甲醛对雄性Wistar大鼠生殖毒性的影响研究

目的:探索不同剂量的甲醛对雄性大鼠精子畸形率、骨髓微核率、血清睾酮水平以及睾丸组织的影响。方法:选择性成熟Wistar大鼠40只随机分成5组:0.9%氯化钠注射液组(阴性对照组)和高、中、低剂量甲醛染毒组(20 mg·kg^(-1)·d^(-1)、2 mg·kg^(-1)·d^(-1)、0.2 mg·kg^(-1)·d^(-1))及50 mg·kg^(-1)·d^(-1)环磷酰胺组(阳性对照组)。通过腹腔注射染毒1周,测定血清睾酮水平,染毒结束后2 d摘眼球采血,颈椎脱臼法处死大鼠,统计精子畸形率和骨髓微核率,对大鼠睾丸做石蜡组织切片,观察睾丸组织损伤情况。结果:精子畸形率:与阴性对照组比较,中、低剂量染毒组精子畸形率上升(P<0.05),高剂量染毒组和阳性对照组精子畸形率上升更明显(P<0.01);骨髓微核率:与阴性对照组比较,中、低剂量染毒组骨髓微核率上升不明显(P>0.05),高剂量染毒组和阳性对照组上升明显(P<0.01);血清睾酮水平:与阴性对照组比较,高、中、低剂量染毒组和阳性对照组血清睾酮水平均明显降低(P<0.01)。睾丸石蜡切片显示高剂量染毒组组织损伤严重。结论:甲醛可以引起雄性大鼠精子畸形,增加骨髓微核率,降低血清睾酮水平,对雄性大鼠具有一定的生殖及遗传毒性。

铁过载对性成熟期雄性大鼠生育能力的影响

目的:研究铁过载对性成熟期雄性大鼠生育能力的影响。方法:6~7周龄SPF级雄性Wistar大鼠40只,按体质量随机分为对照组、缺铁组、低剂量铁过载组及高剂量铁过载组,每组10只,经腹腔注射含Fe^(2+)分别为0.9、0.3、9和18 mg的右旋糖酐铁注射液,隔日注射1次,连续6周。于第6周末经腹主动脉采血,采用比色法检测血清铁含量。留取睾丸及附睾,计算脏器指数,制备精子悬液,显微镜下观察精子数量、精子运动情况及精子畸形情况。采用可见光法检测睾丸组织中过氧化氢酶(CAT)水平,黄嘌呤氧化酶法检测睾丸组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)水平,比色法检测睾丸组织中铁含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,硫代巴比妥酸法检测睾丸组织中丙二醛(MDA)水平。结果:缺铁组大鼠血清铁含量明显低于对照组(P<0.01),而睾丸组织中铁含量与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。低剂量和高剂量铁过载组大鼠血清和睾丸组织中的铁含量均显著高于对照组(P<0.01)。与对照组相比,缺铁组大鼠的精子数量、精子活动率及精子畸形率的差异均无统计学意义(P>0.05)。低剂量铁过载组大鼠的精子活动率显著低于对照组(P<0.01)。高剂量铁过载组大鼠的精子数量和精子活动率显著低于对照组和低剂量铁过载组,且精子畸形率显著高于对照组和低剂量铁过载组(P<0.05)。缺铁组大鼠睾丸GSH-Px活性显著低于对照组(P<0.05)。低剂量铁过载组大鼠睾丸GSH-Px活性显著低于对照组,而MDA水平显著高于对照组(P<0.05)。高剂量铁过载组大鼠睾丸CAT水平及GSH-Px活性均显著低于对照组和低剂量铁过载组,而MDA水平显著高于对照组和低剂量铁过载组(P<0.05)。结论:铁过载可影响性成熟期雄性大鼠的生育能力,表现为精子数量减少、精子运动率降低以及精子畸形率升高,其原因可能与铁过载所导致的高氧化应激水平有关。

槲皮素作为饲料添加剂在体内和体外致突变性潜力的评价

研究通过致突变性检测(Ames)试验、骨髓微核试验以及精子畸形试验,以进一步确定槲皮素作为饲料添加剂在体内和体外致突变性的潜力。体内骨髓微核试验采用昆明种小鼠50只(雌、雄各半),随机分5组,每组10个重复。精子畸形试验采用昆明种雄性小鼠50只,随机分5组,每组10个重复;体外试验采用鼠伤寒沙门氏菌突变型菌株(TA97、TA98、TA100和TA102)进行。在肝微粒体多氯联苯诱导剂(9 000×g Supernatant,S9)干预和不干预的情况下,槲皮素各剂量组对鼠伤寒沙门氏菌(TA97、TA98、TA100和TA102)的回复突变菌落数与阴性对照组无显著差异(P>0.05);同时,槲皮素各剂量组雌雄小鼠的骨髓微核率和嗜多染红细胞/红细胞(Polychromatic erythrocyte/Red blood cell,PCE/RBC)值与阴性对照组无显著差异(P>0.05);槲皮素各剂量组雄性小鼠精子畸形率与阴性组无显著差异(P>0.05)。结果表明,在本试验条件下,槲皮素无致突变性和细胞毒性,并且进一步证明槲皮素是一种安全的饲料添加剂。

Cfap43基因缺陷小鼠组织病理学研究

目的观察Cfap43基因(cilia-and flagella-associated proteins 43)缺陷小鼠精子表型以及多个脏器组织病理学表现。方法使用CRISPR/Cas9技术生成Cfap43敲除小鼠,通过Sanger测序对繁殖后小鼠进行基因型鉴定。选取同一批次的8周龄Cfap43缺陷小鼠Cfap43(-/-)与野生型小鼠(wild type,WT)进行组织病理学检测。观察Cfap43缺陷对小鼠精子表型以及附睾、睾丸、肾、肝、脾、肺、脑、小肠病理结构与超微结构的影响。结果Sanger测序结果显示纯合突变小鼠有2 bp碱基的缺失,Cfap43基因缺陷小鼠附睾精子尾部出现短、粗、卷曲甚至尾部缺失等畸形。病理学观察可见Cfap43基因缺陷小鼠附睾管内成熟精子减少,睾丸生精小管内生精细胞排布紊乱;电镜可见尾部结构排列紊乱;通过透射电镜观察精子头部的变形和浓缩未见明显异常。其他实质脏器如肾、肝、脾、肺、脑、小肠的病理形态与超微结构未见明显改变。结论Cfap43基因缺陷小鼠精子主要表现为鞭毛出现多种畸形,但对其他实质脏器病理形态无明显影响。

精子顶体酶活性与精液常规检查参数关系分析

目的通过比较精子顶体酶正常组和异常组精液常规检测参数差异,明确顶体酶活性在评估男性生育能力中的重要意义。方法从316例男性不育症患者的精液中选取36例顶体酶活性正常标本和36例顶体酶活性异常标本,分别作为顶体酶活性正常组和顶体酶活性异常组。所有精液标本均进行精子活率、A+B级精子活力、精子密度、精子畸形率、精子头部畸形率测定,运用相关统计学方法分析。结果顶体酶正常组精子活率、A+B级精子活力、精子密度均显著高于异常组,精子畸形率和精子头部畸形率均显著低于异常组,且精子顶体酶活性与精子活率、A+B级精子活力、精子密度呈显著正相关与精子畸形率和精子头部畸形率呈显著负相关。结论精子顶体酶活性可以代表精子质量,精液常规检测参数可能是精子顶体酶活性的影响因素,可作为临床评估男性生育能力的重要指标。

五子衍宗汤加味与六味地黄丸对男性不育症精子质量及畸型率的影响

目的:观察五子衍宗汤加味与六味地黄丸对男性不育症精子质量及畸型率的影响。方法:对我院2016年10月-2017年10月接收的114例男性不育症患者资料加以探究,依据治疗方案分为两组,各组57例;对照组单纯行六味地黄丸治疗,治疗组联合五子衍宗汤加味治疗,比对两组精子质量及畸型率。结果:治疗组治疗后a级活力为(37.75±8.22)%、a级+b级活力为(64.26±11.24)%及精子成活率为(69.28±16.75)%,较对照组均显著更高,差异比较具有统计学意义(P <0.05);治疗后治疗组畸形精子百分率为(10.25±0.24)%,较之对照组显著更低,比较差异具有统计学意义(P <0.05)。结论:男性不育症行五子衍宗汤加味与六味地黄丸联合治疗可取得确切疗效,有效改善患者精子活动质量,且降低精子畸形率,可被临床推广、应用。

益肾生精汤治疗少弱精症所致不育症68例

目的:观察益肾生精汤治疗少弱精症所致不育症的临床疗效。方法:68例符合少弱精症所致不育症患者采用益肾生精汤治疗,检测患者治疗前后精液质量。结果:68例患者显效26例,有效32例,无效10例,有效率为85.29%。与治疗前比较,治疗2个疗程后患者精子成活率较明显提高、精液a级精子、a级+b级精子百分比显著增加,精子畸形率明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05);与治疗前比较,治疗2个疗程后精子密度有所增加,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:益肾生精汤治疗少弱精症所致不育症疗效确切,可有效提高精子活力,降低精子畸形率。

纳米硒化镉对小鼠精子毒作用

目的研究不同可溶性的2种纳米硒化镉对小鼠精子的毒性作用。方法昆明种小鼠60只,随机分为四组。试验组剂量为40mg/kg进行腹腔注射染毒,18d后取附睾观察精子存活率和精子畸形率。结果与CdSeⅡ相比,CdSeⅠ精子存活率低,而精子畸形率高(P<0.05)。结论纳米硒化镉随着可溶性的升高,精子存活率增高,精子畸形率显著降低。

铅和镉联合染毒对雄性小鼠生殖系统氧化损伤的影响

目的研究铅、镉联合作用对雄性小鼠生殖系统氧化损伤的影响。方法将健康成年清洁级雄性昆明小鼠40只随机分为4组,分别为对照(蒸馏水)组、铅(800 mg/L)单独染毒组、镉(100 mg/L)单独染毒组和铅(800 mg/L)+镉(100 mg/L)联合染毒组,每组10只。采用自由饮水方式进行染毒,连续染毒28 d。染毒结束后,将小鼠称重,迅速分离睾丸及附睾组织,称重后计算睾丸脏器系数。检测小鼠睾丸组织中丙二醛(MDA)含量及超氧化物岐化酶(SOD)活力,光镜观察小鼠精子畸形情况。结果在染毒21 d各染毒组小鼠体重均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。各染毒组小鼠睾丸系数均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,各染毒组小鼠睾丸组织中MDA含量和精子畸形率均较高,而SOD活力均较低,差异有统计学意义(P<0.05)。与铅+镉联合染毒组相比,铅、镉单独染毒组小鼠睾丸组织中MDA含量和精子畸形率较低,SOD活力较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论铅、镉联合暴露可通过氧化应激损伤雄性小鼠生殖系统,导致精子畸形,二者可能具有协同效应。

探讨精子活动力与畸形精子率的关系

目的探讨精子活动力与畸形精子率之间的关系,探讨其有无临床意义。方法将765例患者分成A组(精子浓度≥15×106,活动力≥32%的精液组)和B组(精子浓度≥15×106,活动力<32%的精液组)两组,A组473例,B组292例,均进行精子形态学分析。结果 B组的畸形精子症人数(292)明显多于A组的畸形精子症人数(473),具有统计学意义(P<0.001)。结论 B组的畸形精子症人数显著高于A组的畸形精子症人数,显示出精子的活动力与畸形精子率之间呈现明显的负相关。