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大肠癌患者血清畸胎瘤衍生生长因子1临床检测意义 被引量:4
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作者 范钰 王崇强 +2 位作者 张尤历 吴莺 曹亮 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2007年第6期488-489,492,共3页
目的:探讨检测大肠癌患者血清畸胎瘤衍生生长因子1(teratocarcinoma-derived growth factor1,TDGF1)水平的临床意义。方法:应用sandwich-酶联免疫吸附法(ELISA)技术检测39例大肠癌患者和36例健康者血清中TDGF1含量。结果:大肠癌患者血清... 目的:探讨检测大肠癌患者血清畸胎瘤衍生生长因子1(teratocarcinoma-derived growth factor1,TDGF1)水平的临床意义。方法:应用sandwich-酶联免疫吸附法(ELISA)技术检测39例大肠癌患者和36例健康者血清中TDGF1含量。结果:大肠癌患者血清TDGF1水平明显高于对照组(P<0.0001);大肠癌患者血清TDGF1含量和患者的年龄、性别及组织病理分化程度无关,而与淋巴结转移、肝转移和Duke′s分期密切相关。结论:血清TDGF 1有可能成为一个新的肿瘤标志物而用于评价大肠癌进展的指标。 展开更多
关键词 大肠肿瘤 畸胎瘤衍生生长因子1 临床意义
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PEBP4、CR-1在食管癌中表达的临床意义 被引量:3
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作者 罗东 尹杰 柯有力 《广西医学》 CAS 2014年第9期1205-1208,共4页
目的探讨磷脂酰乙醇胺结合蛋白4(PEBP4)、畸胎瘤衍化生长因子(CR-1)在食管癌组织中表达的临床意义。方法选取食管癌组织(癌组织组)及正常食管黏膜组织(正常组)各30份,分别采用免疫组化法、蛋白质印迹法检测各组PEBP4、CR-1表达水平。结... 目的探讨磷脂酰乙醇胺结合蛋白4(PEBP4)、畸胎瘤衍化生长因子(CR-1)在食管癌组织中表达的临床意义。方法选取食管癌组织(癌组织组)及正常食管黏膜组织(正常组)各30份,分别采用免疫组化法、蛋白质印迹法检测各组PEBP4、CR-1表达水平。结果癌组织组PEBP4表达阳性率为83.3%,显著高于正常组的20.0%(P<0.05);有淋巴结转移及远处转移的癌灶PEBP4表达阳性率显著高于无淋巴结转移及无远处转移癌灶(P<0.05)。癌组织组CR-1表达阳性率为86.7%,显著高于正常组的16.7%(P<0.05);有淋巴结转移及远处转移的癌灶CR-1表达阳性率显著高于无淋巴结转移及无远处转移癌灶(P<0.05)。癌组织组CR-1 mRNA及其蛋白相对表达水平均显著高于正常组(P<0.05)。结论食管癌组织中PEBP4、CR-1阳性表达率较高,对食管癌的早期诊断及预后判断有较高临床价值。 展开更多
关键词 食管癌 磷脂酰乙醇胺结合蛋白4 畸胎瘤衍化生长因子 免疫组化法 蛋白质印迹法
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TDGF-1基因下调对人鼻咽癌细胞生长迁移侵袭的影响
3
作者 沈荣 范钰 龚丹丹 《中国肿瘤外科杂志》 CAS 2011年第5期290-293,共4页
目的探讨TDGF-1基因小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人鼻咽癌细胞迁移侵袭的影响。方法根据TDGF-1基因序列特点设计了siRNA,转染人鼻咽癌CNE-2细胞,分别采用实时定量PCR和蛋白质印迹法检测TDGF-1基因的mRNA和蛋白水平,以软琼... 目的探讨TDGF-1基因小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人鼻咽癌细胞迁移侵袭的影响。方法根据TDGF-1基因序列特点设计了siRNA,转染人鼻咽癌CNE-2细胞,分别采用实时定量PCR和蛋白质印迹法检测TDGF-1基因的mRNA和蛋白水平,以软琼脂集落形成试验观察癌细胞锚着不依赖性增殖能力,以划痕试验方法评测癌细胞的迁移能力;用Boyden模型观察癌细胞侵袭能力。结果 TDGF-1基因siRNA转染组TDGF-1 mRNA和蛋白水平明显下调,且呈浓度和时间依赖性(均P<0.001)。体外试验发现,TDGF-1 siRNA转染可有效抑制鼻咽癌细胞集落生长、侵袭和迁移能力,且与浓度相关(均P<0.005)。结论 TDGF-1在鼻咽癌细胞生长、迁移、侵袭中起着重要的作用;采用TDGF-1 siRNA转染可抑制鼻咽癌细胞侵袭。 展开更多
关键词 鼻咽癌 畸胎瘤衍生生长因子-1基因 癌细胞迁移 癌细胞侵袭 癌细胞生长 小干扰RNA
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特异性siRNA下调Cr-1基因表达对人结直肠癌细胞侵袭的影响
4
作者 朱祥 马圭 +2 位作者 祁卫东 蒋鹏 程范钰 《结直肠肛门外科》 2012年第5期277-280,共4页
目的探讨RNA干扰(RNA interference,RNAi)沉默Cr-1(Cr-1)基因对人结直肠癌细胞侵袭的影响。方法应用Cr-1基因小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染处理结直肠癌SW480细胞后,分别采用荧光实时定量RT-PCR和蛋白质印迹检测Cr-1基因m... 目的探讨RNA干扰(RNA interference,RNAi)沉默Cr-1(Cr-1)基因对人结直肠癌细胞侵袭的影响。方法应用Cr-1基因小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染处理结直肠癌SW480细胞后,分别采用荧光实时定量RT-PCR和蛋白质印迹检测Cr-1基因mRNA和蛋白水平,分别采用软琼脂集落培养试验和Boyden小室模型试验检测癌细胞的锚着不依赖性增殖和侵袭能力。结果 siRNA转染组Cr-1mRNA和蛋白水平明显下调,且呈浓度和时间依赖性(P<0.05)。体外试验发现,Cr-1siRNA可有效抑制结直肠癌细胞集落生长和侵袭能力,且与浓度相关(P<0.05)。结论 Cr-1在结直肠癌细胞侵袭中起着重要的作用,采用Cr-1siRNA转染可抑制结直肠癌细胞侵袭。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 畸胎瘤衍生生长因子-1 侵袭 RNA干扰 小干扰RNA
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靶向cripto siRNA转染对裸鼠实验性大肠癌细胞肝转移的影响
5
作者 钟锡明 范钰 +2 位作者 周永静 陈坚 林庚金 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期202-206,共5页
目的研究cripto基因对人大肠癌细胞迁移、侵袭和肝转移的影响。方法以cripto基因mRNA小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染人大肠癌SW480细胞后,分别采用荧光实时定量RT-PCR和Western blot检测cripto基因mRNA和蛋白水平,以划痕... 目的研究cripto基因对人大肠癌细胞迁移、侵袭和肝转移的影响。方法以cripto基因mRNA小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染人大肠癌SW480细胞后,分别采用荧光实时定量RT-PCR和Western blot检测cripto基因mRNA和蛋白水平,以划痕试验方法评测癌细胞迁移能力;用Boyden模型观察癌细胞侵袭能力。以脾切除法建立裸鼠大肠癌肝转移模型,以cripto siRNA转染48h后的癌细胞接种裸鼠,观察对大肠癌细胞体内肝转移的影响。结果siRNA转染组cripto基因mRNA水平明显降低,且呈浓度和时间依赖性(P<0.001;P<0.001)。体外实验发现,cripto siRNA转染组癌细胞迁移距离和穿膜细胞数目明显低于对照组,且呈浓度依赖性(P<0.05)。体内实验发现,cripto基因siRNA转染组SW480细胞转移率和肿瘤结节数均明显低于对照组(P<0.05;P<0.05)。结论cripto基因在大肠癌肝转移中起着重要的作用;以siRNA下调cripto基因表达,可抑制大肠癌细胞肝转移。 展开更多
关键词 大肠肿瘤 肝转移 畸胎瘤衍生生长因子-1 小干扰RNA
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小干扰RNA下调畸胎瘤衍生生长因子-1基因表达对黑素瘤细胞黏附、侵袭和尿激酶纤溶酶原激活物的影响 被引量:2
6
作者 方娜 丁克云 范钰 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1309-1311,共3页
目的观察畸胎瘤衍生生长因子-1(TDGF-1)基因小干扰RNA对黑素瘤细胞黏附和侵袭的影响。方法培养人黑素瘤A-375、C-918及M14细胞株,以实时荧光定量聚合酶链反应(FQ—PCR)方法检测TDGF—1基因mRNA水平,筛选出TDGF-1表达最高者。采用T... 目的观察畸胎瘤衍生生长因子-1(TDGF-1)基因小干扰RNA对黑素瘤细胞黏附和侵袭的影响。方法培养人黑素瘤A-375、C-918及M14细胞株,以实时荧光定量聚合酶链反应(FQ—PCR)方法检测TDGF—1基因mRNA水平,筛选出TDGF-1表达最高者。采用TDGF-1基因小干扰RNA(siRNA)转染黑素瘤细胞株,分别以FQ—PCR和免疫荧光方法观察TDGF-1基因mRNA和蛋白水平,然后以噻唑蓝(MMT)法检测细胞黏附,以Boyden方法检测癌细胞侵袭力。结果FQ-PCR方法显示,A-375、C-918及M14细胞株TDGF-1 mRNA水平分别为0.589±0.081、0.712±0.065、1.517±0.085;以TDGF-1 siRNA转染黑素瘤M14细胞后,癌细胞TDGF-1基因mRNA和蛋白表达明显下降,且呈浓度依赖性(P〈0.01);细胞黏附结果显示,Con-A、Con—B、3.125nmol/L、6.250nmol/L和12.500nmol/L组吸光度A值分别为0.89±0.15、0.85±0.12、0.62±0.09、0.51±0.08、0.33±0.06。Boyden小室试验结果显示,Con-A、Con-B、3.125nmol/L、6.250nmol/L和12.500nmol/L组穿膜细胞数分别为(37.8±1.6)、(36.9±1.5)、(21.8±1.2)、(11.6±0.8)和(5.6±0.5)个。酶联免疫吸附试验(ELISA)结果显示,Con—A、Con-B、3.125nmol/L、6.250nmol/L和12.500nmol/L组尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)含量分别为(85.2±1.8)、(84.8±1.5)、(51.6±1.2)、(35.6±0.8)、(17.8±0.6)ng/L。结论TDGF-1基因在黑素瘤细胞黏附和侵袭中发挥着重要作用;以siRNA转染黑素瘤细胞,可抑制黑素瘤细胞黏附和侵袭能力,抑制uPA是其重要机制之一。 展开更多
关键词 黑素瘤 畸胎瘤衍生生长因子-1 黏附 侵袭 尿激酶纤溶酶原激活物
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沉默畸胎瘤衍生生长因子-1基因对胰腺癌细胞株PANC1侵袭力的影响 被引量:1
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作者 范钰 吴莺 +1 位作者 徐军 钟锡明 《中华胰腺病杂志》 CAS 2010年第3期199-201,共3页
目的 探讨TDGF-1基因沉默对胰腺癌细胞株PANC1侵袭力的影响.方法 设计并合成3个(S1、S2、S3)靶向TDGF-1基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),筛选出沉默效果最好的siRNA.以该siRNA的不同浓度(3.125、6.25、12.5 nmol/L... 目的 探讨TDGF-1基因沉默对胰腺癌细胞株PANC1侵袭力的影响.方法 设计并合成3个(S1、S2、S3)靶向TDGF-1基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),筛选出沉默效果最好的siRNA.以该siRNA的不同浓度(3.125、6.25、12.5 nmol/L)转染PANC1细胞,并设对照组和脂质体组.采用实时定量PCR和Western blotting检测TDGF-1 mRNA和蛋白表达,以软琼脂集落培养试验和Boyden小室检测癌细胞的锚着不依赖性增殖和侵袭能力,并将转染48 h的细胞接种裸鼠,观察癌细胞的体内侵袭.结果 siRNA转染组细胞的TDGF-1 mRNA和蛋白表达水平呈浓度和时间依赖性下降,且较脂质体组明显降低(P值均<0.01).对照组细胞集落形成数和穿膜细胞数分别为19.8±2.2和49.8±2.6;siRNA组呈浓度依赖性明显减少,12.5 nmol/L转染组分别为5.6±1.2和8.1±1.1.对照组、脂质体组和12.5 nmol/L转染组接种4周后裸鼠种植瘤体积分别为(2.228±0.026)cm3、(2.186±0.028)cm3和(0.728±0.023)cm3.对照组和脂质体组种植瘤侵犯周围肌层组织,转染细胞组未见侵犯.结论 采用RNA干扰技术沉默PANC 1细胞的TDGF-1基因表达可抑制癌细胞的侵袭力. 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 畸胎瘤衍生生长因子-1 肿瘤侵袭 小分子干扰RNA
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特异性siRNA沉默TDGF-1基因表达对乳腺癌细胞迁移侵袭的影响
8
作者 蒋鹏程 范钰 +1 位作者 周永静 武正炎 《中华内分泌外科杂志》 CAS 2010年第5期291-294,共4页
目的 探讨RNA干扰(RNA interference,RNAi)沉默TDGF-1基因表达对乳腺癌细胞侵袭的影响.方法 根据TDGF-1基因序列特点设计3个小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)后,转染人乳腺癌MDA-MB-468细胞,用荧光实时定量RT-PCR筛选出效果... 目的 探讨RNA干扰(RNA interference,RNAi)沉默TDGF-1基因表达对乳腺癌细胞侵袭的影响.方法 根据TDGF-1基因序列特点设计3个小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)后,转染人乳腺癌MDA-MB-468细胞,用荧光实时定量RT-PCR筛选出效果最好的siRNA.以该siRNA转染处理乳腺癌MDA-MB-468细胞后,分别采用实时定量RT-PCR和western blot检测TDGF-1基因mRNA和蛋白水平,以划痕试验方法评测癌细胞迁移能力;用Boyden模型观察癌细胞侵袭能力.结果 根据TDGF-1基因序列特点设计的3个siRNA均能抑制TDGF-1基因mRNA水平,以S1效果最好.S1 siRNA转染组TDGF-1 mRNA和蛋白水平明显下调,且呈浓度和时间依赖性(P<0.001,P<0.001).体外试验发现,TDGF-1 siRNA转染可有效抑制乳腺癌细胞集落生长、侵袭和迁移能力,且与浓度相关(P<0.005,P<0.005,P<0.005).结论 TDGF-1在乳腺癌细胞迁移、侵袭中起着重要的作用;采用TDGF-1 siRNA转染可抑制乳腺癌细胞侵袭. 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 畸胎瘤衍生生长因子-1 迁移 侵袭 小干扰RNA
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沉默畸胎瘤衍生生长因子-1基因表达对前列腺癌细胞迁移能力的影响
9
作者 吴鼎 时湛 +1 位作者 汤润 孙晓青 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第12期2035-2037,共3页
目的探讨小干扰RNA(siRNA)沉默畸胎瘤衍生生长因子-1(TDGF-1)基因对人前列腺癌细胞PC3迁移的影响及机制。方法通过Silintfect分别将阴性对照siRNA、TDGF-1 siRNA转染到PC3细胞,空白(Blank)组无需特殊处理。分别纯化各组所提取的... 目的探讨小干扰RNA(siRNA)沉默畸胎瘤衍生生长因子-1(TDGF-1)基因对人前列腺癌细胞PC3迁移的影响及机制。方法通过Silintfect分别将阴性对照siRNA、TDGF-1 siRNA转染到PC3细胞,空白(Blank)组无需特殊处理。分别纯化各组所提取的总RNA和蛋白;运用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法检测TDGF-1 mRNA和蛋白表达变化、Western blot法测上皮-间充质转化(EMT)相关标志物蛋白:波形蛋白(Vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)的表达变化。Transwell观察细胞迁移能力的变化。结果与阴性对照(0.988±0.011)、空白组(1.000±0.000)比较,实验干扰组(0.250±0.046)的TDGF-1 mRNA相对表达量明显降低(P=0.007,P=0.006)。干扰组的TDGF-1、N-cadherin、Vimentin蛋白的表达量较阴性对照、空白组明显降低,E-cadherin蛋白则显著升高。Transwell实验结果示实验组[(84.667±7.572)个]细胞的迁移能力较空白组[(174.333±10.017)个]、阴性对照组[(168.333±4.041)个]明显减弱(P=0.022,P=0.025)。结论下调TDGF-1基因的表达能够减弱细胞的迁移能力,其机制可能与EMT有关。 展开更多
关键词 畸胎瘤衍生生长因子-1 前列腺癌 小干扰RNA 上皮-间充质转化 迁移
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人畸胎瘤衍化生长因子原核表达载体的构建及表达
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作者 王宏丽 石莹 +6 位作者 石晶 杨媚婷 鲍永利 于春雷 孙颖 乌垠 李玉新 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2009年第35期5051-5053,共3页
目的:构建人畸胎瘤衍化生长因子(teratocarcinoma-derived growth factor-1,TDGF-1)原核表达载体,进一步探讨其生物学作用及机制。方法:从人肝癌细胞系HepG2中提取总RNA,利用TDGF-1特异性引物通过RT-PCR方法扩增TDGF-1 cDNA,克隆入pHB... 目的:构建人畸胎瘤衍化生长因子(teratocarcinoma-derived growth factor-1,TDGF-1)原核表达载体,进一步探讨其生物学作用及机制。方法:从人肝癌细胞系HepG2中提取总RNA,利用TDGF-1特异性引物通过RT-PCR方法扩增TDGF-1 cDNA,克隆入pHB载体中,构建重组载体pHB-TDGF-1。将重组载体转化入大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,并通过SDS-PAGE及免疫印迹法对表达产物进行鉴定。结果:酶切及测序结果显示,重组质粒构建成功;SDS-PAGE及免疫印迹结果显示,所构建的重组载体可在大肠杆菌中高效表达TDGF-1。结论:该研究成功构建了人TDGF-1原核表达载体,并能够在大肠杆菌中有效表达TDGF-1,为进一步研究TDGF-1的生物学功能及其机制奠定了基础。 展开更多
关键词 畸胎瘤衍化生长因子 TDGF-1 原核表达
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Effects of Salvia miltiorrhiza injectional powder on the development of liver fibrosis initiated by dimethylnitrosamine in rats 被引量:5
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作者 杨莹帆 孙懿 +2 位作者 赵欣 郑希元 蒲小平 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 CAS CSCD 2015年第1期54-62,共9页
Salvia miltiorrhiza (Sm) is a traditional herbal medicine with multiple effects on various diseases. Its water-soluble parts have been used to produce injectional powder. In this study, liver fibrosis rats were indu... Salvia miltiorrhiza (Sm) is a traditional herbal medicine with multiple effects on various diseases. Its water-soluble parts have been used to produce injectional powder. In this study, liver fibrosis rats were induced by intraperitoneal injection of dimethylnitrosarnine for 3 consecutive days per week for 4 weeks. After 2 weeks, rats in the positive drug group were subcutaneously injected with 8×10^5 IU/kg IFNα2b, while the Sm treatment groups were intraperitoneally injected with 50, 100 and 200 mg/kg solution of Sm injectional powder, respectively, for 6 days per week for 4 weeks. The results showed that either IFNα2b or the Sm injectional powder significantly increased the body weight and liver to spleen ratio, and three doses of the powder brought down the spleen index. Serum analysis showed that both IFNα2b and the Sm powder reduced levels of alanine transaminase and total bilirubin, while only 100 and 200 mg/kg of the Sm powder ameliorated aspartate transaminase and albumin levels. In the collagen examination, reduced hyaluronic acid and procollagen type III levels, less fibrous hyperplasia and collagen deposits, and improved hepatocyte states were clearly observed in rats treated with either IFNα2b or Sm injectional powder. In addition, the mechanism of action of the Sm powder was also studied. Immunohistochemical staining showed that IFNα2b and Sm injectional powder significantly down-regulated the expression of transforming growth factor-β1 (TGF-β1) and platelet derived growth factor (PDGF). In conclusion, Sm injectional powder has protective effects on dimethylnitrosamine-initiated liver fibrosis in rats, and the mechanism may include the down-regulation of TGF-β1 and PDGF. 展开更多
关键词 Salvia miltiorrhiza Liver fibrosis DIMETHYLNITROSAMINE Transforming growth factor-β1 Platelet derived growth factor
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