miR-155通过SOCS1/STAT3途径调控类风湿性关节炎中炎症反应和Th17/Treg失衡

目的在类风湿性关节炎(RA)中探究miR-155和细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS1)的表达及作用机制。方法采用RT-PCR和流式细胞术检测miR-155和Th17、Treg细胞在RA患者(RA组)和对照组(HC组)外周血中的表达差异;生物信息学和双荧光素酶基因报告实验检测miR-155和SOSC1的调控关系;分离RA患者外周CD4^(+)T细胞,将沉默miR-155与SOCS1表达的miR-155 inhibitor和si-SOCS1及各自的阴性对照序列分别或联合转染入CD4+T细胞中,并将细胞分为:miR-NC组、miR-155 inhibitor组、miR-155 inhibitor+si-NC组和miR-155 inhibitor+si-SOCS1组。使用Th17诱导分化液处理上述细胞后,采用流式细胞术检测各组CD4+T细胞中Th17比率,Western blot实验检测细胞中p-STAT3/STAT3比值。结果与HC组相比,RA患者中miR-155、Th17比率升高(P<0.01),Treg细胞比率降低(P<0.01);miR-155可靶向抑制SOCS1表达。与miR-NC组相比,miR-155 inhibitor组、miR-155 inhibitor+si-NC组和miR-155 inhibitor+si-SOCS1组中Th17比率、p-STAT3/STAT3比值均降低(P<0.01);与miR-155 inhibitor组相比,miR-155 inhibitor+si-SOCS1组CD4^(+)T细胞中Th17比率、p-STAT3/STAT3比值均升高(P<0.05)。结论在RA患者中表达升高的miR-155可能通过SOCS1/STAT3途径来介导CD4^(+)T细胞的Th17分化,从而参与RA患者外周Th17/Treg细胞失衡。

肠道菌群参与慢性阻塞性肺疾病Th17/Treg失衡机制的研究进展

免疫因素是慢性阻塞性肺疾病发病的关键环节,在疾病的发生发展中起重要作用。肠作为与肺同源的器官,其代谢产物及其他信号分子能够通过血液及淋巴管循环迁移至肺,进而发挥作用。近年研究发现肠道菌群通过影响肺部免疫平衡从而在慢性阻塞性肺疾病的进展中发挥重要意义。本文基于“肠-肺轴”这一结构基础,就肠道菌群参与调节慢性阻塞性肺疾病中Th17/Treg免疫失衡的机制进行综述,为慢性阻塞性肺疾病的防治提供新的思路。

宣白承气汤对痰热腑实型哮喘大鼠肺组织病理损伤及Th17/Treg失衡的影响

目的:观察宣白承气汤对痰热腑实型哮喘大鼠肺组织病理损伤情况及肺泡灌洗液(BALF)中Th17/Treg失衡的影响。方法:将50只Wistar雄性大鼠随机分为空白对照组(A组)、模型组(B组)、定喘汤组(C组)、宣白承气汤组(D组)和地塞米松组(E组),每组10只。利用OVA诱导哮喘模型,并施加痰热腑实因素,造模成功后,C组、D组和E组分别按1.5mL/100g给予定喘汤(0.067g/mL)、宣白承气汤(0.036g/mL)和地塞米松溶液[0.05 mg/(100 g·d)],A组和B组按等比例给予生理盐水,1次/d,连续用药14 d后,观察各组大鼠一般情况;HE染色观察大鼠肺组织病理改变情况,酶联免疫吸附法(ELISA)比较大鼠肺泡灌洗液中IL-6、转化生长因子-β(TGF-β)、IL-17、IL-10的含量。结果:病理切片结果显示,A组未见炎性细胞浸润,肺泡扩张良好、支气管黏膜正常;B组可见大量嗜酸性粒细胞及淋巴细胞浸润等支气管哮喘病理表现;C组、D组和E组细胞炎性浸润均减少,病理情况均有所改善。ELISA结果显示,与A组比较,B组肺泡灌洗液中IL-6和IL-17水平显著上升(均P<0.01);与B组比较,C组、D组、E组IL-6和IL-17水平均下降(均P<0.01);与A组比较,B组肺泡灌洗液中TGF-β和IL-10水平均下降(均P<0.01);与B组比较,D组两种细胞因子水平均显著上升(均P<0.01);C组TGF-β水平上升(P<0.05),IL-10水平明显上升(P<0.01);E组IL-10水平明显上升(P<0.01),但TGF-β上升不明显(P>0.05)。结论:宣白承气汤可以通过泄热通腑的方法治疗痰热腑实型哮喘,改善哮喘症状,缓解大鼠肺组织病理损伤,改变肺泡灌洗液中IL-6、TGF-β、IL-17、IL-10的含量,从而调节Th17/Treg失衡。

PBMCs miR-29c在肺炎支原体肺炎患儿中的表达及与Th17/Treg失衡的关系

目的探究外周血单个核细胞(PBMCs)miR-29c在肺炎支原体肺炎(MPP)患儿中的表达及Th17/Treg失衡的关系。方法2019年8月至2021年4月在我院儿科共纳入108例MPP患儿,包括58例大环内酯类抗菌药物敏感的MPP患儿(MSMP组)和50例难治性MPP(RMPP组)患儿。另外选择50例健康体检儿童作为对照组。采集入院时的血液样本。采用流式细胞术检测外周血Th17、Treg细胞百分比,酶联免疫吸附法测定血清白细胞介素17(IL-17)和转化生长因子β1(TGF-β1)水平。实时荧光定量PCR法检测PBMCs miR-29c表达。结果与对照组相比,MSMP组和RMPP组CD4^(+)Th17细胞百分比、CD4^(+)Treg细胞百分比、Th17/Treg比值以及血清IL-17水平升高,同时PBMCs miR-29c相对表达量降低(P<0.05);而且RMPP组患儿CD4^(+)Th17细胞百分比、CD4^(+)Treg细胞百分比、Th17/Treg比值以及血清IL-17水平高于MSMP组,PBMCs miR-29c相对表达量低于MSMP组(P<0.05)。对于所有MPP患儿,无论是MSMP组还是RMPP组,PBMCs miR-29c相对表达量与循环Th17细胞%、Th17/Treg比值、血清IL-17水平均呈负相关性(P<0.05)。经受试者工作特征曲线分析,PBMCs miR-29c预测RMPP的AUC为0.932(95%CI:0.888~0.976),最佳临界值为0.67。经多因素Logistic回归分析,PBMCs miR-29c是影响RMPP进展的独立影响因子,PBMCs miR-29c≥0.67患儿进展为RMPP风险较低(P<0.05)。结论MPP患儿中PBMCs miR-29c低表达可诱导Th17细胞分化,进而促进Th17/Treg失衡,这可能是导致RMPP进展的重要机制之一。

基于肠-免疫-皮肤轴研究犀角地黄汤对银屑病小鼠肠道Th17/Treg失衡的影响

目的:探讨犀角地黄汤对银屑病模型小鼠肠道Th17/Treg失衡的影响。方法:将30只BALB/c小鼠在造模成功后随机分为模型组、中药低浓度组、中药中浓度组、中药高浓度组、空白对照组各6只。除空白组外,其余4组均采用背部涂抹5%咪喹莫特乳膏42mg(四川明欣药业有限责任公司,批号110206)建立银屑病模型。模型组与空白对照组每日予以相同剂量的蒸馏水;犀角地黄汤低、中、高浓度分别对应中药治疗的低、中、高三组,浓度为80mg/mL、160mg/mL、320mg/mL,每只小鼠按照0.1mL/10g体重的体积灌胃。1次/d,连续2周。观察银屑病样皮损面积和严重程度PASI评分、小鼠肠系膜淋巴结中IL-23、IL-17及TNF-α细胞因子水平、小鼠粪便中肠球菌、肠杆菌、双歧杆菌、乳酸杆菌等4种菌在治疗前后的表达情况。结果:与模型组相比,小鼠PASI评分降低,IL-23、IL-17及TNF-α的水平降低,P<0.05,差异有统计学意义;模型组小鼠相对于空白组乳酸杆菌、双歧杆菌数目减少,肠球菌及肠杆菌数增多;犀角地黄各剂量组乳酸杆菌、双歧杆菌数明显少于模型组(P<0.05),肠球菌、肠杆菌数明显多于模型组(P<0.05)。结论:犀角地黄汤可以降低银屑病小鼠肠系膜中IL-23、IL-17及TNF-α的水平,改善小鼠皮损的炎症反应及肠道菌群结构。

Th17/Treg失衡与卵巢功能减退关系的研究进展

女性卵巢功能减退性的疾病病因十分复杂、临床表现多样、属进行性发展性疾病。卵巢功能衰退的程度,按“三期”分为:潜伏期、生化期和临床不正常期。卵巢功能减退(Diminished Ovarian Reserve,DOR)、早发性卵巢功能不全(Premature ovarian insufficiency,POI)属于患病初期,卵巢早衰(Premature ovarian failure,POF)代表卵巢功能衰退末期。有研究发现自身免疫因素是导致卵巢功能减退的一个重要原因,其免疫失衡与Th17和Treg有着一定的相关性。文中将针对Th17/Treg平衡失调对卵巢功能的影响,作一综述,以期为今后诊治卵巢功能衰退提供思路。

γ-分泌酶抑制剂DAPT阻断Notch通路并纠正脑卒中后抑郁大鼠Th17/Treg失衡

目的:探究γ-分泌酶抑制剂DAPT对Notch信号通路和脑卒中后抑郁(PSD)大鼠辅助性T细胞17/调节性T细胞(Th17/Treg)失衡的影响。方法:SD大鼠采用线栓法结合慢性不可预知性温和应激(CUMS)刺激及孤养建立PSD模型,随机分为PSD组(等量生理盐水)和DAPT组(5 mg/kg DAPT),假手术(sham)组(等量生理盐水)为对照,每组10只。各组大鼠分别于术前(0 d)及术后7、14、21和28 d进行体重检测、敞箱实验(OFT)及蔗糖偏爱实验(SPT)。干预结束后,采用RT-qPCR和Western blot分别检测脑组织海马Notch1和Hes1 mRNA及蛋白表达水平,流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMC)中Th17和Treg细胞比例,ELISA法检测血清白细胞介素17(IL-17)和IL-10水平。结果:术后7、14、21和28 d,与sham组比较,PSD组大鼠体重、水平运动评分、垂直运动评分和糖水消耗比例均显著降低(P<0.05),其中7和14 d PSD组与DAPT组大鼠体重、水平运动评分、垂直运动评分和糖水消耗比例差异无统计学意义(P>0.05);与PSD组比较,21和28 d DAPT组大鼠体重、水平运动评分、垂直运动评分和糖水消耗比例显著增加(P<0.05)。干预结束后,与sham组比较,PSD组大鼠海马Notch1和Hes1 mRNA及蛋白表达水平,PBMC中Th17细胞比例和Th17/Treg比值,以及血清IL-17水平显著升高(P<0.05),Treg细胞比例和血清IL-10水平显著降低(P<0.05);与PSD组比较,DAPT组大鼠海马Notch1和Hes1 mRNA及蛋白表达水平,PBMC中Th17细胞比例和Th17/Treg比值,以及血清IL-17水平显著降低(P<0.05),Treg细胞比例和血清IL-10水平显著升高(P<0.05)。结论:DAPT可阻断Notch信号通路并减轻PSD大鼠抑郁样症状,其机制可能与调节Th17/Treg失衡及炎症因子分泌有关。

过敏性哮喘患者外周血SOCS-1、SOCS-3表达及与Th17/Treg失衡的关系

目的检测过敏性哮喘患者外周血单个核细胞细胞因子信号传导抑制蛋白1(SOCS-1)、SOCS-3表达水平并分析其与Th17/Treg失衡的关系及意义。方法选取2018年4月—2019年9月四川省遂宁市中心医院急诊科诊治过敏性哮喘患者60例为哮喘组,另选取同期于医院进行体检的健康体检者60例作为健康对照组,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测2组外周血单个核细胞SOCS-1、SOCS-3 mRNA表达水平,流式细胞仪检测外周血CD4+IL-17+T细胞(Th17细胞)、CD4+CD25+调节性T细胞(Treg细胞)百分率,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清IL-6、IL-17、IL-23、TGF-β1、IFN-γ水平,Pearson相关分析过敏性哮喘患者Th17/Treg比值与SOCS-1、SOCS-3 mRNA表达水平相关性。结果哮喘组外周血Th17细胞百分率、Th17/Treg比值显著高于健康对照组,Treg细胞百分率显著低于健康对照组(t=15.726、2.665、15.074,P均<0.01);哮喘组外周血单个核细胞SOCS-1、SOCS-3 mRNA表达水平较健康对照组显著上调(t=10.805、4.709,P均=0.000);与健康对照组比较,哮喘组患者血清IL-6、IL-17、IL-23、TGF-β1表达水平显著升高,IFN-γ表达水平显著降低(t=26.648、11.963、6.844、58.921、8.900,P均=0.000);哮喘组患者FEV1、FVC、FEV1%显著低于健康对照组(t=12.316、6.142、35.372,P均=0.000);过敏性哮喘患者外周血SOCS-1、SOCS-3 mRNA表达水平与IL-6、IL-17、IL-23、TGF-β1水平均呈正相关(SOCS-1:r=0.576、0.365、0.525、0.478,P均<0.01;SOCS-3:r=0.463、0.427、0.364、0.415,P均<0.01),与IFN-γ水平均呈负相关(r=-0.549、-0.562,P均<0.01),SOCS-3 mRNA水平与SOCS-1 mRNA水平呈正相关(r=0.471,P<0.01);SOCS-1、SOCS-3 mRNA与Th17/Treg比值呈正相关(r=0.488、0.606,P均<0.05)。结论过敏性哮喘患者外周血SOCS-1、SOCS-3表达上调,与Th17/Treg失衡及炎性因子异常表达有关,可能参与过敏性哮喘发生。

EGR2调控慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者Th17/Treg失衡的分子机制

目的探究EGR2介导慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者Th17/Treg细胞失衡的分子机制。方法选取2021年7月—2022年9月就诊于我院的CRSwNP患者50例,根据SPT检测结果分为Non-atopic CRSwNP组(n=23)和Atopic CRSwNP组(n=27),同期因鼻中隔偏曲、单纯上颌窦囊肿接受手术的患者作为Control组(n=25)。分别取患者鼻息肉及鼻腔、鼻窦粘膜,采用WB法测鼻组织EGR2、IL-17A、FOXP3、STAT3和p-STAT3的表达,Elisa法测外周血中EGR2、IL-17A、TGF-β1的表达;分选培养CD4+T细胞,SiRNA敲低CD4+T细胞中EGR2表达,WB法检测EGR2、IL-17A、FOXP3、STAT3和p-STAT3的表达。结果3组患者鼻组织中EGR2和FOXP3表达比较,Atopic CRSwNP组<Non-atopic CRSwNP组<Control组(P<0.05);IL-17A和p-STAT3表达比较,Atopic CRSwNP组>Non-atopic CRSwNP组>Control组(P<0.05)。3组患者外周血中EGR2和TGF-β1含量比较,Atopic CRSwNP组<Non-atopic CRSwNP组<Control组(P<0.05);IL-17A含量比较,Atopic CRSwNP组>Non-atopic CRSwNP组>Control组(P<0.05)。3组患者外周血中EGR2含量与TGF-β1含量呈正相关(r=0.616,P<0.05),与IL-17A含量呈负相关(r=-0.587,P<0.05)。较于Negative Control组,SiRNA组的STAT3表达无差异(P>0.05),p-STAT3和IL-17A表达增加(P<0.05),EGR2和FOXP3表达降低(P<0.05)。结论Atopic CRSwNP组和Non-atopic CRSwNP组患者息肉组织和外周血中均存在Th17/Treg细胞失衡,且Atopic CRSwNP患者更严重;EGR2低表达可能是CRSwNP患者Th17/Treg细胞失衡的重要因素,低表达的EGR2增加STAT3磷酸化,从而导致CD4+T细胞过度分化为Th17细胞,同时抑制Treg细胞产生。

DCs、B10细胞和Th17/Treg失衡在慢性阻塞性肺疾病患者致病中的作用机制及其与肺功能的关联性

目的:探索树突状细胞(DCs)、新型调节性B细胞(B10细胞)和Th17/Treg失衡在慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者致病中的作用机制及其与肺功能的关联性。方法:根据《慢性阻塞性肺疾病诊治指南(2013年修订版)》,前瞻性选取苏州市第九人民医院2019年5月至2021年12月诊治的93例COPD患者,另外选50例同期健康体检者为对照组。随访1年观察COPD急性加重(AECOPD)情况,分为COPD稳定期组与AECOPD组。比较COPD稳定期组与AECOPD组病程、改良英国医学研究学会呼吸困难指数(mMRC)分级、COPD评估测试(CAT)评分、BODE指数评分、6 min步行距离(6MWD)、动脉血氧分压(PaO_(2))、动脉血二氧化碳分压(PaCO_(2));比较COPD稳定期组、AECOPD组以及对照组的FEV1、FVC、FEV1/FVC、FEV1占预计值百分比(FEV1/Pred)水平与外周血DCs、B10细胞、Th17细胞、Treg细胞与Th17/Treg、IL-12、IL-10、IL-17A与TGF-β1水平;分析AECOPD组外周血DCs、B10细胞和Th17/Treg失衡与肺功能指标的相关性;Logistic回归分析AECOPD发生的独立危险因素。结果:本研究38例COPD患者发生AECOPD事件(40.86%)。AECOPD组病程、mMRC分级、CAT评分、BODE指数评分、PaCO_(2)均明显高于COPD稳定组(P<0.05),6MWD和PaO_(2)均明显低于COPD组。AECOPD组FEV1、FVC、FEV1/FVC与FEV1/Pred水平明显低于COPD稳定期组与对照组(P<0.05);COPD稳定期FEV1、FVC、FEV1/FVC与FEV1/Pred水平明显低于对照组(P<0.05)。AECOPD组DCs、B10细胞、Treg细胞明显低于COPD稳定期组与对照组,而Th17表达水平与Th17/Treg比例明显高于COPD稳定期组与对照组(P<0.05);COPD稳定期DCs、B10细胞、Treg细胞明显低于对照组,而Th17表达水平与Th17/Treg比例明显高于对照组(P<0.05)。AECOPD组IL-12、IL-10与TGF-β1表达水平明显低于COPD稳定期组与健康对照(P<0.05),而IL-17A明显高于COPD稳定期组与对照组;COPD稳定期患者IL-12、IL-10与TGF-β1表达水平明显低于对照组,而IL-17A明显高于对照组(P<0.05)。Pearson分析显示,外周血DCs、B10细胞与FEV1、FVC、FEV1/FVC与FEV1/Pred水平均呈正相关(P<0.05),而Th17/Treg与FEV1、FVC、FEV1/FVC与FEV1/Pred水平均呈负相关(P<0.05)。Logistic回归分析发现,mMRC分级、Th17/Treg是AECOPD发生的独立危险因素(P<0.05)。结论:随着COPD进展,DCs、B10细胞、Th17细胞、Treg细胞与Th17/Treg逐渐成为失衡状态,造成促炎因子及抗炎因子表达水平紊乱;外周血DCs、B10细胞与肺功能水平均呈正相关,而Th17/Treg与肺功能水平均呈负相关,mMRC分级、Th17/Treg是AECOPD发生的独立危险因素。积极干预患者体内免疫功能失衡状态对降低肺组织免疫损伤、促进肺功能改善具有重要临床意义。

围术期异体输血对胃癌患者Th17/Treg失衡的影响

目的探讨围术期异体输血对胃癌患者辅助性T淋巴细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)失衡的影响。方法选择行胃癌根治术的57例患者作为胃癌组,根据围术期是否输血,再将胃癌组患者分为未输血组26例和输血组31例;另选择健康体检者20例作为对照组。采用流式细胞术(FCM)检测对照组和胃癌组术前及术后1 d、7 d、14 d外周血中Th17细胞、Treg细胞比例及Th17/Treg比值。结果胃癌组患者Th17细胞、Treg细胞比例及Th17/Treg比值均明显高于对照组(P均<0.05);术后14 d,输血组Th17细胞、Treg细胞比例均明显高于未输血组(P均<0.05),Th17/Treg比值明显低于未输血组(P<0.05);未输血组Th17细胞、Treg细胞比例及Th17/Treg比值与术前比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论胃癌患者存在Th17/Treg失衡;围术期异体输血可能通过调节Th17、Treg免疫细胞表达导致Th17/Treg失衡加剧,影响胃癌患者的细胞免疫状态。

Th17/Treg失衡与肝脏免疫病理反应的研究进展

Th17细胞及Th17/Treg失衡在炎症反应、组织损伤及纤维化形成中发挥了重要作用,与多种疾病的发生发展密切相关。前炎性细胞因子可诱导T细胞分化为Th17,使Th17/Treg失衡,导致IL-17、IL-6、趋化因子等促炎性细胞因子大量分泌并有效介导中性粒细胞动员与兴奋,使得机体产生炎症反应与免疫病理反应。就Th17/Treg细胞及其失衡在肝脏免疫病理反应中的研究进展进行了综述。

基于Th17/Treg失衡的解毒祛瘀滋阴方治疗系统性红斑狼疮作用机制研究

系统性红斑狼疮(SLE)是一种自身免疫性疾病,以女性多见。近年来,人们对SLE免疫学发病机制研究有了新的进展,诸多研究显示:Th17/Treg细胞免疫失衡参与了SLE异常免疫应答过程[1-2]。解毒祛瘀滋阴方是范永升教授治疗SLE的经验方,已证实具有良好的临床疗效。本研究以Th17/Treg细胞免疫失衡为切入点,探讨解毒祛瘀滋阴方对这一免疫平衡的调控作用。

从Th17/Treg失衡探讨肝纤维化“主客交浑”机制

目的:从Th17/Treg失衡探讨肝纤维化"主客交浑"机制。方法:选取健康雄性大鼠16只,随机分成正常组和模型组。采用猪血清腹腔注射法复制大鼠肝纤维化模型,造模结束后检测两组大鼠肝纤维化指标、Th17细胞和Treg细胞的相关指标,了解Th17/Treg平衡的变化情况。结果:与正常组比较,模型组大鼠肝纤维化指标LN、Ⅳ-C、PCⅢ、HA明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);模型组大鼠RORγt、Foxp3、IL-6、IL-17、IL-10、RORγt/Foxp3、IL-6/IL-10、IL-17/IL-10均较正常组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:肝纤维化大鼠出现了以Th17细胞占优势的Th17/Treg失衡,失衡的Th17/Treg可能是肝纤维化"主客交浑"的机制之一。

鼻鼽合剂对过敏性鼻炎模型小鼠体内Th17/Treg失衡的影响

目的探讨鼻鼽合剂对过敏性鼻炎(allergic rhinitis,AR)模型小鼠体内Th17/Treg失衡的影响。方法20只BALB/c雌性小鼠利用卵清蛋白溶液构建小鼠AR模型,分为模型组、鼻鼽合剂低剂量组、鼻鼽合剂高剂量组和辛芩组;另外5只为空白对照组。观察小鼠在实验过程中的精神状态、饮食饮水、活动情况以及毛发光泽度等情况以及对行为学症状分级进行评分。采用苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)观察小鼠鼻黏膜组织变化。采用实时定量聚合酶链式反应(quantitative real time-polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测小鼠肺组织中白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)、白细胞介素17(interleukin-17,IL-17)、γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、叉头样转录因子3(forkhead box p3,Foxp3)mRNA相对表达水平。结果与空白对照相比,造模后的小鼠精神萎靡,采食与饮水次数减少,出现竖毛的情况,行为学症状分级评分显示造模成功。与模型组比较,鼻鼽合剂低、高剂量组以及辛芩组的小鼠精神、饮食及毛发情况均有所改善。HE染色结果显示,模型组鼻黏膜组织可见大量炎性细胞浸润,上皮细胞排列不齐;鼻鼽合剂低、高剂量组以及辛芩组的炎性细胞明显减少。qRT-PCR结果显示,与对照组相比,模型组鼻黏膜组织中的IL-4、IL-17、IFN-γ和Foxp3的mRNA表达水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,鼻鼽合剂低、高剂量组以及辛芩组的IL-4和IL-17的mRNA表达水平显著降低(P<0.05),但IFN-γ和Foxp3的mRNA表达水平显著上升(P<0.05);鼻鼽合剂的低剂量组和高剂量组IL-4和IL-17的mRNA表达水平则都显著低于辛芩组(P<0.05),而IFN-γ和Foxp3的mRNA表达水平则都显著高于辛芩组(P<0.05)。另外,鼻鼽合剂高剂量组的IL-4和IL-17的mRNA表达量显著低于低剂量组(P<0.05),而IFN-γ和Foxp3的mRNA表达水平都显著高于低剂量组(P<0.05)。结论鼻鼽合剂能通过调节体内Th17/Treg的失衡进而缓解小鼠AR症状。

肝硬化并发SBP患者Th17/Treg失衡的临床研究

以流式细胞术检测我院42例肝硬化并发SBP患者(A组)及49例健康体检者(B组)Th17、Treg水平。A组的DBIL、TBIL、AST、ALT分别为22.61±6.85μmol/L、23.58±7.16μmol/L、132.36±42.58U/L、258.26±71.26U/L,较B组15.58±2.36μmol/L、17.25±4.20μmol/L、14.25±4.79U/L、16.35±3.85U/L明显升高,对比差异显著(P<0.05);A组Treg、Th17频数分别为7.11±2.42%、0.26±0.02%,显著高于B组5.79±1.25%、0.13±0.03%,Treg/Th17为54.92±22.38与B组(76.58±26.02)比较显著较低(P<0.05)。肝硬化并发SBP患者Th17、Treg细胞均异常升高,Th17/Treg失衡可能参与其病理改变。

卵巢子宫内膜异位囊肿患者免疫调节细胞Th17/Treg失衡的临床研究

【目的】探讨卵巢子宫内膜异位囊肿患者体内是否存在Th17/Treg失衡的现象。【方法】采用病例对照研究方法,实验组为腹腔镜术后病理确诊的卵巢子宫内膜异位囊肿患者(40例),对照组为同期因单纯输卵管因素不孕行(宫)腹腔镜联合诊治术患者(40例)。分别收集两组患者的外周血、腹腔液、在位及异位内膜组织。流式细胞术检测外周血中Th17和Treg占CD4+T细胞比例;ELISA分别检测两组患者血清及腹腔液中Th17分泌的IL-17、IL-22和Treg分泌的IL-10、TGF-β浓度;Q-PCR检测在位及异位内膜组织中Th17特异转录因子ROR-γt m RNA和Treg特异转录因子Fox P3 m RNA表达水平。【结果】(1)卵巢子宫内膜异位囊肿患者外周血中Th17占CD4+T细胞比例为(5.53±2.12)%,较对照组的(2.16±0.78)%明显升高;Treg占CD4+T细胞比例为(4.22±1.04)%较对照组的(6.14±1.52)%明显降低,外周循环中呈现Th17/Treg平衡失调现象。(2)与对照组比较,卵巢子宫内膜异位囊肿患者外周血中Th17分泌IL-17、IL-22浓度明显升高,Treg分泌TGF-β、IL-10浓度明显降低;与之相反,卵巢子宫内膜异位囊肿患者腹腔液中Th17分泌IL-17、IL-22浓度较对照组降低,Treg分泌TGF-β、IL-10的浓度明显升高。(3)卵巢子宫内膜异位囊肿患者异位内膜Treg特异转录因子Fox P3 m RNA表达水平较两组在位内膜均明显升高,Th17特异转录因子ROR-γt m RNA表达水平较两组在位内膜均明显降低。【结论】卵巢子宫内膜异位囊肿患者体内存在免疫调节细胞Th17/Treg平衡失调现象,在子宫内膜异位症发生发展的过程中出现了免疫调节的紊乱,免疫因素与内异症的发病有相关性。

呼吸道合胞病毒感染支气管上皮细胞介导IL-8致Th17/Treg失衡

目的:探讨呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染导致哮喘易感性增加的机制,观察人支气管上皮细胞感染RSV后IL-8的表达,以及IL-8对Th17/调节性T淋巴细胞(regulatory T cells,Treg)分化的调节作用。方法:将人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells,HBECs)分为对照组和RSV感染组,构建并验证RSV持续感染HBECs模型,real-time PCR检测对照组和RSV感染组中IL-8 m RNA的表达;ELISA检测感染细胞上清液中IL-8的浓度。提取健康人外周血淋巴细胞并将其分为空白对照组和IL-8作用组,参照ELISA检测到的浓度将IL-8作用于淋巴细胞24 h,采用流式细胞仪检测淋巴细胞中Th17和Treg亚群的分布情况。结果:本实验成功构建RSV持续感染HBECs模型,感染后的细胞仍能够继续分裂传代,并可检测到RSV持续存在的证据。免疫荧光显示细胞内有RSV致病蛋白的荧光表达;电镜下观察到感染细胞的线粒体水肿和内质网扩张,出现核周裂隙以及合胞现象,细胞核、胞浆内有病毒颗粒分布。Real-time PCR和ELISA分别检测到RSV感染组细胞内IL-8 m RNA表达和上清液中IL-8的分泌水平均高于对照组(均P<0.05)。进一步将IL-8作用于淋巴细胞,流式细胞学结果表明IL-8作用组淋巴细胞中Th17亚群比率增高(P<0.05),但Treg亚群比率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:RSV感染气道上皮细胞后可通过过度分泌IL-8而引起Th 17/Treg亚群分化异常。

慢性阻塞性肺病稳定期患者外周血Th17/Treg失衡情况及与预后的关系

目的:观察慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)稳定期患者外周血中Th17与Treg细胞的水平。方法:选取本院2010年1月-2012年12月间确诊的40例COPD稳定期患者,选取同期40例健康体检健康人群作为对照组,收集两组人群的外周血后采用流式细胞术检测各个人群Th17与Treg细胞亚群的比例,采用ELISA法检测血清中的IL-17、TGF-β水平,采用RT-PCR检测转录因子RORγT与Foxp3mRNA水平。结果:COPD稳定期患者外周血中Th17比例为(3.14±0.31)%,显著高于对照组人群的(1.23±0.24)%,差异有统计学意义(P<0.05);COPD稳定期患者外周血中Treg比例为(6.27±0.32)%,显著高于对照组人群的(3.43±0.32)%,差异有统计学意义(P<0.01);COPD稳定期患者外周血中IL-17水平为(89.36±4.13)pg/mL,显著高于对照组的(30.35±2.53)pg/mL,差异有统计学意义(P<0.05);COPD稳定期患者外周血中TGF-β水平为(681.45±41.65)pg/mL,显著高于对照组人群的(519.36±30.43)pg/mL,差异有统计学意义(P<0.01);COPD稳定期患者外周血转录因子Foxp3与RORγT mRNA水平均显著高于对照组人群,差异有统计学意义(均P<0.01)。COPD稳定期患者Th17、Treg比例高水平的住院天数和病死率均高于对应低水平亚组(P<0.05)。结论:Th17、Treg细胞及IL-17、TGF-β水平在COPD稳定期患者外周血表达增加,且转录因子Foxp3与RORγT mRNA水平表达增加,提示其与COPD患者的预后有关,其外周血中Th17与Treg细胞的不平衡可能参与了COPD发病和病程的进展。

Th17/Treg失衡与毛细支气管炎发病关系研究

目的:探讨毛细支气管炎患儿外周血辅助T淋巴细胞17(Th17)/调节性T淋巴细胞(Treg)和相关细胞因子的水平与本病发展的关系。方法:选取毛细支气管炎患儿83例为病例组,分为轻症组(42例)、中症组(21例)和重症组(20例),同期健康体检的儿童30名为对照组。采用流式细胞学检测外周血辅助T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)占CD4+T细胞的比值,应用ELISA方法检测血清白细胞介素6(IL-6)、IL-10、IL-17和IL-35的浓度,比较各组间上述指标差异。结果:病例组Th17细胞比值及其分泌的促炎因子IL-17、IL-6较对照组明显增高(P<0.05),而Treg细胞比值及其分泌的抑炎因子IL-10、IL-35则明显降低,重症组愈加显著(P<0.05)。Pearson相关分析显示Th17与Th17/Treg、IL-17、IL-6呈正相关;Treg与IL-10、IL-35呈正相关,与Th17/Treg负相关;Th17/Treg、Th17和IL-17与IL-35负相关(P<0.05~P<0.01)。logistic回归分析显示Th17/Treg、IL-7和IL-6是重症毛细支气管炎的危险因素(P<0.05~P<0.01)。结论:Th17/Treg失衡在毛细支气管炎发病中起着重要的作用,Th17/Treg、IL-17和IL-6是重症毛细支气管炎的危险因素。