三宝护童羹对变应性鼻炎幼鼠Th17/Treg细胞免疫失衡的影响

目的:研究三宝护童羹对变应性鼻炎幼鼠Th17/Treg细胞免疫失衡的影响。方法:将32只SD雌性大鼠幼鼠随机分为空白组、模型组、三宝护童羹组、地氯雷他定组,每组8只。除空白组外,其他组均以烟熏+大黄苦寒泻下法建立肺脾气虚证幼鼠模型,并运用腹腔注射卵清蛋白(OVA)和氢氧化铝Al(OH)3法进行基础致敏,再用OVA滴鼻法局部致敏,建立变应性鼻炎幼鼠模型。造模成功后,空白组、模型组、三宝护童羹组、地氯雷他定组分别予以生理盐水、生理盐水、三宝护童羹中药汤剂、地氯雷他定干混悬剂灌胃14天。观察幼鼠基础行为学改变,进行鼻部症状评分,HE染色观察鼻粘膜组织病理变化,采用ELISA法检测血清中白介素-17(IL-17)、转化生长因子β(TGF-β)水平,Western blot法检测脾脏中RORγt蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组鼻黏膜上皮结构破坏,纤毛杂乱,上皮水肿,杯状细胞及嗜酸性粒细胞浸润;与模型组相比较,三宝护童羹组和地氯雷他定组给药后鼻部症状评分减少(P<0.05),鼻黏膜组织上皮纤毛较为整齐,上皮水肿减轻,杯状细胞及嗜酸性粒细胞浸润减少;与模型组相比较,三宝护童羹组和地氯雷他定组IL-17水平、脾脏RORγt蛋白表达量降低(P<0.05),TGF-β水平升高(P<0.05)。结论:三宝护童羹可改善变应性鼻炎肺脾气虚证幼鼠鼻部症状,减少炎性细胞浸润,其机制可能与调节Th17/Treg细胞免疫失衡和相关蛋白表达有关。

308nm准分子激光治疗前后对寻常型银屑病患者外周血Th17/Treg细胞免疫失衡的研究

目的探讨308 nm准分子激光治疗前后寻常型银屑病患者外周血Th17细胞与Treg细胞的比例、Th17/Treg比值,分析308nm准分子激光治疗前后Th17/Treg细胞免疫失衡与银屑病发病及病情严重程度之间的关系。方法选取60例寻常型银屑病患者作为试验组,同时选20例健康人作为正常对照组,采用流式细胞术检测寻常型银屑病患者308 nm准分子激光治疗前后及正常人外周血Th17细胞和Treg细胞的比例、Th17/Treg的比值,同时以银屑病面积和严重程度指数(PASI)评分评价寻常型银屑病患者病情的严重程度。结果寻常型银屑病患者308nm准分子激光治疗前外周血Th17细胞的比例、Th17/Treg比值显著高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01);Treg细胞的比例显著低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。寻常型银屑病患者308 nm准分子激光治疗后外周血Th17细胞的比例、Th17/Treg比值显著低于治疗前(P<0.01);Treg细胞的比例显著高于治疗前(P<0.01)。寻常型银屑病患者308 nm准分子激光治疗后外周血Th17细胞的比例、Treg细胞的比例、Th17/Treg比值与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。寻常型银屑病患者PASI评分与Th17细胞的比例呈正相关(P<0.01);而Treg细胞的比例与疾病严重程度之间无相关性(P>0.05)。结论 Th17/Treg细胞免疫失衡可能对银屑病的发病至关重要,308 nm准分子激光治疗可望通过调节患者外周血Th17细胞与Treg细胞的比例,从而调节Th17/Treg细胞失衡达到治疗银屑病的目的。

血清IL-17、HMGB1的水平与原因不明复发性流产患者发病及Th17/Treg细胞免疫失衡的关系

目的:探究HMGB1的水平和原因不明复发性流产(URSA)患者发病、Th17/Treg细胞免疫失衡之间的联系。方法:选取我院于2020-03~2021-03收治的原因不明复发性流产患者34例(研究组)以及健康孕妇34例(参照组)为研究对象,所有的患者均进行Th17细胞流式检测盒测定Th17,Treg细胞,并开展酶联免疫吸附实验检测,分析患者的HMGB1、IL-6、IL-17、IL-10、TGF-β含量。结果:研究组HMGB1、晚期糖基化终产物,Th17、Th17/Treg含量高于参照组,研究组Treg含量低于参照组,存在统计学意义(P<0.05);研究组IL-6、IL-17高于参照组,研究组IL-10、TGF-β含量低于参照组,组间存在统计学意义(P<0.05);HMGB1和Th17、Th17/Treg、晚期糖基化终产物、IL-6、IL-17呈现出正相关性(r=0.457、0.490、0.530、0.400、0.440,P均<0.05);和Treg、IL-10、TGF-β呈现出负相关性(r=-0.554、-0.526、-0.440,P均<0.05)。结论:URSA患者HMGB1、Th17、Th17/Treg含量均较高,HMGB1升高的同时还会直接或者间接打破了Th17/Treg细胞免疫平衡关系,流产概率较高。

银杏提取物对UC大鼠肠黏膜屏障功能的改善作用及对Th17/Treg细胞免疫稳态的影响

目的:探究银杏提取物对溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠黏膜屏障功能的改善作用及对Th17/Treg细胞免疫稳态的影响。方法:雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组及银杏提取物低、中、高剂量组,除正常对照组外其余各组大鼠均给予硝基苯磺酸、乙醇复合诱导建立UC大鼠模型。造模成功后各给药组灌胃相应剂量药物,正常对照组和模型组大鼠灌胃相应体积生理盐水,共给药14 d。记录各组大鼠一般状态,并追踪记录疾病活动指数(DAI),采用腹壁回撤反应(AWR)检测大鼠内脏敏感程度,检测各组大鼠外周血Th17、Treg细胞比例和血清IL-2、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α水平,检测肠道菌群及结肠组织中TLR4、NOD2 mRNA及蛋白表达。结果:与治疗前比较,各给药组大鼠饮水量、体质量、肛温显著升高,DAI显著降低(P<0.05)。与正常对照组比较,模型组大鼠饮水量、体质量、肛温显著降低,DAI、AWR显著升高,外周血Treg细胞比例及血清IL-2、IL-10水平显著降低,外周血Th17细胞比例及Th17/Treg和血清IL-6、IL-8、TNF-α水平显著升高,肠道大肠杆菌、肠球菌水平显著升高,乳酸杆菌、双歧杆菌水平显著降低,结肠组织中TLR4、NOD2 mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.05)。与模型组比较,银杏提取物各剂量组大鼠饮水量、体质量、肛温显著升高,DAI、AWR显著降低,外周血Treg细胞比例及血清IL-2、IL-10水平显著升高,外周血Th17细胞比例及Th17/Treg和血清IL-6、IL-8、TNF-α水平显著降低,肠道大肠杆菌、肠球菌水平显著降低,乳酸杆菌、双歧杆菌水平显著升高,结肠组织中TLR4、NOD2 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05)。银杏提取物的作用呈现剂量依赖性。结论:银杏提取物可降低UC大鼠结肠组织TLR4、NOD2 mRNA及蛋白表达,改善肠黏膜屏障功能,维持Th17/Treg细胞免疫稳态,抑制其炎症反应。

中医药调控白癜风Th17/Treg细胞失衡的研究进展

白癜风是一种临床常见的慢性炎症性色素脱失性皮肤疾病,在世界范围内的患病率约为0.5%~2%^([1])。目前对于本病的发病机制尚不清楚,有多种学术假说被提出来进行解释,如氧化应激理论、神经体液假说等,但是自身免疫学说是最被认可的一种,同时动物模型和人体研究也都强调了免疫系统在白癜风中的重要作用^([2-4])。皮肤作为人体最大的器官,是机体抵御外来感染的第一道防线。

枯芩与条芩提取物对湿热型溃疡性结肠炎大鼠Th17/Treg免疫失衡的调节机制研究

目的比较枯芩、条芩提取物对湿热型溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠模型辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞因子及转录因子维甲酸相关孤儿受体(ROR-γt)/叉头翼状螺旋转录因子3(Foxp3)表达的影响。方法50只健康SD大鼠随机分为5组:正常组、模型组、枯芩组、条芩组和美莎拉嗪组,每组10只。采用高脂高糖饲料喂养+高度白酒灌胃+5%葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)联合诱导法,建立湿热型UC大鼠模型;各组分别于造模第1天开始灌胃给药,枯芩组、条芩组给药剂量均为5.25 g·kg^(-1)·d^(-1),美沙拉嗪组给药剂量为0.266 g·kg^(-1)·d^(-1),正常组、模型组灌服等体积生理盐水。连续给药28 d。给药结束后,麻醉大鼠,腹主动脉取血,分离血清,Elisa法检测大鼠血清白介素-6(IL-6)、IL-17A、IL-10、转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))水平;分离脾脏和结肠组织,采用流式细胞术检测脾脏Th17、Treg细胞比例,计算Th17/Treg比值;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测结肠组织ROR-γt、Foxp3 mRNA表达水平;免疫蛋白印迹(western blot)法检测结肠组织ROR-γt、Foxp3蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组大鼠血清IL-6、IL-17A、脾脏Th17细胞比例、Th17/Treg、结肠组织ROR-γt mRNA和蛋白表达水平均显著增加(P<0.01),血清IL-10、IL-35、TGF-β_(1)、脾脏Treg细胞比例、结肠组织Foxp3 mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.01);给药28 d后,与模型组比较,各给药组大鼠血清IL-6、IL-17A、脾脏Th17细胞比例、Th17/Treg、结肠组织ROR-γt mRNA和蛋白表达水平出现不同程度的降低(P<0.05或P<0.01),血清IL-10、IL-35、TGF-β_(1)、脾脏Treg细胞比例、结肠组织Foxp3 mRNA和蛋白表达水平出现不同程度的升高(P<0.05或P<0.01);与枯芩组比较,条芩组、美沙拉嗪组在降低IL-6、IL-17A,增加IL-10、IL-35、TGF-β_(1)水平,调节ROR-γt mRNA和蛋白表达方面(P<0.05或P<0.01)均优于枯芩组。结论枯芩、条芩可能通过调控转录因子ROR-γt、Foxp3表达,恢复Th17/Treg免疫失衡,抑制炎症反应,从而保护肠道黏膜屏障受损,发挥治疗湿热型UC的作用。

血清HSP60、HSP70水平与原发性免疫性血小板减少症患儿Th17/Treg细胞和预后的关系

目的分析血清热休克蛋白60(HSP60)、热休克蛋白70(HSP70)与原发性免疫性血小板减少症(ITP)患儿辅助性T细胞17/调节性T细胞(Th17/Treg)和预后的关系。方法选取2020年6月—2022年6月保山市人民医院儿科诊治的ITP患儿128例作为病例组,另选同期体检健康儿童60例作为健康对照组。检测并比较2组血清HSP60、HSP70与Th17/Treg细胞水平。Pearson法分析血清HSP60、HSP70与Th17/Treg细胞的相关性。ITP患儿出院后随访1年,根据不同预后情况分为预后良好亚组(107例)和预后不良亚组(21例)。收集ITP患儿的临床资料,采用单因素、多因素Logistic回归模型分析ITP患儿预后的影响因素,并构建风险预测列线图模型。建立受试者工作特征(ROC)曲线分析血清HSP60、HSP70与Th17/Treg细胞对ITP患儿预后的预测价值。结果病例组血清HSP60、HSP70水平及Th17/Treg细胞显著高于健康对照组(t/Z/P=20.445/<0.001、17.467/<0.001、5.823/<0.001)。Pearson相关分析显示,血清HSP60、HSP70与Th17/Treg细胞呈正相关(r/P=0.417/<0.001、0.348/<0.001)。多因素Logistic回归分析显示,HSP60高、HSP70高、Th17/Treg高为ITP患儿预后不良的独立危险因素[OR(95%CI)=1.177(1.041~1.331),1.181(1.038~1.343),9.895(2.171~68.177)],初诊时PLT计数偏高则为保护因素[OR(95%CI)=0.848(0.726~0.990)]。ROC曲线分析结果显示,初诊时PLT、HSP60、HSP70、Th17/Treg水平及列线图模型的曲线AUC分别为0.793、0.730、0.787、0.840、0.975;Bootstrap法(B=1000)对列线图模型进行内部验证显示,Bias-corrected预测曲线与Ideal线基本重合,该模型预测能力较好。决策曲线显示,该模型的阈值概率范围为0.01~0.98,其净收益率>0,高于两条无效线。结论IPT患儿血清HSP60、HSP70、Th17/Treg水平均明显升高,血清HSP60、HSP70与Th17/Treg呈显著正相关。初诊时PLT、HSP60、HSP70、Th17/Treg水平是ITP患儿预后不良的影响因素,且基于HSP60、HSP70等独立危险因素构建的列线图模型对ITP患儿预后不良具有较好的预测价值。

黄连素介导NF-κB/LCN2信号通路改善COPD诱导的Th17/Treg细胞失衡

目的通过构建慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠模型,探讨黄连素是否通过调节NF-κB/LCN2信号通路改善COPD诱导的Th17/Treg细胞失衡。方法将50只Wistar大鼠随机分为对照组(Control组)、慢性阻塞性肺病组(COPD组)、黄连素组(Berberine组)、黄连素+过表达对照组(Berberine+ov-NC组)和黄连素+过表达LCN2组(Berberine+ov-LCN2组),每组10只。Western blotting检测肺组织p-NF-κB、LCN2、IL-17和IL-10蛋白表达;HE染色观察大鼠肺组织病理形态变化;流式细胞术检测大鼠外周血Th17/Treg细胞比例;ELISA检测大鼠血清中IL-17和IL-10水平。结果对照组大鼠肺组织结构完整;与Control组相比,COPD组大鼠肺组织结构损伤,肺组织中p-NF-κB和LCN2蛋白表达显著升高,外周血中Th17细胞比例显著升高,Treg细胞比例显著降低,血清中IL-17水平和肺组织中IL-17蛋白表达显著升高,血清中IL-10水平和肺组织中IL-10蛋白表达显著降低(P<0.05);与COPD组相比,Berberine组和Berberine+ov-NC组大鼠肺组织损伤改善,肺组织中p-NF-κB和LCN2蛋白表达显著降低,外周血中Th17细胞比例显著降低,Treg细胞比例显著升高,血清中IL-17水平和肺组织中IL-17蛋白表达显著降低,血清中IL-10水平和肺组织中IL-10蛋白表达显著升高(P<0.05);与Berberine组和Berberine+ov-NC组相比,Berberine+ov-LCN2组大鼠肺组织损伤加重,肺组织中LCN2蛋白表达显著升高,外周血中Th17细胞比例显著升高,Treg细胞比例显著降低,血清中IL-17水平和肺组织中IL-17蛋白表达显著升高,血清中IL-10水平和肺组织中IL-10蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论黄连素治疗通过下调LCN2表达改善COPD大鼠肺损伤以及Th17/Treg细胞失衡,其机制可能与抑制NF-κB/LCN2信号通路有关。

COPD患者Treg/Th17免疫失衡及血清PCT水平与急性加重发作风险的关系

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)免疫失衡及血清降钙素原(PCT)水平与急性加重发作风险的关系。方法回顾性分析2020年6月至2023年6月在西安医学院第二附属医院进行诊治的80例COPD患者临床资料,依据病情划分为COPD稳定期(SCOPD组,48例)和COPD急性加重期(AECOPD组,32例)。观察两组患者基础资料差异,采用多因素logistic回归分析AECOPD的危险因素,绘制受试者操作特征曲线(ROC)分析各项血清指标评估AECOPD的效能,采用Spearman相关性分析外周血Treg、Th17、Treg/Th17及PCT水平与AECOPD的关系。采用χ^(2)检验、t检验。结果AECOPD组中男20例,女12例,年龄(59.66±9.17)岁,病程(9.16±2.52)年;SCOPD组中男28例,女20例,年龄(60.13±9.05)岁,病程(8.98±2.14)年。AECOPD组Treg、Treg/Th17均低于SCOPD组[(2.52±0.48)%比(3.61±0.73)%、(0.54±0.16)比(1.10±0.33)],差异均有统计学意义(t=7.435、8.913,均P<0.001);AECOPD组Th17、PCT水平均高于SCOPD组[(4.64±0.95)%比(3.28±0.69)%、(1.33±0.46)μg/L比(0.75±0.32)μg/L],差异均有统计学意义(t=7.417、6.656,均P<0.001)。经多因素logistic回归分析证实,Treg、Th17、Treg/Th17、PCT均是AECOPD的影响因素(均P<0.05)。ROC分析结果显示,外周血Treg、Th17、Treg/Th17及PCT水平均可用于AECOPD的评估,曲线下面积分别为0.895、0.910、0.932、0.803(均P<0.001)。相关性分析显示,外周血Treg、Treg/Th17均与AECOPD呈负相关,Th17、PCT水平均与AECOPD呈正相关(均P<0.05)。结论Treg、Th17、Treg/Th17、PCT均是AECOPD的影响因素,且与AECOPD密切相关,可将以上指标作为评估AECOPD的标志物,为临床防治AECOPD提供参考。

性激素和Treg/Th17失衡在自身免疫性肝炎中的作用及研究进展

自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)是一种典型的自身免疫介导的肝脏疾病,大多数患者起病隐匿,无特定的临床表现,且检出率呈逐年上升趋势。其发病机制与T淋巴细胞介导的免疫调节紊乱,尤其是Treg/Th17失衡密切相关。AIH好发于围绝经期女性,性激素在免疫反应中起重要作用,其可通过影响免疫细胞的表达进而引起AIH的发生、发展。本文就性激素和Treg/Th17失衡在AIH中的作用及研究进展作一综述。

血必净对抗NMDA受体脑炎模型小鼠脑组织损伤及脑脊液中Th17/Treg免疫失衡的改善作用

目的:探讨血必净对抗N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体脑炎模型小鼠脑组织损伤及脑脊液(CSF)中辅助性T淋巴细胞17(Th17)/调节性T淋巴细胞(Treg)免疫失衡的影响,阐明其治疗作用。方法:60只健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组、低剂量血必净组和高剂量血必净组,每组15只。除对照组外,其余3组小鼠均给予抗原注射与免疫刺激结合法建立抗NMDA受体脑炎模型,低和高剂量血必净组小鼠分别给予腹腔注射5和10 mL·kg-1血必净注射液。采用HE染色观察各组小鼠脑组织病理形态表现,TUNEL法检测各组小鼠脑组织海马CA1区神经元凋亡率,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组小鼠血清中白细胞介素(IL)-6、IL-10、IL-17和转化生长因子β(TGF-β)水平,流式细胞术检测各组小鼠CSF中Th17和Treg细胞百分率,Western blotting法检测各组小鼠脑组织中维甲酸相关核孤儿受体(RORγt)、叉头状转录因子3(Foxp3)、IL-10和IL-17蛋白表达水平,免疫组织化学染色法检测各组小鼠脑组织中IL-17和Foxp3阳性细胞率。结果:HE染色,对照组小鼠脑组织海马CA1区结构清晰,未见明显病变;与对照组比较,模型组小鼠脑组织海马CA1区部分锥体细胞呈三角形固缩浓染,顶树突拉长,少数神经细胞脱失,组织稀疏;与模型组比较,低和高剂量血必净组小鼠脑组织海马CA1区细胞损伤减小,形态恢复正常,排列较为整齐,且高剂量血必净组小鼠脑组织海马CA1区损伤的改善情况更明显。TUNEL法,与对照组比较,模型组小鼠脑组织海马CA1区神经元凋亡率明显升高(P<0.05);与模型组比较,低和高剂量血必净组小鼠脑组织海马CA1区神经元凋亡率明显降低(P<0.05);与低剂量血必净组比较,高剂量血必净组小鼠脑组织海马CA1区神经元凋亡率明显降低(P<0.05)。ELISA法,与对照组比较,模型组小鼠血清中IL-6和IL-17水平明显升高(P<0.05),IL-10和TGF-β水平明显降低(P<0.05);与模型组比较,低和高剂量血必净组小鼠血清中IL-6和IL-17水平明显降低(P<0.05),IL-10和TGF-β水平明显升高(P<0.05);与低剂量血必净组比较,高剂量血必净组小鼠血清中IL-6和IL-17水平明显降低(P<0.05),IL-10和TGF-β水平明显升高(P<0.05)。流式细胞术,与对照组比较,模型组小鼠CSF中CD4+IL-17A+Th17细胞百分率明显升高(P<0.05),CD25+Foxp3+Treg细胞百分率明显降低(P<0.05);与模型组比较,低和高剂量血必净组小鼠CSF中CD4+IL-17A+Th17细胞百分率明显降低(P<0.05),CD25+Foxp3+Treg细胞百分率明显升高(P<0.05);与低剂量血必净组比较,高剂量血必净组小鼠CSF中CD4+IL-17A+Th17细胞百分率明显降低(P<0.05),CD25+Foxp3+Treg细胞百分率明显升高(P<0.05)。Western blotting法,与对照组比较,模型组小鼠脑组织中RORγt和IL-17蛋白表达水平明显升高(P<0.05),Foxp3和IL-10蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与模型组比较,低和高剂量血必净组小鼠脑组织中RORγt及IL-17蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Foxp3和IL-10蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与低剂量血必净组比较,高剂量血必净组小鼠脑组织中RORγt和IL-17蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Foxp3和IL-10蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。免疫组织化学染色法,与对照组比较,模型组小鼠脑组织中IL-17阳性细胞率明显升高(P<0.05),Foxp3阳性细胞率明显降低(P<0.05);与模型组比较,低和高剂量血必净组小鼠脑组织中IL-17阳性细胞率明显降低(P<0.05),Foxp3阳性细胞率明显升高(P<0.05);与低剂量血必净组比较,高剂量血必净组小鼠脑组织中IL-17阳性细胞率明显降低(P<0.05),Foxp3阳性细胞率明显升高(P<0.05)。结论:血必净能够有效改善抗NMDA受体脑炎小鼠脑组织损伤,调控细胞因子水平,干预抗NMDA受体脑炎小鼠Th17/Treg免疫失衡现象。

小儿定喘颗粒改善Th17/Treg免疫失衡减轻RSV感染诱导哮喘小鼠气道炎症

目的探讨小儿定喘颗粒对呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)感染诱导哮喘小鼠肺组织炎症反应的影响及机制。方法将60只SPF级雄性Balb/c小鼠随机分为空白组,模型组,小儿定喘颗粒高、中、低剂量组,阳性药(地塞米松)对照组,每组10只。除空白组外,其它组采用呼吸道合胞病毒、复合鸡卵蛋白(Ovalbumin,OVA)雾化吸入激发哮喘,造模成功后连续给药2周。HE染色法观察小鼠肺组织病理学改变;Masson与过碘酸-雪夫染色(PAS)染色法观察气道胶原沉积和黏液情况;ELISA法检测肺组织、血清中IL-6、lL-10、IL-17和TGF-β细胞因子含量;Western Blot检测STAT3、p-STAT3、RORγt、Foxp3蛋白表达水平,qRT-PCR检测RORγt、Foxp3mRNA表达。结果HE染色显示模型组小鼠气道结构改变,炎性分泌物增多,Masson、PAS染色发现模型组中气道黏液、胶原沉积显著增高;与模型组相比,小儿定喘颗粒各剂量组及地塞米松组小鼠气道结构逐渐恢复,黏液储备与胶原沉积情况改善;与空白组相比,模型组肺组织、血清中IL-6、IL-17和TGF-β细胞因子含量明显升高,lL-10含量下降(P<0.01),小儿定喘颗粒各剂量组与地塞米松组IL-6、IL-17和TGF-β细胞因子表达下降,lL-10表达增高(P<0.01);与空白组组比较,模型组p-STAT3、RORγt显著升高,Foxp3蛋白表达显著降低(P<0.01);与空白组相比,模型组RORγt、Foxp3mRNA含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,小儿定喘颗粒各剂量组及地塞米松组RORγt、Foxp3mRNA表达均显著降低(P<0.01)。结论小儿定喘颗粒可以改善Th17/Treg免疫失衡抑制,降低血清及肺组织中IL-6、lL-10、IL-17和TGF-β水平,减少炎细胞迁移、气道炎性浸润及胶原沉积情况,减轻RSV诱导的哮喘小鼠气道炎症反应。

基于Th17/Treg细胞失衡浅析温阳发汗法治疗白癜风

白癜风易诊难治,是皮肤科的疑难杂病,发病率呈逐年上升的趋势。当前研究认为免疫学说在白癜风的发病机制占据重要地位,特别是辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)间的免疫失衡,已成为近些年的研究热点之一。汗法作为八法之首,可以调和营卫,开泄肌腠,常作为皮肤疾病的治疗法则。古代典籍中亦有白为寒的论述,说明白癜风的治疗可从寒论治。现代研究认为热刺激能够改善血液运行,促进局部微循环,增强酪氨酸酶的活性,从而提高白癜风患者皮损部位的复色率。文章从Th17/Treg细胞失衡的角度探讨了温阳发汗法治疗白癜风,以期为临床治疗提供理论依据与参考。

基于Th17/Treg细胞免疫平衡探讨升阳益胃汤治疗特发性膜性肾病的作用及机制

[目的]探讨升阳益胃汤对膜性肾病(MN)大鼠模型的保护作用及机制。[方法]将40只雄性SD大鼠随机分为对照组10只和造模组30只,造模组尾静脉注射羊抗大鼠FX1A血清制备海曼(Heymann)肾炎模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、升阳益胃汤组和盐酸贝那普利组各10只,并予以相应药物灌胃。干预6周后,检测24 h尿蛋白(24 h-UTP)、总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN);取肾组织行苏木素-伊红(HE)、马松(Masson)和六胺银(PASM)染色,观察肾组织病理形态变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)法检测肾组织白细胞介素-17A(IL-17A)、白细胞介素-10(IL-10)、α-辅肌动蛋白-4(α-actinin-4)、足糖萼蛋白[Podocalyxin(Podxl)]表达情况;取大鼠脾脏检测Th17和Treg细胞数量。[结果]与对照组相比,模型组大鼠24 h-UTP、TC、TG水平显著升高,TP、Alb水平显著降低(P<0.01),Scr、BUN水平差别无统计学意义(P>0.05);模型组肾脏病理改变明显;α-actinin-4、Podxl表达均明显减少(P<0.01、P<0.05),IL-17A水平显著升高,IL-10水平明显降低(P<0.01);Th17%、Th17/Treg显著升高,Treg%显著降低(P<0.01)。与模型组相比,各治疗组24 h-UTP、TC、TG、TP水平显著降低(P<0.05或P<0.01),Alb水平明显升高(P<0.05);肾脏病理改变减轻。其中,Z组α-actinin-4、Podxl表达明显增加(P<0.05或P<0.01);IL-17A、Th17%、Th17/Treg水平明显降低,IL-10、Treg%水平升高(P<0.05或P<0.01)。[结论]升阳益胃汤可降低膜性肾病大鼠蛋白尿,减轻肾脏病理损伤,并提高足细胞α-actinin-4、Podxl的表达,具有明显的肾脏保护作用,其作用机制可能与调节Th17/Treg免疫平衡有关。

Th17和Treg细胞在自身免疫性肝炎发生发展中的作用研究进展

自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)是一种由免疫介导的慢性肝脏疾病,酒精、药物、毒素等为其诱导因素,至今其发病机制尚未完全阐明,在治疗上尚以缓解症状、延缓疾病进展为主。由于其免疫特性,T细胞作为免疫应答反应的主要细胞之一引起了人们的关注。近些年来国内外学者通过对AIH免疫机制的深入研究发现Th17与Treg细胞在AIH中的发生发展中起着关键作用。本文从自身免疫反应出发,阐明Th17和Treg细胞除了其自身单独作用之外,在数量和功能方面还会互相影响,并且IL-17、IL-6、RORγt、FoxP3等相关细胞因子也可以通过影响Th17细胞和/或Treg细胞水平进而影响AIH的发生发展。

卵巢子宫内膜异位囊肿患者免疫调节细胞Th17/Treg失衡的临床研究

【目的】探讨卵巢子宫内膜异位囊肿患者体内是否存在Th17/Treg失衡的现象。【方法】采用病例对照研究方法,实验组为腹腔镜术后病理确诊的卵巢子宫内膜异位囊肿患者(40例),对照组为同期因单纯输卵管因素不孕行(宫)腹腔镜联合诊治术患者(40例)。分别收集两组患者的外周血、腹腔液、在位及异位内膜组织。流式细胞术检测外周血中Th17和Treg占CD4+T细胞比例;ELISA分别检测两组患者血清及腹腔液中Th17分泌的IL-17、IL-22和Treg分泌的IL-10、TGF-β浓度;Q-PCR检测在位及异位内膜组织中Th17特异转录因子ROR-γt m RNA和Treg特异转录因子Fox P3 m RNA表达水平。【结果】(1)卵巢子宫内膜异位囊肿患者外周血中Th17占CD4+T细胞比例为(5.53±2.12)%,较对照组的(2.16±0.78)%明显升高;Treg占CD4+T细胞比例为(4.22±1.04)%较对照组的(6.14±1.52)%明显降低,外周循环中呈现Th17/Treg平衡失调现象。(2)与对照组比较,卵巢子宫内膜异位囊肿患者外周血中Th17分泌IL-17、IL-22浓度明显升高,Treg分泌TGF-β、IL-10浓度明显降低;与之相反,卵巢子宫内膜异位囊肿患者腹腔液中Th17分泌IL-17、IL-22浓度较对照组降低,Treg分泌TGF-β、IL-10的浓度明显升高。(3)卵巢子宫内膜异位囊肿患者异位内膜Treg特异转录因子Fox P3 m RNA表达水平较两组在位内膜均明显升高,Th17特异转录因子ROR-γt m RNA表达水平较两组在位内膜均明显降低。【结论】卵巢子宫内膜异位囊肿患者体内存在免疫调节细胞Th17/Treg平衡失调现象,在子宫内膜异位症发生发展的过程中出现了免疫调节的紊乱,免疫因素与内异症的发病有相关性。

免疫性血小板减少症患者外周血Th17/Treg细胞比率失衡的研究

本研究检测免疫性血小板减少症(ITP)患者外周血中Th17细胞和调节性T细胞(Treg)的表达并初步阐明Th17/Treg细胞比率失衡在ITP中的作用及意义。ITP患者根据血小板计数及治疗效果分为治疗前组(活动组38例)、治疗后组(缓解组24例、部分缓解组10例、未缓解组4例),30例健康体检者设为对照组。用流式细胞术检测ITP患者、健康者外周血Th17细胞及Treg细胞分别占CD4+T细胞的百分率。结果表明,活动组、未缓解组Th17细胞的百分率均高于对照组(p<0.05);缓解组、部分缓解组亦高于对照组,但均无统计学意义(p>0.05);缓解组低于活动组,但无统计学意义(p>0.05)。活动组、部分缓解组、未缓解组Treg细胞百分率均明显低于对照组(p<0.01);缓解组亦低于对照组,但无统计学意义(p>0.05);缓解组高于活动组(p<0.05)。活动组、部分缓解组、未缓解组Th17/Treg细胞比率均高于对照组(p<0.05);缓解组亦高于对照组,但无统计学意义(p>0.05);缓解组低于活动组(p<0.05)。结论 :ITP患者活动组Th17细胞百分率、Th17/Treg细胞比率升高。ITP患者活动组、部分缓解组、未缓解组Treg细胞百分率降低,缓解组Treg细胞百分率较活动组升高。Th17/Treg细胞比率失衡在ITP的发病机制中可能有重要作用。

汉黄芩素促进自身免疫性肝炎模型大鼠Th17/Treg细胞平衡

目的探讨汉黄芩素(WG)对自身免疫性肝炎(AIH)大鼠Th17/Treg细胞平衡的影响。方法随机选出10只大鼠作为对照组,其余大鼠通过尾静脉注射伴刀豆球蛋白A(ConA,12.5 mg/kg)溶液构建AIH模型大鼠。将造模成功大鼠随机平分为AIH组、L-WG组(10 mg/kg)、M-WG组(20 mg/kg)、H-WG组(30 mg/kg)、H-WG+VPA组[30 mg/kg WG+300 mg/kg Notch信号通路激活剂丙戊酸(VPA)],每组10只,每天给药1次,持续10 d。ELISA检测血清中炎性因子及肝功能指标;HE染色观察肝脏组织病理形态;流式细胞测量术检测脾脏Th17/Treg细胞水平;Western blot检测脾脏类视黄酸相关孤儿受体γt(RORγt)、叉头框蛋白P3(Foxp3)以及肝组织Notch信号通路蛋白质的表达。结果对照组大鼠肝组织结构正常,染色清晰;AIH组大鼠肝组织细胞出现水肿,细胞体积增大导致肝窦受压变窄,出现大量炎性细胞浸润以及少量坏死现象。AIH组较对照组丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性、白介素(IL)-17和IL-23含量、Th17细胞水平、Th17/Treg、RORγt、Notch、hes家族bHLH转录因子1(HES1)、含YRPW基序的bHLH转录因子hes相关家族1(HEY1)蛋白表达均显著上升(P<0.05),IL-10和TNF-β含量、Treg细胞水平、Foxp3蛋白水平均显著下降(P<0.05);与AIH组相比,L-WG组、M-WG组、H-WG组肝损伤情况得到改善,ALT、AST活性、IL-17和IL-23含量、Th17细胞水平、Th17/Treg、RORγt、Notch、HES1、HEY1蛋白表达均显著降低(P<0.05),IL-10和TNF-β含量、Treg细胞水平、Foxp3蛋白水平均显著升高(P<0.05);VPA逆转了H-WG对AIH大鼠的改善效果。结论WG可能通过下调Notch信号通路促进AIH大鼠Th17/Treg细胞平衡。

Th17与Treg细胞免疫失衡在慢性乙型病毒性肝炎发病过程中的调节作用

目的:研究Th17/Treg细胞免疫失衡在慢性乙型病毒性肝炎不同阶段的作用.方法:选取重庆医科大学附属第二医院感染科慢性乙肝患者65例,其中包括7例无症状携带者(AsC),38例慢性乙肝轻、中度患者(CHB-LM),20例慢性重型肝炎患者(CSHB).另有10例健康对照者(HC).用流式细胞术检测外周血中Th17与Treg细胞的频数,并用ELISA方法检测相关细胞因子IL-17,IL-1β,IL-6,IL-21和TGF-β的水平.结果:Th17细胞在CSHB组中的频数明显增加,Treg细胞在AsC组中的比例最高,Th17细胞与Treg细胞之间存在负相关,相关细胞因子(IL-1β,IL-6和IL-21)在CSHB组中的表达均增加,TGF-β因子在各组中无明显变化.结论:Th17与Treg细胞在慢性乙型病毒性肝炎不同疾病阶段存在免疫失衡.在免疫耐受阶段(AsC),Treg细胞发挥主要作用,而在严重炎症活动阶段,Th17细胞发挥主要作用.

HIF-1α介导Th17细胞/调节性T细胞失衡在炎症性自身免疫性疾病中的作用研究进展

辅助性T细胞17/调节性T细胞(Th17细胞/Treg)平衡是机体维持免疫稳态的重要机制,该平衡的失调引起感染性疾病、自身免疫性疾病和肿瘤等炎症性疾病的发生。研究发现介导Th17细胞/Treg失衡的可能途径之一为炎症环境引起的缺氧诱导因子1α(HIF-1α)水平升高,进而在促进Th17细胞发挥免疫炎症作用的同时,抑制Treg的免疫调节功能。HIF-1α可通过介导Th17细胞/Treg失衡参与系统性红斑狼疮(SLE)和风湿性关节炎(RA)等多种疾病的免疫病理损伤,研究HIF-1α介导Th17细胞/Treg失衡的作用及分子机制是阐明多种炎症性自身免疫性疾病发病机制的重要方向之一。