癌和癌旁组织中的表达,探讨它们在胃癌发生、发展中的作用。方法:应用免疫组织化学EliVision法,检测68例胃癌及其癌旁组织中PTEN和P-AKT蛋白表达水平,同时对68例胃癌和癌旁组织采用反转录-聚合酶链反应检测其中PTEN mRNA的表达。结果:PTEN蛋白在胃癌组织中表达低于癌旁组织(P<0.01),P-AKT蛋白在胃癌组织中表达高于癌旁组织(P<0.01),两者呈负相关关系(P<0.05)。胃癌组织中PTEN蛋白的表达在性别和年龄间差异均无统计学意义(P>0.05),但在分化程度、肿瘤大小、临床分期和淋巴结转移表达差异均有统计意义(P<0.01)。胃癌组织中P-AKT蛋白表达在性别、年龄和肿瘤大小间差异均无统计学意义(P>0.05),但在分化程度、临床分期和淋巴结转移间表达差异均有统计学意义(P<0.05)。胃癌组织PTEN mRNA的半定量表达明显低于癌旁组织PTEN mRNA的半定量表达(P<0.01)。结论:PTEN基因在胃癌组织中低表达,癌旁组织蛋白表达也明显高于胃癌组织,P-AKT蛋白在胃癌组织中的表达高于癌旁组织,两者在胃癌中的表达呈负相关。

VEGF/PTEN及下游信号通路在侵袭性垂体瘤中的表达及其临床意义

目的探讨侵袭性垂体瘤中血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)与人第10号染色体缺失的磷酸酶(gene of phosphate and tension homology deleted on chromsome ten,PTEN)表达水平及其下游信号通路的变化的临床意义。方法收集医院神经外科手术后垂体瘤标本62例(侵袭组32例,非侵袭组30例)和60例正常垂体组织标本(对照组)。通过实时定量PCR和蛋白质印迹法检测比较VEGF、PTEN、磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶(phosphate-Serine/threonine Kinase,p-Akt)、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶(phosphate-mitogen-activated protein kinase,p-MAPK)在垂体瘤和正常垂体组织之间的表达差异。结果垂体瘤标本中VEGF的表达水平显著高于对照组(P<0.05),在侵袭组(3.61±0.16)中的表达高于非侵袭组(2.06±0.13),差异有统计学意义(t=10.60,P<0.05),而PTEN在垂体瘤标本中的表达显著低于对照组(P<0.05),尤其在侵袭组(0.42±0.10)中的表达显著降低(t=6.31,P<0.05)。垂体瘤标本中p-Akt和p-MAPK水平显著高于对照组(P<0.05),且侵袭组(p-Akt 3.90±0.14;p-MAPK 2.52±0.11)明显高于非侵袭组(p-Akt 2.27±0.11;p-MAPK 1.89±0.05)(p-Akt,t=12.95,P<0.05;p-MAPK t=7.29,P<0.05)。结论侵袭性垂体瘤中VEGF、p-Akt及p-MAPK水平明显增高,而PTEN表达水平显著降低,提示上述变化可能与垂体瘤的侵袭性相关,其可能为诊断并治疗侵袭性垂体瘤靶点的选择提供新方向。

miRNA-381靶向PTEN对胃癌细胞增殖与凋亡的影响及相关机制研究

目的探讨与研究miRNA-381靶向10号染色体上磷酸酶与张力蛋白同源缺失基因(PTEN)对胃癌细胞增殖与凋亡的影响及相关机制。方法将处于对数生长期的BGC-823细胞平均分为三组:对照组、实验1组与实验2组,分别转染miRNA NC 20 nmol/L与miRNA-381 mimic 20 nmol/L、40 nmol/L。采用MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Transwell小室实验检测细胞迁移情况,实时定量PCR检测miRNA-381表达情况,Western blotting检测PTEN蛋白表达情况。结果转染后24 h、48 h,实验1组与实验2组的细胞增殖指数、细胞迁移指数、miRNA-381表达量高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);实验2组高于实验1组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。实验2组与实验1组的细胞凋亡指数、PTEN蛋白相对表达量均显著低于对照组,实验2组也较实验1组显著降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与转染后24 h相比,转染后48 h三组细胞增殖指数、凋亡指数、迁移指数以及miRNA-381相对表达量均显著增加,而PTEN蛋白相对表达量仅对照组显著增加,两个实验组均显著降低(P<0.05)。结论在胃癌细胞中,miRNA-381可通过靶向抑制PTEN表达,从而促进胃癌细胞增殖与迁移,抑制胃癌细胞的凋亡。

抑癌基因PTEN蛋白在肺癌组织表达的临床病理学意义

目的 研究抑癌基因PTEN蛋白在肺癌组织中的表达情况及其临床病理学意义。方法 应用免疫组织化学S -P法检测 66例肺癌组织中PTEN蛋白的表达 ,另有 1 0例癌旁肺组织作为对照组。结果 肺癌组织中PTEN蛋白的阳性表达率 2 7.3 % (1 8 66) ,显著低于癌旁肺组织 (90 .0 % ,9 1 0 ) ;PTEN在高中分化鳞癌组及低分化鳞癌组的阳性表达率分别为 55 .6 %和 0 ,具有显著性差异 (P <0 .0 1 ) ;PTEN蛋白阳性表达率与肺癌患者的年龄、性别、肿瘤体积、组织学类型、TNM分期及淋巴结转移均无明显关系 (P >0 .0 5)。结论 PTEN基因在肺癌的发生发展过程中起一定作用 ;

PTEN基因蛋白、Ptch在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探讨磷酸酶及张力蛋白同源基因蛋白(PTEN)、补丁蛋白(Ptch)在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义。方法选取口腔鳞状细胞癌组织标本78例,同时选取正常口腔组织标本56例作为对照,采用免疫组化染色法检测PTEN、Ptch蛋白表达。结果口腔鳞状细胞癌中PETN阳性表达率为34.62%,明显低于正常口腔组织(P<0.05),而Ptch阳性表达率为67.95%,明显高于正常口腔组织(P<0.05);TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、中低分化和有淋巴结转移口腔鳞状细胞癌组织PETN阳性表达率分别为13.04%、10.00%和11.43%,明显低于Ⅰ~Ⅱ期、高分化和无淋巴结转移口腔鳞状细胞癌组织(P<0.05);TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移口腔鳞状细胞癌组织Ptch阳性表达率为86.96%和88.57%,明显高于Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移口腔鳞状细胞癌组织(P<0.05);口腔鳞状细胞癌组织中PETN表达与Ptch表达呈负相关(γ_(s)=-0.655,P<0.05)。结论口腔鳞状细胞癌组织中PTEN表达下调,而Ptch表达上调,两者与临床病理特征有一定关系,且两者间存在负相关性。

人舌鳞癌组织PTEN低表达、STING高表达与不良预后相关

目的探究人舌鳞状细胞癌(TSCC)组织中第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN);干扰素基因刺激因子(STING)的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学EnVision法检测65例TSCC和癌旁组织中PTEN、STING蛋白的表达,应用统计学的方法分析PTEN、STING与临床病理参数、总生存期及预后的关系。结果与癌旁组织相比,PTEN在TSCC中表达明显降低,STING表达明显升高,PTEN与STING呈负相关。在TSCC中,PTEN、STING的表达与病理分级、TNM分期和淋巴结转移相关。PTEN、STING表达强度与患者性别和年龄无明显相关性。TSCC组织中PTEN的低表达、STING的高表达与患者的不良预后显著相关,患者术后总生存期明显缩短。结论PTEN低表达、STING高表达的舌鳞癌患者预后不良、生存期短,联合检测PTEN与STING有助于肿瘤进展及患者预后评估。

miR-383-3p靶向PTEN/PI3K/Akt/mTOR信号通路对冠心病大鼠内皮细胞凋亡的影响

目的:探究微小RNA-383-3p(miR-383-3p)靶向调节人第10号染色体缺失的磷酸酶/磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白(PTEN/PI3K/AKT/mTOR)信号通路对冠心病(CHD)大鼠内皮细胞凋亡的影响。方法:将SD大鼠分为control组、CHD组、mimic NC组、miR-383-3p mimic组、miR-383-3p mimic+pcDNA3.1组、miR-383-3p mimic+pcDNA3.1-PTEN组,每组15只;除control组外其余组大鼠通过高脂饲料喂养及垂体后叶素注射构建CHD模型,造模前24h,将慢病毒液或质粒载体注射到相应组大鼠中;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测冠状动脉miR-383-3p表达;全自动生化分析仪测定大鼠血脂水平;酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清内皮素-1(ET-1)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血管内皮生长因子(VEGF)、一氧化氮(NO)水平;HE染色及TUNEL法观察冠状动脉组织病理变化及内皮细胞凋亡情况;双荧光素酶报告基因实验验证miR-383-3p与PTEN靶向关系;Western blot检测冠状动脉组织Bcl-2、Bax及PTEN/PI3K/Akt/mTOR通路蛋白表达。结果:与control组相比,CHD组大鼠miR-383-3p、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、VEGF、NO、Bcl-2、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR水平显著减少,三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)、ET-1、AngⅡ水平、冠状动脉组织病理损伤程度、内皮细胞凋亡指数(AI)、Bax、PTEN表达显著升高(P<0.05);与CHD组相比,miR-383-3p mimic组miR-383-3p、HDL-C、VEGF、NO、Bcl-2、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR水平显著增加,TG、LDL-C、TC、ET-1、AngⅡ水平、冠状动脉组织病理损伤程度、内皮细胞AI、Bax、PTEN表达显著减少(P<0.05);过表达PTEN可逆转miR-383-3p高表达对CHD大鼠内皮细胞凋亡及功能损伤的改善作用;PTEN是miR-383-3p的靶向基因。结论:miR-383-3p可通过靶向抑制PTEN表达来激活PI3K/Akt/mTOR信号通路,与抑制CHD大鼠内皮细胞凋亡密切相关。

microRNA-10调控PTEN基因在促进胰腺癌细胞增殖和迁移的作用

目的:研究胰腺癌患者血浆和癌组织中microRNA(miRNA)-10和张力蛋白同源物基因(PTEN)的表达,并探讨两者在胰腺癌中的调控关系;研究miRNA-10在人胰腺癌PANC-1细胞中的表达及其对PANC-1细胞增殖和迁移的影响。方法:选择80例胰腺癌患者为研究组及80例健康体检者为对照组。采用实时荧光定量PCR技术检测胰腺癌患者血浆中miRNA-10和PTEN基因及组织中miRNA-10的表达,并分析miRNA-10和PTEN基因表达的相关性。采用四甲基偶氮唑盐法和细胞集落形成实验研究miRNA-10在人胰腺癌PANC-1细胞生长和增殖能力,采用划痕实验检测细胞的迁移能力。结果:两组血浆中miRNA-10和PTEN mRNA的表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。miRNA-10和PTEN mRNA在胰腺癌患者血浆中表达呈线性负相关(r=-0.716,P<0.01)。miRNA-10在胰腺癌患者血浆和组织中表达呈正相关(r=0.938,P<0.01)。MTT法检测结果显示,miRNA-10细胞转染24、48、72、96 h的A值均高于对照组(P<0.05)。平板克隆形成实验检测结果显示:miRNA-10转染2周后,miRNA-10转染的细胞克隆数均高于对照组(P<0.05)。划痕实验结果显示:转染miRNA-10分别在24、48 h的PANC-1细胞中,miRNA-10划痕间距与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);PTEN组与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:PTEN可能是miRNA-10的作用靶点,miRNA-10通过负性调控PTEN基因参与胰腺癌的发生发展、侵袭和转移,miRNA-10可作为胰腺癌的辅助诊断的一个新的检测指标。

血清CA199、HE4、PTEN联合检测对子宫内膜癌病情及预后的评估价值

目的分析血清糖类抗原199(CA199)、人附睾蛋白4(HE4)、人第10号染色体缺失的磷酸酶与张力蛋白同源物基因(PTEN)联合检测对子宫内膜癌病情及预后的评估价值。方法选择2018年1月—2020年2月收治的子宫内膜癌91例作为观察组,另选取同期治疗的子宫内膜增生87例作为对照组,以及健康体检者81例作为健康组。比较3组、不同国际妇产科联合会分期子宫内膜癌患者及不同预后子宫内膜癌患者的血清CA199、HE4、PTEN水平,并分析三者联合检测对子宫内膜癌患者预后的评估价值。结果观察组和对照组血清CA199、HE4水平高于健康组,PTEN水平低于健康组;且观察组血清CA199、HE4水平高于对照组,PTEN水平低于对照组(P<0.05)。Ⅰ~Ⅱ期子宫内膜癌患者血清CA199、HE4水平低于Ⅲ~Ⅳ期患者,PTEN水平高于Ⅲ~Ⅳ期患者(P<0.05)。预后良好组血清CA199、HE4水平低于预后不良组,PTEN水平高于预后不良组(P<0.05)。CA199、HE4、PTEN联合检测评估子宫内膜癌患者预后不良的曲线下面积为0.917,明显高于CA199、HE4、PTEN单独检测。结论随着子宫内膜癌患者病情进展血清CA199、HE4水平升高,PTEN水平下降,三者联合检测可为子宫内膜癌预后评估提供参考。

PTEN与Cyclin G1蛋白在婴幼儿血管瘤组织中的表达及意义

目的:探究血管瘤组织第10号染色体丢失的磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)与细胞周期素G1(Cyclin G1)的表达。方法:回顾性分析142例血管瘤患儿临床资料,比较血管瘤瘤体组织与瘤旁组织、增殖期与消退期血管瘤组织、术后6个月内复发与未复发血管瘤组织PTEN、Cyclin G1蛋白表达情况,以受试者工作特征(ROC)曲线评估上述指标对血管瘤复发的预测效能,通过Pearson相关系数模型分析上述指标与血管瘤表面积、深度、微血管密度(MVD)的相关性。结果:PTEN蛋白表达情况比较显示,血管瘤瘤体组织明显低于瘤旁组织,增殖期血管瘤组织明显低于消退期血管瘤组织,预后复发血管瘤组织明显低于预后未复发血管瘤组织(P<0.05);Cyclin G1蛋白表达情况比较显示,血管瘤瘤体组织明显高于瘤旁组织,增殖期血管瘤组织明显高于消退期血管瘤组织,预后复发血管瘤组织明显高于预后未复发血管瘤组织(P<0.05)。且PTEN、Cyclin G1蛋白表达水平联合预测复发的灵敏度与特异度可达64.10%、78.64%。血管瘤组织PTEN蛋白表达与病灶表面积、深度、MVD均呈显著负相关性(r<0,P<0.05),Cyclin G1蛋白表达与病灶表面积、深度、MVD均呈显著正相关性(r>0,P<0.05)。结论:血管瘤组织存在PTEN蛋白低表达与Cyclin G1蛋白过表达情况,且表达水平与病情、预后均联系紧密,可为疾病发生、发展的机制研究及临床预后评估提供指导。

结直肠癌血浆中microRNA-181和PTEN基因与病理分期的关系

目的:研究结直肠癌(Colorectal cancer, CRC)患者血浆和癌组织中microRNA-181和张力蛋白同源物基因(PTEN)的表达及其与临床分期,并探讨CRC在结直肠癌中的诊断价值。方法:选择120例结直肠癌患者及100例健康体检者为对照。采用实时荧光定量PCR技术检测结直肠癌患者血浆中miRNA-181和PTEN基因、以及组织中miRNA-181的表达,采用免疫组织化学技术检测结直肠癌患者血浆和组织PTEN蛋白的表达,并分析miRNA-181和PTEN蛋白表达与结直肠癌病理分期的关系。采用四甲基偶氮唑盐法和细胞集落形成实验研究miRNA-181和PTEN在CRC细胞株SW 1116生长和增殖能力。结果:与正常对照组比较,结直肠癌患者血浆中miRNA-181明显升高(0.58 &#177;0.23 vs 3.28 &#177;0.46 (P 【0.01),血浆中PTEN基因明显下降(5.37 &#177;1.34 vs 0.26 &#177;0.21) (P = 0.01)。与癌旁正常结直肠粘膜组织比较,结直肠癌组织PTEN蛋白阳性表达率明显降低(100% vs 36.67%) (P 【0.001);随着分期恶性度的升高,miRNA-181相对表达量增加,PTEN基因和蛋白的表达下降,各组间比较差异均有统计学意义(P 【0.01, P 【0.001)。四甲基偶氮唑盐法显示miRNA-181组在不同时间的CRC细胞株SW 1116生长速度加快,PTEN组细胞生长落后(P 【0.01, P 【0.001, P 【0.001)。平板克隆形成实验显示miRNA-181组在CRC细胞株SW 1116增殖能力增强,PTEN组细胞增殖能力减弱(P 【0.001)。结论:miRNA-181和PTEN在CRC血浆和组织中的异常表达与结直肠癌病理分期密切相关,miRNA-181对结直肠癌的辅助诊断和预后监测具有重要的临床意义。

加味桂枝茯苓丸通过PTEN/PI3K/Akt通路调控线粒体凋亡途径预防小鼠结直肠腺瘤的作用机制

目的:探讨加味桂枝茯苓丸通过磷酸酯酶与张力蛋白同源物(PTEN)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路调控线粒体凋亡途径预防小鼠结直肠腺瘤(CRA)的作用及机制。方法:将60只SPF级C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组、模型组、加味桂枝茯苓丸低、中、高剂量组(13、26、52 g·kg^(-1)·d^(-1)),阳性药阿司匹林组(0.015g·kg^(-1)·d^(-1)),通过氧化偶氮甲烷(AOM)/葡聚糖硫酸钠(DSS)化学诱导CRA小鼠模型,造模同时灌胃给予加味桂枝茯苓丸或阿司匹林。给药期间,每周检测各组小鼠体质量;9周后,观察腺瘤形成数目;酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察腺瘤组织病理变化;免疫组织化学法(IHC)检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)和细胞增殖核抗原(Ki67)的表达;原位末端转移酶标记法(TUNEL)检测腺瘤组织细胞凋亡情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)观察PTEN、PI3K、Akt、磷酸化PI3K(p-PI3K)、磷酸化Ak(p-Akt)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞色素C(Cyt C)、胱天蛋白酶-9(Caspase-9)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA和蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组小鼠体质量在第1周至第2周无明显变化,第3周至第9周明显降低(P<0.05,P<0.01);结直肠长度显著缩短,结直肠重量显著增加,黏膜表面可见大小不等的瘤样突起(P<0.01);血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平升高(P<0.01);小鼠肠上皮腺体结构紊乱,细胞核明显拉长且可见病理性核分裂,固有层可见大量淋巴细胞小灶性浸润;Cyclin D1、Ki67阳性表达率显著升高(P<0.01);腺瘤细胞凋亡率显著降低(P<0.01);腺瘤组织PI3K、Akt、Bcl-2 mRNA和蛋白表达显著增强(P<0.01),p-PI3K、p-Akt蛋白表达显著增强(P<0.01),PTEN、Bax、Cyt C、Caspase-9、Caspase-3 mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,各给药组小鼠体质量上升(P<0.01);肠道重量减轻,结直肠长度增加,腺瘤数量明显减少(P<0.05,P<0.01);血清TNF-α、IL-6、IL-1β含量显著降低(P<0.01);肠上皮腺体结构紊乱及黏膜固有层中性粒细胞浸润程度有所改善;Cyclin D1、Ki67阳性表达率显著下降(P<0.01);腺瘤组织细胞凋亡率明显增加(P<0.05,P<0.01);腺瘤组织PI3K、Akt、Bcl-2 mRNA和蛋白表达下降(P<0.05,P<0.01),p-PI3K、p-Akt蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),PTEN、Bax、Cyt C、Caspase-9、Caspase-3 mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01),以加味桂枝茯苓丸高剂量组干预效果最为显著。结论:加味桂枝茯苓丸可能通过调控PTEN/PI3K/Akt信号通路,进而诱导线粒体凋亡途径发挥预防小鼠CRA的作用。

环孢素A对兔晶状体上皮细胞增殖过程中磷酸肌醇-3激酶途径的影响

目的:研究环孢素A对白内障术后晶状体上皮细胞增殖过程中磷酸肌醇-3激酶(phosphatidylinositol-3 kinase,PI-3 k)途径的影响,为后发性白内障的治疗提供实验依据。方法:将健康白色家兔30只60眼,行双眼透明晶状体皮质吸除术,右眼为治疗组,左眼为对照组。术后第1d起,对照组眼用生理盐水点眼6次,而治疗组眼应用1%环孢素A(cyclosporine A,Cs A)眼药水点眼6次。分别在术后第1d未点药前、术后1wk,2wk,1mo和2mo各处死随机选择的6只兔,摘取双眼球。应用免疫组织化学、原位杂交方法检测赤道部晶状体上皮细胞中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)及张力蛋白同源的28号染色体缺失磷酸酯酶mRNA(PTEN mRNA)和Ser473-R的表达。结果:术后两组PCNA和Ser473-R的表达均逐渐降低,其中1wk(0.690±0.035 vs 0.785±0.015,t=6.099,P<0.01)和2wk(0.571±0.038 vs 0.670±0.037,t=4.585,P<0.01)时治疗组PCNA表达均显著低于对照组。另外,1wk(0.374±0.031 vs 0.435±0.030,t=3.486,P=0.006)和2wk(0.220±0.022 vs 0.251±0.020,t=2.516,P=0.031)时治疗组Ser473-R的表达均显著低于对照组。术后1wk^1mo时,两组PTEN mRNA均逐渐回升。术后1wk,治疗组A值显著高于对照组(0.302±0.027 vs 0.255±0.038,t=2.474,P=0.033)。结论:环孢素A对兔眼白内障术后晶状体上皮细胞增殖过程中PI-3k途径有显著抑制作用,为研究CsA抑制后发性白内障提供实验依据。

66例乳腺癌的分子病理学研究

目的:研究人类乳腺癌组织中与张力蛋白同源第10号染色体缺失的磷酸酶基因(PTEN)和过氧化物酶体增长因子活化受体γ(PPARγ)蛋白及其与相关分子病理学指标表达的关系和临床意义,为乳腺癌的分子病理分型提供基础研究依据。方法:随机选取我院临床证实66例乳腺癌患者的临床资料及病理切片,利用免疫组织化学链霉素抗生物素-过氧化物酶(SP)法检测乳腺癌组织中PTEN、PPARγ、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、Her-2蛋白的表达,分析乳腺癌组织中PTEN和PPARγ蛋白表达与患者淋巴结转移率及Her-2、ER、PR表达之间的关系。结果:乳腺癌组织中PTEN和PPARγ蛋白表达阳性率分别为68.2%、63.6%,PTEN阳性表达主要在细胞核内,占72.86%,胞浆占27.14%,PPARγ阳性表达在核膜占87.3%。相关分析表明PTEN与PPARγ、ER、PR、HER-2表达无显著相关(P均>0.05),PPARγ与ER、PR、HER-2表达无显著相关(P均>0.05)。PTEN阳性表达乳腺癌患者淋巴结转移率为48.97%,阴性表达淋巴结转移率为46.04%。PPARγ阳性表达乳腺癌患者淋巴结转移率为53.96%,阴性表达淋巴结转移率为43.64%。结论:PTEN、PPARγ可能作为独立的乳腺癌预后标记物,对乳腺癌生物治疗和临床预后提供依据。

基质金属蛋白酶-9及张力蛋白同源基因在牙龈癌中的表达以及临床意义

目的探讨基质金属蛋白酶（MMP）-9以及张力蛋白同源基因（PTEN）在牙龈癌组织的表达情况及临床意义。方法选取固原市人民医院2013年6月~2016年12月就诊的牙龈癌患者50例,研究MMP-9以及PTEN在牙龈癌组织的表达。结果牙龈癌组中PTEN的阳性率为54.00%,正常组织PTEN的阳性率为94.00%,正常对照组PTEN阳性率明显高于牙龈癌组（P〈0.05）;牙龈癌组中MMP-9的阳性率为76.00%,正常对照组的阳性率为20.00%,牙龈癌组明显高于正常对照组（P〈0.05）。MMP-9与PTEN在牙龈癌组织的表达与性别、年龄、组织分化无关,与淋巴结转移、组织浸润情况相关（P〈0.05）。结论 PTEN在牙龈癌组织中低表达,MMP-9在牙龈癌组织中呈高表达。PTEN、MMP-9与牙龈癌的发生、发展密切相关。因此提示MMP-9阳性是牙龈癌的危险因素,而PTEN阳性则是牙龈癌的保护因素。

妇科再造丸含药血清对子宫肌瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的:观察妇科再造丸(FKW)含药血清对体外培养子宫肌瘤细胞增殖和凋亡的影响及对人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)蛋白表达的调控作用。方法:取手术切除的子宫肌瘤标本,分离人子宫肌瘤原代细胞培养至3~4代;雌性SD大鼠灌喂高、中、低剂量FKW药液3d,取大鼠血清作用于培养的3~4代的子宫肌瘤细胞,采用MTT法检测细胞的增殖活力,流式细胞术检测细胞的凋亡率,免疫细胞化学法测定PTEN蛋白表达情况。结果:成功进行人子宫肌瘤细胞原代培养,培养至3~4代的子宫肌瘤细胞纯度接近100%;FKW各剂量组含药血清作用72h后能显著降低子宫肌瘤细胞的增殖活力(P<0.05),提高其凋亡率(P<0.01),并且能上调子宫肌瘤细胞PTEN的表达(P<0.01)。结论:FKW含药血清抑制子宫肌瘤细胞增殖,诱导其凋亡的作用可能是通过上调PTEN表达实现的。

环磷酰胺及其代谢产物作用于卵巢癌细胞SKOV3后对PTEN基因的影响

目的探讨环磷酰胺(CP)及其代谢产物丙烯醛(ACR)作用卵巢癌细胞SKOV3后对人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)的影响。方法选择不同浓度CP及其代谢产物ACR作用重组PTEN蛋白,采用硝基苯磷酸二钠(PNPP)检测PTEN的磷酸化活性,Western blot技术检测蛋白表达,通过生物素与蛋白结合检测药物与蛋白的结合方式;同时分析PTEN基因通路P53/TP53的表达改变;不同药物浓度作用细胞后通过免疫沉淀(IP)方法得到目的蛋白,通过高效液相色谱(HPLC)检测其蛋白磷酸化活性。结果药物代谢产物作用重组PTEN蛋白后其磷酸化活性随着药物浓度的增高而降低,ACR抗体作用表达随着药物浓度增高表达增多,不同实验组蛋白与生物素表达随药物浓度增高而增多,在细胞中随着药物浓度增高PTEN磷酸化活性降低,TP53蛋白表达随着药物浓度增加而减少。结论 CP代谢产物ACR可通过抑制PTEN蛋白磷酸化活性引起细胞毒性。

四逆汤协同壮观霉素B1诱导PTEN与SUMO1解离治疗肺癌的研究

目的从蛋白质类泛素化修饰角度解析温里剂四逆汤协同壮观霉素B1抑制肺癌细胞增殖、迁移和促进细胞凋亡的作用机制。方法实验分对照组、壮观霉素B1组、四逆汤组和联合药物组,于人非小细胞肺癌A549细胞株作用48 h后,采用Westernblotting法检测小泛素相关修饰蛋白-1(SUMO1)、10号染色体缺失磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)、磷酸化Akt(p-AKT)和Caspase-9的蛋白表达水平;MTT实验绘制细胞增殖曲线;流式细胞术检测细胞凋亡;细胞划痕和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭。结果壮观霉素B1和四逆汤均能够降低A549细胞共价态SUMO1和p-Akt水平,增加PTEN和活化Caspase-9的蛋白水平,抑制细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡,壮观霉素B1和四逆汤联合药物组对细胞的抑制作用显著强于各单独给药组。结论四逆汤能够协同壮观霉素B1诱导PTEN与SUMO1解离,进而抑制肺癌细胞增殖、转移和促进细胞凋亡。

抑癌基因PTEN及其与急性白血病相关性研究

抑癌基因PTEN是迄今为止发现的第一个具有双特异性磷酸酶活性的抑癌基因。PTEN基因的缺失或异常表达与多种肿瘤的发生发展密切相关。在急性白血病中,PTEN基因发生异常改变,影响了细胞增殖周期的调控和细胞凋亡等过程。PTEN基因的研究,为急性白血病的药物治疗及基因靶向治疗提供理论依据。