常用免疫抑制剂对Tfr细胞和Breg细胞的作用研究

目的探讨常用免疫抑制剂对滤泡调节性T细胞(Tfr细胞)和调节性B细胞(Breg细胞)的作用。方法收集6例健康志愿者的外周血(每例5 mL),采用人淋巴细胞分离液分离出淋巴细胞进行培养,将细胞分为对照组(未加入免疫抑制剂)、环孢素组(250 ng/mL)、他克莫司组(10 ng/mL)和西罗莫司组(10 ng/mL),分别用相应免疫抑制剂刺激48 h。用流式细胞仪检测各组淋巴细胞中Breg细胞和Tfr细胞的比例;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组上清液中白细胞介素(IL)-21的含量。结果与对照组比较,环孢素组、他克莫司组和西罗莫司组淋巴细胞中Breg细胞的比例均升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05);环孢素组和他克莫司组淋巴细胞中Tfr细胞比例均升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05);西罗莫司组淋巴细胞中Tfr细胞比例下降,差异亦有统计学意义(P<0.05)。ELISA检测结果显示,与对照组比较,环孢素组和他克莫司组上清液中IL-21含量均下降,差异均有统计学意义(均为P<0.05);西罗莫司对IL-21分泌的影响不大,差异无统计学意义(P>0.05)。结论环孢素和他克莫司具有抑制B细胞免疫反应的作用。

B2型胸腺瘤胸腺Tfr细胞和Tfh细胞与重症肌无力的相关性研究

探讨B2型胸腺瘤胸腺Tfr细胞和Tfh细胞与重症肌无力的相关性及对疾病诊治的决策意义。收集了2005年5月～2015年12月胸外科行胸腺切除术27例住院患者的临床及病理资料。其中合并重症肌无力(MG)12例,不合并MG15例,采用免疫荧光染色方法检测并分析两组胸腺生发中心中Tfr和Tfh细胞数及比值。结果,Tfr在两组间比较差异有统计学意义(P<0.01),B2型胸腺瘤合并MG组Tfr细胞低于对照组;Tfh在两组间比较差异有统计学意义(P<0.01),B2型胸腺瘤合并MG组Tfh细胞高于对照组;Tfh/Tfr比值在两组间比较有统计学意义(P<0.01),B2型胸腺瘤合并MG组Tfh/Tfr高于对照组。因此,B2型胸腺瘤合并MG患者胸腺中的Tfr细胞及Tfh细胞的异常,可能对生发中心形成免疫调控有一定作用,可能参与了MG的发病,从一个侧面加以证实以往研究MG的免疫调控机制,对疾病诊治提供了多维度的决策选择。

不规则抗体阳性患者外周血Tfh、Tfr细胞亚群检测及临床意义

目的研究不规则抗体阳性患者外周血Tfh1、Tfh2、Tfh17、Tfr细胞亚群及相关因子ILN-γ、IL-4、IL-17与IL-10的变化,探讨Tfh细胞亚群平衡在血型抗原同种免疫机制中的作用及临床意义。方法收集定期输血的32例不规则抗体阳性患者作为实验组,同时随机选择32例不规则抗体筛查阴性患者作为对照组,分别采集实验组与对照组患者外周血并分离单核细胞(PBMC),采用流式细胞术(FCM)检测Tfh1、Tfh2、Tfh17、Tfr细胞亚群比例,ELISA法测定细胞因子ILN-γ、IL-4、IL-17、IL-10变化,并分析Tfh1/Tfh2、Tfh17/Tfr、ILN-γ/IL-4、IL-17/IL-10比值变化与不规则抗体总效价的相关性。结果与对照组比较,实验组外周血Tfh2亚群比例升高,Tfr亚群比例降低,差异有统计学意义(P<0.05);两组Tfh1、Tfh17细胞亚群比例无显著性差异(P>0.05);与对照组比较,实验组细胞因子IL-10降低,IL-4升高,差异有统计学意义(P<0.05),两组细胞因子ILN-γ与IL-17无显著性差异(P>0.05);相关性分析表明Tfh17/Tfr、IL-17/IL-10比值变化与不规则抗体效价呈正相关(r=0.59、0.75,P<0.05);外周血Tfh1/Tfh2、ILN-γ/IL-4比值变化与不规则抗体效价呈负相关(r=-0.48、-0.77,P<0.05)。结论不规则抗体阳性患者外周血Tfh1/Tfh2、Tfh17/Tfr细胞亚群比例失调及细胞因子ILN-γ/IL-4、IL-17/IL-10比值变化可能与血型同种免疫机制相关,该研究可为定期输血患者血型不规则抗体的预防提供新思路,具有重要临床意义。

Tfr细胞及炎性因子对脓毒症患者的影响

目的Tfr细胞及炎性因子在脓毒症患者中的表达及对预后的影响。方法选取2020年6月—2022年6月在本院进行脓毒症治疗的100例患者为脓毒症组,另取100例来本院进行健康体检者作为健康对照组。采用酶联免疫法检测血清中抑炎细胞因子(IL-4、IL-10、IL-35)、促炎细胞因子(IL-6、IL-1β);肿瘤坏死因子(TNF-α),流式细胞仪检测Tfr细胞标志物(CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)CD25^(+)),logistic分析脓毒症患者不良预后产生的因素。结果与健康组比较,脓毒症组患者血清中促炎细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α及Tfr细胞标志物CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)CD25^(+)升高,抑炎细胞因子IL-4、IL-10、IL-35降低(均P<0.05)。预后分析中发现,预后不良的脓毒症患者的抑炎细胞因子IL-4、IL-10、IL-35降低,促炎细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α升高及Tfr细胞标志物CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)CD25^(+)水平显著升高(均P<0.05);多因素logistic回归分析结果中,IL-4、IL-10、IL-35、IL-6、IL-1β、TNF-α、CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)CD25^(+)均是导致脓毒症患者预后不良的因素。结论Tfr细胞以及炎性因子的异常不仅对增加脓毒症患者的疾病反应具有重要促进作用,还会在一定程度上影响患者的预后。

血管活性肠肽调控滤泡辅助性T细胞/滤泡调节性T细胞平衡治疗溃疡性结肠炎的研究进展

溃疡性结肠炎(UC)是以结肠黏膜屏障持续损伤为病理基础的自身免疫性疾病。滤泡辅助性T(Tfh)细胞和滤泡调节性T(Tfr)细胞的异常表达与UC的发生发展密切相关,Tfh细胞具有分泌促炎因子、辅助B细胞产生抗体等作用,能够促进UC的发展,Tfr细胞则具有抑制Tfh细胞活性、分泌抗炎因子等作用,如何调节两者平衡已成为UC的潜在治疗靶点之一。血管活性肠肽(VIP)对UC具有防治作用,其机制与调控Tfh/Tfr细胞平衡密切相关,可对UC的治疗提供思路。

滤泡辅助性T细胞和滤泡调节性T细胞在骨肉瘤患者中的数量变化及临床意义

目的探讨滤泡辅助性T细胞(TFH)和滤泡调节性T细胞(TFR)在骨肉瘤患者外周血中的数量变化及与预后的关系。方法收集2015年1月至2018年12月20例骨肉瘤患者和20例健康体检者的静脉血,采用流式细胞术检测骨肉瘤患者和健康体检者外周血循环TFH细胞和TFR细胞频率,分析骨肉瘤患者不同年龄段、不同性别以及不同分期上述指标及TFH/TFR细胞频率比值。将外周血循环TFH/TFR细胞频率比值按中位值对骨肉瘤患者进行分层,并根据随访数据分析总生存期(OS)。结果流式细胞术检测结果显示,20例骨肉瘤患者外周血TFH细胞频率[(6.916±1.778)%vs.(2.310±0.874)%,P=0.004)]和TFR细胞频率[(3.016±0.760)%vs.(0.472±0.174)%,P=0.002)]均显著高于健康体检者。骨肉瘤患者TFH/TFR细胞频率比值为2.679±1.246,低于健康体检者的5.830±2.464(P=0.005)。10~25岁患者的外周血TFH细胞和TFR细胞频率明显高于其他年龄段(P<0.05),Ⅲ期患者外周血TFH细胞和TFR细胞频率明显高于Ⅰ期和Ⅱ期患者(P<0.05)。男性和女性骨肉瘤患者外周血TFH细胞和TFR细胞频率的差异无统计学意义(P>0.05)。以20例骨肉瘤患者外周血循环TFH/TFR细胞频率比值的中位数2.362为界值,分为低比值组(≤2.362)和高比值组(>2.362)各10例。20例骨肉瘤患者的中位OS为27个月。其中低比值组中位OS为19个月,低于高比值组的32个月,差异有统计学意义(P=0.036)。结论在骨肉瘤致病过程中,TFH细胞和TFR细胞频率显著升高,与年龄和分期有关。

滤泡调节性T细胞减少与类风湿性关节炎发生和发展相关

目的探讨滤泡调节性T(Tfr)细胞在类风湿性关节炎(RA)发病中的可能机制。方法采用流式细胞术检测20例RA患者及20例健康体检者外周血中CD4^(+)CXCR5^(+)FOXP3^(+)ICOS^(+)Tfr细胞的百分比并分析Tfr细胞比例与RA临床实验室检测指标的相关性;ELISA检测患者血清中白细胞介素10(IL-10)、IL-12、IL-2、转化生长因子β(TGF-β)、CXC趋化因子配体13(CXCL13)的水平;实时定量PCR检测外周血单个核细胞(PBMC)的B细胞淋巴瘤因子6(Bcl6)、B淋巴细胞诱导成熟蛋白1(Blimp-1)的mRNA表达;免疫组织化学法检测RA患者关节滑膜Bcl6、CXCL13的表达。结果与健康对照组相比,RA患者外周血Tfr细胞比例显著下降;Tfr细胞百分比与C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)、血沉(ESR)、28关节疾病活动度评分(DAS28)水平呈负相关;RA患者血清中IL-12、CXCL13表达水平显著升高,IL-2、IL-10、TGF-β表达水平显著降低;RA患者PBMC的Bcl6 mRNA水平显著增高,而Blimp-1 mRNA的表达显著降低;RA患者的关节滑膜中观察到Bcl6、CXCL13显著高表达。结论外周血Tfr细胞比例减少可能与RA的发生发展有关。

调节性免疫细胞在异种移植免疫中的作用

异种移植是未来解决器官短缺最有前景的方法。近年来基因编辑和免疫学技术的进步推动了异种移植的快速发展,但是异种移植的临床应用仍然存在诸多难以克服的障碍,其中排斥反应是引起异种移植失败的最重要原因。调节性免疫细胞是机体内一群具有负性调节功能的免疫细胞,能够抑制同种异体移植排斥反应,延长移植物的存活时间。本文总结了近几年调节性免疫细胞在异种移植应用的研究进展,为异种移植排斥反应预防和治疗提供参考。