基于Th17/Treg细胞免疫平衡探讨升阳益胃汤治疗特发性膜性肾病的作用及机制

[目的]探讨升阳益胃汤对膜性肾病(MN)大鼠模型的保护作用及机制。[方法]将40只雄性SD大鼠随机分为对照组10只和造模组30只,造模组尾静脉注射羊抗大鼠FX1A血清制备海曼(Heymann)肾炎模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、升阳益胃汤组和盐酸贝那普利组各10只,并予以相应药物灌胃。干预6周后,检测24 h尿蛋白(24 h-UTP)、总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN);取肾组织行苏木素-伊红(HE)、马松(Masson)和六胺银(PASM)染色,观察肾组织病理形态变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)法检测肾组织白细胞介素-17A(IL-17A)、白细胞介素-10(IL-10)、α-辅肌动蛋白-4(α-actinin-4)、足糖萼蛋白[Podocalyxin(Podxl)]表达情况;取大鼠脾脏检测Th17和Treg细胞数量。[结果]与对照组相比,模型组大鼠24 h-UTP、TC、TG水平显著升高,TP、Alb水平显著降低(P<0.01),Scr、BUN水平差别无统计学意义(P>0.05);模型组肾脏病理改变明显;α-actinin-4、Podxl表达均明显减少(P<0.01、P<0.05),IL-17A水平显著升高,IL-10水平明显降低(P<0.01);Th17%、Th17/Treg显著升高,Treg%显著降低(P<0.01)。与模型组相比,各治疗组24 h-UTP、TC、TG、TP水平显著降低(P<0.05或P<0.01),Alb水平明显升高(P<0.05);肾脏病理改变减轻。其中,Z组α-actinin-4、Podxl表达明显增加(P<0.05或P<0.01);IL-17A、Th17%、Th17/Treg水平明显降低,IL-10、Treg%水平升高(P<0.05或P<0.01)。[结论]升阳益胃汤可降低膜性肾病大鼠蛋白尿,减轻肾脏病理损伤,并提高足细胞α-actinin-4、Podxl的表达,具有明显的肾脏保护作用,其作用机制可能与调节Th17/Treg免疫平衡有关。

CD4^(+)T细胞Th1/Th2及Th17/Treg平衡状态在IgA肾病间质纤维化中的意义

目的:探讨CD4^(+)T细胞亚群Th1、Th2、Th17、Treg及Th1/Th2、Th17/Treg比值与IgA肾病(IgAN)间质纤维化的关系。方法:收集2022年6月至2023年12月在济南威高肾科医院经肾活检确诊的86例IgAN患者,按照肾间质纤维化程度分为T0组(n=36)、T1组(n=28)和T2组(n=22)。选取同期的健康体检者43例为对照组。采用流式细胞术检测外周血中CD4^(+)T细胞亚群的比例,酶联免疫吸附试验检测外周血中CD4^(+)T淋巴细胞因子:γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-4、IL-17和转化生长因子β(TGF-β)。结果:随着肾间质纤维化程度的增加,Th1、Treg及Th1/Th2逐渐降低,而Th2、Th17及Th17/Treg逐渐升高(P<0.05)。IL-4、IL-17和TGF-β水平随着IgAN肾间质纤维化程度的增加而升高(P<0.05),而IFN-γ水平在各组间的差异无统计学意义。Pearson相关性分析显示,Th1/Th2、Th17/Treg与IgAN患者的临床指标呈弱相关性(P<0.05)。结论:IgAN患者外周血中CD4^(+)T细胞亚群Th1/Th2、Th17/Treg比值失衡,可能参与了肾间质纤维化的发生发展。

积雪草酸调控白细胞介素-6/信号转导子和转录激活子3/核转录因子-κB通路对哮喘小鼠Treg/Th17免疫平衡的影响

目的:探讨积雪草酸调控白细胞介素(IL)-6/信号转导子和转录激活子3(STAT3)/核转录因子-κB(NF-κB)通路对哮喘小鼠Treg/Th17免疫平衡的影响。方法:采用卵清蛋白(OVA)致敏和激发来制备哮喘小鼠模型,随机分为模型组、积雪草酸低剂量组(54 mg/kg)、积雪草酸高剂量组(108 mg/kg)、积雪草酸高剂量(108 mg/kg)+Colivelin(IL-6/STAT3/NF-κB激活剂,2 mg/kg)组,每组各10只。另选10只小鼠在致敏和激发阶段给予等剂量生理盐水设为对照组,用积雪草酸和Colivelin分组处理各组小鼠后检测其肺组织病理形态,肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞计数,外周血Treg/Th17,BALF和血清中Treg、Th17细胞分泌因子水平,肺组织IL-6/STAT3/NF-κB通路相关蛋白表达。结果:与对照组比较,模型组小鼠肺组织发生明显病理损伤,外周血Treg细胞占比和Treg/Th17,BALF和血清IL-10、IL-35水平降低(P<0.05)。肺部炎症评分,BALF中白细胞计数与嗜酸粒细胞计数,外周血Th17细胞占比,BALF和血清IL-17、IL-6水平,肺组织IL-6蛋白表达与p-STAT3/STAT3、p-NF-κB p65/NF-κB p65升高(P<0.05)。低、高剂量积雪草酸可逆转哮喘模型小鼠上述病理变化,且高剂量积雪草酸作用更强。Colivelin可减弱积雪草酸对哮喘模型小鼠上述病理变化的作用。结论:积雪草酸可通过减弱IL-6表达与STAT3、NF-κB的磷酸化,抑制哮喘小鼠炎症细胞及炎症因子产生,从而减轻气道炎症及肺组织损伤,改善肺功能。

川芎-独活-牛膝配伍在骨关节炎发病中TH17/Treg细胞免疫平衡的调节作用

目的:探讨川芎-独活-牛膝配伍在骨关节炎发病中Th17/Treg细胞免疫平衡的调节作用。方法:购置SPF级无菌C57BL/6小鼠40只,随机取小鼠10只为空白对照组;剩余30只小鼠采用Hulth-Telhag方法构建膝关节炎动物模型,并随机分为模型组、异戊酸组和川芎-独活-牛膝配伍组,各10只。空白对照组和模型组腹腔灌注等体积生理盐水,异戊酸组腹腔灌胃异戊酸,川芎-独活-牛膝配伍组采用川芎-独活-牛膝水煎液灌胃,各组均持续7d干预,比较各组HE染色结果、炎性因子水平及Th17/Treg细胞免疫。结果:HE染色下异戊酸组伴有轻度关节软骨破坏,可见少许炎症细胞浸润;川芎-独活-牛膝配伍组关节软骨破坏不明显,炎症细胞亦相对较少;川芎-独活-牛膝配伍组IL-17、IL-6、IL-4低于异戊酸组(P<0.05);IL-10和TGF高于异戊酸组(P<0.05);流式细胞仪测定结果表明:川芎-独活-牛膝配伍组干预7d后Th17细胞低于异戊酸组和模型组(P<0.05);Treg细胞高于异戊酸组和模型组(P<0.05)。结论:川芎-独活-牛膝配伍用于骨关节炎中能减轻膝关节滑膜及软组织损伤,降低体内炎性因子水平,其机制可能与Th17/Treg细胞免疫平衡的调节有关。

痛泻安肠方对肠易激综合征小鼠短链脂肪酸代谢及Th1/Th2细胞免疫平衡的影响

目的观察痛泻安肠方对肝郁脾虚证腹泻型肠易激综合征(IBS-D)小鼠模型短链脂肪酸代谢及Th1/Th2细胞免疫平衡的影响。方法30只18~22 g的雄性C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、痛泻安肠方低剂量组、痛泻安肠方中剂量组、痛泻安肠方高剂量组,每组6只。采用束缚应激联合番泻叶灌胃复制IBS-D小鼠模型,造模成功后分别予相应浓度中药灌胃14 d,每日1次,通过靶向代谢组学检测小鼠粪便中短链脂肪酸含量的变化,并通过流式细胞术检测肠系膜淋巴结中CD3+CD4+INF-γ+T细胞(Th1细胞)、CD3+CD4+IL-4+T细胞(Th2细胞)的占比情况。结果与空白组相比,模型组小鼠粪便短链脂肪酸(SCFAs)相对含量显著升高(P<0.01),尤其是乙酸、丙酸及丁酸的含量均显著升高(P<0.01或P<0.05);不同剂量痛泻安肠方治疗后,粪便总SCFAs相对含量显著降低(P<0.01),乙酸、丙酸及丁酸均有不同程度降低,其中痛泻安肠方各剂量组均可显著降低乙酸和丁酸的含量,差异具有统计学意义(P<0.01),低剂量组及中剂量组可显著降低丙酸的含量,差异具有统计学意义(P<0.01)。造模后,肠易激综合征小鼠肠系膜淋巴结的Th2细胞占比明显降低,而Th1细胞占比及Th1/Th2细胞比率明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后,痛泻安肠方各剂量组Th2细胞占比均有升高,Th1细胞占比及Th1/Th2细胞比率降低。结论痛泻安肠方可以降低IBS-D小鼠粪便SCFAs的含量,调节小鼠Th1/Th2细胞免疫紊乱。

银翘散合麻杏石甘汤加减方对风热闭肺证小儿肺炎支原体肺炎Th1/Th2、Th17/Treg细胞因子影响

目的 探究银翘散合麻杏石甘汤加减方对风热闭肺证小儿肺炎支原体肺炎(MPP)的临床疗效及Th1/Th2、Th17/Treg细胞因子影响。方法 选择2021年10月至2023年6月在南京中医药大学常熟附属医院住院治疗的MMP风热闭肺型患儿为研究对象,按随机数字表法分为中药组(阿奇霉素干混悬剂+银翘散合麻杏石甘汤加减方)和对照组(阿奇霉素干混悬剂)。治疗前和治疗后7 d,比较中药组和对照组的临床疗效、中医证候积分(发热积分、咳嗽积分、咯痰积分和气喘积分)、肺功能[用力肺活量(FVC)、第1秒最大呼气量(FEV1)、峰值呼气流速(PEF)]、Th1/Th2细胞因子[γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)]和Th17/Treg细胞因子[白细胞介素-17(IL-17)和白细胞介素-10 (IL-10)]。观察并记录治疗过程中不良反应发生情况。结果 研究共纳入106例MMP患者,每组各53例。治疗前,中药组和对照组在中医证候积分、肺功能、血清Th1/Th2细胞因子和血清Th17/Treg细胞因子方面差异无统计学意义(P> 0.05)。治疗后,中药组临床疗效显著优于对照组(P <0.05);中医组发热积分、气喘积分、咳嗽积分、咳痰积分、血清INF-γ水平和血清IL-17水平显著低于对照组(P <0.05),而FVC、FEV1、PEF、IL-4和IL-10水平显著高于对照组(P <0.05)。中药组不良反应发生率显著低于对照组(P <0.05)。结论 银翘散合麻杏石甘汤加减方治疗MMP患儿可调节Th1/Th2、Th17/Treg细胞因子水平,改善肺功能,提高疗效与安全性。

海珠益肝加味方对自身免疫性肝炎小鼠Th17/Treg平衡与FoxP3/RORγt的影响

目的:研究海珠益肝加味方对自身免疫性肝炎(AIH)小鼠辅助性T淋巴细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞失衡与维甲酸相关孤核受体γ(ROR-γt)、特异性叉头状转录因子3(FoxP3)的影响。方法:将32只小鼠随机分为正常组、模型组、海珠益肝加味方组、醋酸泼尼松组,每组8只。除正常组外其他组采用刀豆蛋白A(ConA)尾静脉注射制备AIH小鼠模型,造模后采集各组小鼠血液及肝组织。HE染色观察各组肝组织病理表现;采用流式细胞术检测各组Th17和Treg细胞比例。Western Blot检测各组小鼠肝组织中IL-10、IL-17、TGF-β1、FoxP3、ROR-γt蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组Th17细胞比例、Th17/Treg均显著上升(P<0.01),Treg细胞比例显著下降(P<0.01);与模型组比较,海珠益肝加味方组及醋酸泼尼松组Th17细胞比例、Th17/Treg均显著降低(P<0.01),Treg细胞比例显著上升(P<0.01)。与空白组比较,模型组IL-10、FoxP3蛋白表达下降,IL-17、TGF-β1、ROR-γt蛋白表达上升(P<0.01)。与模型组相比,海珠益肝加味方及醋酸泼尼松组IL-10、FoxP3表达显著上升,IL-17、TGF-β1、RORγt蛋白表达均显著下降(P<0.01)。结论:海珠益肝加味方可以有效改善Th17/Treg失衡,其机制可能与调节特异性转录因子FoxP3、ROR-γt的表达相关。

壮医药线点灸对带状疱疹后遗神经痛模型大鼠中枢神经系统Th1/Th2/Th17细胞平衡的影响

目的探究壮医药线点灸对带状疱疹后遗神经痛(Postherpetic neuralgia,PHN)大鼠的干预效果及对中枢神经系统中Th1/Th2/Th17细胞平衡的影响。方法将50只SD大鼠随机分为空白组、模型组、阴性对照组(空线点灸组)、阳性对照组(普瑞巴林组)和壮医药线点灸组,每组10只。除空白组外均予以单次腹腔注射树脂毒素(Resiniferatoxin,RTX)诱导PHN大鼠模型,造模成功后,各组给予相应处理21天,于造模前3天、造模后第1、4、7天以及干预后第3、7、14、21天检测大鼠的缩足机械痛阈值(Mechanical pain threshold,PWT)和大鼠热缩足反射潜伏期(Thermal withdrawal latency,TWL)。干预结束后,取脊髓组织,检测Th1/Th2/Th17细胞比例变化及γ干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)、白细胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)、白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)、白细胞介素-17(Interleukin-17,IL-17)、白细胞介素-22(Interleukin-22,IL-22)mRNA及蛋白表达情况,阐明该疗法对此平衡机制的调控作用。结果树脂毒素造模后大鼠的PWT呈下降趋势,而TWL呈上升趋势,表现出热痛分离,契合PHN的临床表现。壮医药线点灸后,PHN大鼠PWT上升、TWL下降,改善了热痛分离趋势;阴性对照组、阳性对照组和壮医药线点灸组均能通过促进中枢神经系统中Th1的应答,升高脊髓组织中CD4+IL-2+细胞比例以及IFN-γ、IL-2的含量,上调IFN-γ、IL-2 mRNA的表达以及其蛋白活性,同时,抑制中枢神经系统中Th2、Th17的应答,降低脊髓组织中CD4+IL-4+、CD4+IL-17A+细胞比例以及IL-4、IL-10、IL-17、IL-22的含量,下调IL-4、IL-10、IL-17、IL-22 mRNA的表达以及其蛋白活性,且阳性对照组与壮医药线点灸组在纠正中枢神经系统Th1/Th2/Th17淋巴细胞失衡方面疗效相当,均优于阴性对照组。结论壮医药线点灸可改善带状疱疹后遗神经痛大鼠热痛分离趋势,这可能是通过调节Th1/Th2/Th17细胞平衡及相关细胞因子水平来实现的。

HIF-1α介导Th17细胞/调节性T细胞失衡在炎症性自身免疫性疾病中的作用研究进展

辅助性T细胞17/调节性T细胞(Th17细胞/Treg)平衡是机体维持免疫稳态的重要机制,该平衡的失调引起感染性疾病、自身免疫性疾病和肿瘤等炎症性疾病的发生。研究发现介导Th17细胞/Treg失衡的可能途径之一为炎症环境引起的缺氧诱导因子1α(HIF-1α)水平升高,进而在促进Th17细胞发挥免疫炎症作用的同时,抑制Treg的免疫调节功能。HIF-1α可通过介导Th17细胞/Treg失衡参与系统性红斑狼疮(SLE)和风湿性关节炎(RA)等多种疾病的免疫病理损伤,研究HIF-1α介导Th17细胞/Treg失衡的作用及分子机制是阐明多种炎症性自身免疫性疾病发病机制的重要方向之一。

基于Notch信号通路探讨芪蛭皱肺颗粒对慢性阻塞性肺疾病大鼠Th1/Th2免疫平衡的调节机制

目的探讨果蝇双翅边缘缺刻同源基因(Notch)信号通路在慢性阻塞性肺疾病(COPD)辅助性T细胞1(Helper T cells 1,Th1)和辅助性T细胞2(Helper T cells 2,Th2)失衡中的作用及芪蛭皱肺颗粒的干预机制。方法70只Wistar大鼠随机挑选10只作为空白对照组,其余大鼠均采用香烟烟雾(CS)联合气管滴注脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)法建立COPD模型,空白对照组及造模组各随机挑选3只大鼠验证造模是否成功。造模结束进行灌胃给药干预,造模组大鼠随机分为模型对照组、阳性对照组(67.5μg·kg^(-1))及芪蛭皱肺颗粒高中低剂量组(3.24、1.62、0.81 g·kg^(-1)),分别给予生理盐水、醋酸地塞米松混悬液、芪蛭皱肺高、中、低剂量混悬液进行灌胃干预,空白对照组同模型对照组,灌胃等体积生理盐水。经28天造模及28天治疗后,采用动物肺功能测试系统检测吸气峰流速(Peak Inspiratory Flow,PIF)和呼气峰流速(Peak Expiratory Flow,PEF),处死大鼠提取肺脏、脾脏、血清及支气管肺泡灌洗液(BALF),苏木素-伊红(HE)染色评价肺组织病理变化,酶联免疫吸附实验法(ELISA)测定血清及BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,流式细胞仪检测脾脏Th1/Th2细胞水平,免疫组织化学法(Immunohistochemistry,IHC)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肺组织Notch1、Hes家族发状分裂相关增强子1(Hes1)、Hey家族发状分裂相关增强子1(Hey1)蛋白水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR,RT-PCR)检测肺组织Notch1、Hes1、Hey1基因表达水平。结果与空白对照组比较,模型对照组大鼠肺功能显著降低(P<0.05),肺组织出现炎性细胞浸润、支气管结构破坏等病变,血清及BALF中TNF-α含量显著升高(P<0.05),脾Th1细胞百分比显著降低(P<0.05),Th2细胞百分比显著升高(P<0.05),肺组织Notch1、Hes1、Hey1蛋白及mRNA表达显著升高(P<0.05),差异均具有统计学意义;与模型对照组比较,各给药组大鼠肺功能显著升高(P<0.05),肺组织病理损伤均有所减轻,血清及BALF中TNF-α含量显著降低(P<0.05),脾Th1细胞百分比显著升高(P<0.05),Th2细胞百分比显著降低(P<0.05),肺组织Notch1、Hes1、Hey1蛋白及mRNA表达显著降低(P<0.05),差异均具有统计学意义。结论芪蛭皱肺颗粒通过抑制Notch信号通路调节Th1/Th2平衡,从而改善COPD大鼠肺功能及病理损伤,影响其免疫功能。

穴位敷贴疗法对肥胖型哮喘患者Th1/Th2、Th17/Treg免疫细胞平衡的影响

目的:从调节Th1/Th2、Th17/Treg免疫细胞平衡角度探讨穴位敷贴治疗肥胖型哮喘的起效机制。方法:41例肥胖型哮喘患者和33例正常体质量哮喘患者分别分为敷贴组和对照组,观察各组治疗前后炎症因子白介素(IL)-4、γ-干扰素(IFN-γ)、IL-17、IL-10的变化。结果:各组组内治疗前后比较:各组治疗后IL-4水平较治疗前显著降低(P<0.05);正常体质量敷贴组、肥胖型敷贴组治疗后IL-17水平较治疗前显著降低(P<0.05),IFN-γ水平较治疗前显著升高(P<0.05);正常体质量敷贴组、肥胖型敷贴组、肥胖型对照组治疗后IL-10水平较治疗前显著升高(P<0.05);组间治疗前后差值比较,正常体质量敷贴组IL-4和IL-17水平较正常体质量对照组下降更显著(P<0.05),肥胖型敷贴组IFN-γ水平较肥胖型对照组上升更显著(P<0.05),肥胖型敷贴组IL-10水平较正常体质量敷贴组上升更显著(P<0.05)。结论:穴位敷贴疗法可以调节整体哮喘患者体内Th1/Th2、Th17/Treg免疫细胞平衡,在肥胖型哮喘患者中部分免疫细胞因子受影响更明显。

舌下特异性免疫治疗对变应性鼻炎患者Treg/Th17细胞平衡的影响

目的:观察舌下特异性免疫治疗(SLIT)对变应性鼻炎(AR)患者调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞(Th)17细胞平衡的影响。方法:选择2019年12月~2021年2月厦门医学院附属第二医院收治的AR患者64例作为研究对象,采用随机数字表法分为观察组和对照组,各32例。两组患者均给予常规治疗,观察组在常规治疗的基础上给予SLIT,两组患者疗程均为1年。比较两组患者治疗前后外周血中Treg与Th17的占比,血清白细胞介素(IL)-17、转化生长因子(TGF)-β1、IL-35、尘螨特异性免疫球蛋白E(sIgE)、尘螨特异性免疫球蛋白G4(sIgG4)水平及症状评分,并统计两组治疗期间不良反应发生情况。结果:与治疗前比较,治疗后两组Treg细胞占比增大,Th17细胞占比减小,且治疗后观察组Treg细胞占比显著大于对照组,Th17细胞占比显著小于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。与治疗前比较,治疗后两组血清IL-17、sIgE水平降低,TGF-β1、IL-35、sIgG4水平升高,且治疗后观察组血清IL-17、sIgE水平显著低于对照组,TGF-β1、IL-35、sIgG4水平显著高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05或P<0.01)。与治疗前比较,治疗后两组鼻痒、鼻塞、喷嚏、流涕的评分及总评分均降低(P<0.01),且治疗后观察组上述评分显著低于对照组(P<0.01)。两组患者治疗期间发生口腔干燥、舌下肿胀、嗜睡、头晕、瘙痒和全身性荨麻疹等不良反应的发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:SLIT可促进AR患者恢复Treg/Th17平衡,降低血清炎性因子水平,调节免疫应答,改善临床症状,治疗效果优于单独常规治疗,且具有较高的安全性。

贮存式异体成分输血对脊柱手术患者Th1/Th2、Th17/Treg细胞因子失衡的影响

目的 分析研究贮存式异体成分输血对脊柱手术患者Th1/Th2、Th17/Treg细胞因子失衡的影响。方法 选取2020年1月至2022年12月在西安市中心医院116例进行脊柱手术治疗的患者作为研究对象,采用随机数字表法分为观察组(n=58)与对照组(n=58),其中观察组进行贮存式异体去白细胞的红细胞悬液成分血输注,对照组进行贮存式异体普通悬液加血浆输注。比较两组输血前与输血3 d后外周血的Th1、Th2、Th17、Treg、Th1/Th2、Th17/Treg及Th1类细胞因子(IL-2、TNF-α、IFN-γ)、Th2类细胞因子(IL-4、IL-6、IL-10)、Th17类细胞因子(IL-17)与Treg类细胞因子(TGF-β)水平;比较两组输血后不良事件发生率。结果 两组输血3 d后外周血的Th1、Treg与Th1/Th2水平均高于输血前,Th2、Th17与Th17/Treg均低于输血前(t=14.564、8.139;13.940、8.592;8.648、4.343;4.366、10.322;13.434、7.469;10.973、6.291;11.979、7.512;10.214、17.777,均P<0.05);观察组输血3 d后外周血的Th1、Th17、Th1/Th2与Th17/Treg水平均高于对照组,Th2与Treg水平均低于对照组(t=2.477、2.685、8.104、5.989、4.314、3.707,均P<0.05);两组输血3 d后外周血的IL-2、TNF-α、IFN-γ与TGF-β水平均高于输血前,IL-4、IL-6、IL-10与IL-17水平低于输血前(t=14.564、8.139;13.940、8.592;8.648、4.343;4.366、10.322;13.434、7.469;10973、6.291;11.979、7.512;10.214、17.777,均P<0.05);观察组输血3 d后外周血的IL-2、TNF-α、IFN-γ与IL-17水平均高于对照组,IL-4、IL-6、IL-10与TGF-β水平均低于对照组(t=6.251、5.361、4.840、7.421、6.156、5.712、5.628、5.327,均P<0.05);观察组输血后不良事件发生率低于对照组(χ^(2)=4.245,P<0.05)。结论 贮存式异体成分输血对脊柱手术患者Th1/Th2、Th17/Treg细胞因子失衡具有影响,可能与贮存式异体输血中的白细胞成分有关。

痤疮合剂对家兔耳痤疮模型Th1/Th2和Th17/Treg平衡调节机制的实验研究

目的研究旨在探讨痤疮合剂对辅助性T细胞(Helper T Cell,Th)1、Th2、Th17、调节性T细胞(Regulatory T cell,Treg)平衡的调节作用。方法除对照组,其他干预组用Kligman造模法制造兔耳痤疮模型2周,取病理,判断造模成功后,痤疮合剂组灌服痤疮合剂17.52 g/(kg·d);阳性药物组灌服清热暗疮胶囊0.12 g/(kg·d);对照组及模型组灌服等量生理盐水,1次/d,共30 d。取静脉血及患处组织、耳根淋巴结,苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-eosin staining,HE)检测毛囊面积和皮脂腺直径。酶联免疫吸附测定法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中干扰素(Interferon,IFN)-γ、白介素(Interleukin,IL)-5、IL-17、IL-12、IL-22、IL-10、转化生长因子(Transforming growth factor,TGF)-β含量。蛋白质印迹法(Western blot)、免疫组织化学法检测耳根淋巴结中T盒转录因子(T-box expressed in T cell,T-bet)、GATA结合蛋白3(GATA binding protein 3,GATA3)、视黄酸受体相关孤儿核受体γt(Retineic-acid-receptor-related orphan nuclear receptor gamma,RORγt)、叉头盒转录因子p3(Forkhead box P3,Foxp3)表达水平。结果痤疮合剂能明显改善兔耳表皮层的结节、脓疱、组织厚度、囊肿及毛囊口扩张程度,减少炎症细胞的增殖和浸润,表皮和内壁角质层变薄松软。与对照组相比,其余各组IFN-γ、IL-12、IL-17、IL-22含量显著增高,IL-5、TGF-β、IL-10含量显著降低(P<0.01)。与模型组比较,痤疮合剂和阳性组IFN-γ、IL-17、IL-12、IL-22含量明显下降,IL-5、TGF-β、IL-10含量显著增高(P<0.01)。与对照组比较,其余各组T-bet、RORγt的表达及平均光密度值(Integral-Optimistically,IOD)显著增大,GATA3、Foxp3表达及IOD下降(P<0.01)。与模型组相比,痤疮合剂和阳性组T-bet、RORγt表达及IOD下调,GATA3、Foxp3表达及IOD上调(P<0.01)。结论痤疮合剂通过调控炎性因子平衡Th1/Th2、Th17/Treg的极化偏移,实现免疫细胞内稳态,改善皮损病理表现,对痤疮有明显的治疗效果。

Th1/Th2及Th17/Treg细胞平衡在免疫性血小板减少症发病中的意义

原发性免疫性血小板减少症（primary immune thrombocytopenia，ITP）是一种排除其他疾病所致血小板减少（血小板计数〈100×10^9／L）的免疫性疾病。现阶段资料显示，除体液免疫机制外，细胞免疫也在ITP的发病中起重要作用，主要表现在CD4＋T细胞亚型漂移，尤其是Th1／Th2及Th17／Treg两对细胞的平衡紊乱在ITP发病中起重要作用。

白芍总苷对过敏性紫癜小鼠Treg/Th17免疫平衡及JAK1/STAT3信号通路蛋白的影响

目的:基于蛋白酪氨酸激酶1/信号转导因子3(JAK1/STAT3)信号通路探讨白芍总苷对过敏性紫癜小鼠Treg/Th17免疫平衡的影响。方法:动物实验分为对照组、模型组、实验组、抑制剂组,模型组、实验组、抑制剂组小鼠尾静脉注射印度墨水及灌胃麦角蛋白复制过敏性紫癜模型,实验组、抑制剂组小鼠每日灌胃0.1 g/kg白芍药总苷和AG490,连续处理4周。ELISA测定各组小鼠血清IL-10及IL-17含量;流式细胞术检测各组小鼠血清Treg、Th17变化;Western blot检测各组小鼠皮肤和肾脏组织p-JAK1、p-STAT3表达。结果:与对照组相比,模型组、实验组、抑制剂组小鼠血清Treg占CD4+T细胞比例和IL-10含量明显下降,Th17占CD4+T细胞比例、IL-17含量以及小鼠皮肤和肾脏组织p-JAK1、p-STAT3表达明显升高(均P<0.05);与模型组相比,实验组、抑制剂组小鼠血清Treg占CD4+T细胞比例和血清IL-10含量明显升高,Th17占CD4+T细胞比例、IL-17含量以及小鼠皮肤和肾脏组织p-JAK1、p-STAT3表达明显降低(均P<0.05)。结论:白芍总苷可通过抑制JAK2/STAT3信号通路调控过敏性紫癜小鼠Treg/Th17免疫平衡。

黄芪甲苷Ⅳ通过抑制TIM-1信号通路增加Th1/Th2细胞比率减轻IgA肾病小鼠肾损伤

目的探讨黄芪甲苷Ⅳ(AS-Ⅳ)对IgA肾病(IgAN)小鼠1型辅助T(Th1)细胞/Th2细胞平衡的影响及其可能作用机制。方法建立BALB/c小鼠IgAN模型,造模成功小鼠随机分为模型组、AS-Ⅳ低、中和高剂量组各10只,另设对照组10只。AS-Ⅳ低、中和高剂量组小鼠灌胃(12.5、25、50)mg/kg AS-Ⅳ混悬液(生理盐水配制),对照组及模型组给予等量生理盐水。测定各组小鼠24 h尿蛋白(24 hUPr)含量和尿红细胞计数;测定小鼠血尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)和白蛋白(ALB)水平;ELISA检测各组小鼠血清γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)和IL-10水平;流式细胞术检测小鼠外周血Th1/Th2细胞比率;HE染色观察小鼠肾组织病理学变化;反转录PCR和Western blot法分别检测小鼠肾组织中T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域1(TIM-1)、Toll样受体4(TLR4)的mRNA和蛋白表达。结果与模型组比较,AS-Ⅳ低、中和高剂量组小鼠第12周和第15周尿红细胞计数、24 h UPr、BUN、Scr、IL-4、IL-10水平、Th2细胞比例、TIM-1与TLR4 mRNA和蛋白表达水平均明显降低,ALB、IFN-γ水平、Th1细胞比例和Th1/Th2细胞比率升高,且以AS-Ⅳ高剂量组效果最佳。结论AS-Ⅳ通过抑制TIM-1信号通路,增加Th1/Th2细胞比率,抑制炎症反应,减轻IgAN小鼠肾损伤。

益艾康对HIV/AIDS患者Th17/Treg免疫平衡的影响

目的:探讨益艾康对HIV/AIDS患者Th17/Treg免疫平衡的影响。方法:纳入HIV/AIDS患者60例为研究对象,其中HAART治疗组(西药组)30例,HAART联合益艾康治疗组(中西药组)30例,健康对照组23例。流式细胞术检测各组T淋巴细胞亚群及Th17、Treg细胞数量。结果:中西药组CD4^(+)T数量相比西药组升高,CD8^(+)T细胞数量降低(P>0.05);中西药组Th17细胞数量相比西药组升高(P<0.05),Treg细胞数量降低,Th17/Treg比值升高(P>0.05);相关性分析显示:CD4^(+)T细胞数量、CD4^(+)T/CD8^(+)T比值与Th17、Th17/Treg比值表现为正相关(P<0.05),与Treg细胞水平未表现出相关性(P>0.05)。结论:益艾康通过上调Th17细胞的表达水平,提高Th17/Treg比例,改善了患者Th17/Treg免疫平衡。

基于Th17/Treg免疫平衡探讨眼针治疗溃疡性结肠炎作用机制

目的探讨眼针治疗溃疡性结肠炎的疗效作用机制。方法50只SD大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、西药治疗组、眼针治疗组、针药联合组,每组10只。采用5%硫酸葡聚糖钠盐(dextran sulfate,DSS)水溶液自由饮用7 d建立溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠模型,每日灌胃、眼针(肺-大肠区)治疗1次,连续10 d。观察一般情况及每日疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分,处死后行HE染色观察结肠组织病理学变化,酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测血清中白细胞介素(IL)-6、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、信号转导及转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)含量,实时荧光定量PCR(q-PCR)检测结肠黏膜中叉状头转录因子(FoxP3)、维甲酸相关孤儿核受体γt(RORγt)、蛋白质酪氨酸激酶(JAK2)和STAT3 mRNA含量,Western blotting法检测结肠黏膜中FoxP3、RORγt、JAK2、STAT3和p-STAT3蛋白表达。采用SPSS 19.0进行统计学分析。结果与模型对照组相比,西药对照组、眼针治疗组和针药联合组DAI评分降低,病理损伤明显减轻,IL-6、TGF-β、RORγt、JAK2、STAT3、p-STAT3表达水平降低,FoxP3表达增加,差异有统计学意义(P<0.05)。西药对照组与眼针治疗组在IL-6、RORγt、JAK2、STAT3、p-STAT3表达方面有统计学差异(P<0.05)。结论眼针可以改善UC大鼠的临床症状,修复结肠黏膜损伤,其机制可能是通过抑制JAK2/STAT3通路以恢复Th17/Treg免疫平衡。

消痈乳康汤联合中医换药对肉芽肿性乳腺炎临床疗效及Treg/Th17免疫平衡机制的影响

目的:观察消痈乳康汤联合中医换药治疗肉芽肿性乳腺炎(granulomatous mastitis,GM)的临床疗效及对调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)/辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)免疫平衡机制以及免疫相关指标的影响。方法:选取实施乳腺导管切除术后GM患者97例,按照完全随机原则分为观察组(48例)及对照组(48例)。对照组术后予西医常规治疗,观察组在对照组基础上加服消痈乳康汤治疗,共治疗4周。比较两组临床症状、疼痛评分、QLQ-C30评分,外周血Treg细胞、白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)、转化生长因子β_(1)(trans forming growth factor-β_(1),TGF-β_(1))水平,Treg/Th17比值及免疫相关指标,并统计其临床疗效、复发率及不良反应率。结果:治疗后观察组乳房包块最大直径、乳房皮肤评分、疼痛评分及外周血Treg细胞、Treg/Th17比值、IL-10、TGF-β_(1)、IgG、IgA水平均明显低于治疗前与对照组治疗后(P<0.05);QLQ-C30总评分及各维度评分均明显高于治疗前与对照组治疗后(P<0.05)。观察组治疗总有效率[95.83%(46/49)]明显高于对照组[75.51%(37/48)](P<0.05),观察组不良反应发生率[6.25%(3/48)]低于对照组[16.33%(8/49)](P<0.05),且随访复发率低于对照组(P<0.05)。结论:消痈乳康汤联合中医换药治疗GM安全有效,能够明显缓解临床症状,加速疾病康复,改善患者生活质量,还可能是通过调控Treg/Th17免疫平衡机制治疗GM,并能够提升患者免疫功能,同时降低疾病复发风险。