慢性乙型肝炎肝纤维化患者Th1／Th2细胞及其细胞因子的变化

目的探讨Th1／Th2细胞及其分泌的细胞因子在慢性乙型肝炎（CHB）肝纤维化患者发生发展中的作用。方法选取2011年3—10月在河北医科大学第三医院感染科接受肝组织病理活检的CHB肝纤维化患者46例，根据纤维化分期分为S0～1期15例，S2～3期20例，S4期11例三组，另取同期健康志愿者10名作为健康对照组。用流式细胞术和实时荧光定量PCR检测外周血Th1、Th2细胞频率和单个核细胞（PBMCs）中干扰素γ（IFN-γ）、白细胞介素4（IL-4）基因表达；用ELISA法检测血清IFN-γ和IL-4水平；用免疫组织化学染色检测肝组织IFN-γ和IL4表达。应用Spearman相关分析、Kruskal—WallisH检验、Logistic逐步回归方法分析Th1／Th2细胞及其细胞因子在CHB肝纤维化患者外周血和肝组织中的变化。结果不同肝纤维化分期的CHB患者外周血Th1／Th2细胞频率的比值、PBMCs中IFN-γ／IL-4mRNA、血清中IFN-γ／IL-4及肝内IFN-γ／IL-4差异均有统计学意义，并随肝纤维化程度加重逐渐下降（χ2=36．259、40．822、26．321和31．852，P〈0．05）。血清及肝组织中IFN-γ,／IL-4比值与肝纤维分期均呈负相关（r=-0．616和-0．531，P〈0．01）。Logistic回归分析显示：AST、凝血酶原时间（PT）和血清IFN-γ／IL4比值是发生显著肝纤维化（S2-4）的三个独立危险因素（OR=5．933，95％CI：1．324～26．586，P=0．02；OR=12．866，95％CI：1．746～94．788，P=0．01；OR=4．755，95％CI：1．034～21．862，P：0．04）。结论CHB患者体内存在Th1／Th2失衡，随着肝纤维化进展，外周血及肝脏内均呈现Th2应答的极化现象，这可能是CHB肝纤维化发生发展的一种机制。

人羊水间充质干细胞对乙型肝炎肝衰竭患者外周血Th1／Th2的体外调节

目的探讨人羊水间充质干细胞（human amniotie fluid—derived mesenchymal stem cells，h-AFMsc）对乙型肝炎肝衰竭患者外周血Th1／Th2的体外调节作用。方法选择2011年2—5月中山大学附属第三医院6例乙型肝炎肝衰竭患者和6名健康志愿者，提取外周血单个核细胞（peripheral blood mononuelear cells，PBMC），同时从孕妇中期羊水中提取h-AFMSC。将h-AFMSC分别与乙型肝炎肝衰竭患者和健康捐献者的PBMC共培养72h，乙型肝炎肝衰竭患者和健康捐献者的PBMC单独培养组作为对照。应用流式细胞仪检测共培养前后不同组PBMCIFNγ（Th1）和IL-4（Th2）的变化情况，计算Th1／Th2比值。对共培养前后数据进行Mauchly球形检验，P〉0．1满足球形假设检验则采用重复测量方差分析。结果共培养72h，乙型肝炎肝衰竭患者PBMC与h—AFMSC共培养组的Th1细胞比例与其PBMC单独培养组比较无明显差异（F=0．82，P〉0．05），但Th2细胞比例明显下降（F=10．24，P〈0．05），从而导致Th1／Th2比值显著上升（F=17．28，P〈0．01）。健康捐献者PBMC与h-AFMSC共培养组的Th1、Th2和Th1／Th2比值与其PBMC单独培养组比较差异均不明显（F值分别为0．54、0．68和0．74，P值均〉0．05）。结论h-AFMSC对乙型肝炎肝衰竭患者的Th1／Th2有体外调节作用，具有作为移植种子来源移植治疗乙型肝炎肝衰竭的可能性。

流式微珠阵列检测Th1／Th2细胞因子谱在感染性疾病早期诊断中的应用

病原微生物引起的感染性疾病一直是发热的主要病因，早期确定病原菌，防止抗生素的滥用是有效治疗感染性疾病、改善患者预后的关键。实验室检查在发热病因及感染病原体鉴别上有重要意义，其中微生物培养是诊断细菌的金标准，但存在耗时长、敏感性低的缺点。Th1／Th2是辅助性T淋巴细胞亚群，可分泌多种细胞因子。