地塞米松对内毒素肺损伤大鼠Th1/Th2细胞偏移的影响

观察地塞米松 (DEX )对Th1/Th2偏移的影响 ,从Th1/Th2偏移的角度探讨DEX对内毒素肺损伤的治疗作用。静脉注射脂多糖制作大鼠内毒素肺损伤模型。分离、提纯外周血与BALF中T淋巴细胞 ,抗大鼠CD4 FITC单克隆抗体标记 ,通过流式细胞仪分选后 ,应用免疫组织化学技术动态观察Th1、Th2细胞的变化。结果LPS致伤后 ,外周血与BALF中IFN γ阳性细胞 (Th1细胞 )与IL 4阳性细胞 (Th2细胞 )数目均减少 ,Th1细胞在相应时相点CD4 + T淋巴细胞总数的百分比在一过性增高后进行性减少 ,CD4 + T细胞中Th1细胞构成比呈先增加后减少趋势 ,而Th2细胞构成比则持续增高 ,提示LPS使CD4 + T细胞构成比由Th1向Th2偏移。DEX组IFN γ阳性细胞、IL 4阳性细胞数目均减少 ,Th1/Th2比例趋于接近正常。Th1/Th2偏移可能部分参与内毒素肺损伤的发生 ,DEX通过调节炎症反应 ,使Th1/Th2比例趋于正常 。

哮喘小鼠Th1/Th2细胞偏移及卡介苗干预的影响

目的研究哮喘小鼠Th1/Th2细胞偏移情况,同时观察卡介苗(BCG)对Th1/Th2偏移的影响。方法将雄性昆明小鼠随机分成哮喘组、BCG干预组和对照组。用卵清蛋白(OVA)致敏、激发建立哮喘模型。ELISA法测定肺泡灌洗液、脾细胞培养上清液中IFN-γ、IL-4的水平。结果肺泡灌洗液、脾细胞培养上清液中IFN-γ/IL-4比值在OVA致敏后均明显降低,初次激发后进一步降低,多次激发后继续降低,与对照组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。BCG干预后IFN-γ/IL-4比值较哮喘组增高,但仍低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论致敏状态下Th1/Th2比例发生偏移,随着抗原激发,Th1/Th2偏移愈加明显,在哮喘气道炎症中,以Th2亢进为主,而代表全身性炎症的脾脏中,则以Th1分泌减少为主。BCG干预后可以部分纠正Th1/Th2偏移,但BCG作用有时限性。

二甲双胍联合炔雌醇环丙孕酮片对多囊卵巢综合征患者血清miR-124及Th1/Th2细胞因子平衡偏移的影响

目的探讨二甲双胍联合炔雌醇环丙孕酮片对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者血清miR-124水平及Th1/Th2细胞因子平衡偏移的影响。方法纳入2022年1月至2023年2月在攀枝花市妇幼保健院接受治疗的200例PCOS患者,分为观察组(n=100)和对照组(n=100);观察组给予二甲双胍联合炔雌醇环丙孕酮片治疗,对照组给予炔雌醇环丙孕酮片治疗,连续治疗3个月;收集两组患者临床资料,治疗前后血脂[总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)]水平、空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、空腹血清胰岛素(fins insulin,FINS)水平及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);检测血清miR-124、白细胞介素(IL)-2、IL-6、γ干扰素(interferon-γ,INF-γ)。结果治疗后观察组TG、TC、LDL-C水平显著降低(P<0.05);治疗后观察组TG、TC、LDL-C水平低于对照组(P<0.05);治疗前两组患者FPG、FINS、HOMA-IR比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后观察组FPG、FINS、HOMA-IR水平显著降低(P<0.05);且治疗后观察组FPG、FINS、HOMA-IR水平低于对照组(P<0.05);治疗前两组患者IL-2、IL-6、INF-γ及miR-124水平比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后观察组IL-6、INF-γ水平低于治疗前,IL-2、miR-124水平高于治疗前(P<0.05);治疗后观察组IL-6、INF-γ水平低于对照组,IL-2、miR-124水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论二甲双胍联合炔雌醇环丙孕酮片能够明显改善PCOS患者胰岛素抵抗,调节糖脂代谢,改善Th1/Th2细胞因子平衡偏移状态。

补肾固胎方联合黄体酮注射液治疗肾虚型早期先兆流产疗效及对妊娠激素水平和Th1/Th2细胞因子的影响

目的 观察补肾固胎方联合黄体酮注射液治疗肾虚型早期先兆流产疗效及对妊娠激素水平和Th1/Th2细胞因子的影响。方法 采用随机数字表法将符合入选标准的120例肾虚型早期先兆流产患者分为观察组和对照组。对照组予黄体酮注射液治疗,观察组同联合补肾固胎方治疗。连续治疗2周后,比较两组中医证候积分(妊娠期阴道流血、小腹坠胀或疼痛、腰酸痛、膝关节酸软)、妊娠激素水平[雌二醇(Estradiol, E_(2))、人绒毛膜促性腺激素(Human chorionic gonadotropin, β-HCG)、孕酮(Progesterone, P)]、Th1/Th2细胞因子[白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)、白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)、γ干扰素(Interferon-γ,INF-γ)]改善情况,统计两组治疗总有效率、妊娠结局及不良反应发生率。结果 两组治疗后妊娠期阴道流血、小腹坠胀或疼痛、腰酸痛、膝关节酸软积分,IL-2、INF-γ水平均低于治疗前(P<0.05),且观察组治疗后以上中医证候积分和IL-2、INF-γ水平均低于对照组(P<0.05);两组治疗后IL-4水平均高于治疗前(P<0.05),且观察组治疗后IL-4水平高于对照组(P<0.05);观察组总有效率为(91.7%,55/60),高于对照组(75.0%,45/60)(P<0.05);观察组足月分娩率为(85.0%,51/60),高于对照组(56.7%,34/60)(P<0.05);观察组不良反应发生率为3.3%,低于对照组(25.0%)(P<0.05)。结论 补肾固胎方联合黄体酮注射液能够有效调节肾虚型早期先兆流产患者妊娠激素水平和Th1/Th2细胞因子水平,纠正免疫功能紊乱,降低患者流产率,提高足月妊娠率,改善妊娠结局。

儿童难治性肺炎支原体肺炎肺泡灌洗液病菌量与Th1/Th2细胞免疫应答的相关性研究

目的探究儿童难治性肺炎支原体肺炎肺泡灌洗液病菌量与Th1/Th2细胞免疫应答的相关性。方法随机选择郑州大学附属儿童医院诊治的96例难治性肺炎支原体肺炎患儿为研究对象,根据肺泡灌洗液中肺炎支原体DNA含量进行分组,即>106/m L为高菌量组(n=35),103~106/m L为中菌量组(n=30),<103/m L为低菌量组(n=31)。检测三组患儿肺泡灌洗液的炎性因子水平,对比三组的炎性因子水平、肺部影像学与实验室检查结果、临床表现和基础情况,分析肺泡灌洗液中肺炎支原体DNA含量与炎性因子的相关性。结果在体温高于39℃、热程高于10天患儿占比以及总发热时间、使用抗生素后热程、住院时间、乳酸脱氢酶、血小板计数、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数上,三组比较差异有统计学意义(P<0.05),白细胞计数比较差异无统计学意义(P>0.05);双侧或大量胸腔积液、肺不张或者大片肺实变发生率、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),三组之间的双侧肺病变、左侧肺病变、右侧肺病变发生率以及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、干扰素(interferon-γ,INF-γ)、IL-8水平比较差异无统计学意义(P>0.05);肺泡灌洗液中IL-4与肺炎支原体DNA水平呈正相关(P<0.05),肺泡灌洗液中TNF-α、INF-γ、IL-8与肺炎支原体DNA水平无相关性(P>0.05)。结论儿童难治性肺炎支原体肺炎肺泡灌洗液病菌量与Th1/Th2细胞免疫应答具有相关性,肺炎支原体DNA菌量越高,肺内外损害和肺部炎症越严重,Th1/Th2免疫应答失衡。

EZH2抑制剂对恶性淋巴瘤细胞放疗抵抗、Th细胞分化及PD1/PD-L1表达的作用机制

目的探究Zeste基因增强子同源物(EZH)2抑制剂对恶性淋巴瘤细胞放疗抵抗、Th细胞分化及程序性死亡(PD)1/PD1配体(PD-L1)表达的作用机制。方法取对数生长恶性淋巴瘤放疗抵抗细胞株将其分为恶性淋巴瘤(A)组、多柔比星(B)组、EZH2抑制剂(C)组、EZH2抑制剂联合PD1/PD-L1抑制剂(D)组,酶联免疫吸附试验(ELISA)及流式细胞仪检测Th细胞分化相关因子,Western印迹检测PD1/PD-L1蛋白表达,Hoechst33258染色法、噻唑蓝(MTT)法及小室法检测恶性淋巴瘤细胞活性。结果与A组相比,B、C、D组细胞凋亡率、干扰素(INF)-γ水平明显升高,细胞增殖率、侵袭数量、白细胞介素(IL)-4水平、PD1、PD-L1蛋白表达明显降低(P<0.05),且C组比B组变化更明显,D组比C组变化更明显(P<0.05)。结论EZH2抑制剂可显著抑制恶性淋巴瘤细胞放疗抵抗,有效调控Th细胞分化,并抑制PD1/PD-L1蛋白表达。

动态监测病毒性肺炎患儿Th1、Th2细胞因子及铁蛋白水平的临床意义

目的 探究动态监测病毒性肺炎患儿辅助性T细胞1 (Th1)、Th2细胞因子及铁蛋白(SF)水平的临床意义。方法 选取西安交通大学附属红会医院2023年1月至2024年2月114例病毒性肺炎患儿为研究组,另选80名同期来院体检的健康儿童为对照组。所有患儿均接受临床治疗,比较研究组与对照组及研究组治疗前后血清Th1、Th2细胞因子、Th1/Th2及SF水平。根据患儿入院病情严重程度将研究组患儿分为轻症组(n=68)、重症组(n=46),比较2组血清Th1、Th2细胞因子、Th1/Th2及SF水平。采用Spearman相关系数分析血清Th1、Th2细胞因子及SF水平与病毒性肺炎患儿病情的相关性。结果 研究组治疗前血清白细胞介素2 (IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)、Th1/Th2水平显著低于对照组,IL-4、IL-10、SF水平显著高于对照组,差异均有统计学意义(均P <0.05);治疗后,研究组血清IL-2、IFN-γ、Th1/Th2水平均显著升高,IL-4、IL-10、SF水平均显著降低(均P <0.05);轻症组血清IL-2、IFN-γ、Th1/Th2水平显著高于重症组,IL-4、IL-10、SF水平显著低于重症组,差异均有统计学意义(均P <0.05);Spearman相关性分析显示,病毒性肺炎患儿病情与血清IL-2、IFN-γ、Th1/Th2呈显著负相关(P <0.05),与IL-4、IL-10、SF水平呈显著正相关(P <0.05)。结论病毒性肺炎患儿Th1细胞因子水平下调,Th2细胞因子水平上调,Th1/Th2失衡,血清SF水平升高,且Th1、Th2细胞因子及SF水平与病情呈显著相关性,Th1、Th2细胞因子及血清SF水平对治疗情况具有一定的评估价值。

T淋巴细胞亚群、Th1/Th2细胞和血清SAA变化对急诊儿童急性重症肺炎心肌损伤的预测

目的分析T淋巴细胞亚群、辅助性T细胞1/辅助性T细胞2(Th1/Th2)和血清淀粉样蛋白A(SAA)对急诊儿童急性重症肺炎心肌损伤的预测价值。方法选取儿童急性重症肺炎心肌损伤60例为观察组,轻症肺炎50例为对照组,同期体检健康儿童58例为健康组。检测心肌损伤指标、免疫球蛋白(Ig)、淋巴细胞亚群(CD^(+))、动脉血气及乳酸清除率。分析急性重症肺炎心肌损伤的影响因素,以及各指标对急性重症肺炎患儿心肌损伤的预测价值。结果观察组和对照组CD3^(+)、CD4^(+)、Th1/Th2、IgA、IgM、IgG、氧分压(PaO 2)低于健康组,肌钙蛋白I、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、SAA、CD8^(+)、CD19^(+)、CD23^(+)、CD40^(+)、乳酸清除率高于健康组,且观察组变化更为显著(P<0.05)。SAA、CD8^(+)、CD3^(+)、CD4^(+)、Th1/Th2是急性重症肺炎心肌损伤的影响因素(P<0.05)。T淋巴细胞亚群、Th1/Th2细胞和SAA联合预测急性重症肺炎心肌损伤的曲线下面积高于各指标单独应用(P<0.05)。结论T淋巴细胞亚群、Th1/Th2细胞和血清SAA对急诊儿童急性重症肺炎心肌损伤具有较高的预测价值。

维生素D辅助辅舒酮治疗小儿支气管哮喘对峰值呼气流速变异率、Th1/Th2及细胞因子水平的影响

目的:探讨维生素D辅助辅舒酮治疗小儿支气管哮喘对峰值呼气流速(PEF)变异率、Th1/Th2平衡及其细胞因子水平的影响。方法:选取晋江市医院收治的60例支气管哮喘患儿为研究对象,随机分为观察组与对照组各30例。对照组患儿予以辅舒酮吸入治疗,观察组患儿予以维生素D联合辅舒酮吸入治疗。两组均连续治疗3个月。于治疗前与治疗后进行临床疗效、PEF变异率比较、Th1/Th2平衡、细胞因子比较,并对两组患儿的不良反应情况进行统计。结果:与对照组比较,观察组治疗后总有效率更高,差异有统计学意义(P<0.05),PEF变异率、细胞因子超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6,IL-8水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),Th1/Th2平衡更高,差异有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在小儿支气管哮喘治疗中,维生素D辅助辅舒酮治疗能够降低患儿的PEF变异率、细胞因子水平,提高Th1/Th2、临床疗效,且不良反应不会增加。

原发性肝癌患者TACE术后Th1/Th2细胞因子、VEGFR水平变化及其临床意义

目的探究原发性肝癌患者经肝动脉插管化疗栓塞术(TACE)治疗后Th1/Th2细胞因子、血管内皮生长因子受体(VEGFR)水平变化及其临床意义。方法选取接受TACE术治疗的原发性肝癌患者92例,根据治疗效果将完全缓解、部分缓解者纳入有效组(n=50),将疾病进展、疾病稳定者纳入无效组(n=42)。比较2组患者的一般临床资料及术前、术后血清Th1/Th2细胞因子水平[白介素-2(IL-2)、白介素-4(IL-4)、白介素-18(IL-18)]、VEGFR水平变化,采用Logistic回归模型进行分析上述指标与疗效的相关性,并通过ROC曲线预测分析上述指标术后水平对疗效的预测效能,比较各指标术后不同水平患者的无进展生存期差异。结果术后2组患者的IL-2、IL-4和VEGFR均较术前下降,且有效组显著低于无效组(P<0.05);术后2组患者的IL-18均较术前显著上升,且有效组显著高于无效组(P<0.05)。IL-2、IL-4、IL-18和VEGFR均与临床疗效具有显著相关性(P<0.05),ROC曲线显示,IL-2、IL-18、VEGFR的AUC值均有评估价值(P<0.05),而IL-4的ROC曲线AUC值评估价值不高(P>0.05)。IL-2、VEGFR高水平患者平均无进展生存期显著短于IL-2、VEGFR低水平患者(P<0.05),IL-18低水平患者无进展生存期显著短于IL-18高水平患者(P<0.05)。结论原发性肝癌患者在TACE术后Th1/Th2细胞因子免疫平衡得以纠正,VEGFR水平表现出下降,其中血清IL-2与VEGFR水平均与疗效及生存期密切相关,可在临床疗效及预后评估中提供参考。

非小细胞肺癌患者Th17细胞、血清IL-17、MMP2的表达在临床病理分期及淋巴结转移的诊断价值

目的:探讨Th17细胞、血清白细胞介素-17 (IL-17)、基质金属蛋白酶(MMP2)在非小细胞肺癌(NSCLC)临床分期及淋巴结转移中的临床应用价值。方法:选取2022年11月~2023年10月入住于陕西省人民医院的42例NSCLC患者(NSCLC组)及40例肺良性病变患者(对照组),采用流式细胞术检测各组外周血Th17细胞水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中IL-17和MMP2水平,评估这三个检测指标在NSCLC临床分期和淋巴结转移中的应用价值及三者联合检测的诊断效能。结果:NSCLC组中,与I~II期患者对比,III~IV期患者外周血Th17细胞水平明显增高,血清IL-17和MMP2水平也明显较高,差异均有统计学意义(均p < 0.05);NSCLC组中,淋巴结转移者Th细胞水平、血清IL-17和MMP-2水平与未转移者对比,明显较高,差异均有统计学意义(均p < 0.05);Th17,IL-17和MMP2三项联合检测准确度、特异度、灵敏度分别为95.71%,93.84%和97.22%,与单项检测对比,均明显较高,差异均有统计学意义(均p < 0.05)。结论:Th17细胞,IL-17和MMP2在NSCLC与NSCLC临床分期及淋巴结转移中有一定关联,三者联合检测,有助于NSCLC的鉴别诊断。

银翘散合麻杏石甘汤加减方对风热闭肺证小儿肺炎支原体肺炎Th1/Th2、Th17/Treg细胞因子影响

目的 探究银翘散合麻杏石甘汤加减方对风热闭肺证小儿肺炎支原体肺炎(MPP)的临床疗效及Th1/Th2、Th17/Treg细胞因子影响。方法 选择2021年10月至2023年6月在南京中医药大学常熟附属医院住院治疗的MMP风热闭肺型患儿为研究对象,按随机数字表法分为中药组(阿奇霉素干混悬剂+银翘散合麻杏石甘汤加减方)和对照组(阿奇霉素干混悬剂)。治疗前和治疗后7 d,比较中药组和对照组的临床疗效、中医证候积分(发热积分、咳嗽积分、咯痰积分和气喘积分)、肺功能[用力肺活量(FVC)、第1秒最大呼气量(FEV1)、峰值呼气流速(PEF)]、Th1/Th2细胞因子[γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)]和Th17/Treg细胞因子[白细胞介素-17(IL-17)和白细胞介素-10 (IL-10)]。观察并记录治疗过程中不良反应发生情况。结果 研究共纳入106例MMP患者,每组各53例。治疗前,中药组和对照组在中医证候积分、肺功能、血清Th1/Th2细胞因子和血清Th17/Treg细胞因子方面差异无统计学意义(P> 0.05)。治疗后,中药组临床疗效显著优于对照组(P <0.05);中医组发热积分、气喘积分、咳嗽积分、咳痰积分、血清INF-γ水平和血清IL-17水平显著低于对照组(P <0.05),而FVC、FEV1、PEF、IL-4和IL-10水平显著高于对照组(P <0.05)。中药组不良反应发生率显著低于对照组(P <0.05)。结论 银翘散合麻杏石甘汤加减方治疗MMP患儿可调节Th1/Th2、Th17/Treg细胞因子水平,改善肺功能,提高疗效与安全性。

布鲁氏菌病患者外周血中Siglec-7^(+)单核细胞与Th1/Th2细胞的相关性研究

目的:探讨布鲁氏菌病患者外周血中单核细胞的Siglec-7表达以及Siglec-7^(+)单核细胞与Th1/Th2细胞的相关性,分析Siglec-7分子在布鲁氏菌病患者中的临床意义。方法:纳入初诊为布鲁氏菌感染的患者50例(BI组),健康对照46例(正常对照组)。流式细胞术检测外周血单核细胞Siglec-7表达,分析Siglec-7^(+)单核细胞与布鲁氏菌病患者临床指标的相关性;流式细胞术检测Th1/Th2细胞水平,CBA法检测外周血清IFN-γ和IL-4含量,分析Siglec-7^(+)单核细胞与Th1/Th2水平、IFN-γ/IL-4含量的相关性。结果:BI组Siglec-7^(+)单核细胞水平较对照组明显升高(P<0.001);肝功能和肺X线异常的布鲁氏菌病患者体内Siglec-7^(+)单核细胞水平较两者正常的患者升高(P<0.001,P<0.05);Th2细胞水平和IL-4含量较对照组升高(P<0.05),而Th1细胞水平、IFN-γ含量与Th1/Th2、IFN-γ/IL-4较对照组明显降低(P<0.001);Siglec-7^(+)单核细胞水平与Th1细胞水平、IFN-γ含量呈负相关(r=-0.651,r=-0.407);与Th2细胞水平、IL-4含量呈正相关(r=0.706,r=0.530)。结论:在布鲁氏菌感染过程中,Siglec-7^(+)单核细胞增多并可能参与Th1/Th2细胞失衡。

痛泻安肠方对肠易激综合征小鼠短链脂肪酸代谢及Th1/Th2细胞免疫平衡的影响

目的观察痛泻安肠方对肝郁脾虚证腹泻型肠易激综合征(IBS-D)小鼠模型短链脂肪酸代谢及Th1/Th2细胞免疫平衡的影响。方法30只18~22 g的雄性C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、痛泻安肠方低剂量组、痛泻安肠方中剂量组、痛泻安肠方高剂量组,每组6只。采用束缚应激联合番泻叶灌胃复制IBS-D小鼠模型,造模成功后分别予相应浓度中药灌胃14 d,每日1次,通过靶向代谢组学检测小鼠粪便中短链脂肪酸含量的变化,并通过流式细胞术检测肠系膜淋巴结中CD3+CD4+INF-γ+T细胞(Th1细胞)、CD3+CD4+IL-4+T细胞(Th2细胞)的占比情况。结果与空白组相比,模型组小鼠粪便短链脂肪酸(SCFAs)相对含量显著升高(P<0.01),尤其是乙酸、丙酸及丁酸的含量均显著升高(P<0.01或P<0.05);不同剂量痛泻安肠方治疗后,粪便总SCFAs相对含量显著降低(P<0.01),乙酸、丙酸及丁酸均有不同程度降低,其中痛泻安肠方各剂量组均可显著降低乙酸和丁酸的含量,差异具有统计学意义(P<0.01),低剂量组及中剂量组可显著降低丙酸的含量,差异具有统计学意义(P<0.01)。造模后,肠易激综合征小鼠肠系膜淋巴结的Th2细胞占比明显降低,而Th1细胞占比及Th1/Th2细胞比率明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后,痛泻安肠方各剂量组Th2细胞占比均有升高,Th1细胞占比及Th1/Th2细胞比率降低。结论痛泻安肠方可以降低IBS-D小鼠粪便SCFAs的含量,调节小鼠Th1/Th2细胞免疫紊乱。

基于Th1、Th2细胞因子探讨清肠合剂改善术后腹腔粘连的机制

目的探讨清肠合剂改善大鼠术后腹腔粘连的效果及其可能的作用机制。方法75只SD大鼠随机分为5组:空白组、假手术组、模型组、清肠合剂组及透明质酸钠组。除空白组和假手术组外,其余3组采用盲肠刮擦法建立腹腔粘连大鼠模型;透明质酸钠组用2 mL透明质酸钠凝胶均匀涂抹受损的腹壁及盲肠后关腹。清肠合剂组造模成功后每日予2 mL清肠合剂(14.58 g/kg)灌胃1次,其余4组予等体积生理盐水灌胃。每组分别于术后第3、7、14天处死5只大鼠,采用Nair’s评分评估腹腔粘连情况,并收集术后7 d粘连组织或正常腹膜组织,应用荧光定量PCR法检测白细胞介素(IL)-4、信号转导和转录激活因子6(STAT-6)及干扰素-γ(IFN-γ)的mRNA表达水平;Western blot检测IL-4、IL-10、STAT-6及IFN-γ的蛋白表达情况;苏木精-伊红染色后光镜下观察各组粘连组织病理变化,评估炎症和纤维形成情况。结果与空白组和假手术组相比,模型组粘连组织中IL-4、STAT-6的mRNA和蛋白表达水平以及IL-10的蛋白表达水平下降,IFN-γ的mRNA和蛋白表达水平、炎症评分及纤维评分均升高(P<0.05)。与模型组相比,清肠合剂组和透明质酸钠组的IL-4和STAT-6的mRNA和蛋白表达水平以及IL-10蛋白表达水平均升高;Nair’s评分、炎症评分、纤维评分以及IFN-γ的mRNA和蛋白表达水平均降低(P<0.05)。结论清肠合剂可以抑制术后腹腔粘连的形成,其机制可能与调控辅助性T细胞1、辅助性T细胞2相关的细胞因子,降低炎症反应水平有关。

甲炎康泰对自身免疫性甲状腺炎模型大鼠Th1/Th2细胞平衡偏移的影响

目的:探讨甲炎康泰对自身免疫性甲状腺炎(AIT)大鼠Th1/Th2细胞平衡偏移作用机制。方法:采用Lewis大鼠建立AIT大鼠40只,6周后随机分为模型组、甲炎康泰低、中、高剂量组,每组10只,每天分别按去离子水、0.708、1.417、2.834 g?kg-1剂量连续灌胃8周。检测血清Tg Ab、TPOAb;Th1、Th2细胞分布比例及Th1/Th2比率;检测血浆中IL-4、IL-5、IFN-γ、TNF-α和IL-1α含量;HE染色观察甲状腺组织的病理;免疫组织化学检测甲状腺IFN-γ、IL-4蛋白表达。结果:甲炎康泰高剂量组能够下降AIT大鼠TPOAb、TGAb水平,降低甲状腺炎发生率、Th1与Th2细胞分布比例以及Th1/Th2比率;降低血浆IFN-γ、TNF-α、IL-1α、IL-4、IL-5含量;降低甲状腺IFN-γ、IL-4蛋白表达。结论:甲炎康泰具有降低AIT大鼠甲状腺自身抗体的作用,可能与通过调节细胞因子水平和Th1/Th2细胞平衡偏移有关。

CBA技术检测ITP患者Th1/Th2细胞因子平衡偏移的临床意义

目的:探讨CBA技术检测原发性免疫性血小板减少性紫癜(ITP)患者治疗前后外周血Th1/Th2细胞因子水平变化及其临床意义。方法:98例ITP患者分为激素治疗有效组和无效组;选择健康体检正常者40例为对照组,用流式细胞术微珠阵列(CBA)分别检测各组治疗前和治疗后4周、3个月、6个月外周血Th1细胞因子(IFN-γ,TNFα、IL-2)和Th2细胞因子(IL-4、IL-5、IL-10)水平,并分析指标间的变化关系。结果:治疗前,初治ITP组外周血Th1细胞因子明显高于正常对照组,Th2细胞因子明显低于正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),IL-2/IL-4比值明显高于正常对照组;治疗后,激素治疗有效组Th1细胞水平均较治疗前明显下降,IL-2/IL-4比值也明显下降,与治疗前相比,治疗6个月后IL-2/IL-4比值为(1.05±0.43 vs 2.53±0.72),其差异均有统计学意义(P<0.05);而激素治疗无效组则无明显变化。结论:初治ITP患者外周血Th1/Th2细胞存在平衡偏移现象,ITP是一种Th1优势疾病,治疗前后IL-2/IL-4的比值变化与预后相关,对指导ITP个体化治疗有一定临床意义。

未成熟树突状细胞诱导Th1／Th2偏移抑制大鼠高危角膜移植排斥反应的实验研究

目的研究供体来源的未成熟树突状细胞(immature dendritic cell,imDC)对高危角膜移植免疫排斥反应的抑制作用及其机制。方法以45只SD大鼠为受体,23只Wist-ar大鼠为供体,碱烧伤建立同种异体高危角膜移植模型。受体SD大鼠随机分为对照组、imDC组、成熟树突状细胞(mature dendritic cell,mDC)组,每组15只;对照组:术前7d经尾静脉注射PBS液0.1mL;imDC组:于术前7d经尾静脉注射体外培养的供体骨髓来源的imDC106个;mDC组:于术前7d经尾静脉注射体外培养的供体骨髓来源的mDC106个。术后每天裂隙灯观察各组角膜植片存活情况并评分;于术后14d每组随机处死5只大鼠,RT-PCR检测角膜植片Th1/Th2细胞因子白细胞介素(interleukin,IL)-12、IL-15、IL-18、IL-4、IL-10mRNA表达水平。结果 imDC组角膜植片存活时间为(19.8±2.1)d,较对照组的(9.2±1.9)d和mDC组的(7.9±1.4)d显著延长,差异均有统计学意义(均为P<0.01)。RT-PCR结果显示,imDC组Th1型细胞因子IL-12、IL-15、IL-18mRNA表达较对照组和mDC组明显降低;Th2型细胞因子IL-4、IL-10mRNA表达明显升高。结论体外培养的供体来源的imDC可以抑制大鼠同种异体高危角膜移植免疫排斥反应,而调节受体Th1/Th2细胞因子比例是其降低大鼠角膜移植术后免疫排斥反应的机制之一。

细胞信号转导抑制剂介导Th1/Th2免疫偏移对血吸虫虫卵肉芽肿的影响

目的 观察酪氨酸蛋白激酶(TPK)、蛋白激酶C(PKC)和磷酯酰肌醇-3-激酶(P13-K)特异性抑制剂(分别为tyrphostin-25、D-sphingosine和wortmannin)对日本血吸虫感染小鼠虫卵肉芽肿病变的影响,并探讨其作用机制。 方法 于小鼠感染日本血吸虫后第35天起,经尾静脉分别注射3种信号转导分子抑制剂,连续5 d。在小鼠感染后6和8wk,观察小鼠肝肉芽肿病变,并用ELISA夹心法和硝酸还原酶法分别测定小鼠血清IFN-γ、IL-4和一氧化氮(NO)水平。结果 感染小鼠应用TPK和PKC抑制剂后均可显著抑制肝肉芽肿病变,PKC抑制剂可使肉芽肿减少率达56.2％～63.4％(P<0.01)。PKC抑制剂主要抑制Th2细胞因子IL-4的表达,其抑制率为34.1％和65.6％(P<0.01),而对NO水平的检测结果进一步证明了PKC抑制剂对IL-4表达的抑制作用。 结论 在日本血吸虫感染早期应用PKC抑制剂干预T淋巴细胞信号转导可显著抑制小鼠肝肉芽肿病变,其机制可能是由于抑制了Th2优势应答并介导Th2向Th1免疫反应偏移。

木犀草素对重症肌无力大鼠Th1/Th2细胞平衡和AMPK的调控作用

目的探讨木犀草素(luteolin,LUT)对重症肌无力(myasthenia gravis,MG)大鼠的治疗作用及机制。方法将雌性Lewis大鼠分为5组,即C组、MG组、低剂量LUT组(L-LUT)、中剂量LUT组(M-LUT)、高剂量LUT组(H-LUT),每组12只,C组大鼠为正常对照大鼠,其他组为皮下注射Rα97-116诱导的MG模型大鼠,C组和MG组大鼠灌胃1 mL的玉米油。L-LUT组、M-LUT组和H-LUT组大鼠分别灌胃1 mL的10、20和40 mg·kg^(-1)的LUT溶液,给药周期为4周。采用Lennon分级法进行临床症状评分,使用肌电诱发电位仪检测低频重复神经电刺激(repetitive nerve stimulation,RNS)衰减率。通过HE染色观察骨骼肌形态;通过ELISA法检测血清AChR抗体、IFN-γ和IL-4水平;通过可见分光光度法检测骨骼肌SOD,微量法检测GSH-Px和MDA;通过qRT-PCR检测骨骼肌中PGC-1α、NRF1和TFAM的mRNA水平;通过Western blot检测骨骼肌中AMPKα和p-AMPKα蛋白表达水平。结果与C组比较,MG组的Lennon评分和RNS衰减率升高,AChR-Ab和IFN-γ水平升高,骨骼肌出现明显损伤,SOD和GSH-Px水平降低,MDA水平升高,p-AMPKα蛋白表达水平以及PGC-1α、NRF1和TFAM mRNA水平降低(P<0.05)。与MG组比较,L-LUT组、M-LUT组和H-LUT组的Lennon评分和RNS衰减率降低,AChR-Ab和IFN-γ水平降低,骨骼肌损伤减轻,SOD和GSH-Px水平升高,MDA水平降低,p-AMPKα蛋白表达水平以及PGC-1α、NRF1和TFAM mRNA水平升高(P<0.05)。结论LUT治疗MG大鼠的机制可能与纠正Th1/Th2细胞平衡和激活AMPK有关。