四氯二苯并二恶英与妇科疾病

四氯二苯并二恶英(tetrachlorodibenzodioxin,TCDD)是毒性最大的化合物之一,可损伤多种脏器功能并具有免疫抑制和致癌作用。TCDD可导致多种妇科疾病,如子宫内膜异位症、卵巢癌和卵巢功能早衰等,并在一定程度上促进这些疾病的发展。然而,据流行病学调查发现,暴露在TCDD中却使另外一种妇科疾病——子宫肌瘤的发病率降低。因此,研究TCDD与妇科常见病的关系可进一步认识TCDD的特性及作用机制,并为预防这些疾病提供帮助。

二恶英干扰腭中嵴上皮极性及叶酸拮抗作用的动物实验

目的 研究四氯二苯并二恶英（tetraehlorodibenzo-p-dioxin,TCDD）诱导腭裂的机制并探讨叶酸是否能够拮抗小鼠由2,3,7,8-TCDD诱导的腭裂.方法 将大鼠合笼饲养,将受孕（gestation day,GD）后小鼠70只分3组[对照组（20只）、TCDD组（26只）、叶酸组（24只）],对照组胃饲芝麻油50 ml/kg,TCDD组胃饲TCDD 24 μg/kg诱导腭裂模型,叶酸组胃饲叶酸5 mg/kg＋TCDD 24 μg/kg.在GD12.5、13.5、14.5、15.5和16.5孕鼠处死.GD16.5胎鼠体视显微镜检查腭裂类型,GD12.5、13.5、14.5、15.5胎鼠常规染色和扫描电镜观察,同时检测TCDD相关的芳香烃受体（arylhydroearbon re-ceptor,AHR）及腭发育相关的转化生长因子（transforming growth factor,TGF）β3表达及细胞凋亡.结果 腭裂发生率TCDD组为70.2％ （73/104）,叶酸组为66.3％ （61/92）,对照组5.4％ （4/74）.纤毛消失时间：对照组GD15.5、TCDD组GD12.5、叶酸组GD14.5.分子生物学检测发现TGF-β3表达与AHR成负相关,并且干扰到腭中嵴细胞极性和正常凋亡程序.结论 胃饲孕鼠叶酸未能够拮抗由2,3,7,8-TCDD诱导的腭裂,同时在该模型中腭中嵴上皮细胞极性和凋亡程序受到影响,TGF-β3表达受到抑制干扰腭的融合.

人体胎盘组织二噁英和多溴联苯醚化合物负荷水平初步研究

目的建立人体胎盘组织样品氯化二苯并二噁英（PCDD）和呋喃（PCDFs）、多氯联苯（PCBs）、多溴联苯醚（PBDEs）化合物同时准确定量检测分析方法，揭示上述持久性有机污染物人体负荷水平，并初步进行危险性评估。方法采用国际权威标准方法——核素（同位素）稀释的高分辨气相色谱／高分辨双聚焦磁式质谱联用（HRGC／HRMS）技术，以多离子检测方法对人体胎盘组织样品中17个PCDD／Fs和12个共平面PCBs以及7个PBDEs化合物分别进行定性和定量分析，用WHO—TEF值计算所有样品的毒性当量浓度∑TEQ（PCDD＋PCDFs＋PCBs）和PBDEs浓度，进一步对人体二嗯英和PBDEs化合物负荷水平进行危险性评估。结果6个胎盘组织样品中PCDD／Fs和PCBs化合物毒性当量总浓度∑TEQ（PCDD＋PCDFs＋PCBs）中位数是18．15WHO—TEQpg／g脂肪。范围分布在5．14～67．01WHO-TEQpg／g脂肪之间。2，3，4，7，8-PeCDFs、1，2，3，7，8-PeCDDs、PCB126是毒性当量的主要贡献者，合计占65％。以7个化合物计算PBDEs总浓度，6个样品的中位数值为2．73ng／g脂肪，均数为7．17ng／g脂肪，范围是0．95～25．99ng／g脂肪。BDE47是最主要的污染同系物，占到35％。浓度最高的一个受试样品其毒性当量总浓度∑TEQ（PCDD＋PCDFs＋PCBs）已经达到世界上已知高暴露区人体二嗯英污染负荷水平。结论我们在本研究中建立了人体组织样品中持久性有机化合物二嗯英和PBDEs化合物同时准确定量检测方法，高二嗯英负荷水平的样品提供者可能对胎儿存在健康危害的高暴露风险，对于健康的远期影响还需要深入进行医学追踪研究。

深圳市60份母乳中二嗯英负荷水平与影响因素

目的定量检测深圳市非持久性有机污染物（persistent organic pollutants，POPs）暴露区母乳中的多氯代二苯并-对-二噁英与多氯代二苯并呋喃（PCDD—Fs）含量，分析影响当地人群PCDD-Fs人体负荷的相关因素。方法于2007年7—10月采集60位顺产初产妇产后3周至2个月的母乳，选择条件为在深圳生活5年以上、20～34岁且生活在非POPs暴露区。采用快速溶剂提取仪（accelerated solvent extraction，ASE）、自动纯化系统（fluid management system，FMS）对母乳样本中的PCDD—Fs组分进行纯化和富集，采用核素稀释高分辨气相色谱-高分辨双聚焦磁式质谱联用仪（high-resolution gas chromatography—high resolution mass spectrometry，HRGC—HRMS）技术对母乳样本中17个PCDD-Fs单体含量进行定量分析，计算总毒性当量浓度（TEQ）。采用SPSS13．0软件对婴儿出生体重和身长、母亲膳食、年龄、当地居住时间等因素与母乳PCDD—Fs负荷水平进行相关性分析。结果本次母乳样本捐献者平均年龄为28岁，在深圳的居住时问是5—29年（平均居住时间10年）。60份母乳样本中PCDD—Fs含量为26．957143～669．583333 pg／g脂肪，均数为7．224817 pg／g脂肪，中位数为84．176062 pg／g脂肪。其TEQ浓度范围为2．420793～29．014277 pg／g脂肪，均数为8．645992 pg／g脂肪，中位数为7．751804 pg／g脂肪。其中最主要的3个二咏英同系物的优势污染物是2，3，4，7，8五氯代二苯并呋喃（2，3，4，7，8-PeCDF）、1，2，3，7，8五氯代二苯并-对-二噁英（1，2，3，7，8-PeCDD）和2，3，7，8四氯代二苯并二嘌英（TCDD），其TEQ均值分别为3．691654、2．478315、0．980995Pg／g脂肪，其贡献率分别是42．689378％、28．652356％和11．343995％。母乳中PCDD—Fs浓度与乳母年龄（r=0．26，P〈0．05）、深圳市居住时间（r=0．49，P〈0．05）和鱼的消费量（r=0．37，P〈0．05）呈现正相关。结论深圳地区非暴露区母乳二噁英类化合物污染负荷水平较高，且母乳中PCDD-Fs浓度与母亲年龄、在当地的居住时间和鱼的消费量呈现正相关。

IGF-2在四氯二苯并二恶英诱导的大鼠骨骼畸形中的表达

目的探讨骨骼发育畸形的大鼠软骨组织内胰岛素样生长因子（insulin-like growth factors，IGFs）家族成员IGF-2的表达规律。方法应用环境类致畸因子二恶英中毒性最强的四氯二苯并二恶英，即2，3，7，8-四氯-二苯并-对-二恶英（2，3，7，8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin，TCDD）构建先天性大鼠骨骼发育畸形动物模型。应用光镜和透射电镜观测骨骼畸形大鼠的足部软骨组织病理学改变。免疫组织化学染色分析大鼠软骨组织IGF-2蛋白的表达。应用TCDD干预体外培养的大鼠软骨细胞，采用RT-PCR及Western印迹杂交检测软骨细胞内的IGF-2mRNA及蛋白质的表达水平。结果TCDD（15μg／kg）诱导实验组33．3％的胎鼠出现单一或多种畸形，包括：内翻足、小脑畸形、腭裂、无尾畸形等，在骨骼畸形胎鼠的足部软骨发生带缩小，软骨细胞数量减少，软骨细胞核内粗面内质网扩张，核基质降解，线粒体嵴紊乱。15μg／kg剂量的TCDD使畸形胎鼠软骨细胞内IGF-2蛋白质的表达明显降低。TCDD（1×10^-8mol／L）作用体外培养的大鼠软骨细胞24h，细胞内IGF-2的基因转录和翻译水平分别减少80％和60％，P％0．05。结论IGF-2在大鼠软骨细胞内的低表达可能与TCDD对骨骼发育的致畸作用密切相关。

鼠哺乳期二噁英暴露对子代牙槽骨生长发育的影响

目的研究鼠哺乳期二噁英类物质2，3，7，8-四氯二苯对二噁英暴露对大鼠仔鼠牙槽骨生长发育的影响。方法60天龄2，3，7，8-四氯二苯对二噁英暴露组和对照组仔大鼠被处死，将其带有磨牙的上颌骨行树脂包埋，制备硬组织磨片并在荧光显微镜下观察，对两实验组牙槽骨的组织形态、荧光标记情况及组织形态计量学参数进行比较。结果与对照组相比，二噁英暴露组牙槽骨骨小梁结构较为疏松，荧光标记较紊乱。实验组与对照组骨小梁宽度分别为（52．5±5．2）μm及（59．4±6．6）μm，二者差异有统计学意义（P〈0．05）；骨小梁数目分别为（3．27±0．23）mm^-1及（3．75±0．29）mm^-1，差异有统计学意义（P〈0．01）；骨小梁分离度分别为（217．3±37．6）μm及（177．6±33．8）μm，差异有统计学意义（P〈0．05）；矿化沉积率分别为（0．68±0．08）μm／d及（0．95±0．12）μm／d，差异亦有统计学意义（P〈0．05）。结论二噁英类物质哺乳期暴露显著降低了大鼠仔鼠牙槽骨的质、量，并影响其空间构型。

γ-氨基丁酸A型受体β3亚基在2,3,7,8-四氯二苯并二英诱导胎鼠腭裂模型中表达的研究

目的利用2,3,7,8-四氯二苯并二英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)诱导C57BL/6J胎鼠腭裂,检测γ-氨基丁酸A型受体β3亚基(gamma-aminobutyric acidt ype Areceptor beta 3 subunit,GABRB3)在TCDD诱导胎鼠腭裂模型中的表达变化情况,探讨腭裂的发生机制。方法将60只孕鼠按随机数字表法分为实验组和对照组,每组30只。妊娠第10.5天(gestation day 10.5,GD10.5)实验组以28μg/kg的TCDD单次灌胃,对照组以5.6ml/kg玉米油单次灌胃。分别在GD13.5、GD14.5、GD15.5、GD16.5、GD17.5处死孕鼠12只,每组处死6只。行胎鼠腭部形态学和组织学观察;应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测胎鼠腭部组织中GABRB3mRNA及蛋白表达;免疫组织化学及免疫荧光染色检测GABRB3蛋白的表达部位。结果实验组共36只胎鼠,GD17.5腭裂的发生率为100%(36/36);对照组共47只胎鼠,无腭裂发生(0/47)。实验组胎鼠腭突上抬在GD15.5完成,较对照组腭突上抬延迟1d;GD14.5、GD15.5、GD16.5、GD17.5实验组中GABRB3基因mRNA(分别为0.561±0.073、0.728±0.104、0.782±0.137、0.686±0.145)和蛋白表达(分别为0.288±0.013、0.404±0.017、0.399±0.012、0.307±0.010)均显著低于对照组GABRB3基因mRNA(分别为0.818±0.088、0.865±0.086、1.021±0.054、1.163±0.179)和蛋白表达(分别为0.481±0.017、0.456±0.009、0.474±0.016、0.529±0.015)(P<0.05);免疫组化及免疫荧光结果显示,GABRB3主要表达于腭突间质细胞和腭突中嵴上皮缝。结论TCDD诱导胎鼠腭突上抬延迟并最终导致腭裂发生可能与GABRB3降低有关;GABRB3可能在腭部发育的上抬和融合期发挥重要作用。

金属银离子与四氯二苯并对二恶英相互作用及其表面增强拉曼光谱的研究

本文基于DFT方法计算了2,3,7,8-四氯二苯并对二恶英(2,3,7,8-TCDD)结构和振动性质。为了考察分子与金属表面的吸附和相互作用,建立了两种金属银离子与2,3,7,8-TCDD分子的复合体系,计算了它们的分子结构、电子结构和振动性质。基于计算结果详细分析了结构的变化、金属离子与分子中不同原子之间的相互作用;另外,根据不同体系拉曼散射强度的变化,对拉曼强度变化较大的特征振动进行了分析和讨论。文中给出的计算结果可用于指导相应的实验研究。