藏药独一味对肺结核患者Th1/Th2平衡调节作用的研究

目的探讨藏药独一味对肺结核病患者外周血单个核细胞(PBMC)分泌γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)的影响。方法葡聚糖-泛影葡胺密度梯度离心法分离20例肺结核病患者和15例健康对照者PBMC。按加入刺激物的不同,将每份标本分为:RPM I1640组、PPD组、PPD+独一味组。加入相应刺激物后培养72h,收集上清液,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组培养上清液中IFN-γ、IL-4的水平。结果与PPD组相比,加入独一味能有效促进肺结核病患者及健康对照者PBMC分泌IFN-γ(P<0.05),IL-4水平无差异(P>0.05)。结论独一味通过诱导IFN-γ分泌,调节Th1/Th2平衡,对结核分枝杆菌感染患者发挥保护性的免疫反应。

温针灸对盆腔炎性疾病后遗慢性盆腔痛患者细胞因子及Th1/Th2平衡调节作用的临床研究

目的探讨温针灸对盆腔炎性疾病后遗慢性盆腔痛患者细胞因子及Th1/Th2平衡调节作用的影响。方法依据纳、排标准,筛选该院2019年1月—2020年7月诊治的盆腔炎性疾病后遗慢性盆腔痛患者,最终纳入98例,并按照随机数字表法,随机分两组,各49例。对照组予常规西医治疗,治疗组加用温针灸治疗,治疗周期均为3个月。以两组患者中医证候积分、疼痛VAS评分、血清细胞因子及外周血Th1和Th2细胞占CD4+T细胞比例作为观察指标并比较,观察患者治疗前后中医证候、疼痛严重程度、Th1/Th2平衡调节作用及炎症反应的变化情况,并比较两组临床疗效。结果患者下腹坠痛、胸胁胀痛、腰骶痠痛等中医证候均较治疗前缓解,中医证候积分、VAS评分均呈下降趋势(P<0.05),且治疗组下降趋势更显著(P<0.05);相较于治疗前,两组Th1/Th2值、Th1细胞比例及细胞因子IL-2、IL-10均升高,Th2细胞比例及细胞因子IL-6、TNF-α均下降,且组间比较,治疗组各指标改善情况明显优于对照组(P<0.05);治疗组临床总有效率为93.88%(46/49),对照组临床总有效率为71.43%(35/49),治疗组疗效显著优于对照组(P<0.05)。结论温针灸可疏通经络、调畅气血,增强患者机体免疫力,消除炎症,调节Th1/Th2平衡作用,缓解腹痛,有效治疗盆腔炎性疾病后遗慢性盆腔痛,疗效显著。

正常妊娠反复自然流产绒毛及蜕膜组织中细胞因子信号转导负调控因子的表达:改变Th1/Th2平衡调节可影响妊娠结局

背景:细胞因子信号转导负调控因子(suppressors of cytokine signaling,SOCS)参与多种细胞因子信号通路的调节,SOCS1-3对妊娠的调节作用较为突出。目的:通过检测反复自然流产患者和正常妊娠绒毛及蜕膜组织中SOCS3蛋白表达,了解反复自然流产患者SOCS3蛋白的表达。方法:Westenblotting方法检测反复自然流产患者和正常妊娠绒毛组织及蜕膜组织SOCS3的表达。结果与结论:与正常妊娠组相比,反复自然流产组SOCS3在绒毛组织中表达减少(P<0.05),在蜕膜组织中表达减少(P<0.01)。推测SOCS3蛋白可能影响妊娠结局,反复自然流产组SOCS3表达降低,可能导致Th2反应降低,从而导致流产发生。

Th1/Th2平衡调节与哮喘的免疫治疗

自从20世纪中以来，支气管哮喘的严重性和流行性呈明显上升趋势。近年来的研究认为辅助性T淋巴细胞两种亚型Th1，Th2的失衡是哮喘发病最重要的免疫学机制.1986年，Mosmann等发现小鼠的CD4＋T细胞按产生细胞因子的类型和生物学功能，可分为Th1和Th2两种类型。之后．Maggi等发现，人类也有类似小鼠的Th1和Th2亚群。Th1和Th2之间存在着交互调节的关系，即Th1／Th2功能平衡。

BCG-CpG-DNA对哮喘小鼠Th1/Th2平衡调节影响的实验研究

目的:研究BCG-CpG-DNA干预对哮喘小鼠Th1/Th2平衡的影响。方法:将昆明小鼠45只随机分为正常对照组、哮喘组、治疗组3组,每组小鼠都为15只。正常对照组以生理盐水致敏激发,以卵清白蛋白(OVA)致敏激发建立小鼠哮喘模型为模型组,治疗组于致敏后分别以BCGBCG-CpG-DNA注射干预,观察肺泡灌洗液(BALF)白胞总数、外周血嗜酸粒细胞(EOS)计数。采用用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测外周血中干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)水平表达。并采用三色流式细胞法测定外周血Th1/Th2细胞之比。结果:与正常对照组比较,哮喘组、治疗组小鼠肺泡灌洗液中的白细胞总数、EOS计数、血中IL-4水平明显增加。差异显著有统计学意义(P<0.05);而与哮喘组比较,治疗组肺泡灌洗液中的白细胞总数、EOS计数、血中IL-4水平降低差异显著有统计学意义(P<0.05)。与正常对照组比较,哮喘组血中的IFN-γ水平显著降低,而治疗组血中的IFN-γ水平增加互相比较差异显著有统计学意义(P<0.05)。与正常对照组外周血Th1/Th2(1.49±0.32)比较,哮喘组外周血Th1/Th2比值(0.62±0.21)出现明显降低差异显著有统计学意义(P<0.05);与哮喘组Th1/Th2(0.62±0.21)比较,治疗组Th1/Th2(1.12±0.21)明显升高,差异显著有统计学意义(P<0.05)。结论:BCG-CpG-DNA能哮喘小鼠气道炎症起到抑制作用、提高Th1,细胞因子IFN-γ的生成减少哮喘小鼠Th2型细胞因子IL-4的水平提高外周血Th1/Th2的比例。

重型再生障碍性贫血患儿Th1/Th2平衡调节及其相关细胞因子的变化

目的:研究重型再生障碍性贫血(SAA)患儿Th1/Th2平衡调节及其相关细胞因子的变化。方法:选取2019年1月~2020年10月住院治疗的96例再生障碍性贫血(AA)患儿,按Camitta分型分为轻型再生障碍性贫血组(MAA组,55例)、SAA组(41例),按临床疗效分为疗效较好组(37例)、疗效较差组(59例)亚组,另选取50例健康儿童为对照组,采集外周血采用流式细胞法测定Th1、Th2细胞数量,采用酶联免疫法测定干扰素γ(IFN)-γ、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)细胞因子表达水平,分析各组上述指标的差异。结果:AA组外周血Th1、Th1/Th2、IFN-γ、IL-2均明显高于对照组,而Th2、IL-4、IL-6均明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);SAA组外周血Th1、Th1/Th2、IFN-γ、IL-2均高于MAA组,而Th2、IL-4、IL-6均低于MAA组,差异均有统计学意义(P<0.05);疗效较差组外周血Th1、Th1/Th2、IFN-γ、IL-2均明显高于疗效好组,而Th2、IL-4、IL-6均明显低于疗效好组,差异均有统计学意义(P<0.05);IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6联合检测诊断SAA的诊断AUC为0.932,敏感度(86.15%)、特异度(61.28%)均显著提高。结论:SAA患儿机体存在Th1/Th2细胞平衡向Th1细胞偏移,IFN-γ、IL-2等细胞因子分泌增加,监测Th1/Th2平衡变化对AA病情、临床治疗及早期诊断均具有较高的参考价值。

基于网络药理学研究玉屏风颗粒调节IgA肾病模型小鼠Th1/Th2平衡的作用机制

目的:基于网络药理学预测玉屏风颗粒治疗IgA肾病(IgAN)的作用机制并进行机制验证。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库检索玉屏风颗粒有效成分;从GeneCards、OMIM、TTD数据库获取IgAN靶点,运用Venny2.1.0、Cytoscape 3.7.2软件分别获取玉屏风颗粒与IgAN两者交集靶点,构建“活性成分-交集靶点-疾病”关系网络;使用String数据库构建蛋白互作网络图,运用DAVID数据库进行GO、KEGG富集分析;通过AutoDock Vina软件对玉屏风颗粒中的主要活性成分与关键靶点进行分子对接验证。选取60只雄性昆明小鼠随机分为正常组10只,造模组50只,造模成功后随机分为玉屏风颗粒高、中、低剂量组及西药对照组,给药8周。免疫荧光法检测IgA在肾组织中的沉积情况;HE染色、糖原染色观察肾组织病理学改变;生化法检测24 h-UTP、BUN、Scr;ELISA法检测血清中IgA,Th1相关因子TNF-α、INF-γ、IL-2表达,以及Th2相关因子IL-4、IL-6表达。结果:网络药理学部分,筛选出玉屏风颗粒活性成分34个,药物靶点222个;疾病靶点1436个;交集靶点102个;主要活性成分为槲皮素、山柰酚、汉黄芩素等;关键靶点有TNF、IL-6、IL-4、IL-2等。分子对接结果表明,主要活性成分与关键靶点均能较好的结合,所有结合能均≤-6.0 kJ/mol;GO富集分析得到生物过程689条、细胞组分54条、分子功能115条;KEGG富集分析得到IL-17、NF-κB等信号通路。动物实验部分,肾组织IgA免疫荧光显示,与正常组比较,模型组肾小球系膜区可见强绿色团块状IgA荧光信号;与模型组比较,各治疗组IgA沉积情况均有所改善,其中玉屏风颗粒高剂量组改善较明显。HE染色显示,与正常组比较,模型组可见肾小球肿胀,系膜细胞、内皮细胞增生,细胞外基质增多,系膜区扩张;与模型组比较,各治疗组肾组织病理损伤均有所减轻;糖原染色显示,与正常组比较,模型组可见系膜细胞增生,细胞外基质增多,给予药物治疗后,各治疗组肾组织病变程度由中重度变为中轻度。与正常组比较,模型组24 h-UTP、BUN、Scr明显升高(P<0.01);与模型组比较,各治疗组肾功能均有所改善(P<0.01或P<0.05)。与正常组比较,模型组血清中IgA表达明显升高,与模型组比较,各治疗组血清中IgA表达均有所降低(P<0.05)。与正常组比较,模型组血清中Th1相关因子TNF-α、INF-γ、IL-2表达水平明显降低(P<0.05),各治疗组血清中Th1相关因子TNF-α、INF-γ、IL-2均有所上调。与正常组比较,模型组血清中Th2相关因子IL-4、IL-6表达水平明显升高(P<0.05),使用药物治疗后,各治疗组血清中Th2相关因子IL-4、IL-6表达水平均有所下调。与正常组比较,模型组血清中Th1/Th2比值明显下降(P<0.05),各治疗组血清中Th1/Th2比值均有所上调(P<0.05)。结论:玉屏风颗粒对IgAN模型小鼠具有较好的治疗作用,其机制可能与纠正Th1/Th2失衡有关。

基于Notch信号通路探讨芪蛭皱肺颗粒对慢性阻塞性肺疾病大鼠Th1/Th2免疫平衡的调节机制

目的探讨果蝇双翅边缘缺刻同源基因(Notch)信号通路在慢性阻塞性肺疾病(COPD)辅助性T细胞1(Helper T cells 1,Th1)和辅助性T细胞2(Helper T cells 2,Th2)失衡中的作用及芪蛭皱肺颗粒的干预机制。方法70只Wistar大鼠随机挑选10只作为空白对照组,其余大鼠均采用香烟烟雾(CS)联合气管滴注脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)法建立COPD模型,空白对照组及造模组各随机挑选3只大鼠验证造模是否成功。造模结束进行灌胃给药干预,造模组大鼠随机分为模型对照组、阳性对照组(67.5μg·kg^(-1))及芪蛭皱肺颗粒高中低剂量组(3.24、1.62、0.81 g·kg^(-1)),分别给予生理盐水、醋酸地塞米松混悬液、芪蛭皱肺高、中、低剂量混悬液进行灌胃干预,空白对照组同模型对照组,灌胃等体积生理盐水。经28天造模及28天治疗后,采用动物肺功能测试系统检测吸气峰流速(Peak Inspiratory Flow,PIF)和呼气峰流速(Peak Expiratory Flow,PEF),处死大鼠提取肺脏、脾脏、血清及支气管肺泡灌洗液(BALF),苏木素-伊红(HE)染色评价肺组织病理变化,酶联免疫吸附实验法(ELISA)测定血清及BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,流式细胞仪检测脾脏Th1/Th2细胞水平,免疫组织化学法(Immunohistochemistry,IHC)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肺组织Notch1、Hes家族发状分裂相关增强子1(Hes1)、Hey家族发状分裂相关增强子1(Hey1)蛋白水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR,RT-PCR)检测肺组织Notch1、Hes1、Hey1基因表达水平。结果与空白对照组比较,模型对照组大鼠肺功能显著降低(P<0.05),肺组织出现炎性细胞浸润、支气管结构破坏等病变,血清及BALF中TNF-α含量显著升高(P<0.05),脾Th1细胞百分比显著降低(P<0.05),Th2细胞百分比显著升高(P<0.05),肺组织Notch1、Hes1、Hey1蛋白及mRNA表达显著升高(P<0.05),差异均具有统计学意义;与模型对照组比较,各给药组大鼠肺功能显著升高(P<0.05),肺组织病理损伤均有所减轻,血清及BALF中TNF-α含量显著降低(P<0.05),脾Th1细胞百分比显著升高(P<0.05),Th2细胞百分比显著降低(P<0.05),肺组织Notch1、Hes1、Hey1蛋白及mRNA表达显著降低(P<0.05),差异均具有统计学意义。结论芪蛭皱肺颗粒通过抑制Notch信号通路调节Th1/Th2平衡,从而改善COPD大鼠肺功能及病理损伤,影响其免疫功能。

EGCG调节TLR4/MyD88/NF-κB信号通路对特应性皮炎大鼠Th1/Th2平衡的影响

目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对特应性皮炎(AD)大鼠的保护作用及潜在机制。方法 将SPF级SD大鼠分为对照(Control)组、AD模型(AD)组、AD+EGCG治疗(EGCG)组、AD+地塞米松阳性对照(DXM)组、AD+EGCG+TLR4激动剂(TLR4)组,每组18只。根据临床损伤严重程度计算皮肤损伤评分;ELISA检测炎症因子的表达;HE染色观察组织学变化;流式细胞仪分析Th1和Th2阳性细胞比例;Western blot检测TLR4/MyD88/NF-κB通路相关蛋白水平。结果 与Control组比较,AD组大鼠背部皮肤损伤程度较重,病理学损伤评分增加(P<0.05),白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)水平及Th1细胞百分比降低,白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-13(IL-13)水平及Th2细胞百分比升高(P<0.05),TLR4、MyD88、p-NF-κB蛋白水平升高(均P<0.05)。与AD组比较,EGCG组和DXM组大鼠皮肤损伤评分及皮肤损伤病理学评分降低,Th_1细胞百分比、IL-2、IFN-γ水平升高,IL-4、IL-13水平、Th_(2)阳性百分比、TLR4、MyD88、p-NF-κB蛋白水平下降(均P<0.05)。与EGCG组比较,DXM组大鼠皮肤损伤评分及皮肤损伤病理学评分、Th_1、Th_(2)细胞百分比、TLR4、MyD88、p-NF-κB蛋白水平差异无统计学意义(均P>0.05),TLR4组大鼠皮损评分及皮肤损伤病理学评分升高,皮损组织中Th_1细胞百分比降低,Th_(2)阳性百分比及TLR4、MyD88、p-NF-κB蛋白水平上调(均P<0.05)。结论 EGCG可以通过TLR4/MyD88/NF-κB信号通路,维持Th1/Th2平衡来抑制炎症反应,进而降低AD的严重程度。

苦芩煎剂联合度普利尤单抗通过调节Th1/Th2平衡和抑制皮肤炎症反应治疗特应性皮炎的研究

目的:研究苦芩煎剂联合度普利尤单抗通过调节Th1/Th2平衡和抑制皮肤炎症反应治疗特应性皮炎的应用。方法:选取98例我院于2021年3月~2023年8月收治的特应性皮炎患者,采用随机数法分为对照组和研究组,各49例。对照组患者基于度普利尤单抗治疗,治疗16周;研究组在对照组的基础上给予苦芩煎剂,连续治疗2周。评估两组患者临床疗效。分别于治疗前及治疗后,评估两组患者皮损评分(SCORAD)评分、视觉模拟量表(VAS)评分、皮肤病生活质量指数(DLQI)评分;评估患者皮肤屏障功能;采用流式细胞仪测定外周血中Th1细胞和Th2细胞水平;采用酶联免疫吸附法测定血清中干扰素(INF)-γ、白细胞介素(IL)-13、IL-4水平。结果:研究组临床治疗总有效率为97.96%,显著高于对照组83.67%(P<0.05)。治疗后,研究组SCORAD、VAS、DLQI评分及TEWL水平显著低于对照组(P<0.05)。研究组Th1和Th1/Th2水平均显著高于对照组(P<0.05);研究组Th2水平显著低于对照组(P<0.05)。研究组IL-4、IL-13水平均显著高于对照组(P<0.05);研究组INF-γ水平显著低于对照组(P<0.05)。结论:苦芩煎剂联合度普利尤单抗可以明显调节Th1/Th2平衡,抑制炎症反应,治疗特发性皮炎效果显著。

上调IL-37a表达对急性呼吸窘迫综合征大鼠肺功能及Th1/Th2平衡的影响

目的探究上调白细胞介素-37a(IL-37a)表达对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠肺功能及Th1/Th2平衡的影响。方法构建过表达IL-37a的间充质干细胞(MSC),并与单个核细胞共培养,流式细胞术检测过表达IL-37a对Th1、Th2表达影响,ELISA检测培养基上清液IFN-γ、IL-4水平。取30只SD大鼠随机分为Control组(假手术)、ARDS组(脂多糖诱导建立ARDS模型)、IL-37a组(建模+尾静脉注射10μg/kg IL-37a重组蛋白)各10只,建模12 h后,血气分析仪检测大鼠动脉氧分压(PaO2)、氧合指数(PaO2/FiO2),并测定肺干/湿(W/D)比,HE染色观察肺组织病理并评估肺部病理损伤评分,ELISA检测肺泡灌洗液(BALF)及血清中IL-4、IFN-γ表达,流式细胞术检测脾脏Th1/Th2,Westernblot检测肺组织NF-κB、NLRP3蛋白表达。结果过表达IL-37a组细胞外周Th1、Th1/Th2、IL-4表达低于阴性对照组细胞,Th2、IFN-γ表达高于阴性对照组细胞(P<0.05);与Control组比较,ARDS组和IL-37a组PaO2、PaO2/FiO2、BALF及血清IL-4表达降低,W/D、肺部病理损伤评分、BALF及血清IFN-γ、脾脏Th1/Th2、肺组织NF-κB、NLRP3蛋白表达升高;与ARDS组比较,IL-37a组PaO2、PaO2/FiO2、BALF及血清IL-4表达升高,W/D、肺部病理损伤评分、BALF及血清IFN-γ、脾脏Th1/Th2、肺组织NF-κB、NLRP3蛋白表达降低(P<0.05)。结论上调IL-37a表达可改善ARDS大鼠肺部损伤,这可能与IL-37a能影响MSC免疫调节功能,促进Th1/Th2恢复平衡有关。

黄芪多糖通过TGF-β1/Smads通路对哮喘大鼠Th1/Th2免疫失衡的调节作用

目的:探讨黄芪多糖通过转化生长因子(TGF)-β1/Smads信号通路对哮喘大鼠辅助性T细胞(Th)l/Th2免疫失衡的调节作用。方法:选择雄性SD大鼠40只,分为对照组、模型组、黄芪多糖低、中、高剂量组,各8只。建立慢性哮喘大鼠模型,对照组和模型组大鼠尾静脉注射等体积0.9%氯化钠溶液,川芎嗪低、中、高剂量腹腔注射川芎嗪,各组均连续治疗14 d。干预后检测各组大鼠支气管黏膜受损面积和平滑肌厚度,收集各组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF),测定白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)水平变化,苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织结构变化,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)对肺组织TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA和蛋白表达进行测定。结果:与对照组比较,模型组支气管黏膜受损面积、平滑肌厚度增加,与模型组比较,黄芪多糖各组均下降,且呈剂量依赖性(P<0.05)。与对照组比较,模型组BALF中IFN-γ水平降低,IL-4水平升高,与模型组比较,黄芪多糖各组BALF中IFN-γ水平均升高,IL-4水平均下降,且呈剂量依赖性(P<0.05)。模型组肺组织TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA和蛋白表达较对照组升高,黄芪多糖各组肺组织TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA和蛋白表达较模型组下降,且呈剂量依赖性(P<0.05)。结论:黄芪多糖通过抑制TGF-β1/Smads信号激活阻止哮喘大鼠气道炎症,调节Th1/Th2比值失衡,改善大鼠肺组织病理损伤。

参芪地黄汤联合羟氯喹治疗IgA肾病的疗效观察及对Th1/Th2平衡的影响

目的:观察参芪地黄汤联合羟氯喹(HCQ)治疗气阴两虚型IgA肾病(IgAN)的临床疗效及其对Th1/Th2平衡的影响。方法:将42例气阴两虚型IgA肾病患者随机分成观察组和对照组,各21例,对照组给予口服HCQ,观察组在对照组基础上另予参芪地黄汤,两组均连续干预8周。比较两组患者的临床疗效和治疗前后中医症状评分、常规生化指标[血肌酐(SCr)、白蛋白(Alb)]、24 h尿蛋白定量(24 h-uPQ)、细胞因子[γ干扰素(INF-γ)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)]及辅助性T淋巴细胞(Th)水平。结果:观察组临床总有效率(81.0%)高于对照组(57.1%)(P<0.05);治疗后两组患者各项中医症状评分均较治疗前降低,且观察组低于对照组(P<0.05);治疗后两组患者SCr、24 h-uPQ、INF-γ、Th1和Th1/Th2水平均较治疗前降低,且观察组低于对照组(P<0.05);治疗后两组患者Alb、IL-4、IL-10及Th2水平均较治疗前升高,且观察组高于对照组(P<0.05);结论:参芪地黄汤联合HCQ能明显改善气阴两虚型IgAN患者的临床症状,有效控制尿蛋白和延缓肾功能衰竭,调节免疫功能及缓解微炎症状态,临床疗效确切。

二甲双胍联合炔雌醇环丙孕酮片对多囊卵巢综合征患者血清miR-124及Th1/Th2细胞因子平衡偏移的影响

目的探讨二甲双胍联合炔雌醇环丙孕酮片对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者血清miR-124水平及Th1/Th2细胞因子平衡偏移的影响。方法纳入2022年1月至2023年2月在攀枝花市妇幼保健院接受治疗的200例PCOS患者,分为观察组(n=100)和对照组(n=100);观察组给予二甲双胍联合炔雌醇环丙孕酮片治疗,对照组给予炔雌醇环丙孕酮片治疗,连续治疗3个月;收集两组患者临床资料,治疗前后血脂[总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)]水平、空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、空腹血清胰岛素(fins insulin,FINS)水平及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);检测血清miR-124、白细胞介素(IL)-2、IL-6、γ干扰素(interferon-γ,INF-γ)。结果治疗后观察组TG、TC、LDL-C水平显著降低(P<0.05);治疗后观察组TG、TC、LDL-C水平低于对照组(P<0.05);治疗前两组患者FPG、FINS、HOMA-IR比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后观察组FPG、FINS、HOMA-IR水平显著降低(P<0.05);且治疗后观察组FPG、FINS、HOMA-IR水平低于对照组(P<0.05);治疗前两组患者IL-2、IL-6、INF-γ及miR-124水平比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后观察组IL-6、INF-γ水平低于治疗前,IL-2、miR-124水平高于治疗前(P<0.05);治疗后观察组IL-6、INF-γ水平低于对照组,IL-2、miR-124水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论二甲双胍联合炔雌醇环丙孕酮片能够明显改善PCOS患者胰岛素抵抗,调节糖脂代谢,改善Th1/Th2细胞因子平衡偏移状态。

脑组织GDF-15水平与脑梗死大鼠血管新生以及Th1/Th2免疫平衡轴的关系

目的:探讨脑组织GDF-15水平与脑梗死大鼠血管新生以及Th1/Th2免疫平衡轴的关系。方法:45只雄性SD大鼠随机分为脑梗死模型组、假手术组以及正常对照组,15只/组。模型组采用线栓法建立脑梗死模型,假手术组仅暴露颈内动脉后直接缝合皮肤,建模成功后1周评估大鼠改良神经功能缺损(mNSS)评分。采用HE染色检测脑组织病理学变化情况,Western blot法检测大鼠脑组织中组织生长分化因子-15(GDF-15)蛋白水平,RTPCR测定脑组织中GDF-15 mRNA水平。采用ELISA法检测脑组织INF-γ、IL-4表达情况,采用Spearman相关性分析大鼠脑组织中GDF-15蛋白、mRNA表达水平分别与mNSS评分、微血管密度(MVD)、INF-γ/IL-4水平之间的相关性。结果:模型组大鼠mNSS评分明显高于假手术组和正常对照组(P<0.001),模型组脑梗死面积比为(24.45±4.15)%,假手术组和正常对照组未发现脑梗死区域。模型组大鼠脑组织GDF-15蛋白、mRNA、MVD、INF-γ/IL-4水平均明显高于假手术组和正常对照组(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,模型组大鼠脑组织中GDF-15蛋白、mRNA表达水平分别与mNSS评分、MVD、INF-γ/IL-4水平呈正相关关系(P<0.001)。结论:脑梗死大鼠脑组织中GDF-15处于高表达状态,且与神经功能密切关联,其作用机制可能与血管新生以及调控Th1/Th2免疫平衡轴有关。

麻黄定喘汤辅助治疗对过敏性哮喘患儿气道炎症、重塑及Th1/Th2失衡的调节作用

【目的】探讨麻黄定喘汤辅助治疗对过敏性哮喘患儿气道炎症、重塑及辅助性T细胞1(Th1)/辅助性T细胞2(Th2)失衡的调节作用。【方法】将126例痰热壅肺型急性发作期过敏性哮喘患儿随机分为观察组与对照组,每组各63例。对照组给予常规西医治疗,观察组在对照组的基础上加用麻黄定喘汤治疗,总疗程为14 d。观察2组患儿治疗前后肺功能指标[第一秒用力呼气量(FEV1)和峰值呼气流速(PEF)]、气道炎症指标[痰液中的中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细数、单核细胞百分比和白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]、气道重塑指标[气道管壁面积(WA)、气道管腔面积(LA)、气道总面积(TA)]以及Th1/Th2细胞因子[干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)]水平的变化情况,并评价2组患儿的临床疗效和安全性。【结果】(1)疗效方面,治疗14 d后,观察组的总有效率为93.65%(59/63),对照组为80.95%(51/63),组间比较(χ2检验),观察组的疗效明显优于对照组(P<0.05)。(2)肺功能指标方面,治疗后,2组患儿的肺功能指标FEV1和PEF值均较治疗前显著升高(P<0.01),且观察组的升高幅度均明显优于对照组(P<0.05)。(3)气道炎症指标方面,治疗后,2组患儿痰液中的中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞百分比和IL-6、TNF-α水平均较治疗前明显降低(P<0.05),淋巴细胞百分比均较治疗前明显升高(P<0.05),且观察组对痰液中的中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞百分比和IL-6、TNF-α水平的降低幅度及对淋巴细胞百分比的升高幅度均明显优于对照组(P<0.05)。(4)气道重塑指标方面,治疗后,2组患儿的WA值均较治疗前降低(P<0.05),LA、TA值均较治疗前升高(P<0.05),且观察组对WA值的降低幅度及LA、TA值升高幅度均明显优于对照组(P<0.05)。(5)Th1/Th2细胞因子方面,治疗后,2组患者的血清IFN-γ水平和IFN-γ/IL-4比值均较治疗前明显升高(P<0.05),血清IL-4水平均较治疗前明显降低(P<0.05),且观察组对血清IFN-γ水平和IFN-γ/IL-4比值的升高幅度及对血清IL-4水平的降低幅度均明显优于对照组(P<0.05)。(6)安全性方面,2组患儿治疗期间均未见严重不良反应,心电图、血常规、肝功能检查及心率、血压等安全性指标均未见明显异常。【结论】麻黄定喘汤有助于缓解过敏性哮喘患儿气道炎症、重塑,调节Th1/Th2失衡,改善患儿肺功能,疗效肯定,安全性好。

痛泻安肠方对肠易激综合征小鼠短链脂肪酸代谢及Th1/Th2细胞免疫平衡的影响

目的观察痛泻安肠方对肝郁脾虚证腹泻型肠易激综合征(IBS-D)小鼠模型短链脂肪酸代谢及Th1/Th2细胞免疫平衡的影响。方法30只18~22 g的雄性C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、痛泻安肠方低剂量组、痛泻安肠方中剂量组、痛泻安肠方高剂量组,每组6只。采用束缚应激联合番泻叶灌胃复制IBS-D小鼠模型,造模成功后分别予相应浓度中药灌胃14 d,每日1次,通过靶向代谢组学检测小鼠粪便中短链脂肪酸含量的变化,并通过流式细胞术检测肠系膜淋巴结中CD3+CD4+INF-γ+T细胞(Th1细胞)、CD3+CD4+IL-4+T细胞(Th2细胞)的占比情况。结果与空白组相比,模型组小鼠粪便短链脂肪酸(SCFAs)相对含量显著升高(P<0.01),尤其是乙酸、丙酸及丁酸的含量均显著升高(P<0.01或P<0.05);不同剂量痛泻安肠方治疗后,粪便总SCFAs相对含量显著降低(P<0.01),乙酸、丙酸及丁酸均有不同程度降低,其中痛泻安肠方各剂量组均可显著降低乙酸和丁酸的含量,差异具有统计学意义(P<0.01),低剂量组及中剂量组可显著降低丙酸的含量,差异具有统计学意义(P<0.01)。造模后,肠易激综合征小鼠肠系膜淋巴结的Th2细胞占比明显降低,而Th1细胞占比及Th1/Th2细胞比率明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后,痛泻安肠方各剂量组Th2细胞占比均有升高,Th1细胞占比及Th1/Th2细胞比率降低。结论痛泻安肠方可以降低IBS-D小鼠粪便SCFAs的含量,调节小鼠Th1/Th2细胞免疫紊乱。

TIM-1-Fc融合蛋白对哮喘小鼠Th1/Th2和Th17/Treg免疫失衡的调节

目的制备T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域1(T cell immunoglobulin domain and mucin domain protein-1,TIM-1)-Fc融合蛋白并探讨TIM-1-Fc融合蛋白对卵白蛋白(ovabumin,OVA)诱导的哮喘小鼠的干预作用及潜在作用机制。方法通过基因工程技术获得TIM-1-Fc融合蛋白。采用腹腔注射OVA氢氧化铝溶液致敏建立过敏性哮喘小鼠模型,随机分为对照组、哮喘组和TIM-1-Fc干预组。每次干预前20 min,使用40μL卵白蛋白生理盐水溶液(OVA-NS)滴鼻,TIM-1-Fc融合蛋白干预包括TIM-1-Fc滴鼻组(每只小鼠每次给予1μg/40μL TIM-1-Fc滴鼻)和TIM-1-Fc注射组(每只小鼠每次给予6μg/200μL TIM-1-Fc腹腔注射),每天1次,连续7 d,对照组用生理盐水替代。采用苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织病理变化;采用流式细胞术检测小鼠外周血中辅助性T细胞2(type 2 T helper cells,Th2)、辅助性T细胞17(type 17 T helper cells,Th17)和调节性T细胞(Treg)比例及相关细胞因子水平。结果成功构建TIM-1-Fc融合蛋白,成功构建OVA诱导的过敏性哮喘小鼠模型。与哮喘组相比,TIM-1-Fc融合蛋白干预后显著减轻了哮喘小鼠气道炎性损伤和肺组织损伤;TIM-1-Fc融合蛋白干预能显著降低外周血中TIM-1^(+)CD4^(+)T细胞和TIM-1^(+)Th17细胞比例,使TIM-1^(+)Treg细胞增多,显著降低Th2、Th17细胞比例,提高Treg细胞比例,调节哮喘中Th1/Th2和Th17/Treg免疫失衡。结论TIM-1-Fc融合蛋白改善OVA诱导的过敏性哮喘小鼠气道炎症和肺组织损伤,其作用机制可能与TIM-1-Fc融合蛋白对Th1/Th2和Th17/Treg的免疫调节有关。

Th1/Th2免疫应答平衡与肺炎支原体肺炎患者支原体抗体滴度及预后的关系探讨

目的探讨肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)肺炎患者的血清MP-IgM(immunoglobulin M,IgM)抗体滴度与T辅助细胞(helper Tcells,Th)1型/Th2免疫应答平衡的关系。方法选取2020年1月至2022年3月收治于岳池县人民医院的214例MP肺炎患者作为研究对象,根据患者MP-IgM抗体滴度分为低滴度组(n=92)、中滴度组(n=75)、高滴度组(n=47),根据预后病情分为好转组(n=125)和恶化组(n=89)。用单因素分析不同MPIgM抗体滴度组以及不同预后组患者间的临床差异;用广义加性模型(generalizedadditivemodel,GAM)分析指标间的相关性;用多因素Logistic回归分析影响预后病情恶化的危险因素;用样条函数与Logistic回归结合的限制性立方样条法分析Th1/Th2与患者预后病情恶化风险的剂量反应关系。结果不同MP-IgM抗体滴度的3组患者间发热比例、发热消退时间、白细胞计数(white blood cell,WBC)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-5(interleukin-5,IL-5)、IFN-γ/IL-5差异具有统计学意义(P均<0.05),其中发热消退时间、WBC水平、CRP水平、IFN-γ水平、IL-5水平随着MP-IgM抗体滴度的升高而逐渐升高,IFN-γ/IL-5水平随着MP-IgM抗体滴度的升高而降低。MP-IgM抗体低滴度组和中滴度组患者的发热比例差异无统计学意义(P>0.05),但高滴度组患者中发热比例明显高于其余2组(P均<0.05)。IFN-γ、IL-5与MP-IgM抗体滴度均呈正相关,Th1/Th2免疫平衡指标IFN-γ/IL-5与MP-IgM抗体滴度呈负相关。多因素分析结果显示,IFN-γ>5.25 pg/mL、IL-5>4.05 pg/mL以及血清MP-IgM抗体滴度增加是病情恶化的最主要危险因素,IFN-γ/IL-5>1.40为保护因素。Th1/Th2的连续变化与预后病情恶化风险呈非线性剂量反应关系,Th1/Th2水平与患者预后病情恶化风险大致呈负相关,当Th1/Th2>1.20时,随着Th1/Th2水平的升高,预后病情恶化风险显著降低。结论MP肺炎患者血清MP-IgM抗体滴度与Th1/Th2免疫应答平衡指标IFN-γ/IL-5呈负相关,检测血清MP-IgM抗体滴度与Th1/Th2细胞因子指标有助于早期判断MP肺炎患者病情和预后。

炎症性肠病患者血清Tim-3、Gal-9水平与Th1/Th2、Th17/Treg细胞因子平衡的关系

目的 观察炎症性肠病(IBD)患者血清黏蛋白域分子3(Tim-3)、半乳糖凝集素9(Gal-9)变化及其与辅助性T淋巴细胞(Th)1/Th2、Th17/调节性T淋巴细胞(Treg)相关因子水平的关系。方法 选择183例IBD患者纳入IBD组,其中活动期89例、缓解期94例;另选120例体检健康者作为对照组。采用ELISA法检测两组血清Tim-3、Gal-9;采用流式细胞术测算外周血Th1、Th2、Th17、Treg占比,计算Th1/Th2比值及Th17/Treg比值;采用ELISA法检测血清Th1细胞因子干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-2,Th2细胞因子IL-4、IL-6,Th17细胞因子IL-17、IL-22,Treg细胞因子IL-10、转化生长因子β(TGF-β)。分析IBD组血清Tim-3、Gal-9水平与Th1/Th2、Th17/Treg的相关性。结果 IBD组血清Tim-3、Gal-9水平高于对照组,且活动期患者血清Tim-3、Gal-9水平高于缓解期患者(P均<0.05)。IBD组Th1占比、Th17占比、Th1/Th2比值、Th17/Treg比值、IFN-γ、IL-2、IL-6、IL-17、IL-22水平高于对照组,Th2占比、Treg占比、IL-4、IL-10、TGF-β水平低于对照组(P均<0.05);活动期IBD患者血清Th1占比、Th17占比、Th1/Th2比值、Th17/Treg比值、IFN-γ、IL-2、IL-6、IL-17、IL-22高于缓解期患者,Th2占比、Treg占比、IL-4、IL-10、TGF-β低于缓解期患者(P均<0.05)。IBD患者血清Tim-3、Gal-9与Th1、Th1/Th2、IFN-γ、IL-2、IL-6、Th17、Th17/Treg、IL-17、IL-22呈正相关,与Th2、IL-4、Treg、IL-10、TGF-β呈负相关(P均<0.05)。结论 IBD患者血清Tim-3、Gal-9水平升高,且活动期患者高于缓解期患者;异常升高的Tim-3、Gal-9与IBD患者Th17/Treg、Th1/Th2失衡密切相关。