Th1型和Th2型细胞因子对人中性粒细胞吞噬功能的影响

目的探讨Th1型和Th2型细胞因子对人中性粒细胞(Polymorphonuclear neutrophil,PMN)吞噬功能的影响。方法将大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)用异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocyanate,FITC)进行标记,PMN与E.coli-FITC作用,流式细胞术检测细胞吞噬率。将Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ和相关因子IL-12以及Th2型细胞因子IL-4和共同细胞因子GM-CSF预处理PMN,流式细胞术检测吞噬率,同时计算细胞因子处理组吞噬变化率。结果PMN的吞噬率随时间增加而增加(P<0.05)。IL-2、IFN-γ和IL-12预处理PMN,吞噬率和吞噬增加率随浓度增加不断增高;随IL-4浓度增加,PMN吞噬率逐渐降低(P<0.05),而5 min吞噬百分率仅在较高浓度时降低;不同浓度GM-CSF用于PMN,吞噬率在5 min和15 min均与对照组比较无差异。Th1型细胞因子上调PMN吞噬功能,而Th2型细胞因子则下调PMN吞噬功能。结论Th1型和Th2型细胞因子可以调节PMN吞噬功能,PMN可能通过Th1/Th2细胞参与感染性疾病免疫应答。

黄连素介导NF-κB/LCN2信号通路改善COPD诱导的Th17/Treg细胞失衡

目的通过构建慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠模型,探讨黄连素是否通过调节NF-κB/LCN2信号通路改善COPD诱导的Th17/Treg细胞失衡。方法将50只Wistar大鼠随机分为对照组(Control组)、慢性阻塞性肺病组(COPD组)、黄连素组(Berberine组)、黄连素+过表达对照组(Berberine+ov-NC组)和黄连素+过表达LCN2组(Berberine+ov-LCN2组),每组10只。Western blotting检测肺组织p-NF-κB、LCN2、IL-17和IL-10蛋白表达;HE染色观察大鼠肺组织病理形态变化;流式细胞术检测大鼠外周血Th17/Treg细胞比例;ELISA检测大鼠血清中IL-17和IL-10水平。结果对照组大鼠肺组织结构完整;与Control组相比,COPD组大鼠肺组织结构损伤,肺组织中p-NF-κB和LCN2蛋白表达显著升高,外周血中Th17细胞比例显著升高,Treg细胞比例显著降低,血清中IL-17水平和肺组织中IL-17蛋白表达显著升高,血清中IL-10水平和肺组织中IL-10蛋白表达显著降低(P<0.05);与COPD组相比,Berberine组和Berberine+ov-NC组大鼠肺组织损伤改善,肺组织中p-NF-κB和LCN2蛋白表达显著降低,外周血中Th17细胞比例显著降低,Treg细胞比例显著升高,血清中IL-17水平和肺组织中IL-17蛋白表达显著降低,血清中IL-10水平和肺组织中IL-10蛋白表达显著升高(P<0.05);与Berberine组和Berberine+ov-NC组相比,Berberine+ov-LCN2组大鼠肺组织损伤加重,肺组织中LCN2蛋白表达显著升高,外周血中Th17细胞比例显著升高,Treg细胞比例显著降低,血清中IL-17水平和肺组织中IL-17蛋白表达显著升高,血清中IL-10水平和肺组织中IL-10蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论黄连素治疗通过下调LCN2表达改善COPD大鼠肺损伤以及Th17/Treg细胞失衡,其机制可能与抑制NF-κB/LCN2信号通路有关。

Th1/Th2细胞失衡模式在分泌性中耳炎发病机制中的作用

目的:探讨Th1/Th2细胞失衡模式在分泌性中耳炎(SOM)发病机制中的作用。方法:选取SOM患者90例作为观察组,观察组根据病程长短分为急性组和慢性组;另外选取同期进行健康体检的志愿者90例作为对照组。比较2组患者外周血中Th1型细胞因子干扰素γ(IFN-γ)、Th2型细胞因子白细胞介素4(IL-4)及IFN-γ/IL-4的水平,比较急、慢性SOM患者外周血中IFN-γ、IL-4、IFN-γ/IL-4的水平,比较观察组患者的中耳积液与其外周血中IFN-γ、IL-4、IFN-γ/IL-4的水平。结果:观察组患者外周血中IFN-γ、IL-4、IFN-γ/IL-4的水平均高于对照组(P<0.05);慢性组患者外周血中IFN-γ、IL-4、IFN-γ/IL-4的水平均高于急性组(P<0.05);观察组患者外周血的IL-4、IFN-γ/IL-4水平与其中耳积液的IL-4、IFN-γ/IL-4水平相比差异均无统计学意义(P>0.05);但其外周血的IFN-γ水平低于其中耳积液的IFN-γ水平(P<0.05)。结论:SOM患者外周血和中耳积液中IFN-γ、IL-4水平与疾病的发生发展有一定的关系,Th1/Th2的失衡可能是SOM的危险因素。

补肾固胎方联合黄体酮注射液治疗肾虚型早期先兆流产疗效及对妊娠激素水平和Th1/Th2细胞因子的影响

目的 观察补肾固胎方联合黄体酮注射液治疗肾虚型早期先兆流产疗效及对妊娠激素水平和Th1/Th2细胞因子的影响。方法 采用随机数字表法将符合入选标准的120例肾虚型早期先兆流产患者分为观察组和对照组。对照组予黄体酮注射液治疗,观察组同联合补肾固胎方治疗。连续治疗2周后,比较两组中医证候积分(妊娠期阴道流血、小腹坠胀或疼痛、腰酸痛、膝关节酸软)、妊娠激素水平[雌二醇(Estradiol, E_(2))、人绒毛膜促性腺激素(Human chorionic gonadotropin, β-HCG)、孕酮(Progesterone, P)]、Th1/Th2细胞因子[白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)、白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)、γ干扰素(Interferon-γ,INF-γ)]改善情况,统计两组治疗总有效率、妊娠结局及不良反应发生率。结果 两组治疗后妊娠期阴道流血、小腹坠胀或疼痛、腰酸痛、膝关节酸软积分,IL-2、INF-γ水平均低于治疗前(P<0.05),且观察组治疗后以上中医证候积分和IL-2、INF-γ水平均低于对照组(P<0.05);两组治疗后IL-4水平均高于治疗前(P<0.05),且观察组治疗后IL-4水平高于对照组(P<0.05);观察组总有效率为(91.7%,55/60),高于对照组(75.0%,45/60)(P<0.05);观察组足月分娩率为(85.0%,51/60),高于对照组(56.7%,34/60)(P<0.05);观察组不良反应发生率为3.3%,低于对照组(25.0%)(P<0.05)。结论 补肾固胎方联合黄体酮注射液能够有效调节肾虚型早期先兆流产患者妊娠激素水平和Th1/Th2细胞因子水平,纠正免疫功能紊乱,降低患者流产率,提高足月妊娠率,改善妊娠结局。

儿童难治性肺炎支原体肺炎肺泡灌洗液病菌量与Th1/Th2细胞免疫应答的相关性研究

目的探究儿童难治性肺炎支原体肺炎肺泡灌洗液病菌量与Th1/Th2细胞免疫应答的相关性。方法随机选择郑州大学附属儿童医院诊治的96例难治性肺炎支原体肺炎患儿为研究对象,根据肺泡灌洗液中肺炎支原体DNA含量进行分组,即>106/m L为高菌量组(n=35),103~106/m L为中菌量组(n=30),<103/m L为低菌量组(n=31)。检测三组患儿肺泡灌洗液的炎性因子水平,对比三组的炎性因子水平、肺部影像学与实验室检查结果、临床表现和基础情况,分析肺泡灌洗液中肺炎支原体DNA含量与炎性因子的相关性。结果在体温高于39℃、热程高于10天患儿占比以及总发热时间、使用抗生素后热程、住院时间、乳酸脱氢酶、血小板计数、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数上,三组比较差异有统计学意义(P<0.05),白细胞计数比较差异无统计学意义(P>0.05);双侧或大量胸腔积液、肺不张或者大片肺实变发生率、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),三组之间的双侧肺病变、左侧肺病变、右侧肺病变发生率以及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、干扰素(interferon-γ,INF-γ)、IL-8水平比较差异无统计学意义(P>0.05);肺泡灌洗液中IL-4与肺炎支原体DNA水平呈正相关(P<0.05),肺泡灌洗液中TNF-α、INF-γ、IL-8与肺炎支原体DNA水平无相关性(P>0.05)。结论儿童难治性肺炎支原体肺炎肺泡灌洗液病菌量与Th1/Th2细胞免疫应答具有相关性,肺炎支原体DNA菌量越高,肺内外损害和肺部炎症越严重,Th1/Th2免疫应答失衡。

Th1/Th2漂移与新生儿呼吸窘迫综合征疾病严重程度的关系

目的探究辅助性T细胞1/辅助性T细胞2(Th1/Th2)漂移与新生儿呼吸窘迫综合征(NRDS)疾病严重程度关系。方法选取2018年1月至2021年3月收治的117例NRDS患儿,分为轻度组62例与重度组55例。比较两组治疗前Th1细胞及Th2细胞表达率、Th1/Th2值、病情危重情况、呼吸功能参数[动脉氧分压(PaO_(2))、二氧化碳分压(PaCO_(2))、氧合指数(OI)、动脉-肺泡氧分压比例(PaO_(2)/PAO_(2))];采用Pearson相关分析法评价Th1/Th2值与NCIS得分、呼吸功能参数相关性。根据患儿接受规范诊治后预后情况分为预后良好组、预后不良组,观察预后良好组、预后不良组治疗不同时间点Th1/Th2值变化;绘制受试者工作特征(ROC)曲线评价Th1/Th2值对患儿预后预测价值。结果(1)重度组治疗前外周血Th1、Th1/Th2值均较轻度组升高(P<0.05);(2)重度组NCIS得分低于轻度组,呼吸功能参数中PaO_(2)、PaO_(2)/PAO_(2)较轻度组下降,PaCO_(2)、OI较轻度组升高(P<0.05);(3)Pearson相关性分析显示,Th1/Th2值与NCIS得分、PaO_(2)均呈负相关(r=-0.312,-0.404,P<0.05),与PaCO_(2)、OI均呈正相关(r=0.228,0.276,P<0.05),与PaO_(2)/PAO_(2)无明显相关性(P>0.05);(4)117例患儿中25例出现预后不良,且重度组预后不良率高于轻度组(P<0.05);(5)预后良好组治疗前和治疗后1、3 d外周血Th1/Th2值均低于预后不良组,但预后不良组末次检测时外周血Th1/Th2值低于预后良好组;(6)治疗前Th1/Th2值预测患儿预后不良的ROC曲线下面积(AUC)为0.835。结论Th1/Th2漂移与NRDS患儿病情严重程度、呼吸功能具有相关性,且对患儿预后有一定预测价值。

EZH2抑制剂对恶性淋巴瘤细胞放疗抵抗、Th细胞分化及PD1/PD-L1表达的作用机制

目的探究Zeste基因增强子同源物(EZH)2抑制剂对恶性淋巴瘤细胞放疗抵抗、Th细胞分化及程序性死亡(PD)1/PD1配体(PD-L1)表达的作用机制。方法取对数生长恶性淋巴瘤放疗抵抗细胞株将其分为恶性淋巴瘤(A)组、多柔比星(B)组、EZH2抑制剂(C)组、EZH2抑制剂联合PD1/PD-L1抑制剂(D)组,酶联免疫吸附试验(ELISA)及流式细胞仪检测Th细胞分化相关因子,Western印迹检测PD1/PD-L1蛋白表达,Hoechst33258染色法、噻唑蓝(MTT)法及小室法检测恶性淋巴瘤细胞活性。结果与A组相比,B、C、D组细胞凋亡率、干扰素(INF)-γ水平明显升高,细胞增殖率、侵袭数量、白细胞介素(IL)-4水平、PD1、PD-L1蛋白表达明显降低(P<0.05),且C组比B组变化更明显,D组比C组变化更明显(P<0.05)。结论EZH2抑制剂可显著抑制恶性淋巴瘤细胞放疗抵抗,有效调控Th细胞分化,并抑制PD1/PD-L1蛋白表达。

动态监测病毒性肺炎患儿Th1、Th2细胞因子及铁蛋白水平的临床意义

目的 探究动态监测病毒性肺炎患儿辅助性T细胞1 (Th1)、Th2细胞因子及铁蛋白(SF)水平的临床意义。方法 选取西安交通大学附属红会医院2023年1月至2024年2月114例病毒性肺炎患儿为研究组,另选80名同期来院体检的健康儿童为对照组。所有患儿均接受临床治疗,比较研究组与对照组及研究组治疗前后血清Th1、Th2细胞因子、Th1/Th2及SF水平。根据患儿入院病情严重程度将研究组患儿分为轻症组(n=68)、重症组(n=46),比较2组血清Th1、Th2细胞因子、Th1/Th2及SF水平。采用Spearman相关系数分析血清Th1、Th2细胞因子及SF水平与病毒性肺炎患儿病情的相关性。结果 研究组治疗前血清白细胞介素2 (IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)、Th1/Th2水平显著低于对照组,IL-4、IL-10、SF水平显著高于对照组,差异均有统计学意义(均P <0.05);治疗后,研究组血清IL-2、IFN-γ、Th1/Th2水平均显著升高,IL-4、IL-10、SF水平均显著降低(均P <0.05);轻症组血清IL-2、IFN-γ、Th1/Th2水平显著高于重症组,IL-4、IL-10、SF水平显著低于重症组,差异均有统计学意义(均P <0.05);Spearman相关性分析显示,病毒性肺炎患儿病情与血清IL-2、IFN-γ、Th1/Th2呈显著负相关(P <0.05),与IL-4、IL-10、SF水平呈显著正相关(P <0.05)。结论病毒性肺炎患儿Th1细胞因子水平下调,Th2细胞因子水平上调,Th1/Th2失衡,血清SF水平升高,且Th1、Th2细胞因子及SF水平与病情呈显著相关性,Th1、Th2细胞因子及血清SF水平对治疗情况具有一定的评估价值。

T淋巴细胞亚群、Th1/Th2细胞和血清SAA变化对急诊儿童急性重症肺炎心肌损伤的预测

目的分析T淋巴细胞亚群、辅助性T细胞1/辅助性T细胞2(Th1/Th2)和血清淀粉样蛋白A(SAA)对急诊儿童急性重症肺炎心肌损伤的预测价值。方法选取儿童急性重症肺炎心肌损伤60例为观察组,轻症肺炎50例为对照组,同期体检健康儿童58例为健康组。检测心肌损伤指标、免疫球蛋白(Ig)、淋巴细胞亚群(CD^(+))、动脉血气及乳酸清除率。分析急性重症肺炎心肌损伤的影响因素,以及各指标对急性重症肺炎患儿心肌损伤的预测价值。结果观察组和对照组CD3^(+)、CD4^(+)、Th1/Th2、IgA、IgM、IgG、氧分压(PaO 2)低于健康组,肌钙蛋白I、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、SAA、CD8^(+)、CD19^(+)、CD23^(+)、CD40^(+)、乳酸清除率高于健康组,且观察组变化更为显著(P<0.05)。SAA、CD8^(+)、CD3^(+)、CD4^(+)、Th1/Th2是急性重症肺炎心肌损伤的影响因素(P<0.05)。T淋巴细胞亚群、Th1/Th2细胞和SAA联合预测急性重症肺炎心肌损伤的曲线下面积高于各指标单独应用(P<0.05)。结论T淋巴细胞亚群、Th1/Th2细胞和血清SAA对急诊儿童急性重症肺炎心肌损伤具有较高的预测价值。

黄芪多糖通过TGF-β1/Smads通路对哮喘大鼠Th1/Th2免疫失衡的调节作用

目的:探讨黄芪多糖通过转化生长因子(TGF)-β1/Smads信号通路对哮喘大鼠辅助性T细胞(Th)l/Th2免疫失衡的调节作用。方法:选择雄性SD大鼠40只,分为对照组、模型组、黄芪多糖低、中、高剂量组,各8只。建立慢性哮喘大鼠模型,对照组和模型组大鼠尾静脉注射等体积0.9%氯化钠溶液,川芎嗪低、中、高剂量腹腔注射川芎嗪,各组均连续治疗14 d。干预后检测各组大鼠支气管黏膜受损面积和平滑肌厚度,收集各组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF),测定白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)水平变化,苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织结构变化,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)对肺组织TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA和蛋白表达进行测定。结果:与对照组比较,模型组支气管黏膜受损面积、平滑肌厚度增加,与模型组比较,黄芪多糖各组均下降,且呈剂量依赖性(P<0.05)。与对照组比较,模型组BALF中IFN-γ水平降低,IL-4水平升高,与模型组比较,黄芪多糖各组BALF中IFN-γ水平均升高,IL-4水平均下降,且呈剂量依赖性(P<0.05)。模型组肺组织TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA和蛋白表达较对照组升高,黄芪多糖各组肺组织TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA和蛋白表达较模型组下降,且呈剂量依赖性(P<0.05)。结论:黄芪多糖通过抑制TGF-β1/Smads信号激活阻止哮喘大鼠气道炎症,调节Th1/Th2比值失衡,改善大鼠肺组织病理损伤。

维生素D辅助辅舒酮治疗小儿支气管哮喘对峰值呼气流速变异率、Th1/Th2及细胞因子水平的影响

目的:探讨维生素D辅助辅舒酮治疗小儿支气管哮喘对峰值呼气流速(PEF)变异率、Th1/Th2平衡及其细胞因子水平的影响。方法:选取晋江市医院收治的60例支气管哮喘患儿为研究对象,随机分为观察组与对照组各30例。对照组患儿予以辅舒酮吸入治疗,观察组患儿予以维生素D联合辅舒酮吸入治疗。两组均连续治疗3个月。于治疗前与治疗后进行临床疗效、PEF变异率比较、Th1/Th2平衡、细胞因子比较,并对两组患儿的不良反应情况进行统计。结果:与对照组比较,观察组治疗后总有效率更高,差异有统计学意义(P<0.05),PEF变异率、细胞因子超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6,IL-8水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),Th1/Th2平衡更高,差异有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在小儿支气管哮喘治疗中,维生素D辅助辅舒酮治疗能够降低患儿的PEF变异率、细胞因子水平,提高Th1/Th2、临床疗效,且不良反应不会增加。

原发性肝癌患者TACE术后Th1/Th2细胞因子、VEGFR水平变化及其临床意义

目的探究原发性肝癌患者经肝动脉插管化疗栓塞术(TACE)治疗后Th1/Th2细胞因子、血管内皮生长因子受体(VEGFR)水平变化及其临床意义。方法选取接受TACE术治疗的原发性肝癌患者92例,根据治疗效果将完全缓解、部分缓解者纳入有效组(n=50),将疾病进展、疾病稳定者纳入无效组(n=42)。比较2组患者的一般临床资料及术前、术后血清Th1/Th2细胞因子水平[白介素-2(IL-2)、白介素-4(IL-4)、白介素-18(IL-18)]、VEGFR水平变化,采用Logistic回归模型进行分析上述指标与疗效的相关性,并通过ROC曲线预测分析上述指标术后水平对疗效的预测效能,比较各指标术后不同水平患者的无进展生存期差异。结果术后2组患者的IL-2、IL-4和VEGFR均较术前下降,且有效组显著低于无效组(P<0.05);术后2组患者的IL-18均较术前显著上升,且有效组显著高于无效组(P<0.05)。IL-2、IL-4、IL-18和VEGFR均与临床疗效具有显著相关性(P<0.05),ROC曲线显示,IL-2、IL-18、VEGFR的AUC值均有评估价值(P<0.05),而IL-4的ROC曲线AUC值评估价值不高(P>0.05)。IL-2、VEGFR高水平患者平均无进展生存期显著短于IL-2、VEGFR低水平患者(P<0.05),IL-18低水平患者无进展生存期显著短于IL-18高水平患者(P<0.05)。结论原发性肝癌患者在TACE术后Th1/Th2细胞因子免疫平衡得以纠正,VEGFR水平表现出下降,其中血清IL-2与VEGFR水平均与疗效及生存期密切相关,可在临床疗效及预后评估中提供参考。

布鲁氏菌病患者外周血中Siglec-7^(+)单核细胞与Th1/Th2细胞的相关性研究

目的:探讨布鲁氏菌病患者外周血中单核细胞的Siglec-7表达以及Siglec-7^(+)单核细胞与Th1/Th2细胞的相关性,分析Siglec-7分子在布鲁氏菌病患者中的临床意义。方法:纳入初诊为布鲁氏菌感染的患者50例(BI组),健康对照46例(正常对照组)。流式细胞术检测外周血单核细胞Siglec-7表达,分析Siglec-7^(+)单核细胞与布鲁氏菌病患者临床指标的相关性;流式细胞术检测Th1/Th2细胞水平,CBA法检测外周血清IFN-γ和IL-4含量,分析Siglec-7^(+)单核细胞与Th1/Th2水平、IFN-γ/IL-4含量的相关性。结果:BI组Siglec-7^(+)单核细胞水平较对照组明显升高(P<0.001);肝功能和肺X线异常的布鲁氏菌病患者体内Siglec-7^(+)单核细胞水平较两者正常的患者升高(P<0.001,P<0.05);Th2细胞水平和IL-4含量较对照组升高(P<0.05),而Th1细胞水平、IFN-γ含量与Th1/Th2、IFN-γ/IL-4较对照组明显降低(P<0.001);Siglec-7^(+)单核细胞水平与Th1细胞水平、IFN-γ含量呈负相关(r=-0.651,r=-0.407);与Th2细胞水平、IL-4含量呈正相关(r=0.706,r=0.530)。结论:在布鲁氏菌感染过程中,Siglec-7^(+)单核细胞增多并可能参与Th1/Th2细胞失衡。

麻黄定喘汤辅助治疗对过敏性哮喘患儿气道炎症、重塑及Th1/Th2失衡的调节作用

【目的】探讨麻黄定喘汤辅助治疗对过敏性哮喘患儿气道炎症、重塑及辅助性T细胞1(Th1)/辅助性T细胞2(Th2)失衡的调节作用。【方法】将126例痰热壅肺型急性发作期过敏性哮喘患儿随机分为观察组与对照组,每组各63例。对照组给予常规西医治疗,观察组在对照组的基础上加用麻黄定喘汤治疗,总疗程为14 d。观察2组患儿治疗前后肺功能指标[第一秒用力呼气量(FEV1)和峰值呼气流速(PEF)]、气道炎症指标[痰液中的中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细数、单核细胞百分比和白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]、气道重塑指标[气道管壁面积(WA)、气道管腔面积(LA)、气道总面积(TA)]以及Th1/Th2细胞因子[干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)]水平的变化情况,并评价2组患儿的临床疗效和安全性。【结果】(1)疗效方面,治疗14 d后,观察组的总有效率为93.65%(59/63),对照组为80.95%(51/63),组间比较(χ2检验),观察组的疗效明显优于对照组(P<0.05)。(2)肺功能指标方面,治疗后,2组患儿的肺功能指标FEV1和PEF值均较治疗前显著升高(P<0.01),且观察组的升高幅度均明显优于对照组(P<0.05)。(3)气道炎症指标方面,治疗后,2组患儿痰液中的中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞百分比和IL-6、TNF-α水平均较治疗前明显降低(P<0.05),淋巴细胞百分比均较治疗前明显升高(P<0.05),且观察组对痰液中的中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞百分比和IL-6、TNF-α水平的降低幅度及对淋巴细胞百分比的升高幅度均明显优于对照组(P<0.05)。(4)气道重塑指标方面,治疗后,2组患儿的WA值均较治疗前降低(P<0.05),LA、TA值均较治疗前升高(P<0.05),且观察组对WA值的降低幅度及LA、TA值升高幅度均明显优于对照组(P<0.05)。(5)Th1/Th2细胞因子方面,治疗后,2组患者的血清IFN-γ水平和IFN-γ/IL-4比值均较治疗前明显升高(P<0.05),血清IL-4水平均较治疗前明显降低(P<0.05),且观察组对血清IFN-γ水平和IFN-γ/IL-4比值的升高幅度及对血清IL-4水平的降低幅度均明显优于对照组(P<0.05)。(6)安全性方面,2组患儿治疗期间均未见严重不良反应,心电图、血常规、肝功能检查及心率、血压等安全性指标均未见明显异常。【结论】麻黄定喘汤有助于缓解过敏性哮喘患儿气道炎症、重塑,调节Th1/Th2失衡,改善患儿肺功能,疗效肯定,安全性好。

痛泻安肠方对肠易激综合征小鼠短链脂肪酸代谢及Th1/Th2细胞免疫平衡的影响

目的观察痛泻安肠方对肝郁脾虚证腹泻型肠易激综合征(IBS-D)小鼠模型短链脂肪酸代谢及Th1/Th2细胞免疫平衡的影响。方法30只18~22 g的雄性C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、痛泻安肠方低剂量组、痛泻安肠方中剂量组、痛泻安肠方高剂量组,每组6只。采用束缚应激联合番泻叶灌胃复制IBS-D小鼠模型,造模成功后分别予相应浓度中药灌胃14 d,每日1次,通过靶向代谢组学检测小鼠粪便中短链脂肪酸含量的变化,并通过流式细胞术检测肠系膜淋巴结中CD3+CD4+INF-γ+T细胞(Th1细胞)、CD3+CD4+IL-4+T细胞(Th2细胞)的占比情况。结果与空白组相比,模型组小鼠粪便短链脂肪酸(SCFAs)相对含量显著升高(P<0.01),尤其是乙酸、丙酸及丁酸的含量均显著升高(P<0.01或P<0.05);不同剂量痛泻安肠方治疗后,粪便总SCFAs相对含量显著降低(P<0.01),乙酸、丙酸及丁酸均有不同程度降低,其中痛泻安肠方各剂量组均可显著降低乙酸和丁酸的含量,差异具有统计学意义(P<0.01),低剂量组及中剂量组可显著降低丙酸的含量,差异具有统计学意义(P<0.01)。造模后,肠易激综合征小鼠肠系膜淋巴结的Th2细胞占比明显降低,而Th1细胞占比及Th1/Th2细胞比率明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后,痛泻安肠方各剂量组Th2细胞占比均有升高,Th1细胞占比及Th1/Th2细胞比率降低。结论痛泻安肠方可以降低IBS-D小鼠粪便SCFAs的含量,调节小鼠Th1/Th2细胞免疫紊乱。

基于Th1、Th2细胞因子探讨清肠合剂改善术后腹腔粘连的机制

目的探讨清肠合剂改善大鼠术后腹腔粘连的效果及其可能的作用机制。方法75只SD大鼠随机分为5组:空白组、假手术组、模型组、清肠合剂组及透明质酸钠组。除空白组和假手术组外,其余3组采用盲肠刮擦法建立腹腔粘连大鼠模型;透明质酸钠组用2 mL透明质酸钠凝胶均匀涂抹受损的腹壁及盲肠后关腹。清肠合剂组造模成功后每日予2 mL清肠合剂(14.58 g/kg)灌胃1次,其余4组予等体积生理盐水灌胃。每组分别于术后第3、7、14天处死5只大鼠,采用Nair’s评分评估腹腔粘连情况,并收集术后7 d粘连组织或正常腹膜组织,应用荧光定量PCR法检测白细胞介素(IL)-4、信号转导和转录激活因子6(STAT-6)及干扰素-γ(IFN-γ)的mRNA表达水平;Western blot检测IL-4、IL-10、STAT-6及IFN-γ的蛋白表达情况;苏木精-伊红染色后光镜下观察各组粘连组织病理变化,评估炎症和纤维形成情况。结果与空白组和假手术组相比,模型组粘连组织中IL-4、STAT-6的mRNA和蛋白表达水平以及IL-10的蛋白表达水平下降,IFN-γ的mRNA和蛋白表达水平、炎症评分及纤维评分均升高(P<0.05)。与模型组相比,清肠合剂组和透明质酸钠组的IL-4和STAT-6的mRNA和蛋白表达水平以及IL-10蛋白表达水平均升高;Nair’s评分、炎症评分、纤维评分以及IFN-γ的mRNA和蛋白表达水平均降低(P<0.05)。结论清肠合剂可以抑制术后腹腔粘连的形成,其机制可能与调控辅助性T细胞1、辅助性T细胞2相关的细胞因子,降低炎症反应水平有关。

结肠组织中Th1/Th2和Th17细胞失衡与溃疡性结肠炎的关系

目的探讨结肠组织中Th1、Th2和Th17细胞失衡与溃疡性结肠炎(UC)的关系。方法收集41例UC患者和52例对照者肠组织,采用反转录实时定量PCR检测结肠组织Th1、Th2和Th17细胞相关转录因子(T-bet、GATA-3、RORγt)及细胞因子(IFN-γ、IL-4、IL-17A)m RNA水平;同时采用免疫组化检测结肠组织IFN-γ、IL-4、IL-17A的表达水平。结果与对照组相比,UC患者结肠组织中GATA-3、RORγt和IL-17A m RNA水平明显提高(0.84±0.24 vs.0.69±0.22,P<0.01;0.99±0.29 vs.0.83±0.23,P<0.01;1.59±0.65 vs.1.35±0.43,P<0.05)。依据《改良Truelove和Witts严重程度分型标准》将UC患者分层,与轻度患者相比,中重度患者结肠组织中GATA-3、RORγt和IL-17A m RNA水平明显升高(0.90±0.18 vs.0.78±0.16,P<0.05;1.11±0.31 vs.0.87±0.26,P<0.05;1.83±0.64 vs.1.34±0.66,P<0.05)。对UC患者肠组织行免疫组化检测显示,IL-17A阳性细胞主要位于结肠上皮细胞层和黏膜固有层;UC患者结肠组织中IL-17A的平均积分光密度值明显高于对照组(0.25±0.07 vs.0.13±0.03,P<0.01),并且中重度患者明显高于轻度患者(0.31±0.07vs.0.19±0.06,P<0.01)。与对照组相比,UC患者结肠组织中GATA-3/T-bet、RORγt/T-bet和RORγt/GATA-3的m RNA比值均明显升高(1.12±0.30 vs.0.96±0.31,P<0.05;1.33±0.37 vs.1.15±0.33,P<0.05;1.44±0.45 vs.1.20±0.42,P<0.01),并且中重度患者明显高于轻度患者(1.27±0.35 vs.1.00±0.32,P<0.01;1.45±0.37 vs.1.19±0.36,P<0.05;1.59±0.43 vs.1.28±0.46,P<0.05)。结论 Th1、Th2和Th17细胞失衡可能与UC密切相关。

1,25(OH)_2D_3干预实验性自身免疫性甲状腺炎TH1/TH2细胞失衡的研究

目的观察1,25(OH)2D3对实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)大鼠炎症及Th1/Th2细胞的干预效果。方法 48只雌性Wistar大鼠随机分为预防组(n=10),治疗组(n=10),阳性对照组(n=12)和阴性对照组(n=16)。除阴性对照组外,其余大鼠均给予pTG免疫致敏。预防和治疗组每只大鼠使用维生素D35μg/kg.,隔日腹腔注射,分别从建模0～6周和2～8周作干预,阴性对照组和阳性对照组应用花生油作对照。各组大鼠在处死后取甲状腺组织做病理学检查,检测血清自身抗体,及细胞因子的改变。结果阴性对照大鼠的甲状腺结构完整;阳性对照组大鼠甲状腺滤泡结构破坏严重,部分滤泡萎缩或消失,1,25(OH)2D3干预组大鼠甲状腺结构保持较完整,萎缩滤泡减少,淋巴细胞浸润不明显。与阴性对照组相比,预防组其自身抗体及细胞因子水平均无显著性差异;治疗组大鼠血清抗体水平与同时期的阳性对照相比水平明显降低(P<0.05),但较阴性对照明显升高(P<0.05);与阳性对照组相比,治疗组大鼠IFN-γ及IL-12水平显著下降(P<0.05),IL-4和IL-10水平升高(P<0.01)。结论在EAT大鼠建模开始就使用1,25(OH)2D3可使大鼠甲状腺组织保持较完整形态,维持血清抗体及细胞因子正常范围。对EAT大鼠,1,25(OH)2D3有可能减缓病理损害,调整细胞因子的失衡。

Th1、Th2和Th17细胞失衡与克罗恩病的关系

背景:免疫功能紊乱是炎症性肠病发病的关键环节,研究发现Th1、Th2和Th17细胞比例失衡与肠道免疫失调相关。目的:探讨Th1、Th2和Th17细胞失衡与克罗恩病(CD)的关系。方法:收集2013年1月—2014年12月温州医科大学附属第二医院收治的CD患者36例,同期行肠息肉摘除术患者40例作为对照组,分别取病变部位肠组织和正常肠组织,采用real-time PCR和免疫组化法检测Th1、Th2、Th17细胞相关转录因子(T-bet、GATA-3、RORγt)和细胞因子(IFN-γ、IL-4、IL-17A)表达。结果:与对照组相比,CD组肠组织中T-bet、RORγt mRNA表达、IFN-γ、IL-17A mRNA和蛋白表达以及代表Th1/Th2、Th17/Th2比例的T-bet/GATA-3、RORγt/GATA-3比值均显著增高(P<0.05),各转录因子与相应细胞因子表达呈显著正相关(P<0.05)。IFN-γ和IL-17A免疫阳性物质均定位于细胞质,在CD患者中阳性细胞主要分布于上皮层和黏膜固有层。分层分析显示活动期CD的上述指标均显著高于缓解期(P<0.05);活动期CD代表Th17/Th1比例的RORγt/T-bet比值亦较缓解期显著增高(P<0.05)。结论:肠组织中Th1、Th2和Th17细胞失衡与CD密切相关,Th1、Th17细胞极化可能在其中起重要作用,活动期CD以Th17细胞极化为著。

Th1/Th2细胞模式与肿瘤相关性的探讨

目的观察Th1/Th2模式与肿瘤的相关性及细胞因子对Th1/Th2分化的影响,为肿瘤的免疫治疗提供依据。方法选择胃癌患者78例(胃癌组)和健康体检者80例(对照组),采用酶联免疫斑点法检测两组Th1、Th2、Th1/Th2水平;对照组35例行外周血单个核细胞培养并分为A、B、C组,A、B组培养过程中分别加入IL-12+抗IL-4单抗(终浓度分别为4μg/L和10 mg/L)、IL-4+抗γ-IFN单抗(终浓度分别为20μg/L和10 mg/L),C组不干预,检测各组Th1/Th2细胞的比率。结果胃癌组中Th1明显低于、Th2明显高于对照组,Th1/Th2明显低于正常组,P均<0.05;与C组比较,A组Th1细胞阳性率升高,Th2细胞阳性率降低,Th1/Th2值升高;B组Th1细胞阳性率降低,Th2细胞阳性率升高,Th1/Th2值降低(P<0.05)。结论胃癌患者血清呈现Th2优势的分化状态;IL-12+抗IL-4单抗可改变此状态;此为进一步提高肿瘤的免疫治疗效果提供了理论依据。