怀玉山三叶青一年生和四年生地栽扦插苗的光合特性和荧光参数比较

比较了怀玉山三叶青(Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg)怀玉2号一年生和四年生地栽扦插苗的光合特性、叶绿素荧光参数、叶绿素含量和叶形指数。结果表明,一年生地栽扦插苗的气孔导度、胞间二氧化碳浓度显著低于四年生地栽扦插苗,而一年生地栽扦插苗的气孔限制值、光合速率和水分利用效率显著高于四年生地栽扦插苗,两者之间的蒸腾速率和瞬时羧化速率无显著性差异。一年生和四年生地栽扦插苗的叶绿素荧光参数各项指数均无显著性差异。一年生地栽扦插苗的叶绿素含量显著高于四年生地栽扦插苗,但两者的叶长、叶宽和叶形指数均无显著性差异。

三叶青野生种与怀玉山三叶青栽培种光合特征和叶绿素荧光参数的比较

选取了三叶青(Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg)野生种FJ-WYS以及怀玉山三叶青栽培种怀玉2号作为研究对象,研究其光合特征、叶绿素荧光参数、叶绿素含量、叶长、叶宽和叶型指数的差异。结果表明,怀玉2号的胞间CO_(2)浓度(Ci)、稳态荧光(F_(s))、叶绿素含量(SPAD)、叶长、叶型指数显著高于FJ-WYS,而FJ-WYS的气孔限制值(L_(s))、水分利用效率(WUE)、净光合速率(P_(n))、瞬时羧化速率(CUE)、最小初始荧光(F_(o))、叶宽均显著高于怀玉2号。怀玉2号的光合作用弱于FJ-WYS,且光合作用与叶绿素含量和叶型指数无正相关关系。

三叶青块根发育时期RT-qPCR内参基因的筛选与体系建立

三叶青为珍稀药用植物,药用部位地下块根产量低,生长周期长,相关基因表达和调控研究缺乏,为了解其块根发育的分子机制,需筛选稳定表达的内参基因。本研究利用课题组前期的转录组测序数据,选取了β-actin、GAPDH、RNA polymerase Ⅱ和GBSS四个候选内参基因,以不同块根发育阶段的三叶青根、茎、叶、芽组织为材料,通过反转录PCR初筛,实时荧光定量PCR检测表达量,并利用geNorm、NormFinder、BestKeeper、Delta Ct程序和RefFinder在线网站评价内参基因的稳定性。结果表明:GAPDH在不同块根发育及不同组织中的稳定性优于其他基因;β-actin的扩增效果相对较差;经综合分析稳定性顺序为GAPDH>GBSS>RNA polymerase Ⅱ>β-actin,因此本研究认为在研究三叶青块根发育中选用GAPDH作为内参,在后续的基因定量表达验证中结果更为可靠。此外,也可以考虑GAPDH和GBSS或GAPDH,GBSS和RNA polymerase Ⅱ的多内参共同校准的方法以进一步提高结果的准确性。本研究建立了三叶青实时荧光定量PCR内参基因的筛选体系,为后期开展三叶青块根发育过程中基因的功能调控和表达研究提供了理论依据。