肝癌穿刺组织中抑癌基因Tg737的表达情况及其功能分析

目的:研究肝癌穿刺组织中抑癌基因Tg737的表达情况及其功能。方法:收集肝癌组织和癌旁正常组织,检测Tg737的mRNA和蛋白表达量;培养SMMC7721和MHCC97-H细胞株,转染Tg737的表达质粒后测定细胞的增殖能力、细胞中原癌基因(c-fms、c-myc、n-ras)的表达量、上清液中VEGF的含量。结果:肝癌组织中Tg737的mRNA表达量和蛋白表达量均明显低于癌旁正常组织;TNMIIIIV期、低未分化、远处转移的肝癌组织中Tg737的mRNA表达量和蛋白表达量均低于TNMI-II期、中高分化、未远处转移的肝癌组织;Tg737表达质粒能够以剂量依赖性的方式降低细胞活力,减少细胞中c-fms、c-myc、n-ras的mRNA表达量以及上清液中VEGFA、VEGFB、VEGFC的含量。结论:肝癌组织中抑癌基因Tg737的表达量减少;增加肝癌细胞中抑癌基因Tg737的表达后,细胞的活力降低,原癌基因的表达以及VEGF的含量均减少。

肝癌穿刺组织中抑癌基因Tg737的表达和功能

目的探讨抑癌基因Tg737在肝癌穿刺组织中的表达状况及功能。方法行肝穿刺获取肝癌组织和邻近正常组织,通过免疫组化和病理切片法,确认组织的性质。对MHCC97-H和SMMC7721细胞株予以培养,将不同浓度的Tg737表达质粒与转染剂配合。按0、1.0、10.0μg/L不同质粒浓度分组,观察Tg737过表达后肝细胞活力状况及VEGF含量。结果较癌旁正常组织,Tg737的蛋白表达量和mRNA表达量在肝癌组织中居更低水平,差异有统计学意义(P<0.05)。转染Tg737表达质粒可使MHCC97-H和SMMC7721细胞株所具有的CCK-8吸光值降低,质量浓度呈越大显示时,吸光值越低;其亦可使MTT吸光值降低,质粒浓度呈越大显示时,吸光值呈越低显示。质量浓度呈越大显示时,VEGFA、VEGFB含量呈越低显示。结论肝癌组织中分布的抑癌基因Tg737表达呈明显减少显示;通过增加Tg737表达,细胞活力降低,VEGF含量、原癌基因表达均显示明显减少。

肝癌边缘群细胞抑癌基因Tg737杂合性缺失的检测及其意义

目的 检测肝癌边缘群（SP）细胞中Tg737基因的杂合性缺失（LOH）,探讨其与肝癌临床特征的关系及意义.方法 胶原酶结合机械消化法分别制备95例肝癌细胞及癌旁正常肝细胞悬液,Hoeehst33342染色并结合流式细胞仪分别分选肝癌及癌旁的边缘群细胞,分别提取DNA后以同一患者的外周血DNA为对照,采用PCR-SSCP-银染方法 检测肝癌和癌旁中SP细胞Tg737基因5个微卫星位点的LOH,然后进一步分析微卫星LOH情况与原发性肝癌临床特征的关系及意义.结果 95例肝癌边缘群细胞中,Tg737基因5个位点LOH发生的平均频率是71.24%,频率最高点为G64212（78.75%）,其中24例（25.30%）标本中检出3个以上微卫星标记位点存在LOH.其中SHGC-57879和G64212的LOH与肝癌的转移和TNM分期密切相关（P〈0.01）.结论 肝癌边缘群细胞中Tg737基因的高频率LOH与原发性肝癌的临床分期和远处转移相关,提示肝癌干细胞中的基因组不稳定性是影响肝癌病理进程的重要因素.

抑癌基因Tg737下调对肝癌细胞增殖的影响及其机制

目的 探讨下调Tg737表达对肝癌细胞增殖能力的影响及其下游机制.方法 SMMC7721和MHCC97-H细胞分别转染空白对照病毒和干扰Tg737表达的慢病毒后,用CCK-8法绘制肝癌细胞生长曲线检测其增殖能力变化.通过流式细胞仪检测肝癌细胞周期变化,并进一步检测细胞周期调控蛋白的表达变化,推断可能的分子机制.结果 与转染空白对照病毒的细胞相比,稳定下调Tg737的SMMC7721和MHCC97-H细胞增殖能力增强,G1期细胞比例减少,S期细胞比例增高,调控细胞周期完成G1/S转化的cyclinD1的表达水平增高.结论 在肝癌细胞SMMC7721和MHCC97-H下调Tg737表达可能通过上调cylinD1的表达促进肝癌细胞周期由G1期向S期转化,进而促进肝癌细胞的增殖.