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基于肠道菌群调控作用探讨强直性脊柱炎肾虚督寒证患者Th17分化偏移及雷氏银盏隔姜灸的治疗作用 被引量:2
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作者 王臣大 张志忠 +1 位作者 陶玮 董虹丽 《中国中医药科技》 CAS 2023年第4期631-634,688,共5页
目的:基于肠道菌群调控探讨强直性脊柱炎(AS)肾虚督寒证患者辅助性T细胞17(Th17)分化偏移及雷氏银盏隔姜灸的治疗作用。方法:选择90例肾虚督寒证AS患者,采用随机数表法分为两组。对照组给予常规西药治疗,观察组在对照组基础上联用雷氏... 目的:基于肠道菌群调控探讨强直性脊柱炎(AS)肾虚督寒证患者辅助性T细胞17(Th17)分化偏移及雷氏银盏隔姜灸的治疗作用。方法:选择90例肾虚督寒证AS患者,采用随机数表法分为两组。对照组给予常规西药治疗,观察组在对照组基础上联用雷氏银盏隔姜灸,均连续治疗3个月;评价两组临床疗效,比较治疗前后中医证候积分、肠道菌群、Th17、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-22(IL-22))表达水平。结果:观察组肾虚督寒证AS患者临床有效率(95.6%)高于对照组(80.0%)(P<0.05)。治疗后观察组肾虚督寒证证候积分低于对照组(P<0.05)。肠道菌群在门水平上,两组患者均由拟杆菌门、变形菌门、厚壁菌门、梭杆菌门和放线菌门等构成,其中拟杆菌门、变形菌门、厚壁菌门三者为优势门,占比约90%,两组治疗前基本一致;治疗后观察组拟杆菌门、变形菌门相对丰度较治疗前增加,而厚壁菌门较治疗前降低,对照组总体菌群相对丰度变化不大。肠道菌群属水平上,两组患者均由类杆菌、拟杆菌门、链球菌、肠杆菌、乳酸杆菌、双歧杆菌、普雷沃氏菌、其他菌构成,两组治疗前基本一致;治疗后观察组拟杆菌门相对丰度较治疗前增加,而链球菌较治疗前降低,对照组总体菌群相对丰度变化不大。治疗后观察组Th17、IL-17、IL-22水平均低于对照组(P<0.05)。结论:雷氏银盏隔姜灸应用于肾虚督寒证AS的治疗临床效果显著,可有效降低中医证候积分,通过调节肠道菌群,改善Th17、IL-17、IL-22水平。 展开更多
关键词 强直性脊柱炎 肾虚督寒证 th17分化 雷氏银盏隔姜灸 肠道菌群
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黄芪甲苷通过PPARγ抑制Th1、Th17分化改善自身免疫性脑脊髓炎 被引量:9
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作者 梁莉 鲁佑瑜 +3 位作者 劳小平 张兆 林椿人 张炜志 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期954-961,共8页
目的探讨黄芪甲苷实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)治疗作用及其机制。方法采用髓磷脂少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG35-55)免疫C57BL/6小鼠构建EAE模型,随机分为对照(PBS)组与黄芪甲苷(AS-IV)组(100 mg/kg)。免疫前3天连续腹腔注射黄芪甲苷... 目的探讨黄芪甲苷实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)治疗作用及其机制。方法采用髓磷脂少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG35-55)免疫C57BL/6小鼠构建EAE模型,随机分为对照(PBS)组与黄芪甲苷(AS-IV)组(100 mg/kg)。免疫前3天连续腹腔注射黄芪甲苷,免疫后隔天注射,持续观察小鼠发病情况。取脊髓切片HE染色观察炎性细胞浸润,LFB染色评估脊髓髓鞘脱失,流式细胞数检测CD4^(+)T细胞向Th1与Th17细胞分化比例。提取正常小鼠脾脏中CD4^(+)T细胞,在细胞因子作用下诱导分化,加入不同剂量黄芪甲苷与PPARγ抑制剂T0070907探究其对CD4^(+)T细胞分化的影响。采用Western blot检测PPARγ、NF-κB与NLRP3表达。结果与对照组相比,AS-IV组EAE小鼠发病率降低,发病时间延迟,且骨髓炎性细胞浸润减少,髓鞘脱失抑制,脾脏与脊髓中Th1与Th17细胞表型的含量减少。体外实验中,黄芪甲苷剂量依赖性减少了CD4^(+)T细胞向Th1与Th17细胞表型分化,然而,T0070907逆转了黄芪甲苷的抑制作用。与此同时,无论是在体内还是体外实验中,黄芪甲苷有效增加了PPARγ表达,减少了p-NF-κB与NLRP3表达水平。结论黄芪甲苷通过激活PPARγ,介导NF-κB信号通路抑制,减少CD4^(+)T细胞向Th1与Th17细胞分化,减轻小鼠EAE症状。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎 CD4+T细胞 PPARΓ th1/th17分化
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miR-322-5p靶向Akt3抑制Th17分化对干扰素β干预实验性自身免疫性脑脊髓炎的影响 被引量:5
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作者 金书欣 吴婷 +3 位作者 蔡飞扬 雷蕴轩 席晔斌 陈广洁 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期834-842,共9页
目的·探讨miR-322-5p靶向Akt3抑制Th17分化对干扰素β(interferon-β,IFN-β)干预实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的影响。方法·建立EAE小鼠模型,设IFN-β干预组和PBS对照组。流式... 目的·探讨miR-322-5p靶向Akt3抑制Th17分化对干扰素β(interferon-β,IFN-β)干预实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的影响。方法·建立EAE小鼠模型,设IFN-β干预组和PBS对照组。流式染色比较2组Th17的比例变化;RNA芯片检测2组小鼠miRNA的差异表达,筛选出miR-322-5p做进一步研究;软件预测miR-322-5p的靶基因为Akt3;IFN-β干预后和过表达miR-322-5p后检测Akt3的表达水平;双荧光素酶报告实验验证miR-322-5p和Akt3的直接靶向关系;体外实验观察Akt3对Th17细胞分化的影响。结果·IFN-β干预组的EAE小鼠Th17比例均显著降低,miR-322-5p的表达显著升高,而Akt3的表达明显降低;过表达miR-322-5p能显著抑制Akt3的表达,双荧光素酶报告实验显示Akt3是miR-322-5p的直接靶基因,且Akt3对Th17的体外分化有明显促进作用。结论·IFN-β可通过影响miR-322-5p靶向Akt3,进而抑制Th17分化来缓解EAE的疾病进程。 展开更多
关键词 实验性自身免疫性脑脊髓炎 干扰素Β MIRNA th17分化
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抑制RORγt活性及Th17分化的新型化合物研究 被引量:1
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作者 丁庆峰 赵梅 黄朝峰 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期476-480,490,共6页
目的我们在实验中偶然发现了一种能抑制RORγt活性的新型化合物,拟通过鉴定该化合物对Th17体外分化及其细胞因子分泌的影响对其进行生物学评价,以确定该化合物是否可作为一种新型的自身免疫病候选药物。方法构建能在Jurkat细胞中稳定表... 目的我们在实验中偶然发现了一种能抑制RORγt活性的新型化合物,拟通过鉴定该化合物对Th17体外分化及其细胞因子分泌的影响对其进行生物学评价,以确定该化合物是否可作为一种新型的自身免疫病候选药物。方法构建能在Jurkat细胞中稳定表达Gal4-RORγt的荧光素酶报告系统,通过该体系发现了一种对RORγt有显著抑制活性的新型化合物,并在小鼠Th17细胞分化实验中对该化合物的作用效果进行体外验证。在此基础上,对该化合物进行生物功能分析,包括EC50、CC50的测定以及T细胞特异性分析。结果通过体外验证实验,我们确定该化合物(编号为compound 2)能显著的抑制Th17分化及其细胞因子IL-17A、IL-17F的表达和分泌。在后续的生物学评价中,我们还发现该化合物对RORγt有较高的抑制效率,较低的细胞毒性和较强的T细胞特异性。结论本研究中得到的化合物compound 2可作为一种潜在的新型前导化合物应用于治疗自身免疫性疾病和一些炎症性疾病。 展开更多
关键词 新型化合物 RORΓT th17分化 自身免疫病
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苦参碱调控活动期强直性脊柱炎患者组蛋白甲基化酶EZH2表达干预Th17分化偏倚的机制
5
作者 赵亚男 刘宏潇 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期2596-2599,共4页
目的:观察中药单体苦参碱对活动期强直性脊柱炎(AS)患者外周血单个核细胞(PBMC)组蛋白甲基化酶EZH2表达对Th17分化转录因子表达的抑制作用。方法:纳入2019年12月就诊于中国中医科学院广安门医院风湿病科门诊活动期AS患者10例,健康志愿者... 目的:观察中药单体苦参碱对活动期强直性脊柱炎(AS)患者外周血单个核细胞(PBMC)组蛋白甲基化酶EZH2表达对Th17分化转录因子表达的抑制作用。方法:纳入2019年12月就诊于中国中医科学院广安门医院风湿病科门诊活动期AS患者10例,健康志愿者6名,梯度密度离心法分离PBMC,体外苦参碱单体干预24 h,Western Blot法检测苦参碱干预前后EZH2、RORc及H3K27me3蛋白表达情况,RT-PCR法检测苦参碱干预前后EZH2、RORc mRNA表达情况。结果:苦参碱干预24 h后,EZH2蛋白及mRNA表达较干预前显著升高(P<0.01),RORc蛋白及mRNA表达较干预前显著降低(P<0.01)。结论:中药单体苦参碱体外上调活动期AS-PBMC中EZH2表达,调控Th17分化及效应,是治疗AS炎症的可能有效药物之一。 展开更多
关键词 强直性脊柱炎 外周血单个核细胞 苦参碱 th17分化 组蛋白甲基化酶EZH2
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SIRT2在结肠癌微环境CD4^(+)T细胞向Th17细胞分化中的作用及对HIF-1α的影响
6
作者 蒋斌 谢兴旺 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期2196-2200,2206,共6页
目的:探讨沉默信息调节因子2(SIRT2)过表达在结肠癌微环境CD4^(+)T细胞向Th17细胞分化中的作用及对缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的影响。方法:小鼠结肠癌细胞CT26过表达SIRT2,构建稳定SIRT2过表达的CT26细胞株(CT26/SIRT2),qRT-PCR、Weste... 目的:探讨沉默信息调节因子2(SIRT2)过表达在结肠癌微环境CD4^(+)T细胞向Th17细胞分化中的作用及对缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的影响。方法:小鼠结肠癌细胞CT26过表达SIRT2,构建稳定SIRT2过表达的CT26细胞株(CT26/SIRT2),qRT-PCR、Western blot检测SIRT2、HIF-1α水平;CCK-8验证SIRT2过表达对CT26细胞增殖能力的影响;24只健康C57BL/6小鼠随机分为CT26组、CT26/SIRT2组,分别接种CT26细胞、CT26/SIRT2细胞,28 d后处死小鼠,Ki67染色、TUNEL染色分别观察小鼠肿瘤组织细胞增殖与凋亡,并测定组织匀浆上清液中IL-17、IL-6水平;利用流式细胞术分离Th17细胞,qRT-PCR、Western blot检测Th17细胞中SIRT2、HIF-1α水平。结果:与CT26细胞相比,CT26/SIRT2细胞SIRT2 mRNA、蛋白水平升高,HIF-1αmRNA与蛋白水平降低(P<0.05);CT26、CT26/SIRT2细胞的增殖抑制率差异无统计学意义(P>0.05);与CT26小鼠相比,CT26/SIRT2小鼠剥离瘤体体积与重量、Ki67阳性表达,小鼠肿瘤组织Th17细胞比例、组织匀浆上清液中IL-17、IL-6水平、Th17细胞HIF-1αmRNA与蛋白水平均降低(P<0.05);肿瘤组织细胞凋亡率、Th17细胞SIRT2 mRNA和蛋白水平升高(P<0.05)。结论:SIRT2可抑制结肠癌微环境CD4^(+)T细胞向Th17细胞分化,并下调HIF-1α表达。 展开更多
关键词 沉默信息调节因子2 缺氧诱导因子-1Α 结肠癌 th17细胞分化
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体外分化Th17细胞IL-17f,ctBP和Gfi1的表达 被引量:2
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作者 陈嵘祎 周飞 +1 位作者 周英 阿彩岭 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2014年第6期563-566,共4页
目的检测小鼠Th17细胞诱导分化模型中IL-17f,ctBP和Gfi1的表达情况并探讨其临床意义。方法提取小鼠脾淋巴细胞,采用免疫磁珠纯化CD4+CD62L+T细胞后,空白对照组用RPMI 1640培养,Th17分化组用anti-CD3ε,anti-CD28,anti-IFN-γ,anti-IL-4... 目的检测小鼠Th17细胞诱导分化模型中IL-17f,ctBP和Gfi1的表达情况并探讨其临床意义。方法提取小鼠脾淋巴细胞,采用免疫磁珠纯化CD4+CD62L+T细胞后,空白对照组用RPMI 1640培养,Th17分化组用anti-CD3ε,anti-CD28,anti-IFN-γ,anti-IL-4抗体及IL-6,TGF-β1和IL-23等细胞因子培育,诱导原始T细胞向Th17细胞分化。两组细胞分别培养72 h后,采用Realtime-PCR检测IL-17f,ctBP,Gfi1 mRNA的表达情况。结果 Th17分化组细胞经相关抗体及细胞因子刺激诱导分化后,其IL-17f mRNA表达明显增高(分化前为1,分化后达194.011721),但ctBPmRNA,Gfi1 mRNA表达均明显低于空白对照组,以上差异均有统计学意义(P均<0.01),对照组ctBPmRNA分化前为1,Th17分化后为0.45375958,Gfi1 mRNA表达在对照组分化前为1,Th17分化后为0.00430432。结论 ctBP和Gfi1在Th17分化组中表达显著下调,但上述两种转录辅抑制因子是否参与了Th17细胞的分化调控值得进一步研究。 展开更多
关键词 IL-17 CTBP Gil1 小鼠 th17分化模型
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小鼠脾Th17细胞分化模型中IL-17F、RORα、Stat3 mRNA表达
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作者 陈嵘祎 柯国琳 +1 位作者 李琛 樊翌明 《广东医学院学报》 2014年第3期287-289,共3页
目的研究小鼠脾Th17细胞分化模型中IL-17F、RORα、Stat3表达。方法提取C57/BL6J小鼠脾淋巴细胞,采用免疫磁珠纯化CD4^+CD62L^+T细胞,分为对照组及Th17分化组。对照组用RPMI1640培养;Th17分化组加抗小鼠CD3ε、CD28、IFN-γ、IL-4单抗及... 目的研究小鼠脾Th17细胞分化模型中IL-17F、RORα、Stat3表达。方法提取C57/BL6J小鼠脾淋巴细胞,采用免疫磁珠纯化CD4^+CD62L^+T细胞,分为对照组及Th17分化组。对照组用RPMI1640培养;Th17分化组加抗小鼠CD3ε、CD28、IFN-γ、IL-4单抗及IL-6、TGF-β1、IL-23孵育。培养48 h后,采用Real-time PCR检测两组细胞IL-17F、RORα、Stat3 mRNA表达。结果 Th17分化组IL-17F、RORα、Stat3 mRNA表达明显高于对照组(P<0.01)。结论小鼠脾Th17细胞分化过程中伴有RORα、Stat3 mRNA表达上调。 展开更多
关键词 IL-17 RORα STAT3 小鼠 th17分化模型
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马尔尼菲青霉菌对树突状细胞分化成熟及树突状细胞诱导CD4^+ T淋巴细胞向Th17/Treg分化平衡的影响 被引量:2
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作者 唐艳萍 张建全 +3 位作者 钟小宁 邱晔 许海光 马婷婷 《广西医科大学学报》 CAS 2017年第5期667-671,共5页
目的:探讨马尔尼菲青霉菌(TM)对树突状细胞(DCs)分化成熟及对DCs诱导CD4^+ T淋巴细胞向Th17/Treg分化平衡的影响。方法:诱导小鼠骨髓来源的单个核细胞增殖分化为DCs,观察TM刺激后的DCs的形态,流式细胞仪检测DCs表面共刺激分子,酶联免疫... 目的:探讨马尔尼菲青霉菌(TM)对树突状细胞(DCs)分化成熟及对DCs诱导CD4^+ T淋巴细胞向Th17/Treg分化平衡的影响。方法:诱导小鼠骨髓来源的单个核细胞增殖分化为DCs,观察TM刺激后的DCs的形态,流式细胞仪检测DCs表面共刺激分子,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测培养上清液中的白介素(IL)-6及转化生长因子(TGF)-β浓度。从小鼠脾脏分离出CD4^+ T细胞,将TM与DCs及CD4^+ T细胞共培养24h后,流式细胞术观察各组细胞Th17及Treg的阳性表达率,实时荧光定量PCR(qPCR)检测各组RORγt mRNA和Foxp3mRNA表达,ELISA法检测各组培养细胞上清液IL-17A、IL-10及TGF-β的水平变化。结果:DCs在与TM共培养24h后可见大量DCs中含TM。TM可上调共刺激分子CD40、CD80、CD86和细胞因子IL-6、TGF-β表达(P<0.05)。CD4^+ T细胞联合经TM刺激成熟后的DCs时,可使Th17阳性表达率降低而Treg阳性表达率升高(均P<0.05),Th17/Treg平衡倾向于Treg,且Treg可分泌大量的IL-10及TGF-β发挥免疫抑制作用。结论:TM可诱导DCs的成熟,经TM刺激成熟的DCs可诱导CD4^+ T淋巴细胞向Th17/Treg分化平衡,从而发挥免疫抑制效应,这可能是TM逃避宿主免疫,在体内存活致病及复发的机制。 展开更多
关键词 树突状细胞 马尔尼菲青霉菌 th17/Treg分化平衡
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强直性脊柱炎患者H3K27me3表达水平及其调控Th17细胞分化的表观遗传机制
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作者 程明 贾龙 +3 位作者 薛志远 杨涛 周雪 赵冠兰 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期744-748,共5页
目的 探讨强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis, AS)中组蛋白H3K27me3甲基化及其调节酶JMJD3和EZH2在Th17细胞分化中的作用,以揭示其在AS发病机制中的潜在作用。通过分析H3K27me3的甲基化状态及其与Th17相关因子之间的相互作用,为AS的... 目的 探讨强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis, AS)中组蛋白H3K27me3甲基化及其调节酶JMJD3和EZH2在Th17细胞分化中的作用,以揭示其在AS发病机制中的潜在作用。通过分析H3K27me3的甲基化状态及其与Th17相关因子之间的相互作用,为AS的临床治疗提供新的策略和靶点。方法 采集84名AS的患者(活跃期、稳定期各42例)和84名健康志愿者(对照组)血液样本,ELISA检测Th17细胞及相关细胞因子(IL-21、IL-22和IL-17),RT-PCR分析Th分化关键信号通路RORc、JAK2、STAT3基因的表达,蛋白质印迹法检测RORc、JAK2/STAT3通路蛋白、H3K27me3及相关蛋白酶EZH2、JMJD3的表达。对活动期AS患者H3K27me3、EZH2、JMJD3与Th分化关键信号通路分子的关联性进行Pearson相关分析。结果 RORc、JAK2、STAT3 mRNA表达,活动期组>稳定期组,差异有统计学意义(P<0.05)。H3K27me3、EZH2的表达量,活动期组<稳定期组<对照组,差异有统计学意义(P<0.05);JMJD3、RORc、JAK2、pJAK2、STAT3、pSTAT3的表达量,活动期组>稳定期组>对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。活动期组Th17比例及其炎性因子的表达水平高于其他两组(P<0.05)。H3K27me3与RORc、JAK2、STAT3、IL-17负相关,JMJD3与JAK2、STAT3、IL-17正相关,而EZH2与JAK2、STAT3、IL-17负相关(P<0.05)。结论 AS中H3K27me3的低表达受到基因位点JMJD3和EZH2的影响,可以调节Th17细胞的分化,从而在AS的发病和进展中发挥作用。 展开更多
关键词 强直性脊柱炎 H3K27me3 th17细胞分化 表观遗传调控
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中医药干预类风湿关节炎Th17/Treg平衡的研究进展 被引量:4
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作者 李平顺 周孟茹 +1 位作者 王钢 朱琴 《中国医药导刊》 2019年第7期421-425,共5页
类风湿关节炎(RA)是一种以慢性滑膜炎为特征的自身免疫性疾病,目前发病机制尚不明确。随着对RA研究的深入,学者发现调节性T细胞(Treg)和辅助性T细胞(Th,主要是Th17细胞)免疫调节异常是其发病机制研究的热点,Th17细胞主要分泌IL-17,介导... 类风湿关节炎(RA)是一种以慢性滑膜炎为特征的自身免疫性疾病,目前发病机制尚不明确。随着对RA研究的深入,学者发现调节性T细胞(Treg)和辅助性T细胞(Th,主要是Th17细胞)免疫调节异常是其发病机制研究的热点,Th17细胞主要分泌IL-17,介导炎症反应过程,是RA发病机制中的主要效应细胞;Treg细胞作为具有独特调节作用的免疫抑制细胞,主要通过分泌TGF-β、IL-10等发挥作用。两种细胞的分化发育相互制约,Th17细胞的增多,Treg细胞的减少,可导致Th17/Treg平衡失调,而出现滑膜炎症、关节破坏、骨侵蚀等,加剧RA的发生、发展。近年来,中医药针对Th17/Treg失衡的治疗发现,阻止Th17对RA的致病作用,提高Treg细胞对RA的保护作用,调节Th17/Treg的平衡成为治疗RA的新途径。本文拟就Th17、Treg细胞分化、平衡关系以及中医药对Th17/Treg失衡的干预进行综述,以期为RA的机制研究和临床防治提供新思路。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 th17/Treg细胞分化 th17/Treg平衡 中医药
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B细胞转录激活因子对Th17细胞的分化调控 被引量:1
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作者 徐礼 向旭东 《国际呼吸杂志》 2010年第16期984-988,共5页
B细胞转录激活因子(B cell activating transcription factor,BATF)是碱性亮氨酸拉链转录因子激活蛋白1(AP-1)超家族中的一员,BATF通过与Fos竞争与Jun而形成Jun/BATF二聚体.该二聚体对AP-1 DNA结合位点有较高的亲和力,但却无活化作... B细胞转录激活因子(B cell activating transcription factor,BATF)是碱性亮氨酸拉链转录因子激活蛋白1(AP-1)超家族中的一员,BATF通过与Fos竞争与Jun而形成Jun/BATF二聚体.该二聚体对AP-1 DNA结合位点有较高的亲和力,但却无活化作用,从而干扰AP-1对该部位的正性活化作用,发挥对AP-1途径的负性调节作用.新型辅助性T细胞Th17在分化和功能特征上较传统的辅助性T细胞Th1和Th2存在显著的不同.有研究表明BATF在Th17的增殖分化调控中发挥着重要作用,白介素6与转化生长因子β协同刺激Th17的细胞可使得产生STAT3,STAT3可诱导促进BATF表达,BATF表达后与RORγt协同作用于白介素17近端启动子,诱导白介素17的表达.尽管目前对于BATF调控Th17分化的机制还不是十分清楚,但是本文的论述为将来进行关于BATF研究指明了方向,深入研究BATF的功能及其对各个炎性细胞的作用将为我们揭示更多机体在抗感染免疫和自身免疫疾病中的免疫病理机制,也有利于相应治疗靶点的选择. 展开更多
关键词 B细胞转录激活因子 激活蛋白1 th17分化 白介素6 STAT3 RORΓT
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Network Biological Modeling:A Novel Approach to Interpret the Traditional Chinese Medicine Theory of Exterior-Interior Correlation Between the Lung and Large Intestine 被引量:2
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作者 CHEN Wen-Lu HONG Jia-Na +5 位作者 ZHANG Xin-Ning EMMANUEL Ibarra-Estrada WAN Li-Sheng LI Sha-Sha YAN Shi-Kai XIAO Xue 《Digital Chinese Medicine》 2020年第4期249-259,共11页
Objective To study the common pathogenesis of pneumonia and colitis using modern biological network analysis tools,and to explore the theory that the lung and large intestine are exteriorly and interiorly related.Meth... Objective To study the common pathogenesis of pneumonia and colitis using modern biological network analysis tools,and to explore the theory that the lung and large intestine are exteriorly and interiorly related.Methods The relevant target genes(hereinafter,“targets”)of pneumonia and colitis were separately queried on the GeneCards database.The main targets of the two diseases were then screened out according to their correlation scores and intersected to obtain those common to the two diseases.Metascape was used to analyze the main and common targets identified,and the Database for Annotation,Visualization and Integrated Discovery(DAVID)was used to enrich and analyze the common targets.Cytoscape 3.7.2 software was used to build the network diagram.Results In total,54 targets,such as TNF,IL-10,IL-6,IL-2,IL-4,TLR4,TLR2,CXCL8,IL-17A and IFNG,etc.,are common to pneumonia and colitis,which are mainly enriched in these processes such as cytokine–cytokine receptor interaction,the Tcell receptor signaling pathway,the Toll-like receptor signaling pathway and the Jak-STAT signaling pathway.The Metascape modular analysis identified 11 modules for pneumonia,six modules for colitis,and two modules for the common targets.Conclusions Pneumonia and colitis have the same pathogenic targets and mechanisms of action and finally interact with each other through inflammatory reactions and immune responses.This provides a probable molecular mechanism that explains the theory that the lung and large intestine are exteriorly and interiorly related. 展开更多
关键词 theory of the exterior-interior relationship between the lung and large intestine PNEUMONIA COLITIS Network pharmacology th17 cell differentiation Inflammatory reactions Immune responses
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IL-22诱导类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞分泌 IL-6促进 Th17细胞分化的研究 被引量:11
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作者 彭桉平 卢欣沂 +4 位作者 何敏 林海标 张成 刘瑞萍 庄俊华 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期541-545,共5页
目的:探讨白细胞介素-22(IL-22)刺激类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RASF)产生白细胞介素-6(IL-6)的水平,及间接调控IL-17+CD4+T(Th17)细胞分化的能力。方法分离RASF 6例,建立体外培养体系,IL-22刺激RASF,qRT-PCR及ELISA检... 目的:探讨白细胞介素-22(IL-22)刺激类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RASF)产生白细胞介素-6(IL-6)的水平,及间接调控IL-17+CD4+T(Th17)细胞分化的能力。方法分离RASF 6例,建立体外培养体系,IL-22刺激RASF,qRT-PCR及ELISA检测IL-6的表达;IL-22R1封闭抗体及抑制剂实验检测IL-6产生所涉及的特异性受体及其下游信号通路;建立RASF与健康志愿者CD4+T细胞共培养体系和Transwell 体系,流式细胞术检测体系中各组 Th17细胞比例。结果 IL-22刺激RASF呈时间和剂量依赖性产生IL-6(P<0.05),且IL-6产生依赖于IL-22R1及其下游的p38和JAK2通路(P<0.05);共培养体系和Transwell体系中发现IL-22预刺激RASF组较未刺激组Th17细胞比例增加,阻断IL-22R1或IL-6均能降低Th17细胞比例。结论 IL-22刺激RASF产生IL-6,进而促进Th17细胞分化,中和IL-22是RA治疗的有效策略。 展开更多
关键词 IL-22 th17细胞分化 IL-6 滑膜成纤维细胞 类风湿关节炎
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过表达miR-498通过下调STAT3抑制类风湿性关节炎患者Th17细胞分化 被引量:7
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作者 项海燕 潘峰 +5 位作者 鄢巨振 洪理泉 张腊红 刘玉华 冯晓 蔡成松 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期167-174,共8页
本文旨在探讨微小RNA-498(miR-498)影响类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中Th17细胞分化的作用机制。从50例RA患者和50例对照人群中分别收集外周血,分离PBMCs。... 本文旨在探讨微小RNA-498(miR-498)影响类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中Th17细胞分化的作用机制。从50例RA患者和50例对照人群中分别收集外周血,分离PBMCs。流式细胞术检测CD4^+IL-17^+T(Th17)细胞或者CD4^+FOXP3^+T(Treg)细胞比例,并分析Th17/Treg比值。Real-time PCR检测细胞中miR-498和STAT3基因表达,Western blot检测STAT3的蛋白表达,ELISA检测外周血血清或细胞上清中IL-17的浓度。荧光素酶报告基因实验验证miR-498靶向结合STAT3的3’非翻译(3’untranslated region,3’UTR)。miR-498 mimic或/和pc DNA-STAT3瞬时转染CD4^+T细胞,进一步考察miR-498影响Th17细胞分化的机制。结果显示,RA患者的PBMCs中,Th17细胞比例显著高于对照,且Th17/Treg比值也显著高于对照(P<0.05)。miR-498低表达而STAT3高表达于RA患者的PBMCs中,且RA患者血清中的IL-17浓度显著高于对照(P<0.05)。在转染野生型STAT3报告基因质粒的细胞中转染miR-498 mimic/inhibitor后,荧光酶活性、STAT3的基因和蛋白表达均明显改变(P<0.05),但是在转染突变型STAT3报告基因质粒的细胞中转染miR-498 mimic/inhibitor,上述指标没有显著变化(P>0.05)。此外,miR-498 mimic转染CD4^+T细胞后,显著降低Th17细胞比例,且细胞分泌IL-17的水平减少(P<0.05),而与pcDNA-STAT3共转CD4^+T细胞后,Th17细胞比例明显提高,细胞分泌IL-17的水平增加(P<0.05)。以上结果提示,在RA患者CD4^+T细胞中,过表达miR-498靶向下调STAT3,进而抑制Th17细胞分化。 展开更多
关键词 微小RNA-498 STAT3 th17细胞分化 类风湿性关节炎
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整合素aV亚基在类风湿性关节炎中的表达及其与Th17细胞分化的关系
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作者 高锦 项海燕 +2 位作者 鄢巨振 张腊红 潘峰 《中国卫生检验杂志》 CAS 2019年第7期772-774,共3页
目的研究类风湿性关节炎(RA)患者整合素aV亚基的表达,分析其与辅助性T细胞17(Th17)分化的关系。方法选取30例类风湿性关节炎患者(RA组)、20名健康体检者作为对照组,运用流式细胞术(FCM)检测外周血PBMCs中Th17细胞和调节性T细胞比例以及P... 目的研究类风湿性关节炎(RA)患者整合素aV亚基的表达,分析其与辅助性T细胞17(Th17)分化的关系。方法选取30例类风湿性关节炎患者(RA组)、20名健康体检者作为对照组,运用流式细胞术(FCM)检测外周血PBMCs中Th17细胞和调节性T细胞比例以及PBMCs和树突状细胞DCs中表达整合素aV亚基的CD11c^+αν^+DC比例。结果与对照组相比,RA组Th17/Treg细胞比值显著升高(P<0.05);RA患者外周血及DCs中CD11c^+αν^+DC细胞在CD11c^+DC中占比均高于对照组(P<0.05);Spearman相关性分析发现RA患者中树突状细胞整合素aV亚基的表达与Th17/Treg细胞比值呈正相关(r=0.478,P<0.05)。结论整合素aV亚基可能参与类风湿性关节炎患者Th17细胞分化的调控。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 整合素aV th17细胞分化
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构建反转录病毒小向导RNA表达载体用于小鼠T细胞基因功能研究 被引量:1
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作者 赵艳娜 邱荣 +1 位作者 沈南 唐元家 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1585-1590,共6页
目的·构建反转录病毒小向导RNA(small guide RNA,sgRNA)表达载体,用于小鼠T细胞分化调控及其基因功能的研究。方法·表达短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)的反转录病毒载体(MSCV-LTR-miR30-PIG,LMP)经过Xho1和Sal1双酶切后... 目的·构建反转录病毒小向导RNA(small guide RNA,sgRNA)表达载体,用于小鼠T细胞分化调控及其基因功能的研究。方法·表达短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)的反转录病毒载体(MSCV-LTR-miR30-PIG,LMP)经过Xho1和Sal1双酶切后,回收得到反转录病毒载体骨架。以慢病毒sgRNA表达载体为模版,通过PCR扩增获得U6-sgRNA-PGK-Puro-BFP片段。利用同源重组将U6-sgRNA-PGK-Puro-BFP片段组装进反转录病毒载体骨架。为了验证系统的有效性,设计靶向Il17a、Rorc和Irf4的sgRNA序列并进行克隆。分离Cas9转基因小鼠CD4 T细胞分别进行sgRNA反转录病毒感染,诱导其向Th17细胞分化。细胞因子染色,流式检测Il17a阳性细胞比例。2组独立样本数据比较采用非配对t检验。结果·①成功构建反转录病毒sgRNA载体。②利用反转录病毒载体向小鼠CD4 T细胞递送sgRNA并实现Il17a基因敲除。③Rorc-sgRNA和Irf4-sgRNA阳性群体中,Il17a阳性群体比率显著降低(P<0.05)。结论·利用sgRNA反转录病毒载体成功向目的细胞递送sgRNA并实现基因敲除。Rorc和Irf4基因敲除结果提示该系统可用于小鼠T细胞基因功能研究。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 Cas9转基因小鼠 反转录病毒载体 th17细胞分化
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