过敏性紫癜患儿外周血miR-155表达及与Th17/Treg平衡的关系

目的探讨过敏性紫癜患儿外周血miR-155表达及与Th17/Treg平衡的关系。方法选取79例过敏性紫癜患儿为研究对象,60例健康体检儿童作为对照,采用qRT-PCR技术检测外周血miR-155、RORγt和Foxp3mRNA表达,流式细胞术检测Th17和Treg细胞比例,酶联免疫吸附法检测细胞因子IL-6、IL-17、IL-22、IL-23、IL-10和TGF-β1表达,Pearson相关性分析miR-155与Th17和Treg细胞,RORγt和Foxp3mRNA,细胞因子IL-6、IL-17、IL-22、IL-23、IL-10和TGF-β1表达之间关系。结果与健康对照相比,过敏性紫癜患儿外周血miR-155、Th17细胞比例、转录因子RORγt、相关细胞因子IL-6、IL-17、IL-22和IL-23均显著升高(P<0.05),Treg细胞比例、转录因子Foxp3、相关细胞因子IL-10和TGF-β1均显著降低(P<0.05)。miR-155与Th17细胞比例、RORγt、IL-6、IL-17、IL-22和IL-23均呈正相关(P<0.05),与Treg细胞比例、Foxp3、IL-10和TGF-β1均呈负相关(P<0.05)。结论过敏性紫癜患儿外周血miR-155高表达,Th17/Treg平衡失调,miR-155可能通过调节Th17/Treg平衡参与过敏性紫癜的疾病过程,是该疾病潜在的治疗靶点。

祛毒退黄汤结肠滴注给药对慢性乙型肝炎肠源性内毒素血症、外周血Th_(17)/Treg细胞因子和肝功能的影响

目的:探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者肠源性内毒素血症(TEM)对外周血Treg细胞、Th_(17)细胞及对肝功能的影响。方法:收集35例健康对照者(HC)和70例CHB患者且血浆内毒素阳性患者的外周血;应用流式细胞术测定外周血Treg细胞(CD_4^+Fox P_3^+)及Th_(17)细胞(CD_4^+IL-17)的水平;并结合血浆谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和总胆红素(TBIL)进行分析。结果:与健康对照者比较,CHB患者的Treg细胞百分比、Th17细胞百分比显著升高(P<0.05);CHB内素素阳性组患者(对照组)Treg细胞百分比、Th_(17)细胞百分比水平均明显高于研究组(P<0.05)。并且治疗后研究组肝功能指标血浆谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和总胆红素(TBIL)的改善较对照组更为明显(P<0.05)。两组患者不良反应发生率差异不具有统计学意义(P>0.05)。结论:自拟祛毒退黄汤结肠滴注给药对慢性乙型肝炎肠源性内毒素血症症状和肝功能均有较为明显的改善作用,副作用小,值得临床应用。

中西医结合治疗对乙型肝炎肝硬化失代偿期患者外周血Th/Treg平衡及淋巴细胞的影响研究

目的:探究中西医结合治疗对乙型肝炎肝硬化失代偿期患者外周血Th/Treg平衡及淋巴细胞影响性,以期提高疗效,丰富治疗方法。方法:选取2017年2月至2018年8月安徽省淮北市中医医院收治符合纳入条件乙型肝炎肝硬化失代偿期患者80例作为研究对象,按照就诊顺序编号随机分为对照组与观察组,每组40例。对照组给予常规西医治疗予一般治疗、药物治疗、补充白蛋白和血浆、放腹水、积极防治各种并发症治疗,观察组加用中药汤剂治疗,每日1剂,均治疗4周。观察2组患者治疗前、完成治疗后淋巴细胞指标CD3^+、CD4^+、CD8^+、CD4^+/CD8^+、CD19、自然杀伤细胞(NK细胞)变化并比较;观察2组患者治疗前、完成治疗后在辅助性T细胞(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡指标白细胞介素-17(IL-17)、IL-6和转化生长因子(TGF)-β变化并比较;观察2组患者治疗前、完成治疗后在肝功能、肝纤维化指标、谷丙转氨酶(ALT)、白蛋白(ALB)、白球比(A/G)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、透明质酸(HA)、Ⅳ型胶原、层黏蛋白(LN)变化并比较;治疗过程中进行不良反应监测,并及时治疗,治疗结束后进行统计比较。结果:1)2组患者治疗前CD3^+、CD4^+、CD8^+、CD4^+/CD8^+、CD19、NK细胞比较,差异无统计学意义(P>0.05),完成治疗后2组患者CD3^+、CD4^+、CD4^+/CD8^+、CD19、NK细胞较治疗前均显著上升,CD8^+则显著下降(P<0.05),完成治疗后观察组患者CD3^+、CD4^+、CD4^+/CD8^+、CD19、NK细胞显著高于对照组,CD8^+显著低于对照组(P<0.05)。2)2组患者治疗前Th17、IL-17、IL-6、Treg、TGF-β比较,差异无统计学意义(P>0.05),完成治疗后2组患者Th17、IL-17、IL-6较治疗前显著下降,Treg、TGF-β显著升高(P<0.05),完成治疗后观察组Th17、IL-17、IL-6显著低于对照组、Treg、TGF-β显著高于对照组(P<0.05)。3)2组患者治疗前ALT、ALB、A/G、γ-GT、HA、Ⅳ型胶原、LN比较,差异无统计学意义(P>0.05),完成治疗后2组患者ALT、ALB、γ-GT、HA、Ⅳ型胶原、LN较治疗前均显著下降、A/G较治疗前显著升高(P<0.05),完成治疗后观察组A/G显著高于对照组,余指标显著低于对照组(P<0.05)。4)观察组疲乏无力发生率显著低于对照组(P<0.05),而在恶心呕吐、肝功能异常比率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:中西医结合治疗能改善乙型肝炎肝硬化失代偿期患者外周血Th/Treg平衡,提供淋巴细胞水平,改善功能,从而提高疗效。

绵羊痒螨巨噬细胞迁移抑制因子重组蛋白对兔外周血单个核细胞Th1/Th2型和Th17/Treg型特征因子表达的影响

为了初步探讨绵羊痒螨巨噬细胞迁移抑制因子(PoMIF)对健康新西兰兔外周血单个核细胞(PBMC)中Th1/Th2和Th17/Treg细胞平衡的变化。采用RT-PCR从绵羊痒螨总RNA中扩增得到MIF全长基因,经原核表达、纯化重组PoMIF(rPoMIF)蛋白,并分析其氧化还原酶和互变异构酶活性。筛选与健康新西兰兔PBMC孵育的最佳rPoMIF浓度,且用最佳浓度rPoMIF(0.2μg·mL^-1)与PBMC共同孵育0、1、6、12、24、36 h后收集细胞,用荧光定量PCR检测其Th1/Th2/Th17/Treg细胞相对应的特征性转录因子T-bet/GATA-3/RORc/Foxp3和特征性细胞因子IFN-γ/IL-4/IL^-17A/IL^-10 mRNA表达变化。结果表明:PoMIF全长363 bp,rPoMIF大小为32 ku(含pET32a标签蛋白19 ku),且具有互变异构酶活性;rPoMIF刺激后PBMC中Th1细胞的T-bet和IFN-γ先下降后上升,Th2细胞的GATA-3和IL-4均呈下降趋势,且T-bet/GATA-3和IFN-γ/IL-4比值在12、24和36 h均升高;Th17细胞的RORc和IL^-17A在各时间点下降,而Treg细胞的Foxp3和IL^-10在各时间点升高,且RORc/Foxp3和IL^-17A/IL^-10比值在各时间点均变低。rPoMIF可造成家兔外周血单个核细胞的Th1/Th2和Th17/Treg平衡分别向Th1和Treg偏移。