γ-氨基丁酸对怀玉山三叶青低温胁迫下试管苗生长及相关生理代谢的影响

目的探讨γ-氨基丁酸(GABA)对怀玉山三叶青低温胁迫下试管苗生长及相关生理代谢的影响,为其在怀玉山三叶青仿野生栽培中的防冻抗寒应用提供依据。方法以低温胁迫下GABA处理的怀玉山三叶青试管苗为研究对象,采用植物组织培养法测定其生长指标,植物生理生化法测定其生理指标,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测其查尔酮合酶和黄酮醇合酶基因的相对表达量。结果与未添加GABA的对照组相比,培养基中添加0.5 g·L^(-1)GABA,怀玉山三叶青2个栽培种“怀玉1号”和“怀玉2号”试管苗的增殖系数、株高、鲜质量、干质量及组织含水量均达到最高值;可以显著提高其可溶性蛋白(SP)、可溶性糖(SS)、脯氨酸(Pro)、还原型谷胱甘肽(GSH)、抗坏血酸(AsA)、吲哚乙酸(IAA)、玉米素核苷(ZR)、赤霉素(GA3)、茉莉酸(JA)的含量,以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、谷胱甘肽还原酶(GR)的活性和查尔酮合酶(CHS)基因的相对表达量(RQ值);显著降低其相对电导率、脱落酸(ABA)、过氧化氢(H_(2)O_(2))、丙二醛(MDA)的含量,O_(2)·^(-)产生速率,以及黄酮醇合酶(FLS)基因的相对表达量。低温胁迫下GABA处理的怀玉山三叶青试管苗的生长与IAA、ZR、GA3、JA、SS、AsA、GSH的含量和CHS基因表达呈正相关。结论适当浓度的GABA可以调控内源植物激素和渗透调节物质含量、抗氧化物质含量以及次生代谢物关键基因表达,以促进低温胁迫下怀玉山三叶青试管苗的生长。

仿野生种植三叶青不同部位总黄酮分析及其抗炎、抗氧化能力比较

目的:比较仿野生种植三叶青不同部位中总黄酮含量、抗氧化活性以及抗炎能力差异。方法:采用醇提工艺对仿野生种植三叶青茎叶、块根、根须进行提取,比较不同部位间总黄酮含量差异;通过DPPH自由基、ABTS^(+)自由基、羟自由基清除实验以及铁离子还原力测定,比较仿野生种植三叶青不同部位间抗氧化能力的强弱;采用脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞作为炎症模型,通过细胞NO的释放量比较仿野生种植三叶青不同部位间的抗炎能力差异。结果:在最佳提取工艺条件下,测得仿野生种植三叶青茎叶、块根、根须总黄酮含量分别为11.86±0.23、8.48±0.10、7.52±0.02 mg·g^(-1);建立三叶青HPLC指纹图谱,共标定了10个共有峰,通过对照品指认出6号峰为芦丁、8号峰为槲皮素、9号峰为山奈酚,并对其含量进行检测,结果显示块根中三种指标成分含量均最高,其次根须,茎叶最低。检测仿野生种植三叶青不同部位对DPPH自由基、ABTS^(+)自由基以及羟自由基的IC_(50)值,茎叶分别为0.2107、0.2315、0.7625 mg/mL;块根分别为0.3134、0.3758、0.8967 mg/mL;根须分别为0.2058、0.2587、0.7856 mg/mL。三叶青茎叶、块根、根须对铁离子还原能力的吸光度值分别为0.172、0.153、0.184。当仿野生种植三叶青三部位的质量浓度在25~200μg/mL之间时,它们不会对RAW264.7细胞造成毒性,能够有效地抑制LPS诱导的NO释放,从而达到良好的抗炎效果。结论:本研究结果为仿野生种植三叶青不同部位的质量评价提供参考,并对仿野生种植三叶青非药用部位废物再利用及后续全资源开发提供理论依据。

三叶青不同部位无机营养元素的ICP-MS/MS分析与评价

为利用电感耦合等离子体串联质谱法(ICP-MS/MS)建立同时测定三叶青中Na、Mg、Al、P、S、K、Ca、Fe、Ni、Cu、Zn、Se共12种无机营养元素含量的方法,并探究不同部位(茎叶、块根、须根)的12种元素含量分布,通过ICP-MS/MS中的单杆和串联四级杆模式下的多种反应气体(O_(2)、H_(2)、NH_(3))形式建立同时分析三叶青中12种营养元素的方法,测定三叶青中不同部位的无机营养元素含量,运用单因素方差分析(ANOVA)比较药材不同部位无机营养元素含量的差异,采用偏最小二乘-判别分析(PLS-DA)构建不同部位的鉴别模型。结果表明,ICP-MS/MS方法的线性、检测限、精密度、重复性和稳定性均良好,实际药材的加样回收率为90.66%~108.50%;不同部位的三叶青无机营养元素含量差异较大,地下部的无机营养元素含量显著高于地上部,Ca、Al、K、Na这4种元素是三叶青3个部位的主要差异元素。本研究通过电感耦合等离子体串联质谱法建立了快速鉴别三叶青不同部位中无机营养元素含量的方法,有效鉴定了块根、须根、茎叶中的无机营养元素含量,三叶青地下部的无机营养元素含量显著高于地上部,研究结果可以为三叶青质量控制、原产地溯源和种质资源的评价提供技术依据。

林下不同栽培模式下三叶青叶片光合特性的比较

目的:探究林下不同栽培模式的三叶青生长和光合特性的差异规律。方法:设置一年生三叶青林下地栽和袋栽2种模式,测定不同栽培模式下三叶青藤叶生长性状和光合特性的相关指标。结果:林下袋栽三叶青的主要农艺性状要优于林下地栽。袋栽模式下三叶青主茎长是地栽的3.04倍,林下袋栽的节数是地栽的2.09倍;林下袋栽模式下叶片的SPAD值和含氮量均显著高于地栽模式;2种模式下的光合指标之间变化趋势不尽相同,袋栽模式下叶片净光合速率、瞬时水分利用率、光合有效辐和叶面温度等指标均显著高于地栽模式;各个指标相关性分析表明三叶青的净光合速率与叶面温度呈显著正相关;光合有效辐射与SPAD值、叶片氮含量呈极显著正相关,与叶面温度呈显著正相关,而与主茎长和节数呈显著负相关。结论:林下袋栽模式下三叶青的生长和光合性能显著优于林下地栽,可为三叶青人工种植模式提供参考。

月均气温对三叶青林下容器栽培苗光合特性及其块根总黄酮含量的影响

文章比较了2015—2019年五府山月均气温对三叶青林下容器栽培苗光合生理及其块根总黄酮含量的影响。结果表明,2015—2019年,五府山1月的气温最低,2—6月气温逐渐提升,7—8月气温达到最高值,9—12月气温逐渐下降。随着1—6月气温逐渐提高,五府山三叶青林下容器栽培苗叶绿素含量SPAD值、净光合速率(P_(n))、气孔导度(G_(s))、蒸腾速率(T_(r))、气孔限制值(L_(s))、瞬时羧化速率(CUE)、初始荧光(F_(o))、最大荧光(F_(m))、光下最小荧光(F′_(o))、光下最大荧光(F′_(m))、稳态荧光(F_(s))、PSⅡ最大光能转化效率(F_(v)/F_(m))、PSⅡ潜在光化学效率(F_(v)/F_(o))、PSⅡ实际光化学效率(ΦPSⅡ)、开放的PSⅡ反应中心捕获激发能效率(F′_(v)/F′_(m))、光化学淬灭系数(q P)和块根总黄酮含量显著提高(P<0.05),胞间CO 2浓度(C_(i))、水分利用效率(WUE)和非光化学淬灭系数(NPQ)显著下降(P<0.05);气温在7—8月达到最高值,五府山三叶青林下容器栽培苗叶绿素含量SPAD值、P_(n)、G_(s)、T_(r)、L_(s)、CUE、F_(o)、F_(m)、F′_(o)、F′_(m)、F_(s)、F_(v)/F_(m)、F_(v)/F_(o)、ΦPSⅡ、F′_(v)/F′_(m)、q P和块根总黄酮含量达到最大值,C_(i)、WUE和NPQ达到最低值;9—12月气温逐渐下降,五府山三叶青林下容器栽培苗叶绿素含量SPAD值、P_(n)、G_(s)、T_(r)、L_(s)、CUE、F_(o)、F_(m)、F′_(o)、F′_(m)、F_(s)、F_(v)/F_(m)、F_(v)/F_(o)、ΦPSⅡ、F′_(v)/F′_(m)、q P和块根总黄酮含量显著下降(P<0.05),C_(i)、WUE和NPQ显著提高(P<0.05)。本试验结果可为三叶青林下容器生态栽培提供气象因子(气温)依据。

丽产特色中药材及饮片中33种禁用农药残留分析

建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法和气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)法评价丽产特色中药材及饮片中33种禁用农药残留情况。用乙腈高速匀浆提取低温浓缩,并结合亲水亲油平衡材料固相萃取柱净化。结果表明,33种禁用农药线性良好,相关系数均大于0.990,加标回收率为75.7%~119.7%,RSD为2.6%~9.8%。160批丽产特色中药材及饮片中有8批检出禁用农药(检出率为5%),其中1批样品超出限度(不合格率为1%),禁用农药残留情况整体良好,需重点关注灵芝孢子粉中硫丹残留。

药用植物三叶青培育技术研究进展

三叶青是中国特有珍稀药用植物,以块根或全草入药,有抗炎、抗肿瘤及保肝等重要药理作用,具有广阔的药用价值和经济价值。然而其野生资源日渐减少,并不能满足市场需求。在此背景下,国内外开始对三叶青培育技术进行了大量研究,并取得了一定的成果。结合以往相关文献,从三叶青的种源选择、基地选址、育苗繁殖、栽植模式、管理5个方面对三叶青生长发育影响进行了系统的阐述与总结,以期为三叶青的培育提供技术参考和借鉴。

三叶青两个受体蛋白基因的克隆及功能分析

植物细胞受体类蛋白是一类重要的结构蛋白,在环境信号感知及细胞间信息传递中起重要作用。本研究克隆了三叶青(Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg)的两个受体蛋白基因ThRLP1与ThRLK1,并对其进行了生物信息学分析、器官特异性表达分析和在块根发育不同时期的表达分析,以明确两基因与三叶青芽发育和块根形成的相关性。生物信息学分析表明,所克隆的两个基因中一个为细胞外受体类蛋白基因(ThR-LP1),其氨基酸序列具有特征的亮氨酸重复序列,亚细胞定位推测在细胞壁;另一个为质膜受体类蛋白激酶基因(ThRLK1),推测氨基酸序列中具有特征的丝氨酸/苏氨酸激酶的催化结构域,亚细胞定位推测在细胞核。器官特异性表达分析发现ThRLP1在块根中的表达量显著低于其他器官,ThRLK1在块根中的表达量显著低于枝蔓但高于其他器官,两个基因的表达水平并没有显示出与芽发育有相关性;块根发育不同时期表达量分析表明,ThRLP1在块根初始膨大期的表达量显著低于其他时期,ThRLK1表达量随块根发育进程而提高,ThR-LK1基因的表达与块根发育进程呈现出一定的正相关性。所克隆的两个受体蛋白可通过大肠杆菌原核表达体系正确表达出相应蛋白。本研究可为进一步明确受体类蛋白激酶基因在三叶青块根发育分子网络中的功能提供初步的参考依据。

基于UFLC-QTRAP-MS/MS技术分析三叶崖爬藤不同部位的多元活性成分

基于三叶崖爬藤不同部位中60种多元活性成分的差异,对不同部位质量进行综合评价。采用超快速高效液相色谱-三重四极线性离子阱质谱联用技术测定三叶崖爬藤块根、茎、叶中60种活性成分的含量,应用多元统计分析方法比较了不同部位间差异活性成分,并对不同部位进行了质量等级排序。含量测定结果显示,60种活性成分总含量在不同部位中的分布规律为叶>茎>块根,分别达到了14263、11583、4603μg/g;主成分分析显示不同部位样本分类明显,差异较大;偏最小二乘回归分析及方差分析显示,8种活性成分可作为区分不同部位的活性成分标志物;灰色关联度分析结果显示,不同部位等级排序为叶>茎>块根,叶的整体质量优于其他两个部位。本实验结果可为三叶崖爬藤不同部位多种活性成分的快速鉴定及质量控制提供方法参考,也为其资源合理开发利用奠定基础。

三叶青质量控制方法研究进展

目的:综述三叶青质量控制研究进展,为进一步完善三叶青药材质量控制提供参考。方法:查阅目前关于三叶青质量评价的文献,并对其进行整理和归纳。结果:目前关于三叶青质量控制研究主要涉及性状鉴定、显微鉴别、活性化学成分的含量测定及指纹图谱研究。结论:虽然已有关于三叶青真伪辨别和质量好坏的评价研究,但目前质量优劣的评价仅凭一种或几种化学成分的含量测定,不能真正控制其质量,对三叶青质量评价进行综述,为进一步完善三叶青质量控制奠定基础,促进三叶青药用资源标准化、合理化的开发和利用。

三叶青地上部分显微结构多样性与总黄酮含量相关性

为揭示不同种源地三叶青(Tetrastigma hemsleyanum Diels&Gilg)茎、叶显微结构多样性,及其与地上部分总黄酮含量的相关性,以49个三叶青种质资源(简称“资源”)为研究对象,对各资源茎、叶的16个比例性状进行比较,采用相关性分析对茎叶比例性状及其与种源地位置和地上部分总黄酮含量关系进行统计分析。结果表明:茎维系数(NSB/LSL)、茎韧纤比(SPF/LSL)、茎维宽比(SXW/LSS)和茎木比(TSL/LSS)等,以及叶部的柄翅高比(PWL/PH)、柄翅宽比(DPW/PW)、柄皮层比(PCT/PH)和气孔密度(SD)等性状资源间变异系数较大,可作为资源间鉴别的解剖学依据。各资源比例性状与种源地地理位置相关性分析结果显示:随着种源地的南移,茎维管组织越来越发达,叶柄两翅逐渐变得不明显,皮层发达;随着种源地由东向西推移,叶气孔密度逐渐降低,叶柄两翅逐渐靠近,髓部变得发达。组织化学定位及相关性分析结果表明:三叶青地上部分黄酮类化合物主要分布于茎部薄壁组织中,地上部分总黄酮含量与茎长宽比(LSL/LSS)、茎皮层比(SCT/LSL)、茎韧纤比(SPF/LSL)和茎木比(TSL/LSS)存在极显著相关性,这些茎性状可作为高黄酮三叶青品种的形态学筛选依据。

三叶青茎部不同溶剂提取物的功能成分、抗氧化及酪氨酸酶抑制活性研究

目的 以三叶青茎部为原料,探究三叶青不同溶剂提取物的功能成分、抗氧化及酪氨酸酶抑制活性。方法 采用乙醇超声法提取三叶青,获得醇提液及残渣。醇提液依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇对其进行分步萃取,残渣则采用蒸馏水多次提取,最终得到4种提取物。分别测定4种提取物总酚、总黄酮、总皂苷、总多糖、抗氧化及酪氨酸酶抑制活性,并进行相关性分析。结果 4种提取物中乙酸乙酯萃取物总酚、总黄酮、总皂苷含量最高,分别为40.22%±1.01%、38.56%±0.64%、6.15%±0.21%,正丁醇萃取物总多糖含量最高,为9.29%±0.25%。各萃取物均具有抗氧化和酪氨酸酶抑制活性,其中乙酸乙酯萃取物清除1,1-二苯基-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、超氧阴离子、2-苯基-4,4,5,5-四甲基咪唑啉-3-氧代-1-氧(2-phenyl-4,4,5,5-tetramethylimidazoline-3-oxide-1-oxyl,PTIO)自由基、羟自由基能力和铁离子还原能力(ferric reducing antioxidant power, FRAP)最强,其半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration, IC50)分别为0.016、0.014、0.355、0.265、0.352mg/mL。同时,在酪氨酸酶抑制活性上,乙酸乙酯萃取物明显强于各萃取物。相关性分析表明,三叶青提取物中总酚、总黄酮、总皂苷物质与抗氧化和酪氨酸酶抑制活性呈极显著正相关性(P<0.01)。结论 三叶青茎部乙酸乙酯萃取物具有较强的抗氧化性及抑制酪氨酸酶活性,主要作用成分为总酚、总黄酮和总皂苷。本研究为进一步开发利用三叶青茎部资源提供相关技术支持。

三叶青不同萃取物的抗氧化和抗菌活性

[目的]三叶青(Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg),是中国特有的珍稀药用植物,含有丰富的抗氧化和抗菌成分,本研究旨在探究三叶青块根4种不同萃取物的抗菌和抗氧化活性,为其药食产品及工业产品开发提供理论依据。[方法]分别采用DPPH·、ABTS^(+)·、FRAP及二倍稀释法比较三叶青正丁醇、乙酸乙酯、石油醚及水萃取物的抗氧化和抗菌活性。[结果](1)三叶青块根4种不同萃取物均具有抗氧化与抗菌活性,且都随萃取物浓度增加而增强;(2)三叶青块根正丁醇萃取物抗氧化效果最好(IC50DPPH·=3.68±0.56 mg·L^(-1),IC50+ABTS·=11.57±1.66 mg·L^(-1)),接近于L-抗坏血酸抗氧化能力;其次为三叶青块根乙酸乙酯萃取物(IC50DPPH·=6.13±0.77 mg·L^(-1),IC50+ABTS·=16.58±1.71 mg·L^(-1));而三叶青块根石油醚与水萃取物抗氧化效果则明显偏弱(P<0.01);(3)三叶青块根4种不同萃取物对不同菌株的抗菌活性同样也存在差异。三叶青块根4种不同萃取物抑菌和杀菌效果为:正丁醇>乙酸乙酯>石油醚>水。三叶青块根正丁醇萃取物抗菌效果表现为:MIC(E.coli)=0.31 g·L^(-1),MBC(E.coli)=0.63 g·L^(-1);MIC(B.subtilis)=1.25 g·L^(-1),MBC(B.subtilis)=1.25 g·L^(-1);MIC(E.faecalis)=0.63 g·L^(-1),MBC(E.faecalis)=0.63 g·L^(-1);MIC(P.saeruginosa)=0.63 g·L^(-1),MBCC(P.aeruginosa)=0.63 g·L^(-1);MIC(S.aureus)=0.63 g·L^(-1),MBC(S.aureus)=1.25 g·L^(-1)。三叶青块根4种萃取物作用于白色念珠菌均未表现出明显抗菌活性。[结论]三叶青块根具有强抗氧化能力及广谱抗菌功效,其发挥作用的活性物质主要富集在正丁醇萃取部位,其次为乙酸乙酯萃取部位。

三叶青查尔酮异构酶基因的克隆及序列分析

目的 阐明三叶青中查尔酮异构酶(CFI)的结构基因信息及其在黄酮生物合成途径中表达调控机制。方法取三叶青新鲜叶片提取总RNA,以所提的总RNA为模板,随机引物(N8)作为引物进行逆转录反应;以逆转录产物为模板,使用正向引物CFI-F与反向引物CFI-R进行PCR;PCR产物经回收纯化后与克隆载体pMD18-T连接并转化至大肠杆菌DH5a,筛选阳性克隆进行测序。结果 测序结果分析显示,该基因片段长为760 bp,含一个长为714 bp的开放阅读框,编码237个氨基酸(NCBI登录号:OP358477)。NCBI数据库BLAST搜索分析显示,该基因编码产物与CFI高度同源;进化树分析表明三叶青的CFI基因与大齿牛果藤的亲缘关系最近。结论 本研究为进一步探究三叶青黄酮类成分的生物合成机制奠定基础。

三叶青黄酮诱导SGC-7901胃癌细胞凋亡的实验研究

目的:观察三叶青黄酮对SGC-7901人胃癌细胞凋亡的诱导作用,初步探讨其可能的机制。方法:体外培养SGC-7901人胃癌细胞,并用MTT法检测三叶青黄酮对肿瘤细胞生长的抑制作用,流式细胞仪分析细胞周期,光镜和电镜观察细胞形态改变,酶谱分析基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白的表达改变。结果:三叶青黄酮能显著地抑制SGC-7901细胞的生长,并且具有浓度依赖性,且细胞有明显的凋亡特征性改变,并能降低细胞上清液中MMP-2的含量。结论:三叶青黄酮具有抗肿瘤细胞增殖和诱导凋亡的作用,有潜在的抗肿瘤价值,值得进一步研究。

蛇附子中4种黄酮类成分的分离及含量测定

目的：研究蛇附子中4种黄酮类成分的分离及其含量测定。方法：采用质谱引导自动纯化系统分离蛇附子中4种黄酮类成分,应用NMR、HR-MS、UV等波谱学方法进行结构鉴定;采用UHPLC-DAD法测定含量,Kinetex C18色谱柱（100 mm×4.6 mm,2.6μm）,以乙腈（B）-0.1%甲酸（A）为流动相,梯度洗脱,流速0.4 m L/min,检测波长350 nm,柱温30℃。结果：从蛇附子中分离得到4个黄酮类化合物,分别鉴定为：芦丁、异槲皮苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、紫云英苷;4个成分的线性范围分别为0.283~11.32μg/m L（r1=0.9998）、0.311~12.44μg/m L（r2=0.9994）、0.277~11.08μg/m L（r3=0.9995）、0.103~2.06μg/m L（r4=0.9990）,平均加样回收率分别为99.75%（RSD=2.15%）、98.73%（RSD=2.58%）、98.03%（RSD=2.23%）、97.62%（RSD=1.95%）。结论：4个黄酮类化合物均为首次从该植物中分离得到,建立的UHPLC-DAD定量分析方法简便、快捷、准确,可作为蛇附子的质量控制方法。

三叶青愈伤组织培养及其总黄酮含量的研究

目的:通过三叶青愈伤组织诱导、增殖、分化及其总黄酮含量测定,探讨用三叶青愈伤组织生产三叶青黄酮的可行性。方法:以无菌苗叶片、野生三叶青叶片和茎段为外植体,诱导形成愈伤组织;经不同培养基培养后,选取两种典型的愈伤组织、叶片和块根为材料,以乙醇为溶剂,超声波提取总黄酮,用NaNO2-Al(NO3)3显色,在500nm处用分光光度计测总黄酮含量。结果:三叶青愈伤组织的最佳诱导培养基为2/3MS+2.0mg/L6-BA+2.0mg/LNAA,最佳增殖培养基为MS+2.0mg/L6-BA+2.0mg/LNAA,最佳生根培养基为1/2MS+1.0mg/L6-BA+1.0mg/LNAA。三叶青总黄酮含量在块根中为31.135mg/g,在叶片中为12.830mg/g,在愈伤组织中高达18.047mg/g。结论:三叶青愈伤组织中总黄酮含量较高,用愈伤组织可大规模生产三叶青黄酮,满足医药市场的迫切需求。

濒危药用植物三叶青研究进展

三叶青为中国特有的具有重要药用价值的植物。现代药理研究表明,三叶青具有较好的抗肿瘤活性,黄酮类化合物是三叶青的主要组成成分和功效成分。在相关文献的基础上,从植物学、化学成分、毒理药理学、临床应用、人工栽培、生物技术等方面对三叶青在各个领域的研究成果进行了总结,并探讨了今后的研究方向,在保护濒危种质资源三叶青的同时,为合理开发与利用三叶青的药用价值提供科学依据。

中草药三叶青抗肿瘤作用机制实验研究和临床应用

目的拟对民间常用中草药三叶青抗恶性肿瘤作用机制做深入的实验研究,并在此基础上按《保健食品注册管理办法(试行)》要求以三叶青为主,配以药食同用的黄芪、人参皂苷制成制剂金芪片经过临床验证研制成抗恶性肿瘤的功能性保健食品。方法按《保健食品检验与评价技术规范》对三叶青进行抗肿瘤功能实验、提高人体免疫功能实验和食品安全性毒理学评价实验,证实三叶青有明显抗肿瘤作用,且长期服用安全无毒。以三叶青为主配以黄芪、人参皂苷制成的制剂金芪片经临床验证,证实疗效确切无毒副反应。结果各项实验结果证实三叶青及金芪片提取物对人体肝癌细胞HepG2活性具有较强抑制作用,对小鼠HepG2细胞的端粒酶基因表达有抑制作用,并又增强小鼠细胞免疫和体液免疫功能的作用。三叶青提取物经急性毒性试验及长期毒性实验证实安全无毒。金芪片临床验证:120例恶性肿瘤病人服用90天,完全缓解52例,部分缓解42例,稳定18例,进展8例,总有效率78.33%。结论表明三叶青及其制剂金芪片对恶性肿瘤病人有较好的效果,值得推广,并可期盼做进一步研究开发成抗恶性肿瘤新药。

三叶青黄酮对H-22荷瘤小鼠瘤体的抑制作用及其机理研究

[目的]观察三叶青总黄酮对H-22荷瘤小鼠瘤体的抑制作用,探讨其作用机理。[方法]小鼠肝癌H-22细胞右前肢腋窝皮下接种造膜,观察低、中、高剂量三叶青黄酮对荷瘤小鼠抑瘤率、脾脏指数、胸腺指数的影响,并通过定量RT-PCR检测小鼠皮下移植瘤Fasp-3、CytC的表达情况。[结果]低、中、高剂量三叶青黄酮对H-22荷瘤小鼠的瘤重抑制率分别为34.28%、32.56%和29.24%;皮下移植瘤Fasp-3、CytC mRNA的表达低剂量组明显高于空白组(P<0.05)。[结论]三叶青黄酮可显著抑制肿瘤细胞,这一作用与其能促进肿瘤细胞的促凋亡基因Fasp-3、CytC的表达相关。