超声检测联合血栓弹力图预测早期流产并指导抗凝治疗的临床价值

目的分析超声检测孕妇卵黄囊状态与基线血栓弹力图指标在评估不同妊娠结局与抗凝结局中的临床价值。方法收集215例孕妇,其中早期妊娠正常孕妇87例,作为A组;出现阴道流血、下腹部疼痛等早期流产症状的孕妇128例,根据妊娠结局不同分为B组(先兆流产妊娠结局良好,70例)和C组(先兆流产妊娠结局不良,58例)。经阴道超声对孕妇进行检查,记录卵黄囊直径、妊娠囊大小、胎芽长度及有无原始心管搏动等数据。对孕妇进行血栓弹力图凝血分析,记录反应时间(R)值、凝血时间(K)值、Angel角、最大振幅(MA)值、凝血综合系数(CI)值。比较三组超声检测卵黄囊情况(卵黄囊显示率、卵黄囊直径)、血栓弹力图基线资料,C组孕8~12、12~16周出现高凝状态孕妇治疗前后血栓弹力图指标变化情况。结果A组卵黄囊显示率为89.66%、B组为87.14%,均高于C组的55.17%,差异具有统计学意义(P<0.05);三组卵黄囊显示率比较差异有统计学意义(P<0.05)。A组、C组孕7~8、8~9、9~10、10~11、11~12周卵黄囊直径均大于B组,且A组小于C组,差异具有统计学意义(P<0.05);三组孕7~8、8~9、9~10、10~11、11~12周卵黄囊直径比较差异有统计学意义(P<0.05)。三组R值、K值、Angel角、MA值、CI值比较,差异有统计学意义(P<0.05)。C组R值、K值均低于A组、B组,Angel角、MA值、CI值均高于A组、B组,差异有统计学意义(P<0.05)。C组于孕8~12周出现高凝状态的孕妇25例,于孕12~16周出现高凝状态的孕妇28例。C组孕8~12周出现高凝状态孕妇治疗后R值、K值、Angel角、MA值、CI值分别为(7.31±0.45)min、(1.96±0.31)min、(75.78±7.21)°、(62.21±7.11)mm、(2.78±0.51),均优于治疗前的(5.79±0.51)min、(0.99±0.33)min、(86.29±6.21)°、(71.78±7.29)mm、(5.51±1.21),差异有统计学意义(P<0.05)。C组孕12~16周出现高凝状态孕妇治疗后R值、K值、Angel角、MA值、CI值分别为(7.01±0.44)min、(1.92±0.34)min、(75.12±7.11)°、(61.21±7.49)mm、(2.32±0.31),均优于治疗前的(5.51±0.41)min、(0.91±0.31)min、(88.29±6.48)°、(73.78±7.21)mm、(5.62±1.01),差异有统计学意义(P<0.05)。结论超声检测的卵黄囊直径大小与妊娠结局有关,偏大或偏小均会导致流产。基线血栓弹力图指标可以有效反映孕妇流产的发生几率,高凝患者经抗凝治疗后指标好转,因此可以用基线血栓弹力图指标评估抗凝治疗的有效性,指导临床抗凝治疗。

蛋黄饼干生产工艺及货架期预测

以低筋粉、鹰粟粉、黄油和蛋黄为原料,感官评分为评价指标,通过单因素实验和正交实验优化蛋黄饼干的制作工艺,并测定其脆度值和货架期。结果表明,最佳原料配比为以低筋粉100 g为基准(100%),鹰粟粉100%、无盐黄油100%、熟鸡蛋黄32%、盐1%和糖粉40%;最佳烘焙条件为下火150℃、上火180℃、时间15 min,由此配方制作的蛋黄饼干在色泽、香气、味道和形状上都表现良好,感官评分为90.6分,脆度值达到1.74 s。此外,添加特丁基对苯二酚(Tert-Butylhydroquinone,TBHQ)可以延长蛋黄饼干的货架期至370 d。

间接血凝抑制试验检测血清和卵黄中鸡毒支原体抗体的研究

将13只正处于产蛋期的试验鸡在接种疫苗前后分别采血、分离血清;收集鸡蛋,分离蛋黄,并分别用16%NaCl、8%柠檬酸纳和氯仿处理后,检测鸡毒支原体(MG)间接血凝抑制(HI)抗体。结果表明:接种疫苗前的血清和16%NaCl、8%柠檬酸钠和氯仿处理卵黄抗体平均效价分别为4.7,4.4,4.1和4.2log2;第一次接种疫苗后的血清和16%NaCl、8%柠檬酸纳和氯仿处理卵黄抗体平均效价分别为7.4、6.7、7.1、6.9log2;第二次接种疫苗后第1次采集的血清和16%NaCl、8%柠檬酸钠、氯仿处理卵黄抗体平均效价分别为10.4、9.6、10.1、9.7log2,第2次采集的血清和16%NaCl、8%柠檬酸钠、氯仿处理卵黄抗体平均效价分别为7.9、7.1、7.6和7.4log2。8%柠檬酸钠处理后的卵黄抗体效价最高,与血清抗体效价最接近。血清HI抗体效价与卵黄HI抗体效价具有良好的一致性和相关性,用卵黄可以代替血清进行HI试验。

琼扩试验检测鸡传染性法氏囊病卵黄抗体的研究

采用琼脂扩散(AGP)试验检测免疫鸡血清和3种不同稀释液(氯仿、8%柠檬酸钠、16%氯化钠)处理的卵黄样品,结果表明,免疫后的卵黄样品与血清样品的AGP抗体效价一致,为1∶16。氯仿样品的检出率最高,为85%,血清样品的检出率为67%,8%柠檬酸钠和16%氯化钠样品的检出率分别为47%和25%。同时,对AGP检测结果分别在点样后24h、48h和72h进行观察,结果表明,AGP结果的最佳观察时间在24～48h。检测氯仿处理卵黄抗体的AGP可以代替检测血清抗体的AGP,以避免采血造成应激,具有重要的经济意义。

猪流行性腹泻病毒3种抗原卵黄抗体的制备

【目的】探讨猪流行性腹泻病毒（PEDV）3种不同抗原制备的卵黄抗体对PEDV的中和能力,为抗猪流行性腹泻卵黄抗体的制备提供新的方法和理论基础。【方法】根据PEDV S糖蛋白基因设计引物扩增PEDVS534基因（636~789位氨基酸）和PEDV COE基因（499~638位氨基酸）,并构建原核表达质粒pET32a-PEDV S534和pET32a-COE,分别转化表达菌株BL21（DE3）进行诱导表达。以原核表达的PEDV S534蛋白、COE蛋白以及PEDV灭活病毒为抗原,分别免疫产蛋鸡并制备卵黄抗体,通过病毒中和试验评价各卵黄抗体的中和效力。【结果】成功表达了PEDV S534蛋白和COE蛋白,Western-Blotting分析显示,2种蛋白均具有很好的免疫原性;制备的3种特异性卵黄抗体均具有一定的病毒中和能力,PEDV S534蛋白特异性卵黄抗体的中和效价为1∶12,COE蛋白特异性卵黄抗体的中和效价为1∶25,而PEDV灭活病毒的卵黄抗体中和效价达到1∶120。【结论】PEDV灭活病毒的中和能力最强,其次为COE蛋白特异性卵黄抗体,PEDV S534卵黄抗体的中和能力较弱。

禽流感高免球蛋白的制备及应用研究

应用H9N2亚型禽流感病毒(AIV)油乳剂灭活苗6个不同剂量免疫30周龄SPF蛋鸡,通过血凝抑制(HI)和琼脂免疫扩散(AGP)试验监测血清及卵黄抗体消长规律,确定2.0 mL为最适免疫剂量。首免后第18天血清与卵黄中抗体同时升至第一高峰,此时加强免疫。二免后1周,效价达到第二高峰,用常规抽提法从高抗体滴度卵黄中提取高免球蛋白(IgY)。中和试验(NT)表明:IgY具有中和病毒感染的作用,且中和抗体滴度随HI滴度的降低而降低;给鸡肌肉注射后6 h能检测出血清的HI抗体,24 h达到峰值,维持7 d,第13天血清中HI抗体消失。104个EID50的AIV(H9N2)攻毒,同时用HI价为214的IgY的10倍系列稀释物分5组进行保护试验,确定HI价为214的IgY保护范围在100倍稀释与10倍稀释之间。IgY系列保护试验表明HI价28为完全保护的最低滴度;在攻毒的前1天及至攻毒后第5天接种IgY均能100%保护。攻毒保存期试验证明,所制得的高免球蛋白4 ℃可以保存6个月,-20 ℃可保存1年。

蛋黄油镇痛作用的实验研究

目的观察蛋黄油的抗炎、镇痛作用。方法采用小鼠热板法、化学刺激、扭体法观察蛋黄油的镇痛作用。结果在小鼠热板实验中,连续给药3d,高剂量组在第4天给药后130min与生理盐水组比较有显著性差异(P<0.05)。在小鼠扭体实验中,京万红组和蛋黄油高、低剂量组,均能减少小鼠的扭体次数,与生理盐水组比较有显著性差异(P<0.001),蛋黄油与生理盐水组比较有显著性差异(P<0.05)。结论蛋黄油有明显的镇痛作用。

高免蛋黄抗体中和雏鸭肝炎病毒(DHV)的效价测定

用鸭胚测定半数致死量并进行中和试验.测定了用雏鸭肝炎病毒(Ⅰ型)免疫蛋鸭收获的鸭蛋所制成的蛋黄抗体的滴度.结果表明,雏鸭肝炎病毒(Ⅰ型)的半数致死量为3.50,该毒株的高免蛋黄抗体以1:532稀释可保护50％的鸭胚免于死亡;病毒对照组全部死亡;空白对照组全部存活.该雏鸭病毒性肝炎高免蛋黄抗体滴度较高,可用于预防和治疗雏鸭病毒性肝炎.

抗牛多杀性巴氏杆菌高免卵黄抗体IgY的制备及间接血凝检测方法的建立

本研究通过自制牛源荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌灭活菌苗免疫产蛋鸡,采用卡拉胶结合硫酸铵沉淀法提取卵黄抗体IgY,并采用间接血凝方法检测抗体效价。结果表明,抗原致敏红细胞的最佳浓度是800μg/mL,免疫后第7周抗体效价达到高峰,效价为1:1024,高效价持续5周开始下降,测定提取的IgY浓度为8.258mg/mL,无菌检测及动物安全性实验表明制备的卵黄抗体安全可靠。本研究制备了抗牛多杀性巴氏杆菌卵黄抗体,为防治由荚膜血清A型多杀性巴氏杆菌所致的犊牛肺炎提供了新的手段。

心包积液-肝坏死综合征高免卵黄抗体的研制

采取心包积液-肝坏死综合征病鸡的肝脏匀浆冻融,接种SPF鸡胚,制备尿囊液灭活水苗,用两种免疫程序对产蛋鸡进行免疫,用琼脂扩散试验检测其卵黄抗体水平,制备高免卵黄抗体。经中和试验和临床试验,结果显示高免卵黄抗体对该病的预防和治疗效果明显。

禽蛋卵黄抗体检测中影响血凝抑制试验结果的因素分析

血凝抑制试验是检测有血凝性的家禽疾病抗体效价最常用的一种方法,具有简便、快速、灵敏、准确等特点,已被广泛应用于各兽医检测机构和基层养禽场,但是由于试验操作过程中的不规范操作和细节注意不够,导致不正确检测结果出现的现象时有发生,笔者结合工作实践现将禽蛋卵黄抗体检测过程中影响血凝抑制试验结果的影响因素进行分析归纳总结,以期能对生产应用提供参考。

用HI试验检测鸡血清和卵黄中鸡毒霉形体抗体的研究

用超声波裂解的鸡毒霉形体（ＭＧ）Ｓ６菌液作抗原建立了检测鸡血清和卵黄中ＭＧ抗体的血凝抑制（ＨＩ）试验，ＨＩ试验的敏感性比血清平板凝集（ＳＰＡ）试验提高了２～３２倍。ＨＩ试验可检出卵黄中ＳＰＡ试验不足以检出的ＭＧ抗体。以ＳＰＦ鸡血清、卵黄抗体、鸡滑液囊霉形体（ＭＳ）阳性血清作对照。

抗鸡新城疫卵黄抗体IgY的研制

产蛋母鸡经新城疫灭活抗原重复免疫后,所产生的高免卵黄中,特异性抗体的HI效价可达到12log2以上。从高免卵黄中分离提纯的特异性新城疫抗体,病毒中和试验结果表明,具有明显的中和病毒的作用,特异性病毒中和指数可达到630957以上。使用纯化后的高免卵黄抗体(IgY)安全、高效、无任何不良反应。

产蛋鸡卵黄性腹膜炎病原分离鉴定及防治试验

从25个鸡场疑似卵黄性腹膜炎的病料中分离到了18株大肠杆菌和2株沙门氏菌,经大肠杆菌O血清型鉴定,用优势血清型菌株分别接种改良的血清-葡萄糖-肉汤培养基所研制的多价油乳剂灭活苗,在开产前接种鸡群预防产蛋鸡卵黄性腹膜炎,预防效果良好,而采取多价油乳剂灭活苗预防接种配合活菌制剂益生素的使用,预防效果更佳。使用优势血清型菌株筛选的敏感药物硫酸丁胺卡那霉素、强力霉素同时配合清瘟败毒散和VC对卵黄性腹膜炎鸡群进行治疗,治疗效果良好。

蛋黄卵磷脂的提取及其对小鼠记忆功能的影响

为探讨蛋黄卵磷脂对大脑的营养作用,实验采用有机溶剂法从蛋黄中提取卵磷脂粗品,并经柱硅胶纯化,最终获得纯度为95.67%的卵磷脂精品。将获得的卵磷脂精品通过灌胃法给小白鼠灌服30d后,对小鼠进行Morris水迷宫实验、跳台实验。结果显示:受试小鼠Morris水迷宫逃逸时间缩短(P<0.05),跳台实验潜伏期延长(P<0.05),跳台实验错误次数减少(P<0.05),且灌服70d后基本稳定。说明蛋黄卵磷脂可提高小鼠记忆功能,促进大脑发育。

白痢康复鸡种用及经济价值的评价

本文对某农场688只白痢康复鸡的种用及经济价值进行的评价结果为,日产蛋率比发病前正常水平降低了12.3％,蛋的受精率降低了5.1～8.1％,孵化率降低了18.9％;全血平板凝集试验、血清琼脂扩散及卵黄琼脂扩散反应的阳性率分别为92.5％、90.0％和84.0％。从这些康复鸡所产的鲜蛋,入孵后7日龄和21日龄的死胚以及后代死雏中均分离出鸡白痢沙门氏菌,检出率依次为8.0％(2/25)、16.6％(5/30)、53.3％(16/30)和77.7％(7/9)。为此,该鸡群显然不能留作种用,其继续喂养的经济价值亦低,建议于产蛋期后全部淘汰。

产蛋鸡卵黄性腹膜炎病原分离鉴定及防制试验

从25个鸡场疑似卵黄性腹膜炎的病料中分离到了18株大肠杆菌和2株沙门氏菌,经大肠杆菌O血清型鉴定为O_(78)6株,O_(11)、O_4各4株,O_(143)2株,O_(15)、O_2各1株,其中O_(78)、O_(11)、O_4为优势血清型,用优势血清型菌株分别接种改良的血清-葡萄糖-肉汤培养基研制成多价油乳剂灭活苗,在开产前接种鸡群预防产蛋鸡卵黄性腹膜炎,预防效果良好,而采取多价油乳剂灭活苗预防接种配合活菌制剂益生素使用,预防效果更佳。使用优势血清型菌株筛选的敏感药物硫酸丁胺卡那霉素、强力霉素,同时配合清瘟败毒散和V_C对卵黄性腹膜炎鸡群进行治疗,治疗效果良好。

鸡卵黄性腹膜炎病例大肠杆菌的分离及药敏试验

从 40例卵黄性腹膜炎病例分离到 36株大肠杆菌 ,分离率为 90 %。通过血清型鉴定 ,共有 9个血清型 ,即O5(2 0 8%) ,O8(16 7%) ,O78(12 7%) ,O14 1(12 5 %) ,O14 7(12 5 %) ,O18(12 3%) ,O19(5 6 %) ,O14 (4 9%)和O15(2 0 %)。在豫西地区蛋鸡群中 ,致病性大肠杆菌的优势菌株应依次为O5,O8,O78,O14 1,O14 7,O18,其中O5,O8,O14 1,O14 7优势菌株的存在 ,足以说明豫西地区鸡大肠杆菌病的不同性和复杂性。药敏试验结果表明 ,所分离的大肠杆菌菌株对链霉素、烟酸氟哌酸抑菌作用最强 ,高敏菌株达 6 1 1%;次敏药物为蒽诺沙星、氯霉素、卡那霉素、畅乐、杆净 ;低敏和无抑菌作用的药物有痢特灵、土霉素和磺胺嘧啶。

山东牛轮状病毒的分离鉴定及其卵黄抗体应用试验

为研究卵黄抗体对牛轮状病毒(BRV)的预防与治疗效果,本试验收集山东某牛场的腹泻粪便样本接种MA104细胞进行病毒分离、纯化,采用RT-PCR和电镜进行鉴定。将分离株增殖灭活制成油苗多次免疫产蛋鸡,收集高免鸡蛋,用水稀释-盐析法纯化卵黄抗体(IgY),用琼扩法测定抗体效价,进行安全性检测。选10头1日龄BRV阴性的犊牛,随机均分为2组,人工感染BRV,进行犊牛口服IgY疗效观察。结果显示:病毒盲传至第8代后出现稳定细胞病变,经蚀斑纯化后测得病毒滴度为10-5.62 TCID 50/mL;分离毒株经RT-PCR和电镜观察证实为BRV,命名为SD-LX株。SD-LX株灭活油苗免疫蛋鸡后得到滴度为1∶64的IgY,该抗体对犊牛感染BRV的保护率与对照组相比为100%,治愈率为40%。本试验成功分离到1株BRV,该毒株油苗免疫蛋鸡制成的IgY对犊牛BRV有良好的保护作用。

狮头鹅大肠杆菌分离鉴定、药敏试验及灭活疫苗的制备

为了分析广东某狮头鹅种鹅场鹅卵黄性腹膜炎的病原,从病死雌性种鹅中分离得到1株菌株。通过细菌培养形态、镜检、生化鉴定以及16S r RNA基因序列同源性比对,确定分离的菌株为大肠杆菌。抗生素和中草药水提取物对分离菌株的药敏试验结果表明,恩诺沙星、头孢噻肟和中草药丁香对分离菌株的抑制和杀灭效果最好。用分离菌株制备的灭活疫苗,经无菌检测、试验动物安全性和免疫效果检验,结果表明,该疫苗是安全的,并对试验动物具有一定的免疫保护作用。