清燥养肺方对干燥综合征NOD小鼠Th1/Th2免疫调节的影响

目的:研究清燥养肺方对干燥综合征非肥胖糖尿糖(NOD)小鼠Th1/Th2细胞免疫失衡的干预作用及其相关细胞因子表达的影响,探讨该方治疗干燥综合征的作用机制。方法:将100只雌性干燥综合征NOD小鼠随机分为模型组、硫酸羟氯喹组及清燥养肺方低、中、高剂量组,每组20只。模型组小鼠灌胃给予0.9%氯化钠注射液,硫酸羟氯喹组灌胃给予硫酸羟氯喹溶液(剂量为60mg/kg),清燥养肺方低、中、高剂量组分别按30g/kg、60 g/kg、120 g/kg的剂量灌胃给予清燥养肺方药液,灌胃容量均为10 ml/kg。分别于实验第2周、第4周、第6周、第8周,采用湿重法测定小鼠唾液流率;实验8周后股动脉取血,测定各组小鼠血清Th1相关细胞因子[白介素(IL)-2、干扰素(IFN)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]及Th2相关细胞因子(IL-4、IL-6、IL-10、IL-13)水平。结果:实验第2~6周,各给药组小鼠唾液流率均高于模型组(P<0.05);实验第6周,清燥养肺方高剂量组小鼠唾液流率高于硫酸羟氯喹组(P<0.05);实验第8周,清燥养肺方中、高剂量组小鼠唾液流率高于硫酸羟氯喹组(P<0.05)。与模型组比较,各用药组小鼠血清Th1细胞因子(IFN、TNF-α、IL-2)水平和Th2相关细胞因子(IL-4、IL-6、IL-10、IL-13)水平均明显下降(P<0.05),且清燥养肺方高剂量组IFN、TNF-α、IL-2及IL-4、IL-10、IL-13血清水平均低于硫酸羟氯喹组(P<0.05)。结论:清燥养肺方能够增加干燥综合征NOD小鼠唾液流率,降低其血清Th1/Th2相关细胞因子的水平,可能是通过调节Th1/Th2免疫平衡,抑制细胞因子的促炎效应,从而发挥治疗作用。

艾迪注射液抗肿瘤作用及其对Th1/Th2免疫调节机制探讨

肿瘤患者机体内"Th1/Th2平衡漂移"现象是促使肿瘤细胞发生免疫逃逸的机制。通过综述艾迪注射液的抗肿瘤作用及肿瘤患者机体内Th1/Th2型细胞因子水平的变化,探讨艾迪注射液对肿瘤患者机体内Th1/Th2型细胞因子的影响及其调节Th1/Th2免疫平衡机制。认为艾迪注射液因其良好的疗效和较少的不良反应,其联合化疗的治疗已被广泛应用于各种恶性肿瘤性疾病的治疗。近年来有关Th1/Th2细胞失衡与肿瘤性疾病发生发展的关系及其对疗效影响的相关研究的兴起,为肿瘤疾病的免疫调节治疗提供了新的方向。今后若能更深入了解艾迪注射液的Th1/Th2调节免疫机制,如何有效控制Th1/Th2的平衡,从而使Th细胞向更有利于机体状况的方向分化,将为提高艾迪注射液治疗肿瘤的疗效,拓展艾迪注射液的药理作用,并为其临床辅助治疗提供依据。

黄芪多糖通过TGF-β1/Smads通路对哮喘大鼠Th1/Th2免疫失衡的调节作用

目的:探讨黄芪多糖通过转化生长因子(TGF)-β1/Smads信号通路对哮喘大鼠辅助性T细胞(Th)l/Th2免疫失衡的调节作用。方法:选择雄性SD大鼠40只,分为对照组、模型组、黄芪多糖低、中、高剂量组,各8只。建立慢性哮喘大鼠模型,对照组和模型组大鼠尾静脉注射等体积0.9%氯化钠溶液,川芎嗪低、中、高剂量腹腔注射川芎嗪,各组均连续治疗14 d。干预后检测各组大鼠支气管黏膜受损面积和平滑肌厚度,收集各组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF),测定白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)水平变化,苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织结构变化,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)对肺组织TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA和蛋白表达进行测定。结果:与对照组比较,模型组支气管黏膜受损面积、平滑肌厚度增加,与模型组比较,黄芪多糖各组均下降,且呈剂量依赖性(P<0.05)。与对照组比较,模型组BALF中IFN-γ水平降低,IL-4水平升高,与模型组比较,黄芪多糖各组BALF中IFN-γ水平均升高,IL-4水平均下降,且呈剂量依赖性(P<0.05)。模型组肺组织TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA和蛋白表达较对照组升高,黄芪多糖各组肺组织TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA和蛋白表达较模型组下降,且呈剂量依赖性(P<0.05)。结论:黄芪多糖通过抑制TGF-β1/Smads信号激活阻止哮喘大鼠气道炎症,调节Th1/Th2比值失衡,改善大鼠肺组织病理损伤。

TIM-1-Fc融合蛋白对哮喘小鼠Th1/Th2和Th17/Treg免疫失衡的调节

目的制备T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域1(T cell immunoglobulin domain and mucin domain protein-1,TIM-1)-Fc融合蛋白并探讨TIM-1-Fc融合蛋白对卵白蛋白(ovabumin,OVA)诱导的哮喘小鼠的干预作用及潜在作用机制。方法通过基因工程技术获得TIM-1-Fc融合蛋白。采用腹腔注射OVA氢氧化铝溶液致敏建立过敏性哮喘小鼠模型,随机分为对照组、哮喘组和TIM-1-Fc干预组。每次干预前20 min,使用40μL卵白蛋白生理盐水溶液(OVA-NS)滴鼻,TIM-1-Fc融合蛋白干预包括TIM-1-Fc滴鼻组(每只小鼠每次给予1μg/40μL TIM-1-Fc滴鼻)和TIM-1-Fc注射组(每只小鼠每次给予6μg/200μL TIM-1-Fc腹腔注射),每天1次,连续7 d,对照组用生理盐水替代。采用苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织病理变化;采用流式细胞术检测小鼠外周血中辅助性T细胞2(type 2 T helper cells,Th2)、辅助性T细胞17(type 17 T helper cells,Th17)和调节性T细胞(Treg)比例及相关细胞因子水平。结果成功构建TIM-1-Fc融合蛋白,成功构建OVA诱导的过敏性哮喘小鼠模型。与哮喘组相比,TIM-1-Fc融合蛋白干预后显著减轻了哮喘小鼠气道炎性损伤和肺组织损伤;TIM-1-Fc融合蛋白干预能显著降低外周血中TIM-1^(+)CD4^(+)T细胞和TIM-1^(+)Th17细胞比例,使TIM-1^(+)Treg细胞增多,显著降低Th2、Th17细胞比例,提高Treg细胞比例,调节哮喘中Th1/Th2和Th17/Treg免疫失衡。结论TIM-1-Fc融合蛋白改善OVA诱导的过敏性哮喘小鼠气道炎症和肺组织损伤,其作用机制可能与TIM-1-Fc融合蛋白对Th1/Th2和Th17/Treg的免疫调节有关。

基于Notch信号通路探讨芪蛭皱肺颗粒对慢性阻塞性肺疾病大鼠Th1/Th2免疫平衡的调节机制

目的探讨果蝇双翅边缘缺刻同源基因(Notch)信号通路在慢性阻塞性肺疾病(COPD)辅助性T细胞1(Helper T cells 1,Th1)和辅助性T细胞2(Helper T cells 2,Th2)失衡中的作用及芪蛭皱肺颗粒的干预机制。方法70只Wistar大鼠随机挑选10只作为空白对照组,其余大鼠均采用香烟烟雾(CS)联合气管滴注脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)法建立COPD模型,空白对照组及造模组各随机挑选3只大鼠验证造模是否成功。造模结束进行灌胃给药干预,造模组大鼠随机分为模型对照组、阳性对照组(67.5μg·kg^(-1))及芪蛭皱肺颗粒高中低剂量组(3.24、1.62、0.81 g·kg^(-1)),分别给予生理盐水、醋酸地塞米松混悬液、芪蛭皱肺高、中、低剂量混悬液进行灌胃干预,空白对照组同模型对照组,灌胃等体积生理盐水。经28天造模及28天治疗后,采用动物肺功能测试系统检测吸气峰流速(Peak Inspiratory Flow,PIF)和呼气峰流速(Peak Expiratory Flow,PEF),处死大鼠提取肺脏、脾脏、血清及支气管肺泡灌洗液(BALF),苏木素-伊红(HE)染色评价肺组织病理变化,酶联免疫吸附实验法(ELISA)测定血清及BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,流式细胞仪检测脾脏Th1/Th2细胞水平,免疫组织化学法(Immunohistochemistry,IHC)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肺组织Notch1、Hes家族发状分裂相关增强子1(Hes1)、Hey家族发状分裂相关增强子1(Hey1)蛋白水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR,RT-PCR)检测肺组织Notch1、Hes1、Hey1基因表达水平。结果与空白对照组比较,模型对照组大鼠肺功能显著降低(P<0.05),肺组织出现炎性细胞浸润、支气管结构破坏等病变,血清及BALF中TNF-α含量显著升高(P<0.05),脾Th1细胞百分比显著降低(P<0.05),Th2细胞百分比显著升高(P<0.05),肺组织Notch1、Hes1、Hey1蛋白及mRNA表达显著升高(P<0.05),差异均具有统计学意义;与模型对照组比较,各给药组大鼠肺功能显著升高(P<0.05),肺组织病理损伤均有所减轻,血清及BALF中TNF-α含量显著降低(P<0.05),脾Th1细胞百分比显著升高(P<0.05),Th2细胞百分比显著降低(P<0.05),肺组织Notch1、Hes1、Hey1蛋白及mRNA表达显著降低(P<0.05),差异均具有统计学意义。结论芪蛭皱肺颗粒通过抑制Notch信号通路调节Th1/Th2平衡,从而改善COPD大鼠肺功能及病理损伤,影响其免疫功能。

儿童难治性肺炎支原体肺炎肺泡灌洗液病菌量与Th1/Th2细胞免疫应答的相关性研究

目的探究儿童难治性肺炎支原体肺炎肺泡灌洗液病菌量与Th1/Th2细胞免疫应答的相关性。方法随机选择郑州大学附属儿童医院诊治的96例难治性肺炎支原体肺炎患儿为研究对象,根据肺泡灌洗液中肺炎支原体DNA含量进行分组,即>106/m L为高菌量组(n=35),103~106/m L为中菌量组(n=30),<103/m L为低菌量组(n=31)。检测三组患儿肺泡灌洗液的炎性因子水平,对比三组的炎性因子水平、肺部影像学与实验室检查结果、临床表现和基础情况,分析肺泡灌洗液中肺炎支原体DNA含量与炎性因子的相关性。结果在体温高于39℃、热程高于10天患儿占比以及总发热时间、使用抗生素后热程、住院时间、乳酸脱氢酶、血小板计数、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数上,三组比较差异有统计学意义(P<0.05),白细胞计数比较差异无统计学意义(P>0.05);双侧或大量胸腔积液、肺不张或者大片肺实变发生率、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),三组之间的双侧肺病变、左侧肺病变、右侧肺病变发生率以及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、干扰素(interferon-γ,INF-γ)、IL-8水平比较差异无统计学意义(P>0.05);肺泡灌洗液中IL-4与肺炎支原体DNA水平呈正相关(P<0.05),肺泡灌洗液中TNF-α、INF-γ、IL-8与肺炎支原体DNA水平无相关性(P>0.05)。结论儿童难治性肺炎支原体肺炎肺泡灌洗液病菌量与Th1/Th2细胞免疫应答具有相关性,肺炎支原体DNA菌量越高,肺内外损害和肺部炎症越严重,Th1/Th2免疫应答失衡。

脑组织GDF-15水平与脑梗死大鼠血管新生以及Th1/Th2免疫平衡轴的关系

目的:探讨脑组织GDF-15水平与脑梗死大鼠血管新生以及Th1/Th2免疫平衡轴的关系。方法:45只雄性SD大鼠随机分为脑梗死模型组、假手术组以及正常对照组,15只/组。模型组采用线栓法建立脑梗死模型,假手术组仅暴露颈内动脉后直接缝合皮肤,建模成功后1周评估大鼠改良神经功能缺损(mNSS)评分。采用HE染色检测脑组织病理学变化情况,Western blot法检测大鼠脑组织中组织生长分化因子-15(GDF-15)蛋白水平,RTPCR测定脑组织中GDF-15 mRNA水平。采用ELISA法检测脑组织INF-γ、IL-4表达情况,采用Spearman相关性分析大鼠脑组织中GDF-15蛋白、mRNA表达水平分别与mNSS评分、微血管密度(MVD)、INF-γ/IL-4水平之间的相关性。结果:模型组大鼠mNSS评分明显高于假手术组和正常对照组(P<0.001),模型组脑梗死面积比为(24.45±4.15)%,假手术组和正常对照组未发现脑梗死区域。模型组大鼠脑组织GDF-15蛋白、mRNA、MVD、INF-γ/IL-4水平均明显高于假手术组和正常对照组(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,模型组大鼠脑组织中GDF-15蛋白、mRNA表达水平分别与mNSS评分、MVD、INF-γ/IL-4水平呈正相关关系(P<0.001)。结论:脑梗死大鼠脑组织中GDF-15处于高表达状态,且与神经功能密切关联,其作用机制可能与血管新生以及调控Th1/Th2免疫平衡轴有关。

痛泻安肠方对肠易激综合征小鼠短链脂肪酸代谢及Th1/Th2细胞免疫平衡的影响

目的观察痛泻安肠方对肝郁脾虚证腹泻型肠易激综合征(IBS-D)小鼠模型短链脂肪酸代谢及Th1/Th2细胞免疫平衡的影响。方法30只18~22 g的雄性C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、痛泻安肠方低剂量组、痛泻安肠方中剂量组、痛泻安肠方高剂量组,每组6只。采用束缚应激联合番泻叶灌胃复制IBS-D小鼠模型,造模成功后分别予相应浓度中药灌胃14 d,每日1次,通过靶向代谢组学检测小鼠粪便中短链脂肪酸含量的变化,并通过流式细胞术检测肠系膜淋巴结中CD3+CD4+INF-γ+T细胞(Th1细胞)、CD3+CD4+IL-4+T细胞(Th2细胞)的占比情况。结果与空白组相比,模型组小鼠粪便短链脂肪酸(SCFAs)相对含量显著升高(P<0.01),尤其是乙酸、丙酸及丁酸的含量均显著升高(P<0.01或P<0.05);不同剂量痛泻安肠方治疗后,粪便总SCFAs相对含量显著降低(P<0.01),乙酸、丙酸及丁酸均有不同程度降低,其中痛泻安肠方各剂量组均可显著降低乙酸和丁酸的含量,差异具有统计学意义(P<0.01),低剂量组及中剂量组可显著降低丙酸的含量,差异具有统计学意义(P<0.01)。造模后,肠易激综合征小鼠肠系膜淋巴结的Th2细胞占比明显降低,而Th1细胞占比及Th1/Th2细胞比率明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后,痛泻安肠方各剂量组Th2细胞占比均有升高,Th1细胞占比及Th1/Th2细胞比率降低。结论痛泻安肠方可以降低IBS-D小鼠粪便SCFAs的含量,调节小鼠Th1/Th2细胞免疫紊乱。

基于网络药理学研究玉屏风颗粒调节IgA肾病模型小鼠Th1/Th2平衡的作用机制

目的:基于网络药理学预测玉屏风颗粒治疗IgA肾病(IgAN)的作用机制并进行机制验证。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库检索玉屏风颗粒有效成分;从GeneCards、OMIM、TTD数据库获取IgAN靶点,运用Venny2.1.0、Cytoscape 3.7.2软件分别获取玉屏风颗粒与IgAN两者交集靶点,构建“活性成分-交集靶点-疾病”关系网络;使用String数据库构建蛋白互作网络图,运用DAVID数据库进行GO、KEGG富集分析;通过AutoDock Vina软件对玉屏风颗粒中的主要活性成分与关键靶点进行分子对接验证。选取60只雄性昆明小鼠随机分为正常组10只,造模组50只,造模成功后随机分为玉屏风颗粒高、中、低剂量组及西药对照组,给药8周。免疫荧光法检测IgA在肾组织中的沉积情况;HE染色、糖原染色观察肾组织病理学改变;生化法检测24 h-UTP、BUN、Scr;ELISA法检测血清中IgA,Th1相关因子TNF-α、INF-γ、IL-2表达,以及Th2相关因子IL-4、IL-6表达。结果:网络药理学部分,筛选出玉屏风颗粒活性成分34个,药物靶点222个;疾病靶点1436个;交集靶点102个;主要活性成分为槲皮素、山柰酚、汉黄芩素等;关键靶点有TNF、IL-6、IL-4、IL-2等。分子对接结果表明,主要活性成分与关键靶点均能较好的结合,所有结合能均≤-6.0 kJ/mol;GO富集分析得到生物过程689条、细胞组分54条、分子功能115条;KEGG富集分析得到IL-17、NF-κB等信号通路。动物实验部分,肾组织IgA免疫荧光显示,与正常组比较,模型组肾小球系膜区可见强绿色团块状IgA荧光信号;与模型组比较,各治疗组IgA沉积情况均有所改善,其中玉屏风颗粒高剂量组改善较明显。HE染色显示,与正常组比较,模型组可见肾小球肿胀,系膜细胞、内皮细胞增生,细胞外基质增多,系膜区扩张;与模型组比较,各治疗组肾组织病理损伤均有所减轻;糖原染色显示,与正常组比较,模型组可见系膜细胞增生,细胞外基质增多,给予药物治疗后,各治疗组肾组织病变程度由中重度变为中轻度。与正常组比较,模型组24 h-UTP、BUN、Scr明显升高(P<0.01);与模型组比较,各治疗组肾功能均有所改善(P<0.01或P<0.05)。与正常组比较,模型组血清中IgA表达明显升高,与模型组比较,各治疗组血清中IgA表达均有所降低(P<0.05)。与正常组比较,模型组血清中Th1相关因子TNF-α、INF-γ、IL-2表达水平明显降低(P<0.05),各治疗组血清中Th1相关因子TNF-α、INF-γ、IL-2均有所上调。与正常组比较,模型组血清中Th2相关因子IL-4、IL-6表达水平明显升高(P<0.05),使用药物治疗后,各治疗组血清中Th2相关因子IL-4、IL-6表达水平均有所下调。与正常组比较,模型组血清中Th1/Th2比值明显下降(P<0.05),各治疗组血清中Th1/Th2比值均有所上调(P<0.05)。结论:玉屏风颗粒对IgAN模型小鼠具有较好的治疗作用,其机制可能与纠正Th1/Th2失衡有关。

Th1/Th2免疫应答平衡与肺炎支原体肺炎患者支原体抗体滴度及预后的关系探讨

目的探讨肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)肺炎患者的血清MP-IgM(immunoglobulin M,IgM)抗体滴度与T辅助细胞(helper Tcells,Th)1型/Th2免疫应答平衡的关系。方法选取2020年1月至2022年3月收治于岳池县人民医院的214例MP肺炎患者作为研究对象,根据患者MP-IgM抗体滴度分为低滴度组(n=92)、中滴度组(n=75)、高滴度组(n=47),根据预后病情分为好转组(n=125)和恶化组(n=89)。用单因素分析不同MPIgM抗体滴度组以及不同预后组患者间的临床差异;用广义加性模型(generalizedadditivemodel,GAM)分析指标间的相关性;用多因素Logistic回归分析影响预后病情恶化的危险因素;用样条函数与Logistic回归结合的限制性立方样条法分析Th1/Th2与患者预后病情恶化风险的剂量反应关系。结果不同MP-IgM抗体滴度的3组患者间发热比例、发热消退时间、白细胞计数(white blood cell,WBC)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-5(interleukin-5,IL-5)、IFN-γ/IL-5差异具有统计学意义(P均<0.05),其中发热消退时间、WBC水平、CRP水平、IFN-γ水平、IL-5水平随着MP-IgM抗体滴度的升高而逐渐升高,IFN-γ/IL-5水平随着MP-IgM抗体滴度的升高而降低。MP-IgM抗体低滴度组和中滴度组患者的发热比例差异无统计学意义(P>0.05),但高滴度组患者中发热比例明显高于其余2组(P均<0.05)。IFN-γ、IL-5与MP-IgM抗体滴度均呈正相关,Th1/Th2免疫平衡指标IFN-γ/IL-5与MP-IgM抗体滴度呈负相关。多因素分析结果显示,IFN-γ>5.25 pg/mL、IL-5>4.05 pg/mL以及血清MP-IgM抗体滴度增加是病情恶化的最主要危险因素,IFN-γ/IL-5>1.40为保护因素。Th1/Th2的连续变化与预后病情恶化风险呈非线性剂量反应关系,Th1/Th2水平与患者预后病情恶化风险大致呈负相关,当Th1/Th2>1.20时,随着Th1/Th2水平的升高,预后病情恶化风险显著降低。结论MP肺炎患者血清MP-IgM抗体滴度与Th1/Th2免疫应答平衡指标IFN-γ/IL-5呈负相关,检测血清MP-IgM抗体滴度与Th1/Th2细胞因子指标有助于早期判断MP肺炎患者病情和预后。

麻黄定喘汤辅助治疗对过敏性哮喘患儿气道炎症、重塑及Th1/Th2失衡的调节作用

【目的】探讨麻黄定喘汤辅助治疗对过敏性哮喘患儿气道炎症、重塑及辅助性T细胞1(Th1)/辅助性T细胞2(Th2)失衡的调节作用。【方法】将126例痰热壅肺型急性发作期过敏性哮喘患儿随机分为观察组与对照组,每组各63例。对照组给予常规西医治疗,观察组在对照组的基础上加用麻黄定喘汤治疗,总疗程为14 d。观察2组患儿治疗前后肺功能指标[第一秒用力呼气量(FEV1)和峰值呼气流速(PEF)]、气道炎症指标[痰液中的中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细数、单核细胞百分比和白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]、气道重塑指标[气道管壁面积(WA)、气道管腔面积(LA)、气道总面积(TA)]以及Th1/Th2细胞因子[干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)]水平的变化情况,并评价2组患儿的临床疗效和安全性。【结果】(1)疗效方面,治疗14 d后,观察组的总有效率为93.65%(59/63),对照组为80.95%(51/63),组间比较(χ2检验),观察组的疗效明显优于对照组(P<0.05)。(2)肺功能指标方面,治疗后,2组患儿的肺功能指标FEV1和PEF值均较治疗前显著升高(P<0.01),且观察组的升高幅度均明显优于对照组(P<0.05)。(3)气道炎症指标方面,治疗后,2组患儿痰液中的中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞百分比和IL-6、TNF-α水平均较治疗前明显降低(P<0.05),淋巴细胞百分比均较治疗前明显升高(P<0.05),且观察组对痰液中的中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞百分比和IL-6、TNF-α水平的降低幅度及对淋巴细胞百分比的升高幅度均明显优于对照组(P<0.05)。(4)气道重塑指标方面,治疗后,2组患儿的WA值均较治疗前降低(P<0.05),LA、TA值均较治疗前升高(P<0.05),且观察组对WA值的降低幅度及LA、TA值升高幅度均明显优于对照组(P<0.05)。(5)Th1/Th2细胞因子方面,治疗后,2组患者的血清IFN-γ水平和IFN-γ/IL-4比值均较治疗前明显升高(P<0.05),血清IL-4水平均较治疗前明显降低(P<0.05),且观察组对血清IFN-γ水平和IFN-γ/IL-4比值的升高幅度及对血清IL-4水平的降低幅度均明显优于对照组(P<0.05)。(6)安全性方面,2组患儿治疗期间均未见严重不良反应,心电图、血常规、肝功能检查及心率、血压等安全性指标均未见明显异常。【结论】麻黄定喘汤有助于缓解过敏性哮喘患儿气道炎症、重塑,调节Th1/Th2失衡,改善患儿肺功能,疗效肯定,安全性好。

支炎合剂对肺炎支原体感染小鼠M1巨噬细胞活化及Th2型免疫应答的影响分析

目的:探讨支炎合剂对肺炎支原体(MP)感染小鼠经典激活的巨噬细胞(M1)活化及辅助性T细胞2(Th2)型免疫应答的影响。方法:将C57BL/6J小鼠分为对照组、MP组、支炎合剂组和阿奇霉素组,除对照组外其他各组小鼠通过鼻滴MP菌液(1×10^(7)CFUs/ml)制成MP感染模型,支炎合剂组给予支炎合剂灌胃治疗,阿奇霉素组给予阿奇霉素灌胃治疗,对照组、MP组小鼠灌胃等体积生理盐水;HE染色观察小鼠肺组织病理损伤并进行病理评分,固体培养法检测小鼠肺组织MP载量变化,流式细胞法检测小鼠肺组织M1巨噬细胞水平,PCR检测肺组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、TNF-α、CXC趋化因子1(CX-CL1)mRNA水平,ELISA检测小鼠肺组织IL-4、IL-5、IL-10、IL-13水平,Western blot检测小鼠肺组织NF-κB通路相关蛋白表达。结果:MP组、支炎合剂组和阿奇霉素组小鼠肺组织病理评分、MP载量、F4/80^(+)细胞水平、CD86^(+)/F4/80^(+)、MHCⅡ^(+)/F4/80^(+)和iNOS、TNF-α、CXCL1 mRNA水平高于对照组(P<0.05),肺组织IL-4、IL-5、IL-10、IL-13水平和p-p65/p65、p-IKK/IKK蛋白表达均高于对照组(P<0.05)。支炎合剂组和阿奇霉素组小鼠肺组织病理评分、MP载量、F4/80^(+)细胞水平、CD86^(+)/F4/80^(+)、MHCⅡ^(+)/F4/80^(+)和iNOS、TNF-α、CXCL1 mRNA水平均低于MP组(P<0.05),肺组织IL-4、IL-5、IL-10、IL-13水平均高于MP组(P<0.05),肺组织pp65/p65、p-IKK/IKK蛋白表达低于MP组(P<0.05)。结论:支炎合剂可改善MP感染小鼠肺损伤,可能与降低M1巨噬细胞活性、增加Th2免疫应答、抑制NF-κB通路有关。

缺血性脑卒中患者肠道菌群改变与其预后及Th1/Th2免疫细胞平衡的相关性

目的探讨缺血性脑卒中患者肠道菌群改变与其预后及Th1/Th2免疫细胞平衡的相关性。方法选取2020年1月—2022年3月就诊的106例缺血性脑卒中患者为研究对象,均行静脉溶栓治疗,且出院后进行90 d随访,采用改良Rankin量表(Modified Rankin Scale,m RS)评分评估预后,将患者分为良好组(m RS评分≤2分,71例)和不良组(m RS评分为3~6分,35例),对比2组肠道菌群组成、Th1/Th2及相关细胞因子水平,采用Pearson相关性分析,分析缺血性脑卒中患者肠道菌群相对丰度与Th1/Th2及相关细胞因子水平的相关性。结果不良组Chao l指数、Shannon指数低于良好组(t=7.025、5.033,P均<0.001);不良组厚壁菌门、普雷沃菌属低于良好组(t=11.475、6.514,P均<0.001);不良组拟杆菌属、埃希氏菌属高于良好组(t=19.289、7.826,P均<0.001);不良组白细胞介素(interleukin,IL)2、干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)水平高于良好组(t=12.685、25.814,P均<0.001);而Th1/Th2、IL-4、IL-5水平低于良好组(t=5.066、12.793、11.476,P均<0.001)。Pearson相关性分析结果显示,拟杆菌门、埃希氏菌属与Th1/Th2、IL-4、IL-5呈负相关(r=-0.604~-0.376,P均<0.05),与IL-2、IFN-γ呈正相关(r=0.439~0.623,P均<0.05);厚壁菌门、普雷沃菌属、Chao 1指数和Shannon指数与Th1/Th2、IL-4、IL-5呈正相关(r=0.428~0.623,P均<0.05),与IL-2、IFN-γ呈负相关(r=-0.584~-0.397,P均<0.05)。结论缺血性脑卒中患者肠道菌群改变与不良预后、Th1/Th2及相关细胞因子水平相关。

补肾固胎方联合黄体酮注射液治疗肾虚型早期先兆流产疗效及对妊娠激素水平和Th1/Th2细胞因子的影响

目的 观察补肾固胎方联合黄体酮注射液治疗肾虚型早期先兆流产疗效及对妊娠激素水平和Th1/Th2细胞因子的影响。方法 采用随机数字表法将符合入选标准的120例肾虚型早期先兆流产患者分为观察组和对照组。对照组予黄体酮注射液治疗,观察组同联合补肾固胎方治疗。连续治疗2周后,比较两组中医证候积分(妊娠期阴道流血、小腹坠胀或疼痛、腰酸痛、膝关节酸软)、妊娠激素水平[雌二醇(Estradiol, E_(2))、人绒毛膜促性腺激素(Human chorionic gonadotropin, β-HCG)、孕酮(Progesterone, P)]、Th1/Th2细胞因子[白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)、白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)、γ干扰素(Interferon-γ,INF-γ)]改善情况,统计两组治疗总有效率、妊娠结局及不良反应发生率。结果 两组治疗后妊娠期阴道流血、小腹坠胀或疼痛、腰酸痛、膝关节酸软积分,IL-2、INF-γ水平均低于治疗前(P<0.05),且观察组治疗后以上中医证候积分和IL-2、INF-γ水平均低于对照组(P<0.05);两组治疗后IL-4水平均高于治疗前(P<0.05),且观察组治疗后IL-4水平高于对照组(P<0.05);观察组总有效率为(91.7%,55/60),高于对照组(75.0%,45/60)(P<0.05);观察组足月分娩率为(85.0%,51/60),高于对照组(56.7%,34/60)(P<0.05);观察组不良反应发生率为3.3%,低于对照组(25.0%)(P<0.05)。结论 补肾固胎方联合黄体酮注射液能够有效调节肾虚型早期先兆流产患者妊娠激素水平和Th1/Th2细胞因子水平,纠正免疫功能紊乱,降低患者流产率,提高足月妊娠率,改善妊娠结局。

CSU患儿血清维生素D、DHEA-S与Th1/Th2细胞因子及免疫球蛋白的相关性

目的:探讨慢性自发性荨麻疹(chronic spontaneous urticaria,CSU)患儿维生素D、脱氢表雄酮硫酸酯(dehydroepiandrosterone sulfate,DHEA-S)与Th1/Th2细胞因子及免疫球蛋白的相关性。方法:选取2022年3月—2023年5月深圳市坪山区妇幼保健院收治的73例CSU患儿作为研究组,选取同期体检结果健康的70例儿童作为对照组。检测两组维生素D、DHEA-S、Th1/Th2细胞因子及免疫球蛋白水平。比较两组、轻度、中度及重度CSU患儿维生素D、DHEA-S、Th1/Th2细胞因子及免疫球蛋白水平。分析CSU患儿维生素D、DHEA-S与Th1/Th2细胞因子及免疫球蛋白的相关性。结果:研究组维生素D、DHEA-S、白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)水平均低于对照组,白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE)、免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。中度、重度患儿DHEA-S、IFN-γ水平低于轻度患儿,IgE、IgG水平高于轻度患儿,重度患儿DHEA-S、IFN-γ水平低于中度患儿,IgE、IgG水平高于中度患儿,差异有统计学意义(P<0.05)。维生素D与DHEA-S与IL-2、IFN-γ均呈正相关,与IL-4呈负相关(P<0.05);DHEA-S与IgE呈负相关(P<0.05)。结论:CSU患儿血清维生素D降低同Th1/Th2细胞因子失衡相关,DHEA-S随着病情加重而降低。

萆薢渗湿汤对急性湿疹小鼠模型Th1/Th2/Th22免疫功能的影响

目的:探讨萆薢渗湿汤对急性湿疹小鼠模型的治疗效果及对Th细胞介导的免疫功能相关机制的研究。方法:将30只KM小鼠随机分为空白组(Normal)、模型组(Model)和萆薢渗湿汤治疗组(BXSST),采用2,4-二硝基氯苯(DNCB)建立急性湿疹小鼠模型。造模成功后,治疗组给予1.3 g/ml萆薢渗湿汤0.2 ml/只灌胃,空白组与模型组给予等量生理盐水灌胃。HE染色观察小鼠耳部组织的病理变化,ELISA检测小鼠血清中白细胞介素22(IL-22)、白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-2(IL-2)的表达水平。结果:HE染色病理切片显示与模型组比较,萆薢渗湿汤组表皮棘层厚度明显降低,组织内炎症细胞浸润减少;与空白组相比,模型组小鼠血清中IL-2表达降低(P<0.01),IL-4、IL-22水平均明显升高(P<0.01);与模型组比较,萆薢渗湿汤治疗组中IL-2表达升高(P<0.01),IL-4与IL-22水平降低(P<0.05)。结论:萆薢渗湿汤可通过调节IL-2、IL-4及IL-22细胞因子的水平,来改善小鼠急性湿疹的症状。

EGCG调节TLR4/MyD88/NF-κB信号通路对特应性皮炎大鼠Th1/Th2平衡的影响

目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对特应性皮炎(AD)大鼠的保护作用及潜在机制。方法 将SPF级SD大鼠分为对照(Control)组、AD模型(AD)组、AD+EGCG治疗(EGCG)组、AD+地塞米松阳性对照(DXM)组、AD+EGCG+TLR4激动剂(TLR4)组,每组18只。根据临床损伤严重程度计算皮肤损伤评分;ELISA检测炎症因子的表达;HE染色观察组织学变化;流式细胞仪分析Th1和Th2阳性细胞比例;Western blot检测TLR4/MyD88/NF-κB通路相关蛋白水平。结果 与Control组比较,AD组大鼠背部皮肤损伤程度较重,病理学损伤评分增加(P<0.05),白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)水平及Th1细胞百分比降低,白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-13(IL-13)水平及Th2细胞百分比升高(P<0.05),TLR4、MyD88、p-NF-κB蛋白水平升高(均P<0.05)。与AD组比较,EGCG组和DXM组大鼠皮肤损伤评分及皮肤损伤病理学评分降低,Th_1细胞百分比、IL-2、IFN-γ水平升高,IL-4、IL-13水平、Th_(2)阳性百分比、TLR4、MyD88、p-NF-κB蛋白水平下降(均P<0.05)。与EGCG组比较,DXM组大鼠皮肤损伤评分及皮肤损伤病理学评分、Th_1、Th_(2)细胞百分比、TLR4、MyD88、p-NF-κB蛋白水平差异无统计学意义(均P>0.05),TLR4组大鼠皮损评分及皮肤损伤病理学评分升高,皮损组织中Th_1细胞百分比降低,Th_(2)阳性百分比及TLR4、MyD88、p-NF-κB蛋白水平上调(均P<0.05)。结论 EGCG可以通过TLR4/MyD88/NF-κB信号通路,维持Th1/Th2平衡来抑制炎症反应,进而降低AD的严重程度。

苦芩煎剂联合度普利尤单抗通过调节Th1/Th2平衡和抑制皮肤炎症反应治疗特应性皮炎的研究

目的:研究苦芩煎剂联合度普利尤单抗通过调节Th1/Th2平衡和抑制皮肤炎症反应治疗特应性皮炎的应用。方法:选取98例我院于2021年3月~2023年8月收治的特应性皮炎患者,采用随机数法分为对照组和研究组,各49例。对照组患者基于度普利尤单抗治疗,治疗16周;研究组在对照组的基础上给予苦芩煎剂,连续治疗2周。评估两组患者临床疗效。分别于治疗前及治疗后,评估两组患者皮损评分(SCORAD)评分、视觉模拟量表(VAS)评分、皮肤病生活质量指数(DLQI)评分;评估患者皮肤屏障功能;采用流式细胞仪测定外周血中Th1细胞和Th2细胞水平;采用酶联免疫吸附法测定血清中干扰素(INF)-γ、白细胞介素(IL)-13、IL-4水平。结果:研究组临床治疗总有效率为97.96%,显著高于对照组83.67%(P<0.05)。治疗后,研究组SCORAD、VAS、DLQI评分及TEWL水平显著低于对照组(P<0.05)。研究组Th1和Th1/Th2水平均显著高于对照组(P<0.05);研究组Th2水平显著低于对照组(P<0.05)。研究组IL-4、IL-13水平均显著高于对照组(P<0.05);研究组INF-γ水平显著低于对照组(P<0.05)。结论:苦芩煎剂联合度普利尤单抗可以明显调节Th1/Th2平衡,抑制炎症反应,治疗特发性皮炎效果显著。

莫米松联合孟鲁司特钠治疗变应性鼻炎的效果及对血清Th1/Th2细胞因子表达调节效应的影响

目的:研究莫米松联合孟鲁司特钠治疗变应性鼻炎(Allergic rhinitis,AR)的效果及对血清Th1/Th2细胞因子表达调节效应的影响。方法:以2020年3月至2022年3月我院收治的82例AR患者为研究对象,随机将患者分为A组、B组,各41例。A组采用糠酸莫米松治疗,B组采用糠酸莫米松联合孟鲁司特钠治疗。比较两组临床疗效、不同治疗时间临床症状评分、血清Th1/Th2细胞因子[白细胞介素-2(Interleukine-2,IL-2)、干扰素-(γInterferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-4(Interleukine-4,IL-4)、白细胞介素-10(Interleukine-10,IL-10)]水平、血清趋化因子配体17(CC-chemokine ligand 17,CCL17)、趋化因子配体22(CC-chemokine ligand 22,CCL22)水平及不良反应发生率。结果:B组临床总有效率高于A组(P<0.05);治疗1 m、3 m后B组临床症状评分低于A组(P<0.05);治疗1 m、3 m后B组血清IL-2、IFN-γ水平高于A组,IL-4、IL-10水平低于A组(P<0.05);治疗1 m、3 m后B组血清CCL17、CCL22水平低于A组(P<0.05);两组不良反应总发生率无统计学差异。结论:在糠酸莫米松治疗AR基础上,加用孟鲁司特钠可进一步提升疗效,改善临床症状,调节血清Th1/Th2细胞因子,促进病情恢复。

上调IL-37a表达对急性呼吸窘迫综合征大鼠肺功能及Th1/Th2平衡的影响

目的探究上调白细胞介素-37a(IL-37a)表达对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠肺功能及Th1/Th2平衡的影响。方法构建过表达IL-37a的间充质干细胞(MSC),并与单个核细胞共培养,流式细胞术检测过表达IL-37a对Th1、Th2表达影响,ELISA检测培养基上清液IFN-γ、IL-4水平。取30只SD大鼠随机分为Control组(假手术)、ARDS组(脂多糖诱导建立ARDS模型)、IL-37a组(建模+尾静脉注射10μg/kg IL-37a重组蛋白)各10只,建模12 h后,血气分析仪检测大鼠动脉氧分压(PaO2)、氧合指数(PaO2/FiO2),并测定肺干/湿(W/D)比,HE染色观察肺组织病理并评估肺部病理损伤评分,ELISA检测肺泡灌洗液(BALF)及血清中IL-4、IFN-γ表达,流式细胞术检测脾脏Th1/Th2,Westernblot检测肺组织NF-κB、NLRP3蛋白表达。结果过表达IL-37a组细胞外周Th1、Th1/Th2、IL-4表达低于阴性对照组细胞,Th2、IFN-γ表达高于阴性对照组细胞(P<0.05);与Control组比较,ARDS组和IL-37a组PaO2、PaO2/FiO2、BALF及血清IL-4表达降低,W/D、肺部病理损伤评分、BALF及血清IFN-γ、脾脏Th1/Th2、肺组织NF-κB、NLRP3蛋白表达升高;与ARDS组比较,IL-37a组PaO2、PaO2/FiO2、BALF及血清IL-4表达升高,W/D、肺部病理损伤评分、BALF及血清IFN-γ、脾脏Th1/Th2、肺组织NF-κB、NLRP3蛋白表达降低(P<0.05)。结论上调IL-37a表达可改善ARDS大鼠肺部损伤,这可能与IL-37a能影响MSC免疫调节功能,促进Th1/Th2恢复平衡有关。